趙 莼

(天津市中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院，天津 300120)

腦卒中是一種急性腦血管疾病，包括缺血性和出血性卒中。世界衛(wèi)生組織(WHO)指出，腦卒中以每年8.7%的速率增加，按照目前的發(fā)展趨勢(shì)，腦卒中所導(dǎo)致的全球死亡人數(shù)將在2030年達(dá)到780萬(wàn)。缺血性卒中是指由于腦的供血?jiǎng)用}(頸動(dòng)脈和椎動(dòng)脈)狹窄或閉塞、腦供血不足導(dǎo)致的腦組織壞死的總稱,發(fā)病率高，占腦卒中總數(shù)的60%～70%。目前，國(guó)內(nèi)外公認(rèn)的抗腦缺血藥物是溶栓劑組織型纖溶酶原激活物(tissue-type plasminogen activator，t-PA)，但其可能會(huì)使患者產(chǎn)生顱內(nèi)出血等并發(fā)癥及過敏反應(yīng)[1]。而中藥具有多組分、多靶點(diǎn)、毒副作用小、療效穩(wěn)定等優(yōu)勢(shì)，因而在抗腦缺血治療中越來(lái)越受到人們的重視?，F(xiàn)代藥理研究表明，丹參、川芎、黃芪、水蛭等益氣活血類中藥及其有效成分均有抗腦缺血損傷的作用[2]。丹參多酚酸是從活血化瘀中藥丹參中提取出的水溶性成分，具有活血、化瘀、通脈的功效，臨床上可用于治療輕中度腦梗死、冠心病穩(wěn)定型心絞痛、肝性腦病等。其主要成分為丹酚酸類、紫草酸、迷迭香酸、丹參素、原兒茶酸、原兒茶醛、咖啡酸等，其中丹酚酸類包括丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸D、丹酚酸E等主要活性成分[3]。有關(guān)研究證實(shí)丹參多酚酸具有改善腦供血、保護(hù)腦神經(jīng)、抗血小板聚集、降低缺血再灌注損傷、提高耐缺氧能力等藥理作用[4，5]。其中丹酚酸A、丹酚酸B、迷迭香酸、丹參素、原兒茶酸等主要活性成分具有抗炎、抗氧化、清除自由基等作用，對(duì)腦缺血損傷具有一定的保護(hù)作用[6-8]。因此本文就丹參多酚酸及其主要活性成分對(duì)腦缺血的藥理研究進(jìn)展做一綜述。

1 丹參多酚酸鹽治療腦缺血的藥理研究

腦缺血損傷后會(huì)引起一系列的炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、神經(jīng)興奮性毒性等，而丹參多酚酸鹽對(duì)腦缺血損傷具有一定的保護(hù)作用，可能與其能夠抗炎、抗氧化、清除自由基、抑制內(nèi)皮素釋放、鈣通道阻滯等作用有關(guān)。

陳歡等[9]研究丹參多酚酸對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷恢復(fù)期炎性因子的影響，將Wistar大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、腦缺血再灌注模型組、丹參多酚酸治療組，建立大腦中動(dòng)脈栓塞缺血再灌注(MCAO)模型，術(shù)后3 h向大鼠尾靜脈注射丹參多酚酸，1次/d，連續(xù)給藥10 d后，檢測(cè)三組中腦組織及血清中腫瘤壞死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和白介素-1β(IL-1β)含量并進(jìn)行比較，結(jié)果顯示丹參多酚酸可以顯著降低治療組大鼠的腦組織及血清中TNF-α、IL-6和IL-1β的含量，表明丹參多酚酸可能通過降低相關(guān)炎癥因子含量，來(lái)減輕腦缺血引起的血清及腦組織炎癥反應(yīng)，從而起到抗腦缺血再灌注損傷的作用。

