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        雞馬立克氏病毒感染對(duì)雞腦部神經(jīng)系統(tǒng)損傷的研究

        2018-02-13 01:39:20張孝清
        湖北畜牧獸醫(yī) 2018年11期
        關(guān)鍵詞:神經(jīng)系統(tǒng)病毒感染

        張孝清

        摘要:選取4日齡無特定病原雞分析雞馬立克氏病毒感染對(duì)雞腦部神經(jīng)系統(tǒng)損傷的影響,根據(jù)不同毒力特征(814、rMS、WC1203、Ms5、BS)MDV-1毒株感染,對(duì)不同接毒時(shí)間(接毒后1、3、5、7、10、14、21、28 d)動(dòng)態(tài)檢測(cè)病毒載量變化情況進(jìn)行有效記錄,對(duì)不同毒株感染后雞腦部組織病理學(xué)檢查結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果表明,不同毒力MDV-1毒株在無特定病原雞腦部存在不同的復(fù)制規(guī)律,其中強(qiáng)毒自身的復(fù)制能力明顯高于弱毒,而特超強(qiáng)病毒株早期復(fù)制速度最快;感染早期,強(qiáng)毒對(duì)無特定病原雞腦組織神經(jīng)系統(tǒng)損傷程度更高,與弱毒相比存在明顯差異;感染21 d,強(qiáng)毒所造成的腦部損傷明顯更強(qiáng)。說明不同毒株對(duì)無特定病原雞所產(chǎn)生的腦神經(jīng)系統(tǒng)損傷程度不同,毒株毒性越強(qiáng)損傷越重。

        關(guān)鍵詞:雞馬立克氏病;病毒感染;神經(jīng)系統(tǒng)

        中圖分類號(hào):S858.31? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A? ? ? ? 文章編號(hào):1007-273X(2018)11-0006-02

        雞馬立克氏病屬于雞常見疾病,主要由雞馬立克氏病毒血清1型(MDV-1)引發(fā),可對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)造成嚴(yán)重?fù)p傷,也會(huì)導(dǎo)致免疫抑制,屬于接觸性傳染性疾病,對(duì)雞飼養(yǎng)造成明顯影響[1,2]。神經(jīng)系統(tǒng)癥狀在馬立克氏病毒感染的雞群中不僅發(fā)病早,同時(shí)雞只淘汰率較高。為進(jìn)一步掌握雞馬立克氏病毒感染情況,試驗(yàn)對(duì)不同毒力MDV-1感染對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)損傷程度進(jìn)行詳細(xì)分析,并研究其結(jié)果,現(xiàn)做詳細(xì)報(bào)道。

        1? 材料與方法

        1.1? 材料

        雞:無特定病原雞,購自國(guó)內(nèi)某獸醫(yī)研究所實(shí)驗(yàn)中心;病毒株:MDV-1毒株,購自世界生物資源中心(ATCC),由本實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行保存。

        試劑、儀器:分子生物水、DNA提取試劑盒、PBS。

        FQ-PCR引物:①檢測(cè)基因?yàn)镸DV-1特異基因Meq;②內(nèi)參基因?yàn)殡u的管家基因Ovo。

        1.2? 方法

        取180羽無特定病原4日齡雞,隨機(jī)分組,每組30羽,采用負(fù)壓隔離器對(duì)其進(jìn)行飼養(yǎng)。6組雞分別采用腹腔接種方法,以1 000 PFU/羽劑量將814、rMS、WC1203、Ms5、BS病毒株注射給6組試驗(yàn)雞,病毒接種后,對(duì)其不同時(shí)間段腦部情況進(jìn)行分析。

        1.3? 組織病理檢查

        對(duì)上述不同組別雞腦部組織進(jìn)行收集,然后進(jìn)行病理切片檢查。采用10%福爾馬林對(duì)神經(jīng)組織進(jìn)行有效固定,固定24 h后采用乙醇進(jìn)行脫水處理,并采用二甲苯、無水乙醇的混合液石蠟包埋。制備石蠟切片,做好染色處理,觀察病理變化。

        1.4? 觀察指標(biāo)

        對(duì)不同毒力MDV-1毒株在無特定病原雞腦部復(fù)制規(guī)律進(jìn)行分析和對(duì)比,分析不同毒力對(duì)無特定病原雞腦組織神經(jīng)系統(tǒng)損傷程度,做好詳細(xì)記錄。

        1.5? 統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析

        試驗(yàn)結(jié)果用Spss20.0軟件分析,結(jié)果用(x±s)表示,用t檢驗(yàn),P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2? 結(jié)果與分析

