董自亮

（江蘇省連云港市贛榆區(qū)贛馬鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心，連云港 222124）

0 引言

犬細小病毒（Canine Parvovirus，CPV）為單股線狀DNA病毒，隸屬于細小病毒科細小病毒屬，為犬細小病毒?。–anine Parvovirus disease，CPD）的致病原[1]。該病毒對不同品種、年齡、性別的犬均易感，但對幼犬的致病性最強，致死率最高，患病犬的分泌物與排泄物中均含有大量病毒，空氣、器具以及直接接觸等均可傳播病毒。該病一年四季均可發(fā)生，氣溫驟降、寒冷、潮濕易誘發(fā)，以春季和冬季高發(fā)[2]。該病發(fā)病急，傳播速度快，病死率高，一直以來都是危害犬類的主要疫病之一。近年，隨著人們業(yè)余生活的不斷豐富和畜牧養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，寵物行業(yè)和養(yǎng)犬業(yè)也隨之得到快速發(fā)展，我國犬類的飼養(yǎng)數(shù)量和飼養(yǎng)密度逐步增加，犬類異地流通不斷加強，犬細小病毒的感染率亦隨之增加，嚴(yán)重威脅我國寵物行業(yè)和養(yǎng)犬業(yè)的健康與可持續(xù)發(fā)展[3]。

1 發(fā)病情況

2018年10月，江蘇省連云港贛榆區(qū)柏南莊村一個養(yǎng)狗戶10～60日齡幼犬突然發(fā)病，主要表現(xiàn)為精神萎靡、食欲減少、體溫升高，發(fā)病后曾使用阿莫西林藥物治療3 d，不但沒有控制疫病，還出現(xiàn)4條幼犬死亡的現(xiàn)象，疫病呈現(xiàn)日益嚴(yán)重趨勢，引起養(yǎng)犬戶的重視和恐慌。經(jīng)現(xiàn)場詢問得知該養(yǎng)殖戶一直未為犬接種犬細小病毒相關(guān)疫苗。

2 臨床癥狀

臨床觀察發(fā)現(xiàn)病犬在發(fā)病初期精神萎靡，食欲減退直至廢絕，體溫升高至39.5 ℃及以上，發(fā)病后期嘔吐，腹瀉，糞便呈水樣或血樣，糞便具有腥臭味，皮膚觸摸無彈力，脫水，消瘦，通常在發(fā)病后4～5 d因衰竭死亡。

3 病理變化

對4條死亡犬進行解剖，可見腹腔具有大量積液，肝臟腫大、出血，腸系膜淋巴結(jié)腫大、出血、充血，回腸粘膜出血、壞死或潰瘍、脫落，腸絨毛萎縮，其他內(nèi)臟實質(zhì)器官未變現(xiàn)出明顯的病理變化。

4 試紙條檢測

無菌采集病死犬的肝臟、腸粘膜、腸絨毛等病料樣品，將其利用滅菌生理鹽水碾磨，離心后取上清液，利用犬細小病毒膠體金試紙條（購自武漢中博生物股份有限公司）對其進行檢測，可見膠體金試紙條的檢測線和質(zhì)控線均出現(xiàn)特異性條帶，表明該病料樣品經(jīng)犬細小病毒膠體金試紙條檢測為犬細小病毒陽性。

5 PCR檢測

利用犬細小病毒PCR檢測試劑盒（購自上?？道噬锟萍加邢薰荆Σ杉牟∷廊闻K、腸粘膜、腸絨毛等病料樣品進行檢測，PCR擴增產(chǎn)物經(jīng)核酸電泳檢測顯示位于250～500 bp之間具有一條特異性條帶，與試劑盒提供的預(yù)期擴增片段大小一致，表明該病料樣品經(jīng)犬細小病毒PCR檢測試劑盒檢測為犬細小病毒陽性。

6 綜合診斷結(jié)果

根據(jù)該養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)犬的發(fā)病情況、臨床特征、病例變化等臨床診斷結(jié)果，結(jié)合膠體金試紙條檢測、PCR檢測等實驗室診斷結(jié)果，綜合判定致病原為犬細小病毒。