婁崢[10]也從動(dòng)物方面做了相關(guān)研究，其將大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、假手術(shù)組、腦缺血再灌注組、丹參多酚酸鹽注射液+腦缺血再灌注組、丹參乙酸鎂+腦缺血再灌注組、依達(dá)拉奉+腦缺血再灌注組、溶媒+腦缺血再灌注組，建立大腦中動(dòng)脈栓塞缺血再灌注(MCAO)模型，手術(shù)后30 min舌下靜脈給藥，用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction, PCR)及免疫印跡(western blot, WB)法檢測(cè)腦組織中NADPH氧化酶2(NOX2)、NADPH氧化酶4(NOX4)的mRNA及蛋白表達(dá)，相關(guān)試劑盒檢測(cè)過氧化氫(hydrogen peroxide, H2O2)的含量。結(jié)果顯示丹參多酚酸鹽、丹參乙酸鎂、依達(dá)拉奉顯著降低了治療組NOX2、NOX4的mRNA及蛋白表達(dá)水平和 H2O2含量。表明丹參多酚酸可能通過調(diào)控NOX2、NOX4的表達(dá)而抑制H2O2生成，從而降低缺血再灌注誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激，起到抗腦缺血再灌注損傷的作用。

王強(qiáng)等[11]采用大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞缺血再灌注(MCAO)模型，SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、缺血再灌注組、丹參多酚酸鹽低劑量治療組和高劑量治療組，在術(shù)后60 min、1 d、2 d分別腹腔注射低劑量及高劑量的丹參多酚酸，ELISA法檢測(cè)腦組織內(nèi)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)和膠質(zhì)源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)的含量，結(jié)果顯示丹參多酚酸鹽可增加治療組腦組織內(nèi)BDNF和GDNF的含量，表明丹參多酚酸鹽對(duì)腦缺血再灌注損傷有明顯的保護(hù)作用，其機(jī)制可能和促進(jìn)腦組織合成的與神經(jīng)元的生長(zhǎng)、分化、生存都起著重要作用的BDNF及GDNF有關(guān)。

2 丹酚酸B治療腦缺血的藥理研究

丹參多酚酸包括多種酚酸類成分，其中丹酚酸B含量最高，是主要的活性成分，藥理學(xué)研究表明其具有抗炎、抗氧化、清除自由基、抗凝血、抗病毒和抗腫瘤等作用。

衛(wèi)永鯤等[12]分別從在體和離體方面做了研究。在體方面，將大鼠分為假手術(shù)組、模型組、丹酚酸B組，建立大腦中動(dòng)脈栓塞缺血再灌注(MCAO)模型，于造模前 3 d腹腔注射丹酚酸 B，1次/d，連續(xù) 3 d，第 3日末給藥 1 h 后造模，用Western blot法檢測(cè)大鼠腦組織中核因子E2-相關(guān)因子2(Nrf2)、血紅素氧合酶-1(HO-1)的蛋白表達(dá)。結(jié)果顯示，與模型組相比，丹酚酸B可顯著升高治療組Nrf2、HO-1 蛋白表達(dá)水平。離體方面，培養(yǎng)大鼠皮層神經(jīng)元原代細(xì)胞，制備細(xì)胞缺氧缺糖模型模擬體外缺血條件，分別給予不同濃度丹酚酸B，用Western blot法檢測(cè)大腦皮層細(xì)胞中 Nrf2、HO-1 的蛋白表達(dá)。結(jié)果顯示，隨著丹酚酸 B 濃度增加，細(xì)胞 HO-1 蛋白及細(xì)胞核中 Nrf2 蛋白表達(dá)水平逐漸升高，而細(xì)胞質(zhì)中 Nrf2 蛋白表達(dá)水平逐漸降低，基本上呈濃度依賴性。在敲除 Nrf2 或HO-1 后，與對(duì)照組相比，丹參酚酸 B 組的細(xì)胞死亡率與細(xì)胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species, ROS) 水平均有明顯的減低，而敲除 Nrf2 后，細(xì)胞死亡率與細(xì)胞內(nèi) ROS 水平與敲除 HO-1 相比，均有相應(yīng)的升高。表明丹酚酸B能夠減輕由大鼠腦缺血再灌注所造成的氧化應(yīng)激損傷，其作用機(jī)制可能是通過增加Nrf2蛋白表達(dá)，激活核因子E2-相關(guān)因子2/抗氧化反應(yīng)元件(nuclear factor E2-related factor/antioxidant response element, Nrf2/ARE)通路，誘導(dǎo)HO-1產(chǎn)生，從而加大肌體清除氧自由基的能力，起到對(duì)大鼠腦神經(jīng)的保護(hù)作用。

