★ 舒晴 喻松仁* 白洋 姚琦 王萍

(1.江西中醫(yī)藥大學(xué)研究生院 南昌 330004；2.江西中醫(yī)藥大學(xué) 南昌 330004 )

脾虛證泛指因脾氣虛損而引起的以脾的生理功能失常為主要表現(xiàn)的病理現(xiàn)象和病癥，包括脾氣虛、脾陽(yáng)虛、脾虛氣陷、脾不統(tǒng)血等。脾虛證大多由飲食不節(jié)、勞倦過(guò)度、憂思傷脾或年老體衰、久病耗氣所致。李東垣《脾胃論·脾胃盛衰論》中曰:“百病皆由脾胃衰而生也”，可見(jiàn)人體疾病的發(fā)生與脾胃功能受損密切相關(guān)?！端貑?wèn)·遺篇刺法論》云：“正氣存內(nèi)，邪不可干”，脾為“后天之本”“氣血生化之源”，主運(yùn)化而化生氣血，脾胃功能健旺可以滋養(yǎng)人體正氣，是增強(qiáng)人體抗病能力的基礎(chǔ)；“邪之所湊，其氣必虛”，當(dāng)人體正氣虛弱，無(wú)力抗邪時(shí)，邪氣便侵襲人體而致病，故《靈樞·本臟篇》中有“脾堅(jiān)，則臟安難傷”之說(shuō)?，F(xiàn)代免疫學(xué)研究也表明，傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)中所說(shuō)的“脾”是人體中最大的淋巴網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)，有著廣泛的免疫學(xué)內(nèi)涵。另外，脾的防御功能與人體免疫機(jī)制亦十分相似。故，本文將從免疫學(xué)機(jī)制的角度綜述學(xué)者們關(guān)于脾虛證本質(zhì)的研究。

1 脾虛證與免疫器官的超微結(jié)構(gòu)

免疫器官主要包括脾臟、胸腺、骨髓和肝臟。結(jié)構(gòu)決定功能，因此，免疫器官的超微結(jié)構(gòu)變化往往是其功能異常的物質(zhì)基礎(chǔ)。目前，脾虛證與免疫器官的研究主要是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。上世紀(jì)90年代吳玲霓等[1]就通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)了脾虛動(dòng)物的脾臟和胸腺免疫器官超微結(jié)構(gòu)遭到了嚴(yán)重破環(huán)；王運(yùn)平等[2]檢測(cè)脾虛小鼠的脾重、脾重指數(shù)、胸腺重量及胸腺指數(shù)，發(fā)現(xiàn)各項(xiàng)指標(biāo)均明顯低于正常小鼠，且具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。此后，眾多學(xué)者復(fù)制脾虛證動(dòng)物模型進(jìn)行研究，均發(fā)現(xiàn)脾虛動(dòng)物的脾臟和胸腺等免疫器官的發(fā)育受到了限制。陳芝喜等[3]觀察到脾虛模型動(dòng)物脾臟、胸腺等臟器組織增殖減弱。王洪海等[4]研究發(fā)現(xiàn)脾虛證大鼠胸腺、脾重量明顯降低。黃秀深等[5]造模20d后觀測(cè)亦發(fā)現(xiàn)濕困脾胃證大鼠脾臟、胸腺濕重大幅減輕(P<0.01)，且胸腺皮質(zhì)厚度及脾臟中央動(dòng)脈淋巴鞘直徑明顯變小(P<0.01)，可見(jiàn)脾虛大鼠免疫器官的正常發(fā)育會(huì)受到抑制。而采用健脾益氣方藥治療，可使脾虛動(dòng)物已被破壞的免疫器官結(jié)構(gòu)及體重逐漸恢復(fù)到正常水平。如王珺等[6]研究發(fā)現(xiàn)不同劑量四君子湯治療后脾虛證小鼠的體重、脾臟和胸腺指數(shù)均能有所提高；廖樂(lè)樂(lè)等[7]研究亦表明經(jīng)健脾藥物干預(yù)后脾虛小鼠的免疫器官功能得到明顯提高。劉海濤等[8]證實(shí)補(bǔ)氣健脾藥物能明顯改善脾虛證大鼠的體重、脾臟及胸腺指數(shù)降低的現(xiàn)象。綜上，說(shuō)明脾虛證與免疫器官的超微結(jié)構(gòu)之間是密切相關(guān)的。

