付正龍 陳征 張益兵

摘要：經(jīng)過(guò)多年的研究和實(shí)踐表明：礬根的頂芽或腋芽均可作為組織培養(yǎng)的外植體。在其培養(yǎng)過(guò)程中加入適量濃度的6-BA和NAA有助于調(diào)節(jié)和促進(jìn)外植體的生長(zhǎng)和生根。研究發(fā)現(xiàn)：以30～40d為一繼代培養(yǎng)周期為好，若超出此期限，易誘發(fā)玻璃苗;控制空氣中塵埃拉子的大小和濃度可減少組培苗的污染率;由組培苗轉(zhuǎn)變成生產(chǎn)用苗的煉苗過(guò)程，其溫度、光照和溫度的控制是十分重要的。并十分強(qiáng)調(diào)：組培苗一旦脫離試管（或瓶）切不可用凈水泡洗，否則將嚴(yán)重降低組培苗的移栽成活率;礬根組培苗移出后的移栽基質(zhì)以2：1或3：4（體積比）的泥炭和珍珠巖為好。

關(guān)鍵詞：磯根;組培;移栽

中圖分類號(hào)：S68 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-9944（2018）05-0067-03

1 引言

礬根（Heuchera hybrid）系虎耳草科礬根屬，該植物為多年生宿根花卉，然而其觀賞點(diǎn)不在花而在葉上，從這點(diǎn)出發(fā)：該植物為彩葉地被植物更為貼切。礬根原產(chǎn)地為美洲中部，是十分耐寒的品種。在-15℃時(shí)，即便葉片受凍枯死，但根部仍存活，一旦地溫回升，照常萌芽。礬根的園藝品種有上海、巴黎、甜茶、里奧、瑪瑪蕾都等許多品種。根據(jù)葉色大致可分為深色系列和淺色系列。葉色有淺紅、深紅、淡黃、綠色等。它在園林上多半應(yīng)用于林下地被，小型色塊，庭院花境。近年來(lái)該品種已開(kāi)發(fā)應(yīng)用到墻面立體綠化和組合盆花等方面。鑒于該品種葉色的多樣化，全年常綠，耐寒性極強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，故其發(fā)展前景較好。

該品種引入我國(guó)已有多年歷史，可推廣面仍十分有限。究其原因，是多方面的。其一，該品種的銷售價(jià)格偏高。其二，苗源的供應(yīng)量不充足。盡管有多地采用組培快繁技術(shù)繁育小苗，但并未形成規(guī)模效應(yīng)。組培過(guò)程中一些關(guān)鍵和組培苗至生產(chǎn)用苗過(guò)程中一些外部因素的掌控未到位。其三，人們對(duì)礬根仍缺乏足夠的認(rèn)識(shí)，尤其是如何應(yīng)用方面缺乏相應(yīng)的知識(shí)。礬根在露地條件下栽培，到盛夏季節(jié)，葉緣易被強(qiáng)光照而灼傷，嚴(yán)重影響景觀效果。這給礬根的推廣帶來(lái)了不少負(fù)面影響。筆者將礬根生產(chǎn)苗的有關(guān)組培、煉苗過(guò)程中作一疏理，將其關(guān)鍵技術(shù)做介紹。以期進(jìn)一步推動(dòng)礬根在園林景觀或家庭養(yǎng)花等方面的開(kāi)發(fā)應(yīng)用，并供同行參考。

2 材料與方法

（1）組織培養(yǎng)的全套設(shè)備。

主要有空調(diào)（中央空調(diào)）、超凈工作臺(tái)、高壓滅菌鍋、紫外燈、空氣過(guò)濾系統(tǒng)、光源（Led燈）

（2）組織培養(yǎng)所需消耗材料。

組培瓶、試管、培養(yǎng)基、6-BA、NAA和有關(guān)微量元素

（3）煉苗用的有關(guān)設(shè)備和材料。大棚（連棟，帶濕簾和負(fù)壓風(fēng)機(jī)），遮蔭網(wǎng)（遮光率80%～90%），穴盤（128孔，）澆灌和噴霧設(shè)備。

（4）數(shù)據(jù)獲得和處理。隨機(jī)抽樣，3個(gè)重復(fù)，每一個(gè)樣本數(shù)不少于100，取3個(gè)重復(fù)的平均值。