汪紅等[13]認(rèn)為丹酚酸B可能通過調(diào)節(jié)相關(guān)信號(hào)通路來(lái)發(fā)揮抗炎作用，從而保護(hù)腦神經(jīng)。將小鼠分為假手術(shù)組、模型組、陽(yáng)性組(尼莫地平30 μg/kg)、丹酚酸 B低劑量組、丹酚酸 B 高劑量組，采用小鼠大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)模型，造模后立即尾靜脈注射不同劑量丹酚酸B，用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)腦組織中IL-1β、TNF-α含量，PCR法、Western blot法分別檢測(cè)缺血側(cè)腦皮層Toll樣受體4(Toll-like receptors4, TLR4)、核因子κB p65(nuclear factor kappa-B p65，NF-κB p65) 的mRNA及蛋白表達(dá)，結(jié)果顯示丹酚酸B高、低劑量均可顯著降低治療組的IL-1β、TNF-α含量以及缺血側(cè)腦皮層TLR4、NF-κB p65 mRNA表達(dá)，丹酚酸B高劑量組可顯著降低缺血側(cè)腦皮層TLR4、NF-κB p65 mRNA蛋白表達(dá)，表明丹酚酸B可能通過抑制TLR4、NF-κB p65信號(hào)通路，減少炎癥因子IL-1β及TNF-α含量，進(jìn)而發(fā)揮抗腦缺血作用。

肖文喜等[14]也進(jìn)行了相關(guān)的動(dòng)物研究，將小鼠分為假手術(shù)組、模型組、尼莫地平組和丹酚酸B高、中、低劑量組，采用改進(jìn)的Zea Longa方法建立大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)模型，造模后立即尾靜脈注射給藥，對(duì)小鼠的神經(jīng)功能缺損評(píng)分，用干濕比重法測(cè)定腦組織含水量、腦指數(shù)，用相應(yīng)試劑盒測(cè)定蛋白及谷氨酸含量，結(jié)果顯示丹酚酸B各劑量組均可顯著降低小鼠神經(jīng)功能損傷，減輕腦水腫，減少谷氨酸含量，從而抑制興奮性氨基酸神經(jīng)毒性作用。由此得出，丹酚酸B對(duì)小鼠急性局灶性腦缺血具有神經(jīng)保護(hù)作用。

3 丹酚酸A治療腦缺血的藥理研究

相關(guān)研究表明，氧化應(yīng)激是導(dǎo)致腦缺血再灌損傷最嚴(yán)重、時(shí)程最長(zhǎng)的因素[15]。而丹酚酸A作為丹參多酚酸最主要的活性成分之一，其含有較多的酚羥基，為咖啡酸多聚體，較丹參素等清除氧自由基的作用更強(qiáng)[16]，因此推斷丹酚酸A可能會(huì)通過抗氧化應(yīng)激等途徑來(lái)保護(hù)腦缺血再灌損傷。

魏禮洲等[17]將大鼠分為假手術(shù)組、模型組和丹酚酸A治療組，建立大鼠右側(cè)局灶性腦缺血再灌注(MCAO)模型，尾靜脈注射丹酚酸A，用相應(yīng)的試劑盒檢測(cè)腦組織中三種抗氧化酶超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)、過氧化氫酶(catalase, CAT)的活性水平，研究發(fā)現(xiàn),丹酚酸A治療組能夠顯著增加抗氧化酶SOD、GSH-PX及CAT的活性，表明丹酚酸A可能通過升高SOD、GSH-PX及CAT活性來(lái)起到抗氧化作用，從而起到抗腦缺血在灌注損傷的。但其并未對(duì)其具體機(jī)制做深入研究。

而張?chǎng)┑萚18]做了更進(jìn)一步的研究。動(dòng)物方面，將大鼠分為假手術(shù)組、模型組、陽(yáng)性藥依達(dá)拉奉組和不同劑量丹酚酸A治療組，建立大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞/再灌注 (MCAO/R) 模型，給予不同劑量丹酚酸A，用Western blot法檢測(cè)腦組織中的Nrf2、HO-1蛋白表達(dá)，實(shí)驗(yàn)顯示丹酚酸A治療組可呈劑量依賴性的顯著增加Nrf2、HO-1的蛋白表達(dá)。細(xì)胞方面，選用神經(jīng)細(xì)胞株P(guān)C12細(xì)胞系，制備氧糖剝奪再?gòu)?fù)氧復(fù)糖(oxygen and glucose deprivation/reperfusion, OGD/R)模型,用免疫熒光法檢測(cè)Nrf2、HO-1的表達(dá)，以及Nrf2 siRNA 轉(zhuǎn)染后對(duì)Nrf2 和 HO-1 表達(dá)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)丹酚酸A能夠促進(jìn)腦組織及 PC12 胞核和胞漿中Nrf2蛋白表達(dá)，核轉(zhuǎn)位率升高，HO-1 蛋白表達(dá)增強(qiáng)，其抗氧化機(jī)制可能與激活Nrf2/HO-1 信號(hào)途徑, 促進(jìn) Nrf2 合成和核轉(zhuǎn)位, 從而促進(jìn)HO-1 的表達(dá)有關(guān)。

