謝鳴部+王芳

[摘要] 目的 探討尿單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）、細(xì)胞免疫水平檢測(cè)對(duì)狼瘡性腎炎（LN）患者病情評(píng)估的價(jià)值及相關(guān)性。 方法 回顧性分析2011年9月～2016年9月60例就診于我院腎內(nèi)科的LN患者臨床資料，依據(jù)系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動(dòng)指數(shù)（SLE-DAI）將60例患者分為活動(dòng)組（SLE-DAI評(píng)分≥10分，n=37）和穩(wěn)定組（SLE-DAI評(píng)分<10分，n=23）；以同時(shí)期30例健康志愿者作為健康組。比較三組受試者尿MCP-1水平和外周血T細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）檢測(cè)結(jié)果差異；經(jīng)Pearson線性相關(guān)分析法分析尿MCP-1、T細(xì)胞亞群水平與LN患者病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性。 結(jié)果 三組受試者尿MCP-1、外周血CD8+檢測(cè)結(jié)果顯示：活動(dòng)組>穩(wěn)定組>健康組（P<0.05）；外周血CD4+、CD4+/CD8+檢測(cè)結(jié)果則顯示：活動(dòng)組<穩(wěn)定組<健康組（P<0.05）；三組外周血CD3+檢測(cè)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。Pearson線性相關(guān)分析結(jié)果顯示：尿MCP-1水平、CD8+水平與SLE-DAI評(píng)分呈正相關(guān)，CD4+、CD4+/CD8+水平與SLE-DAI評(píng)分呈負(fù)相關(guān)（P<0.05），CD3+水平與SLE-DAI評(píng)分無明顯相關(guān)性（P>0.05）。 結(jié)論 尿MCP-1和T細(xì)胞亞群水平與LN患者病情嚴(yán)重程度關(guān)系密切，可作為L(zhǎng)N診斷和病情評(píng)估的敏感指標(biāo)。

[關(guān)鍵詞] 尿MCP-1；T細(xì)胞亞群；LN；相關(guān)性

[中圖分類號(hào)] R446.1；R446.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2017）34-0004-03

The value of the detection of urinary MCP-1 and cellular immunity levels in evaluating the condition of patients with lupus nephritis and correlation study

XIE Mingbu WANG Fang

Department of Nephrology，Ningde Municipal Hospital Affiliated to Fujian Medical University，Ningde 352100，China

[Abstract] Objective To investigate the value of the detection of urinary monocyte chemoattractant protein-1（MCP-1）and cellular immunity in evaluating the condition of patients with lupus nephritis（LN） and the correlation. Methods The clinical data of 60 patients with LN treated in department of nephrology of our hospital from September 2011 to September 2016 were retrospectively analyzed. The patients were divided into active group（SLE-DAI score≥10 points， n=37） and stable group（SLE-DAI score<10 points， n=23）， according to SLE-DAI. And 30 healthy volunteers at the same period were chosen as the healthy group. The differences in the levels of urinary MCP-1 and peripheral blood T lymphocyte subsets（CD3+， CD4+， CD8+， CD4+/CD8+） were compared among three groups. Pearson's linear correlation analysis was used to analyze the correlation of urinary MCP-1 and T cell subsets levels with the severity of LN patients. Results The results of urine MCP-1 and CD8+ in peripheral blood in the three groups showed active group> stable group> healthy group（P<0.05）. The results of peripheral blood CD4+， CD4+/CD8+ detection showed active group0.05）. Pearson linear correlation analysis showed that there was a positive correlation between urinary MCP-1 level and CD8+ level with SLE-DAI score， and CD4+ and CD4+/CD8+ levels were negatively correlated with SLE-DAI score（P<0.05）.There was no significant correlation between CD3+ level and SLE-DAI score（P>0.05）. Conclusion The levels of urinary MCP-1 and T cell subsets are closely related to the severity of LN and may be used as a sensitive index for the diagnosis and assessment of LN.