2 脾虛證與特異性免疫

2.1 脾虛證與細(xì)胞免疫 細(xì)胞免疫即細(xì)胞介導(dǎo)免疫，是以淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、紅細(xì)胞等免疫細(xì)胞發(fā)揮清除異物作用，其中以T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答最為關(guān)鍵。

2.1.1 脾虛證與T淋巴細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子 T淋巴細(xì)胞源于骨髓中多能干細(xì)胞，在胸腺內(nèi)分化成熟，成為具有免疫活性的T淋巴細(xì)胞。臨床及實(shí)驗(yàn)研究均表明脾虛證與T淋巴細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)相關(guān)，脾虛時(shí)外周血T淋巴細(xì)胞百分比明顯低于正常值，T淋巴細(xì)胞亞群CD4+T與CD8+T比值也異常[9]。張聲生等[10]研究發(fā)現(xiàn)脾虛證和脾虛痰濕證患者的外周血T細(xì)胞亞群CD4+T及CD4+/CD8+比值較健康人明顯下降，可見(jiàn)不論是脾虛證還是脾虛痰濕證，其細(xì)胞免疫功能都明顯下降。萬(wàn)生芳[11]制作脾虛大鼠模型進(jìn)行研究，結(jié)果顯示脾虛證大鼠CD3+T、CD4+T細(xì)胞較空白對(duì)照組下降,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。脾虛不僅影響T淋巴細(xì)胞亞群的表達(dá)，而且與相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)之間也存在一定的關(guān)聯(lián)性。細(xì)胞因子(CK)是細(xì)胞信號(hào)傳遞的使者，能參與免疫細(xì)胞的分化并調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫應(yīng)答。王洪海等[4]研究脾虛證大鼠免疫系統(tǒng)變化特點(diǎn)時(shí)發(fā)現(xiàn)脾虛證大鼠IL-1β表達(dá)顯著降低，IL-2、TNF-α表達(dá)不穩(wěn)定。王明明等[12]實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果也顯示，脾虛證與細(xì)胞因子表達(dá)之間具有高度的相關(guān)性?？梢?jiàn)，脾虛證與T淋巴細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)密切相關(guān)。同樣，健脾藥物的治療能明顯糾正T淋巴細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子的異常表達(dá)，如陳勇等[13]發(fā)現(xiàn)防己黃芪湯灌胃治療可提升脾虛小鼠T淋巴細(xì)胞增值能力并使IL-2表達(dá)恢復(fù)到正常水平。趙盛云等[14]發(fā)現(xiàn)四君子湯可明顯增加脾虛大鼠胃黏膜CD4+T細(xì)胞數(shù)量并降低CD8+T細(xì)胞的數(shù)量。李宏宇等[15]采用四君子湯治療脾虛證小鼠，亦證實(shí)能使其T淋巴細(xì)胞增殖能力得到提升。此外，針刺治療對(duì)脾虛證亦有一定療效，曾榮華等[16]通過(guò)針刺大鼠“足三里”穴發(fā)現(xiàn)可明顯改善脾虛證大鼠納差、便溏、泄瀉等癥狀并有效調(diào)節(jié)脾虛證大鼠腸系膜淋巴結(jié)T淋巴細(xì)胞亞群的平衡,維持機(jī)體的免疫穩(wěn)態(tài)。