也有研究表明，丹酚酸A抗腦缺血損傷機(jī)制與其抗凋亡作用有關(guān)。彭瀟等[19]將SD大鼠分為對(duì)照組、模型組、丹酚酸A組和聯(lián)合組(LY294002+丹酚酸A)，建立大腦中動(dòng)脈缺血再灌注模型。丹酚酸A組給藥預(yù)處理2 d后造模，術(shù)后每日給予丹酚酸A治療。聯(lián)合組在丹酚酸A組處理的基礎(chǔ)上，再灌注前1 h經(jīng)尾靜脈給予LY294002。用原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)(TdT-mediated dUTP nick-end labeling, TUNEL)檢測(cè)細(xì)胞凋亡，免疫組織化學(xué)檢測(cè)在腦組織中的胞漿型磷脂酶A2(cytosolic phospholipases A2, cPLA2)表達(dá)，Western blot法檢測(cè)蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt表達(dá)。結(jié)果顯示，與模型組比較，丹酚酸A治療組可顯著降低TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和cPLA2表達(dá)，聯(lián)合組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；丹酚酸A治療組可顯著升高磷酸化Akt表達(dá)，聯(lián)合組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表明丹酚酸A可通過調(diào)控Akt信號(hào)通路，降低腦缺血再灌注后腦組織中cPLA2表達(dá)，減少腦細(xì)胞凋亡，從而發(fā)揮抗腦缺血再灌作用。

4 丹參素治療腦缺血的藥理研究

丹參素是丹參中提取的水溶性成分，是丹參多酚酸的主要活性成分之一，具有具有抑制血小板聚集、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、抗血栓形成、抗炎、抗腫瘤、清除氧自由基、神經(jīng)保護(hù)等藥理作用[20，21]，以丹參素為主要成分的復(fù)方丹參滴丸、丹參注射液等已廣泛應(yīng)用于臨床治療。近年來(lái)藥物復(fù)方配伍的研究越來(lái)越多，腦缺血損傷會(huì)產(chǎn)生一系列嚴(yán)重的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，因此藥物的聯(lián)合應(yīng)用可能會(huì)成為治療缺血性腦血管病的新方向。

楊永飛等[22]利用丹參素配伍川芎嗪來(lái)研究對(duì)其大鼠局灶性腦缺血的作用機(jī)制，其將SD 大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、丹參素組、川芎嗪組、丹參川芎嗪注射液組和尼莫地平注射液組，建立永久性大腦中動(dòng)脈阻塞(pMCAO)模型。分別在造模前 2 d給藥，1次/d，ip；造模前 0.5 h 給藥 1 次，ip；造模后 4 h 和 8 h給藥 1 次，ip。造模24 h后，腹主動(dòng)脈取血，用Hitachi 7180 全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性及谷氨酸(Glu)含量，實(shí)驗(yàn)顯示與模型組相比，丹參素組、川芎嗪組和丹參川芎嗪注射液組均可顯著升高血清中SOD活性，降低Glu含量，表明丹參素、川芎嗪及其配伍組均能使大鼠血清中SOD活性升高，Glu含量降低，其中丹參川芎嗪注射液組保護(hù)作用最優(yōu)，說明兩單味藥配伍使保護(hù)作用增強(qiáng)，丹參素配伍川芎嗪對(duì)大鼠局灶性腦缺血有協(xié)同的保護(hù)作用。