[Key words] Urinary MCP-1； T cell subsets； LN； Correlation

狼瘡性腎炎（LN）是指系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者合并腎臟免疫性損傷的一種疾病，常伴隨蛋白尿、腎功能不全等臨床癥狀，其腎臟損傷程度與患者治療方案的選擇和預(yù)后密切相關(guān)[1]。目前診斷LN的“金標(biāo)準(zhǔn)”仍為病理學(xué)活檢，但多次侵入性操作給患者帶來較大痛苦，作為一種評(píng)估腎臟損傷程度的檢查方法并不十分理想[2]。因此，尋找合適的生物學(xué)或免疫學(xué)指標(biāo)對(duì)LN病情進(jìn)行準(zhǔn)確評(píng)估具有重要的臨床意義。本研究旨在探討尿單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）、T細(xì)胞亞群水平在LN診斷和病情評(píng)估中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2011年9月～2016年9月于我院腎內(nèi)科就診的60例LN患者的臨床資料。納入標(biāo)準(zhǔn)[3]：年齡18～55歲；符合2009年美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)（ACR）年會(huì)上SLE國際臨床協(xié)作組提出的SLE分類新標(biāo)準(zhǔn)[4]；持續(xù)性蛋白尿﹥0.5 g/d或細(xì)胞管型尿；經(jīng)病理學(xué)活檢證實(shí)有腎臟損傷；患者知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)[5]：合并糖尿病、高血壓或其他可引起腎臟損傷疾病者；臨床資料不全者。依據(jù)系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動(dòng)指數(shù)（SLE-DAI）[6]將60例患者分為活動(dòng)組（SLE-DAI評(píng)分≥10分，n=37）和穩(wěn)定組（SLE-DAI評(píng)分<10分，n=23）?；顒?dòng)組男7例，女30例，平均年齡（33.24±6.34）歲；穩(wěn)定組中男4例，女19例，平均年齡（32.17±5.86）歲。以同時(shí)期30例健康志愿者作為健康組，其中男5例，女25例，平均年齡（33.82±6.63）歲；各項(xiàng)體檢指標(biāo)無異常，均簽署知情同意書。三組受試者在性別（χ2=0.061，P>0.05）、年齡（F=0.448，P>0.05）等方面比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。具有可比性。

1.2 檢測(cè)方法

（1）尿MCP-1水平檢測(cè)：留取所有受試者隨機(jī)尿液30 mL，常規(guī)離心分離取上清液，于-70℃條件下放置保存待檢，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定MCP-1水平，試劑盒由上海瓦蘭生物科技有限公司提供。（2）T細(xì)胞亞群水平檢測(cè)：采集所有受試者清晨空腹肘靜脈血3 mL，使用美國BD Biosciences FACSVerse智能掌控型流式細(xì)胞分析儀測(cè)定CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS19.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson線性相關(guān)分析法，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組受試者尿MCP-1水平比較

活動(dòng)組和穩(wěn)定組患者的尿MCP-1水平明顯高于健康組（t=27.673、11.273，P<0.05），且活動(dòng)組高于穩(wěn)定組（t=16.419，P<0.05），見表1。

2.2 三組受試者外周血T細(xì)胞亞群水平比較

活動(dòng)組患者CD3+水平低于穩(wěn)定組和健康組（t=4.233、5.270，P<0.05），穩(wěn)定組和健康組比較無顯著差異（t=0.721，P>0.05）；活動(dòng)組、穩(wěn)定組患者CD4+水平均低于健康組（t=5.661、2.721，P<0.05），且活動(dòng)組低于穩(wěn)定組（t=2.355，P<0.05）；活動(dòng)組、穩(wěn)定組患者CD8+水平均高于健康組（t=7.264、4.166，P<0.05），且活動(dòng)組高于穩(wěn)定組（t=2.662，P<0.05）；活動(dòng)組、穩(wěn)定組患者CD4+/CD8+水平均低于健康組（t=8.932、4.124，P<0.05），且活動(dòng)組低于穩(wěn)定組（t=3.986，P<0.05）。見表2。

2.3尿MCP-1水平、外周血T細(xì)胞亞群與LN患者SLE-DAI評(píng)分的相關(guān)性分析

經(jīng)Pearson相關(guān)性分析，尿MCP-1水平、CD8+水平與SLE-DAI評(píng)分呈正相關(guān)，CD4+、CD4+/CD8+水平與SLE-DAI評(píng)分呈負(fù)相關(guān)（P<0.05），CD3+水平與SLE-DAI評(píng)分無明顯相關(guān)性（P>0.05）。見表3。