2.1.2 脾虛證與紅細(xì)胞 紅細(xì)胞是血液中數(shù)量最多的的一種血細(xì)胞，也是血液中運(yùn)送氧氣的最主要載體，同時(shí)還具有一定的免疫功能。紅細(xì)胞參與機(jī)體免疫反應(yīng)，主要發(fā)揮增強(qiáng)吞噬、去除循環(huán)免疫復(fù)合物和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答等作用[17]。自Siegel1981年提出紅細(xì)胞具有免疫功能后，學(xué)者們開(kāi)始對(duì)此展開(kāi)研究。研究發(fā)現(xiàn)，脾虛證對(duì)紅細(xì)胞免疫功能的影響主要體現(xiàn)在酶母菌紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)率(RBC-C3b-RR)及紅細(xì)胞免疫復(fù)合物花環(huán)率(RBC-Ic-RR)上，而與紅細(xì)胞總數(shù)之間無(wú)明顯直接聯(lián)系。田維毅等[18]通過(guò)檢測(cè)脾虛大鼠RBC-C3b-RR、RBC-Ic-RR以及紅細(xì)胞總數(shù)觀察紅細(xì)胞的免疫功能時(shí)，發(fā)現(xiàn)脾虛大鼠RBC- C3b-RR、RBC-Ic-RR均明顯低于正常對(duì)照組。王紅偉等[19]研究脾虛大鼠血液成分時(shí)亦發(fā)現(xiàn)脾虛組RBC-C3b-RR、RBC-Ic-RR明顯低于正常組。此外，蔡琨等[20]通過(guò)番瀉葉制作的脾虛模型組大鼠RBC-C3b-RR也顯著低于正常對(duì)照組(P<0.05)。研究表明，脾虛證與紅細(xì)胞免疫功能之間有明顯的關(guān)聯(lián)性。

2.2 脾虛證與體液免疫 體液免疫是通過(guò)B細(xì)胞產(chǎn)生的抗體來(lái)發(fā)揮保護(hù)目的的免疫機(jī)制。脾虛證與體液免疫的關(guān)系主要表現(xiàn)為免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)和補(bǔ)體(C3、C4)含量的異常。李家邦與溫慶祥等[21-22]分別通過(guò)臨床和實(shí)驗(yàn)研究探討四君子湯對(duì)機(jī)體免疫功能的影響，李氏研究發(fā)現(xiàn)脾虛模型大鼠的血清IgM水平會(huì)顯著降低，而治療后能明顯提高，溫氏亦檢測(cè)到脾虛患者經(jīng)四君子湯治療后血清IgA、IgG、IgM水平明顯升高。二人采用不同實(shí)驗(yàn)對(duì)象證明了脾虛證與血清免疫球蛋白水平之間的關(guān)系并發(fā)現(xiàn)健脾方藥治療能使異常的免疫功能恢復(fù)正常。此外，李宏宇等[13]用四君子湯給脾虛小鼠灌胃后，發(fā)現(xiàn)脾虛小鼠B淋巴細(xì)胞增殖的能力明顯增強(qiáng)，各項(xiàng)免疫指標(biāo)都有所恢復(fù)。朱萱萱等[23]研究結(jié)果亦提示溫脾實(shí)腸顆粒和溫脾實(shí)腸合劑具有促進(jìn)脾陽(yáng)虛小鼠血清中溶血素抗體生產(chǎn)的作用，能有效增強(qiáng)體液免疫功能。聶建華等[24]研究發(fā)現(xiàn)土人參根水煎液可以明顯提高脾氣虛大鼠IgM、IgG、C3、C4水平。綜上可見(jiàn)，脾虛會(huì)影響B(tài)細(xì)胞抗體的表達(dá)而采用健脾法可明顯提高體液免疫功能。