3 結(jié)果分析

3.1 組織培養(yǎng)幼苗與相關(guān)因素關(guān)系的調(diào)查

3.1.1 組培苗與溫度的關(guān)系

研究指出：組培苗的產(chǎn)量和質(zhì)量與組培培養(yǎng)室內(nèi)的溫度關(guān)系密切。當(dāng)植株處在增殖階段時(shí)，室溫應(yīng)在20℃±1方可取得最佳的組培效果，當(dāng)植株處在生根階段時(shí)，室溫應(yīng)調(diào)高到22℃±1便可達(dá)到最高的發(fā)根率。詳見(jiàn)表1。

由表1可見(jiàn)：礬根組織培養(yǎng)過(guò)程中在不同階段選用不同溫度不僅有利于這一特定時(shí)間段植株的生長(zhǎng)、發(fā)育，而且有利于電耗的掌控，從而降低組培成本。

3.1.2 組培苗與光照的關(guān)系

組織培養(yǎng)的全過(guò)程均為人工光照而非自然光照。而光源的選擇不僅關(guān)系到組培效果也關(guān)系到能耗的多寡。調(diào)查表明：在同樣光照強(qiáng)度下（2500Lux-3000Lux），其Led光源條件下的組培幼苗較普通日光燈光源下組培苗顯得粗壯。而且在同一時(shí)間段內(nèi)，Led光源的電耗是常用日光燈電耗的1/3，故現(xiàn)有組培培養(yǎng)室內(nèi)的光源大部分由普通日光燈改用Led光源。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，生產(chǎn)100萬(wàn)株組培苗，組培培養(yǎng)室內(nèi)改用Led光源后，電耗減少折成人民幣約8萬(wàn)元[1，2]。

3.1.3 組培苗與空氣濕度的關(guān)系

這里指的空氣濕度是指組培培養(yǎng)室內(nèi)的而并非培養(yǎng)瓶中的濕度。研究表明：當(dāng)組培室內(nèi)空氣相對(duì)濕度）60%時(shí)，則瓶?jī)?nèi)組培苗污染率明顯上升，只有空氣相對(duì)濕度嚴(yán)控在≤30%范圍時(shí)，組培污染率方可明顯下降。見(jiàn)表2和圖1。

通常講，新建的組培室，室內(nèi)的空氣濕度要高些，加之其它例如工作人員服裝上攜帶的病菌程度，空氣中塵埃的多少等原因也會(huì)影響組培苗的污染率。為盡量減少組培苗的污染率，新建組培項(xiàng)目應(yīng)事先作出詳細(xì)防污染預(yù)案[3]。

3.1.4 組培苗與有關(guān)植物激素的關(guān)系

礬根的組織培養(yǎng)在不同階段和不同品系的品種中所使用的6-BA的濃度存有一定的差異。當(dāng)外植體剛植入培養(yǎng)基的誘導(dǎo)期時(shí)，則6-BA的濃度為2 mg/ L，進(jìn)入繼代增殖期時(shí)則6-BA濃度應(yīng)降至0.1mg/L，然而對(duì)綠色品系而言，則濃度需要0.2mg/L，否則繼代增殖階段將過(guò)早出現(xiàn)長(zhǎng)根現(xiàn)象，進(jìn)而抑制植株的增殖，見(jiàn)圖2。當(dāng)組培苗進(jìn)人生根周期時(shí)，加入濃度為0.1mg/L的NNA對(duì)生根十分必要。

3.1.5 組培苗與外植體的關(guān)系

實(shí)驗(yàn)表明：礬根的外植體可用頂芽和腋芽作為誘導(dǎo)材料。大小要求也不十分嚴(yán)格，通常頂芽以1cm，腋芽1.2cm為最佳，當(dāng)然品種間的差異也有關(guān)系，例如印第安納銀幣，筆者經(jīng)過(guò)3年的不斷誘導(dǎo)，才成功得到其幼苗。