3 討論

SLE是一種多發(fā)于青年女性，與遺傳、食物、紫外線照射等因素相關(guān)的自身免疫性疾病，目前病因尚不明確。LN的發(fā)生可能與免疫復(fù)合物在腎臟沉積或活性物質(zhì)作用于腎臟有關(guān)。病理檢查作為一種有創(chuàng)檢查，雖對(duì)LN診斷和疾病進(jìn)展有準(zhǔn)確的評(píng)估，但同時(shí)對(duì)患者造成痛苦。因此，尋找靈敏的生物學(xué)、免疫學(xué)指標(biāo)代替病理檢查具有重要意義[7]。

MCP-1是一種主要作用于單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的小分子蛋白質(zhì)，尤其可誘導(dǎo)單核細(xì)胞中溶酶體酶的釋放和超氧離子的產(chǎn)生，通過促進(jìn)其定向遷移和功能活化對(duì)LN患者的腎臟造成一定損傷[8]。本研究對(duì)所有受試者的尿MCP-1水平進(jìn)行了測(cè)定，以健康志愿者作為參照物，發(fā)現(xiàn)處于活動(dòng)期的LN患者尿MCP-1水平高于穩(wěn)定期患者，且兩組患者均高于健康者，與高玉琴等[9]研究結(jié)果基本一致。該學(xué)者認(rèn)為，LN患者由于腎臟損傷可導(dǎo)致尿MCP-1水平上升，且這一變化早于病理組織改變，因而尿MCP-1的檢測(cè)對(duì)LN的病情進(jìn)展評(píng)判有積極意義。也有研究發(fā)現(xiàn)[10]，尿MCP-1水平異常上升會(huì)加重單核細(xì)胞對(duì)腎臟的損傷，形成惡性循環(huán)，進(jìn)而促進(jìn)疾病進(jìn)展，不利于病情轉(zhuǎn)歸。為進(jìn)一步了解尿MCP-1水平與疾病嚴(yán)重程度的聯(lián)系，本研究就尿MCP-1水平與SLE-DAI評(píng)分的相關(guān)性展開分析。研究結(jié)果顯示，尿MCP-1水平與SLE-DAI評(píng)分呈正相關(guān)，進(jìn)一步證實(shí)了尿MCP-1水平可較為準(zhǔn)確地反映LN患者的病情嚴(yán)重程度，與以往的研究報(bào)道一致[11]。

LN是一種與免疫功能損傷有關(guān)的疾病，主要表現(xiàn)為外周血CD4+、CD8+水平的異常變化，導(dǎo)致T細(xì)胞亞群比例失衡，進(jìn)而加重免疫功能缺失[12]。本研究中，與健康者比較，LN患者CD4+降低，CD8+升高，CD4+/CD8+水平則降低，且活動(dòng)組患者改變幅度大于穩(wěn)定組，表明T細(xì)胞亞群水平與LN疾病活動(dòng)度關(guān)系密切。吳君榮等[13]學(xué)者的研究指出，SLE是一種自身免疫性疾病，疾病導(dǎo)致的免疫細(xì)胞異?？赡芤鹉I臟損傷，而腎炎的發(fā)生也可加重免疫功能失調(diào)，進(jìn)而加重病情。本研究還探討了T細(xì)胞亞群水平與SLE-DAI評(píng)分的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)CD8+水平與SLE-DAI評(píng)分呈正相關(guān)，而CD4+、CD4+/CD8+水平則與之呈負(fù)相關(guān)，說明T細(xì)胞亞群確實(shí)與LN患者的病情嚴(yán)重程度緊密相關(guān)。據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[14]，LN患者的細(xì)胞免疫功能隨病情加重而發(fā)生改變，CD4+細(xì)胞作為T細(xì)胞免疫的重要組成部分明顯下降，導(dǎo)致CD8+細(xì)胞活性降低，進(jìn)而引起其數(shù)量上升。因而，T細(xì)胞亞群水平與LN患者病情嚴(yán)重程度緊密聯(lián)系，臨床上可將其作為敏感的免疫學(xué)檢測(cè)指標(biāo)，在LN的診斷和病情評(píng)估中發(fā)揮重要作用[15]。endprint