2.3 脾虛證與局部免疫 分泌型IgA(SIgA) 是機(jī)體黏膜局部抗感染免疫的主要抗體，在腸道黏膜免疫中起到關(guān)鍵作用。研究表明，與正常人相比脾虛證患者唾液中SIgA含量明顯偏低。陳永輝等[25]通過(guò)檢測(cè)腸道相關(guān)指標(biāo)發(fā)現(xiàn)脾虛患兒腸道局部免疫功能低下。徐世軍等[26]檢測(cè)脾虛大鼠SIgA發(fā)現(xiàn)SIgA含量明顯低于正常對(duì)照組。孫理軍等[27]觀察大鼠脾虛與唾液免疫的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)模型組大鼠唾液溶菌酶增高、SIgA降低，表明脾虛會(huì)導(dǎo)致大鼠唾液免疫功能的紊亂。張博等[28]研究脾虛老齡大鼠腸道免疫功能時(shí)發(fā)現(xiàn)脾虛組大鼠腸黏膜sIgA分泌減少，四君子湯組大鼠腸黏膜sIgA分泌增加。

3 脾虛證與非特異性免疫

非特異性免疫即與生俱來(lái)的先天免疫，能對(duì)各種病原微生物作出快速反應(yīng)，而且在特異性免疫過(guò)程中也發(fā)揮重要作用。脾虛證非特異性免疫功能的異常主要表現(xiàn)為固有免疫細(xì)胞和固有免疫分子的異常表達(dá)。溫慶祥等[22]曾發(fā)現(xiàn)脾虛大鼠的IL-4、IL-8水平明顯下降。段永強(qiáng)等[29]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)脾虛證進(jìn)程中小鼠非特異性免疫功能低下(P<0.05)，脾虛小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬率和吞噬指數(shù)，T、B淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)及NK細(xì)胞活性明顯受到影響。同樣，健脾藥物的干預(yù)能使紊亂的細(xì)胞表達(dá)得以改善。顧紅纓等[30]研究發(fā)現(xiàn)補(bǔ)中益氣湯治療能使脾虛小鼠IL-2表達(dá)增強(qiáng)。趙寧等[31]觀察發(fā)現(xiàn)四君子湯可以使脾虛證大鼠異常的TGF-β、TNF-α表達(dá)恢復(fù)正常。米娜[32]采用利血平制備脾虛模型，發(fā)現(xiàn)脾虛小鼠的RBC-C3bR、RBC-IC花環(huán)率，脾NK細(xì)胞活性，巨噬細(xì)胞活性，脾及胸腺指數(shù)等指標(biāo)均明顯低于正常值(P<0.01)。童光東等[33]研究發(fā)現(xiàn)溫補(bǔ)培元方組動(dòng)物的巨噬細(xì)胞功能、脾細(xì)胞NK細(xì)胞活性與脾虛等病理模型組相比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

4 脾虛證與免疫遺傳

免疫遺傳即包含免疫又涵蓋了遺傳方面的內(nèi)容。目前為止，對(duì)于脾虛證與免疫遺傳之間關(guān)聯(lián)性的系統(tǒng)研究較少，而且主要集中在基因和細(xì)胞凋亡兩個(gè)領(lǐng)域。其中關(guān)于脾虛證與基因的研究報(bào)道比較匱乏，劉曉穎等[34]最早從癌基因P53角度揭示了脾氣虛證在胃癌前病變中的重要作用。此外，張世平等[35]探究脾虛證患者與人類(lèi)白細(xì)胞抗原(HLA)之間的關(guān)聯(lián)性，結(jié)果顯示脾虛證與HLA-B22之間存在顯著相關(guān)性(P<0.015),提示脾虛證的本質(zhì)可能有與免疫遺傳學(xué)因素存在一定關(guān)系。曾益宏[36]通過(guò)臨床與實(shí)驗(yàn)相結(jié)合的方法研究脾虛證與線粒體基因多態(tài)性相關(guān)性，結(jié)果提示脾虛證存在著基因的多態(tài)性及基因的異常表達(dá)。細(xì)胞凋亡方面，徐珊等[37]研究發(fā)現(xiàn)氣陰兩虛型慢性胃炎胃粘膜中促進(jìn)細(xì)胞凋亡的基因蛋白Bax、Fax、P16的表達(dá)減弱，細(xì)胞凋亡受到抑制。近年來(lái)隨著現(xiàn)代免疫遺傳研究技術(shù)的成熟，從分子和蛋白表達(dá)的角度亦發(fā)現(xiàn)脾虛影響其相關(guān)指標(biāo)的表達(dá)。鄭愛(ài)華等[38-39]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)大鼠脾虛時(shí)PKCmRNA和IFN-rmRNA表達(dá)水平明顯低于正常對(duì)照組，IL-4rmRNA表達(dá)水平顯著高于正常對(duì)照組。劉海濤等[8]研究發(fā)現(xiàn)脾虛模型大鼠小腸黏膜中SGLT1、GLUT2蛋白表達(dá)均顯著降低(P<0.05)。