        2.1? 病毒復(fù)制規(guī)律分析

        雙重?zé)晒舛繖z測(cè)方法證實(shí),在不同時(shí)段下,不同毒力MDV-1毒株在無特定病原雞腦部,存在不同的復(fù)制規(guī)律;強(qiáng)毒復(fù)制能力明顯高于弱毒(P<0.05),而特超強(qiáng)病毒株早期復(fù)制速度最快。觀察結(jié)果表明,①感染后5 d,可在BS株感染的雞腦組織中發(fā)現(xiàn)病毒,感染7 d后均能檢測(cè)出病毒,說明BS株增殖能力最強(qiáng),與毒力等級(jí)呈正比關(guān)系;②感染10 d至最后,強(qiáng)毒載量一直高于弱毒(P<0.05),說明感染中晚期,毒力與病毒復(fù)制能力呈正相關(guān);③感染10 d及21 d兩個(gè)節(jié)點(diǎn)上,無論是強(qiáng)毒,還是弱毒,均出現(xiàn)2個(gè)復(fù)制高峰期。強(qiáng)毒感染17 d時(shí),病毒載量呈現(xiàn)最低表現(xiàn),弱毒感染14 d時(shí)最低,說明兩種毒性在試驗(yàn)雞腦部潛伏期不同。④接種病毒10 d后,不同弱毒株與其他三種強(qiáng)毒株在病毒載量上已經(jīng)不存在明顯差異性(P>0.05),說明感染中后期強(qiáng)毒之間的復(fù)制能力變化與毒力無明顯關(guān)聯(lián)(圖1)。

        2.2? 腦神經(jīng)組織病理學(xué)變化

        感染早期,強(qiáng)毒對(duì)無特定病原雞腦組織神經(jīng)系統(tǒng)損傷程度更高,與弱毒相比存在明顯差異(P<0.05)。研究結(jié)果證實(shí),感染5 d時(shí),雖然能夠在BS株感染后的腦組織中檢測(cè)出馬立克氏病毒,但是病理切片顯示,感染5 d后,無論是強(qiáng)毒還是弱毒,受到感染的腦組織切片均會(huì)發(fā)生一定病理改變。強(qiáng)毒感染后,試驗(yàn)雞腦組織多為局部膠質(zhì)細(xì)胞浸潤(rùn),弱毒感染后,試驗(yàn)雞腦組織膠質(zhì)細(xì)胞浸潤(rùn)比較有限,說明強(qiáng)毒對(duì)腦組織損傷程度更加嚴(yán)重。感染21 d,強(qiáng)毒所造成的腦部損傷明顯更強(qiáng),但是弱毒載量出現(xiàn)第2個(gè)高峰值,2種毒力對(duì)試驗(yàn)雞腦部病理損傷程度有明顯的差別。

        3? 小結(jié)與討論

        研究發(fā)現(xiàn),雞馬立克氏病毒感染毒力不斷強(qiáng)化,我國(guó)雞馬立克氏病毒感染毒力變化情況與世界公認(rèn)狀況基本相符[3]。通過多年觀察發(fā)現(xiàn),我國(guó)雞馬立克氏病新分離出來的病毒株,在致病特征上出現(xiàn)一定改變,其中BS是我國(guó)分離出來的病毒株,毒力比較高,超過一般強(qiáng)毒及超強(qiáng)毒。

        結(jié)合MDV-1致病性,可將感染分為4種病原型,即溫和型(mMDV)、強(qiáng)毒型(vMDV)、超強(qiáng)毒型(vvMDV)和特超強(qiáng)毒型(vv+MDV)。不同毒力毒株感染后,雞產(chǎn)生的致病特征也不盡相同[4]。

        很多研究文獻(xiàn)認(rèn)為[5,6],雞馬立克氏病毒血清1型的毒力越強(qiáng),在病毒感染前期,其在雞體內(nèi)復(fù)制速度越快,同時(shí)也會(huì)顯著增加病毒載量。通過研究復(fù)制動(dòng)力學(xué),基本上證實(shí)了這個(gè)規(guī)律,即致病性與病毒復(fù)制能力呈正相關(guān)。

        本研究結(jié)果顯示,不同毒力 MDV-1 毒株在無特定病原雞腦部,存在不同的復(fù)制規(guī)律,其中強(qiáng)毒自身的復(fù)制能力明顯高于弱毒,而特超強(qiáng)病毒株早期復(fù)制速度最快;感染早期,強(qiáng)毒對(duì)無特定病原雞腦組織神經(jīng)系統(tǒng)損傷程度更高,與弱毒相比存在明顯差異;感染21 d,強(qiáng)毒所造成的腦部損傷明顯更強(qiáng)。不同毒株對(duì)無特定病原雞所產(chǎn)生的腦神經(jīng)系統(tǒng)損傷程度不同,毒株毒性越強(qiáng)損傷越重。

        參考文獻(xiàn):

        [1] 陳洋宙.雞馬立克氏病病毒Meq蛋白特異性單克隆抗體研制及其初步應(yīng)用[D].揚(yáng)州:揚(yáng)州大學(xué),2018.

        [2] 付? 麗,王海秋.雞馬立克氏病的診斷及綜合防治分析[J].吉林畜牧獸醫(yī),2017,38(11):42.

        [3] 朱? 婷.雞馬立克氏病病毒分離株AH1410的致病性與基因序列分析[D].江蘇揚(yáng)州:揚(yáng)州大學(xué),2018.

        [4] 周忠文,蘇? 帥,崔? 寧,等.整合REVLTR的自然重組馬立克氏病毒GX0101的全基因組序列分析[J].中國(guó)獸藥雜志,2017,51(10):1-10.

        [5] 王夢(mèng)云,周宏達(dá),韋美甜,等.馬立克氏病毒UL36蛋白的表達(dá)及其去泛素化酶活性分析[J].畜牧與獸醫(yī),2017,49(5):77-82.

        [6] 王守文.內(nèi)臟型雞馬立克氏病繼發(fā)大腸桿菌病例報(bào)告[J].山東畜牧獸醫(yī),2017,38(3):78-79.

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