3.1.6 組培苗污染率與組培室內(nèi)空氣質(zhì)量的關(guān)系

這里所說(shuō)的空氣質(zhì)量是指組培室內(nèi)空氣中塵埃粒子的濃度。參照藥廠的GMP原理，空氣中微生物都是暫時(shí)懸浮于空氣中的小顆粒（以下稱為塵埃粒子）的形式存在，通過(guò)控制空氣中的塵埃粒子的大小和濃度，減少空氣中菌落的的濃度，從而減少組培苗的污染率。通常的做法是：組培室內(nèi)安裝空氣過(guò)濾器，根據(jù)不同的操作區(qū)域，相應(yīng)的空氣過(guò)濾器的處理級(jí)別不同。例如預(yù)備室，培養(yǎng)基配制室，一般10萬(wàn)級(jí)標(biāo)準(zhǔn)即可（即）0.5μm粒子數(shù)≤3520000;≥5μm粒子數(shù)≤29300），培養(yǎng)室最好是10000級(jí)，接種室則1000級(jí)為最佳（即≥0.5μm粒子數(shù)≤35200;≥5μm粒子數(shù)為293）。值得一提的是組培室內(nèi)保持清潔衛(wèi)生，定時(shí)消毒外，組培室周邊環(huán)境保持清潔也十分重要。組培室是一個(gè)相對(duì)密閉的空間，通過(guò)空氣控制系統(tǒng)將內(nèi)部的空氣排出培養(yǎng)室，將過(guò)濾后的新鮮空氣注入培養(yǎng)室。如果培養(yǎng)室周邊環(huán)境本來(lái)就很差，空氣控制系統(tǒng)中設(shè)備的老化程度加快，過(guò)濾效果降低，運(yùn)行成本將大大增加。

3.1.7 組培過(guò)程中玻璃苗的防止

玻璃苗是植物組織培養(yǎng)過(guò)程中特有的一種生理失調(diào)或生理病變，其組織畸形，吸收器官與光合器官功能不全，即劣質(zhì)次品苗。經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，玻璃苗與培養(yǎng)周期（指繼代培養(yǎng)過(guò)程中組培苗成熟的時(shí)間）關(guān)系密切。越是超齡的，則玻璃苗出現(xiàn)的幾率越高。詳見(jiàn)表3。玻璃苗見(jiàn)圖3。

故根據(jù)培養(yǎng)周期生產(chǎn)不僅可降低玻璃苗的幾率，還可增加組培苗的產(chǎn)量和質(zhì)量。

3.2 組培苗到生產(chǎn)用苗過(guò)程中幾個(gè)關(guān)鍵因素的控制

由組織培養(yǎng)苗到生產(chǎn)用苗務(wù)必經(jīng)過(guò)煉苗復(fù)壯的過(guò)程。這個(gè)過(guò)程就是組培苗從培養(yǎng)瓶中取出，在室外環(huán)境下馴化成生產(chǎn)用苗的階段。在這個(gè)過(guò)程中，只有把握和控制好下列因素，方可獲得更多優(yōu)質(zhì)的生產(chǎn)用苗。

3.2.1 組培苗脫離培養(yǎng)瓶的相關(guān)處理

組培苗從培養(yǎng)瓶中取出，應(yīng)及時(shí)清除根部的培養(yǎng)基。應(yīng)盡量避免植株在清水中浸泡。實(shí)驗(yàn)指出：經(jīng)泡洗后的組培苗，其移栽成活率反而明顯下降，有時(shí)可下降50%～60%。這種狀況在冬季尤為突出。見(jiàn)表4。

2015年10月移栽，每個(gè)樣本移栽10盤（1280株），每個(gè)樣本抽樣3盤。

因此正確的做法是，組培苗從瓶中取出后，將其根部輕度沖洗，培養(yǎng)基完全從幼根脫離即可。

3.2.2 移栽基質(zhì)及配方

經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)，由于煉苗的基質(zhì)以高位泥炭和珍珠巖為好。前者的pH為6.2左右，后者為中性或弱堿性。二者均為少菌或無(wú)菌污染。它們的配比為1：2或3：4。值得一提的是珍珠巖應(yīng)采用園藝系列的粒徑1.2-1.5mm。

