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        酥油中β-內(nèi)酰胺酶檢測方法

        2018-02-14 08:41:18
        畜禽業(yè) 2018年12期
        關(guān)鍵詞:酥油外源性內(nèi)酰胺酶

        (西藏職業(yè)技術(shù)學(xué)院 動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,西藏 拉薩 850030)

        0 引言

        目前,國內(nèi)外對動物性食品病原微生物的分離鑒定、及致食品安全問題報(bào)道較多,對牛奶、及乳制品相關(guān)的檢測報(bào)道也較多,但對酥油中β-內(nèi)酰胺酶檢測方法報(bào)道罕見。鑒于此,本文就酥油中β-內(nèi)酰胺酶概念、來源及檢測方法進(jìn)行了研究,以期為酥油的食品安全、人類健康提供研究思路。

        1 β-內(nèi)酰胺酶概念

        β-內(nèi)酰胺酶,俗稱抗生素分解劑,它是由細(xì)菌產(chǎn)生的,能夠裂解青霉素和頭孢菌素類抗生素藥物的β-內(nèi)酰胺環(huán),可導(dǎo)致青霉素、頭孢菌素類抗生素耐藥性增強(qiáng),降低了機(jī)體的抗病能力。據(jù)有關(guān)報(bào)道,β-內(nèi)酰胺酶現(xiàn)已有200多種,其中頭孢菌素酶、青霉素酶和超廣譜酶被廣泛應(yīng)用。

        2 β-內(nèi)酰胺酶的來源

        食品或牛奶中的β-內(nèi)酰胺酶的可能來源有2種,一是內(nèi)源性的,是由牛奶或食品中的耐藥細(xì)菌產(chǎn)生的;二是外源性的,是人為添加到牛奶或食品中的。國際上針對畜禽養(yǎng)殖中使用的抗生素和抗菌藥物制定了最高殘留限量,同時要求生鮮乳收購環(huán)節(jié)中采用指定的快速檢測方法檢測抗生素,不得超越。未超過最高殘留限量的生鮮乳,為安全合格產(chǎn)品。由于β-內(nèi)酰胺類抗生素在奶牛養(yǎng)殖中的廣泛應(yīng)用,但由于不正當(dāng)?shù)氖褂?,出現(xiàn)了奶牛中抗生素殘留的問題,為了高價出售抗生素殘留的牛奶,不法商家便加入β-內(nèi)酰胺酶,從而掩蔽抗生素殘留。據(jù)報(bào)道一支6毫升的“解抗劑”,可以在幾小時內(nèi)讓1噸“有抗奶”在常溫環(huán)境下變成“無抗奶”[2]。

        3 β-內(nèi)酰胺酶檢測方法

        3.1 微生物培養(yǎng)法

        微生物培養(yǎng)法是目前較為可靠和準(zhǔn)確的方法,是實(shí)驗(yàn)室檢測β-內(nèi)酰胺酶使用比較廣泛的一種檢測方法。該方法利用克拉維酸、舒巴坦特異性抑制β-內(nèi)酰胺酶的特點(diǎn)培養(yǎng)細(xì)菌,通過測量抑菌圈得出結(jié)果[3]。該檢測方法不需要特殊的試劑,易操作,結(jié)果易判斷,但特異性差。該方法能定性檢測牛奶中未失活的β-內(nèi)酰胺酶,但檢出限較低,無法判斷是內(nèi)源性還是外源性β-內(nèi)酰胺酶。

        3.2 碘量法

        碘量法也是當(dāng)前比較常用的一種檢測方法,該方法根據(jù)青霉素或頭孢菌素經(jīng)過β-內(nèi)酰胺酶分解后的降解產(chǎn)物與碘結(jié)合,與淀粉競爭游離碘,使藍(lán)色的碘淀粉復(fù)合物褪色的原理設(shè)計(jì)的,本法簡便易行,可迅速獲取結(jié)果,該方法可用于檢測鮮奶和奶制品中的β-內(nèi)酰胺酶,檢測限比較高,但也無法判斷是內(nèi)源性還是外源性的。

        3.3 酸量法

        酸量法原理是利用青霉素或頭孢菌素類經(jīng)過β-內(nèi)酰胺酶作用產(chǎn)生的裂解酸引起牛奶中pH值變化,觀察指示劑顏色變化或壓力測量計(jì)的變化實(shí)現(xiàn)對牛奶中β-內(nèi)酰胺酶的定量檢測[4]。該方法簡單易行,重復(fù)性好,靈敏度高,結(jié)果穩(wěn)定性好,但可能會出現(xiàn)假陰性和假陽性情況,無法區(qū)分內(nèi)源性和外源性。

        4 結(jié)語

        酥油含多種維生素,具有營養(yǎng)價值頗高等一系列優(yōu)點(diǎn)。同時,作為酥油的原材料,攜帶病原微生物的牦牛極易將微生物傳播到牛奶中去。酥油家庭式制作及小作坊式的生產(chǎn)方式?jīng)Q定了其在制作過程中極易被病原微生物污染,其各個環(huán)節(jié)的疏漏都有可能加大病原微生物污染的概率。

        加大對β-內(nèi)酰胺酶的監(jiān)管力度,在動物飼養(yǎng)過程中使用的飼料、獸藥及添加劑必須符合國家要求的標(biāo)準(zhǔn)。加大宣傳力度,認(rèn)識到添加β-內(nèi)酰胺酶的違法性和危害性;加快制定β-內(nèi)酰胺酶的管理辦法和管理?xiàng)l例;動員消費(fèi)群體和社會群眾加強(qiáng)β-內(nèi)酰胺酶的監(jiān)管。眼下,探索并突破一種快速、科學(xué)、靈敏度高的β-內(nèi)酰胺酶檢測方法,這顯得至關(guān)重要。

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