5 脾虛證與神經(jīng)內(nèi)分泌

神經(jīng)內(nèi)分泌是神經(jīng)學(xué)和內(nèi)分泌學(xué)之間的邊緣學(xué)科，與免疫功能之間密切相關(guān)，故認(rèn)為其與脾虛證之間亦存在一定的關(guān)聯(lián)性。夏天等[40]研究發(fā)現(xiàn)脾虛時(shí)下丘腦、垂體、甲狀腺的合成、分泌及調(diào)控功能均低下，從而影響激素水平，這些都會(huì)導(dǎo)致機(jī)體免疫功能的下降。李剛等[41]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)脾虛證大鼠額葉皮質(zhì)血清亮氨酸-腦啡肽(L-EK)含量明顯低于正常組(P<0.05)，各腦區(qū)L-EK含量較正常組顯著升高(P<0.01)。而L-EK可能會(huì)通過(guò)下丘腦-垂體-甲狀腺軸影響并削弱免疫功能。呂琳等[42]研究發(fā)現(xiàn)脾虛大鼠腦-腸軸β-內(nèi)啡肽(β-EP)與紅細(xì)胞免疫功能相關(guān)，且不同部位與相同免疫指標(biāo)之間的關(guān)聯(lián)性存在差異。溫慶祥等[43]研究四君子湯對(duì)脾虛大鼠神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)功能的影響，檢測(cè)結(jié)果顯示脾虛組血清胃泌素、胃動(dòng)素、醛固酮等的水平較治療組明顯降低，可見(jiàn)脾虛會(huì)引起神經(jīng)內(nèi)分泌免疫功能的下降。李志強(qiáng)等[44]檢測(cè)脾虛證大鼠血清性激素和甲狀腺激素水平發(fā)現(xiàn)脾虛模型大鼠血清雌二醇(E2)及甲狀腺素(T4)、三碘甲狀腺原氨酸(T3)含量比正常對(duì)照組明顯升高(P<0.01), 睪酮(T)含量比正常對(duì)照組降低(P<0.05)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

6 小結(jié)

綜上所述，可見(jiàn)脾與免疫系統(tǒng)關(guān)系密切，脾虛證與免疫功能低下十分相似，從免疫學(xué)機(jī)制的角度探究脾虛證的本質(zhì)研究取得了一定的進(jìn)展，但主要是基于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的觀察，臨床驗(yàn)證較少。而如今臨床中肥胖癥、高血壓、糖尿病等各類(lèi)代謝性疾病的發(fā)病率急劇上升，由此引發(fā)的各類(lèi)心血管疾病及癌癥也嚴(yán)重危害著人類(lèi)的健康，從中醫(yī)辨證的角度究其病因發(fā)現(xiàn)均與脾虛有著密不可分的聯(lián)系，脾虛生痰、脾失健運(yùn)均會(huì)導(dǎo)致機(jī)體免疫力的下降而致生病。因此，隨著脾虛證診斷標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)范化、脾虛證動(dòng)物模型研究的成熟化及現(xiàn)代免疫學(xué)技術(shù)的廣泛應(yīng)用，探求脾虛證的內(nèi)在本質(zhì)，是從現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的角度找到疾病發(fā)生原因的關(guān)鍵。找尋脾虛證的本質(zhì)，了解疾病發(fā)生的根源，才能更好的做到治病求本、未病先防，為臨床疾病診治和預(yù)防提供借鑒，給科研提供更多新思路。