3.2.3 水分的控制

脫離培養(yǎng)瓶的組培苗在清除根部培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)處理后，植于由泥炭和珍珠巖混合的基質(zhì)中，冬季用噴淋澆水，使基質(zhì)的含水量達(dá)到持水量的70%～80%，也就是說(shuō)，當(dāng)日的澆水量無(wú)須達(dá)到通常意義上“定根水”的水平。冬季，基質(zhì)濕度偏高極易造成幼苗的爛根。夏季，移栽后務(wù)必及時(shí)澆水，且一次性澆透。前期，穴盤內(nèi)的基質(zhì)保持在持水量70%～80%，且見(jiàn)干見(jiàn)濕，后期直至出圃前，基質(zhì)濕度應(yīng)控制在60%～70%，達(dá)到蹲苗的目的。

3.2.4 光照強(qiáng)度的控制

光照強(qiáng)度的控制側(cè)重于夏季，如上海7～8月盛夏期，自然光照（晴天）強(qiáng)度可達(dá)15萬(wàn)Lux，為此，大棚內(nèi)應(yīng)設(shè)置2～3層遮蔭網(wǎng)（遮光率90%）可使礬根安全越夏。

3.2.5 溫度的控制

礬根小苗對(duì)溫度的適應(yīng)范圍很廣，-8℃～40℃均能適應(yīng)（上海地區(qū)），冰點(diǎn)以上均可以移植。就煉苗而言，冬季塑料大棚內(nèi)，白天溫度可達(dá)15～25℃（晴天），而夏季，即便室外溫度達(dá)39℃，采用上述的遮光方式，并加以水簾和排風(fēng)設(shè)施，可使大棚內(nèi)的溫度降至30℃。這種控溫方法一直要延至9月底。

3.2.6 病蟲(chóng)害的控制

煉苗期間，礬根的主要病害：白粉病和灰霉病。在冬季，連續(xù)的陰雨天，更容易誘發(fā)?？刹捎脽熝`加以熏蒸，可達(dá)到預(yù)防的效果。

在此期間的蟲(chóng)害主要是蝸牛和鼻涕蟲(chóng)，數(shù)量甚少，可以人工捕捉。

4 討論

4.1 關(guān)于產(chǎn)生玻璃苗的機(jī)理

由上所述，組培苗若超出限定的培養(yǎng)周期，便多出現(xiàn)玻璃苗，其原因可能是因?yàn)榕囵B(yǎng)基中某些微量元素耗盡所致，如Fe或Mg。因?yàn)檫@兩個(gè)元素均是光合作用不可少的。這方面的試驗(yàn)有待進(jìn)一步研究。

4.2 組培苗脫離培養(yǎng)后處理

冬季，組培苗脫離培養(yǎng)瓶后，不可用清水浸泡植株，否則會(huì)影響其移栽成活率。造成這種狀況的原因是因幼苗浸泡后，細(xì)胞濃度下降而降低植株的抗寒能力[4]，還是別的方面原因有關(guān)這方面待作進(jìn)一步的研究。

4.3 關(guān)于品種的進(jìn)一步篩選

礬根的品種有100多個(gè)，抗高溫高濕的品種卻很少，因此礬根的度夏一直是其在園林中大規(guī)模應(yīng)用的軟肋。這方面需要進(jìn)一步的研究

4.4 做出示范，加大推廣力度

從礬根的生物學(xué)特性和景觀效果來(lái)看，它是一優(yōu)質(zhì)的地被植物品種，但是目前應(yīng)用十分有限，人們對(duì)其缺乏認(rèn)識(shí)是重要原因。故有關(guān)部門應(yīng)加大力度作出示范。這種示范包括園林小品，林下地被，庭院花境，室內(nèi)裝飾和家庭陽(yáng)臺(tái)綠化[5]。

參考文獻(xiàn)：

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[2]魏進(jìn)莉.LED燈在植物組織培養(yǎng)中的應(yīng)用效果研究[J].農(nóng)業(yè)機(jī)械學(xué)報(bào)，2017（8）：143～144.

[3]徐志剛，丁為民.規(guī)?；M培育苗設(shè)施環(huán)境與控制的研究進(jìn)展[J].農(nóng)業(yè)機(jī)械學(xué)報(bào)，2002（1）：106～110.

[4]王建強(qiáng)，鄧永成.低溫脅迫對(duì)銀葉菊和磯根抗寒生理指標(biāo)的比較研究[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2014，30（7）：224～227.

[5]李春輝.我國(guó)礬根研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)學(xué)通報(bào)，2017，23（15），109～111.