綜上所述，尿MCP-1和T細(xì)胞亞群水平與LN病情嚴(yán)重程度關(guān)系密切，且檢測(cè)便利，可作為評(píng)估LN疾病活動(dòng)度的重要生物學(xué)和免疫學(xué)指標(biāo)。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 鐘正霞，羅茜，裘志成，等. 尿足細(xì)胞B7-1分子的檢測(cè)在原發(fā)性腎病綜合征患者中的價(jià)值[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2015，13（3）：65-66.

[2] 商蒙蒙，劉聰聰，李杰，等.聲觸診組織定量技術(shù)在狼瘡性腎炎診斷中的應(yīng)用研究[J].中國超聲醫(yī)學(xué)雜志，2015， 31（7）：619-621.

[3] 譚德敏，向陽，譚千林，等.狼瘡性腎炎患者外周血樹突狀細(xì)胞功能的研究[J].中國免疫學(xué)雜志，2016，32（4）：570-572.

[4] 郭桂梅，何威遜.系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷標(biāo)準(zhǔn)及治療進(jìn)展[J].中華實(shí)用兒科臨床雜志，2015，30（13）：978-982.

[5] 王超，楊翠，湯水福，等.湯水福辨治狼瘡性腎炎的臨床經(jīng)驗(yàn)[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，34（4）：592-594.

[6] 鄭晗晗，江學(xué)良.美沙拉嗪栓每日1次與每日2次給藥治療輕中度活動(dòng)期潰瘍性直腸炎的臨床療效比較[J].中國全科醫(yī)學(xué)，2016，19（11）：1267-1271.

[7] 李海英，左燦，王艷蘭，等.血清胱抑素C及同型半胱氨酸和視黃醇結(jié)合蛋白聯(lián)合檢測(cè)在狼瘡性腎炎診斷中的意義[J].廣東醫(yī)學(xué)，2014，35（6）：864-866.

[8] 鄺建玉，瞿志軍，趙蔚，等.RANTES、MCP-1和SDF-1β在正常人體和AIDS患者體內(nèi)含量的對(duì)比研究[J].中國感染控制雜志，2017，16（9）：841-844.

[9] 高玉琴，鄧之奎，李元媛，等.MCP-1在狼瘡性腎炎患者血漿及尿中的檢測(cè)水平及意義[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014，13（19）：1600-1603.

[10] 徐瑞，盧文，錢浩，等.TLR9、Mcp-1在狼瘡腎炎患者腎組織中的表達(dá)及臨床意義[J].安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，52（6）：863-868.

[11] 宋欣穎，馬冰，王曉明，等.單核細(xì)胞趨化蛋白-1啟動(dòng)子-2518A/G位點(diǎn)基因多態(tài)性與狼瘡性腎炎關(guān)聯(lián)性的Meta分析[J].中國全科醫(yī)學(xué)，2014，17（10）：1172-1175， 1179.

[12] 劉抗寒，劉芳，梁玉梅，等.外周血CD4+T 細(xì)胞組蛋白乙?；诶钳徯阅I炎中的作用[J].重慶醫(yī)學(xué)，2015，44（30）：4193-4195.

[13] 吳君榮，秦雪，鄧燕，等.狼瘡性腎炎患者免疫功能指標(biāo)的檢測(cè)[J].臨床檢驗(yàn)雜志，2013，31（12）：911-912.

[14] 孫吉平，趙菲，張文靜，等.淋巴細(xì)胞表型和細(xì)胞因子表達(dá)譜與Ⅳ型狼瘡性腎炎患者免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制[J].中南大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2014，39（5）：458-464.

[15] 陳昊，馮輝.調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在免疫性腎病中的作用及臨床應(yīng)用研究進(jìn)展[J].免疫學(xué)雜志，2017，33（2）：179-184.

（收稿日期：2017-10-05）endprint