7 治療措施

確定致病原為犬細小病毒后，迅速采取了下列針對性治療措施：①將患病犬全部隔離飼養(yǎng)，病死犬的尸體及污染物全部進行無害化處理。②對患病犬立即免疫犬細小病毒高免血清（購自軍事獸醫(yī)研究所），免疫方式為皮下注射，免疫劑量為2.0 mL/條，連續(xù)免疫3 d。③補液與抗繼發(fā)感染。對發(fā)病嚴(yán)重的患病犬靜脈滴注5%葡萄糖溶液，通過人工補液防止脫水死亡。同時，在250 mL 5 %葡萄糖溶液中添加頭孢拉定2 g、500 mg維生素C、利巴韋林100 mg，連續(xù)注射3 d，防止其他致病原的繼發(fā)感染。通過采取以上治療措施后，發(fā)病犬逐漸康復(fù)，隨后對全飼養(yǎng)場的犬進行了犬細小病毒疫苗的免疫接種，疫情得到有效控制。

8 討論

（1）犬細小病毒感染的診斷方面。由于犬細小病毒病與犬冠狀病毒病、彎曲桿菌病等疫病引起的臨床癥狀和病理變化均具有極高的相似性，僅通過臨床診斷很難做出確診[4]，且犬細小病毒病發(fā)病急、病程短、死亡率高，發(fā)病早期做到正確診斷是犬細小病毒病快速治療的前提，因此應(yīng)及早對犬細小病毒病進行實驗室診斷。目前，犬細小病毒病常用的實驗室診斷方法主要有病毒分離鑒定、免疫學(xué)以及分子生物學(xué)檢測方法[5]。其中病毒分離鑒定耗時、操作也復(fù)雜，無法滿足基層快速確診的需求。免疫學(xué)檢測方法基于抗原-抗體的特異性反應(yīng)，目前常用的有ELISA方法和膠體金檢測試紙條，ELISA方法需要酶標(biāo)儀等儀器設(shè)備，且檢測時間較長（至少需要2～3 h），但ELISA方法高通量，特別適合臨床大批量樣品的流行病學(xué)調(diào)查和監(jiān)測；膠體金檢測試紙條不需要任何儀器設(shè)備，將待檢樣品滴于檢測孔中，10 min內(nèi)即可顯示檢測結(jié)果，肉眼判讀，對試驗操作人員技術(shù)水平要求較低，特別適用于單個臨床樣品的快速檢測。分子生物學(xué)檢測方法基于病原體的特異性核酸序列，具有其他診斷方法無法比擬的優(yōu)越性，在犬細小病毒的諸多分子生物學(xué)檢測方法中，PCR方法是操作最簡單，也是應(yīng)用最廣泛的檢測方法[6]。因此，本病例采用膠體金檢測試紙條和PCR方法對致病原進行了檢測，結(jié)合免疫學(xué)和分子生物學(xué)2種方法對致病原進行確診，保證了實驗室診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性。

（2）犬細小病毒感染的防治方面。雖然目前有多種高免血清、卵黃抗體、單克隆抗體以及抗病毒藥物可以對犬細小病毒進行治療，但由于犬細小病毒病為烈性傳染病，一旦發(fā)病勢必造成一定的經(jīng)濟損失，因此對于犬細小病毒病的防治應(yīng)采取“防大于治”的原則，臨床中應(yīng)采取以加強飼養(yǎng)和衛(wèi)生管理、疫苗免疫種等積極性預(yù)防措施為主的綜合防控措施，盡量避免本病的發(fā)生[7]。飼養(yǎng)中要重視日常管理、環(huán)境衛(wèi)生、機體抗病力，要保持圈舍通風(fēng)、干燥、清潔，排泄物及時清理，定期消毒，禁止與豬、羊等家畜混養(yǎng)，定期進行疫苗的免疫接種和抗體檢測，保持飼養(yǎng)營養(yǎng)物質(zhì)均衡，使飼養(yǎng)犬在最適的飼養(yǎng)管理和環(huán)境中達到最佳的生長狀態(tài)，可有效降低犬細小病毒病的發(fā)病率。一旦發(fā)生犬細小病毒病，一定要做到早發(fā)現(xiàn)、早確診、早治療，可以采用高免血清、卵黃抗體、單克隆抗體、抗病毒藥物進行犬細小病毒感染的治療。在治療中，第一，要補水、補鉀，防止脫水和中毒。在治療中要配合使用抗菌藥物，防止繼發(fā)感染；第二，配合使用止吐、止瀉藥物，減輕臨床癥狀；第三，要補充白蛋白等營養(yǎng)物質(zhì)，增強患病犬抵抗力，加快患病犬康復(fù)。

9 結(jié)束語

目前，要加強對犬細小病毒病的重視，采取預(yù)防為主、治療為輔的綜合性防控措施，逐步降低犬細小病毒病的發(fā)病率，降低犬細小病毒病對我國養(yǎng)犬業(yè)的危害，避免造成嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。