也有研究表明，新型依達(dá)拉奉丹參素共軛物對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用，可能與其清除自由基有關(guān)。張樹紅等[23]將SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、依達(dá)拉奉治療組、丹參素治療組、新型依達(dá)拉奉丹參素共軛物低劑量治療組以及新型依達(dá)拉奉丹參素共軛物高劑量治療組，建立大鼠局灶性腦缺血再灌損傷模型，于手術(shù)當(dāng)天缺血后2 h及第 2日和第3日早8:00尾靜脈注射各藥物或生理鹽水，手術(shù)后72 h將大鼠處死，用相應(yīng)試劑盒檢測(cè)大鼠腦組織中的SOD活性和MDA含量，結(jié)果顯示，與模型組比較，新型依達(dá)拉奉丹參素共軛物治療組的SOD活性顯著升高，丙二醛(MDA)含量顯著降低。之后用體外非細(xì)胞實(shí)驗(yàn)法檢測(cè)新型依達(dá)拉奉丹參素共軛物對(duì)羥自由基(.OH)和超氧陰離子(·O2-)的清除能力，結(jié)果顯示依達(dá)拉奉治療組、丹參素治療組、新型依達(dá)拉奉丹參素共軛物低劑量及高劑量治療組對(duì)·OH和·O2-的清除能力均增強(qiáng)，且呈劑量依賴性，其中新型依達(dá)拉奉丹參素共軛物治療組顯示出最強(qiáng)的清除能力。

另外丹參素冰片酯對(duì)抗腦缺血損傷也具有一定的作用，其可以改善大鼠神經(jīng)癥狀，減輕神經(jīng)細(xì)胞病理?yè)p傷、脂質(zhì)氧化損傷、酸中毒，抗自由基損傷、抑制炎癥反應(yīng)。張易[24]將SD大鼠分為五組，假手術(shù)組、模型組、丹參素冰片酯高、中、低劑量治療組，建立大鼠中動(dòng)脈腦缺血(MCAO)模型，造模后立即舌下靜脈給藥，6 h后腹腔給藥1次，造模后24 h再腹腔給藥1次，做神經(jīng)功能行為學(xué)評(píng)分和腦梗死范圍測(cè)定，用相應(yīng)試劑盒檢測(cè)大鼠腦組織中乳酸(LD)、乳酸脫氫酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛含量。結(jié)果顯示，與模型組相比，丹參素冰片酯高、中劑量治療組大鼠的腦梗死程度明顯減輕，但神經(jīng)癥狀未見明顯改善；與模型組相比，丹參素冰片酯高劑量治療組可顯著升高腦組織中SOD含量、MDA含量，丹參素冰片酯中劑量治療組可顯著升高SOD含量，丹參素冰片酯低劑量治療組可明顯抑制LD含量的升高，表明丹參素冰片酯有抗自由基損傷的作用，從而保護(hù)腦組織。

5 其他活性成分治療腦缺血的藥理研究

丹參多酚酸的其他主要活性成分，迷迭香酸、原兒茶醛、原兒茶酸等也具有減輕腦缺血損傷，保護(hù)腦神經(jīng)的作用。

崔海瑛[25]認(rèn)為迷迭香酸的抗腦缺血損傷可能與其抗氧化、抗凋亡作用有關(guān)。選用CD-1小鼠作為研究對(duì)象，隨機(jī)分為假手術(shù)組、手術(shù)組、迷迭香酸高、中、低劑量組，建立小鼠短暫性(60 min)右側(cè)大腦中動(dòng)脈閉塞(MCAO)模型，再灌注后立即腹腔注射給藥。再灌注24 h后，對(duì)小鼠神經(jīng)功能缺失評(píng)分，用TTC(2，3，5-三苯基氯化四氮唑)染色測(cè)定腦梗死體積，用TUNEL檢測(cè)細(xì)胞凋亡，用Western Blot 和RT-PCR法分別檢測(cè)腦組織中 HO-1、Nrf2、B淋巴細(xì)胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2, Bcl-2)、Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bcl-2-associated X protein, Bax)的蛋白及mRNA表達(dá)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，迷迭香酸高、中劑量組小鼠的神經(jīng)功能評(píng)分明顯低于手術(shù)組，梗死體積明顯縮小，缺血周圍腦組織的TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞明顯減少，而迷迭香酸低劑量組無(wú)顯著性影響；與手術(shù)組相比，迷迭香酸高、中劑量組均能顯著升高Bcl-2蛋白表達(dá)，降低Bax 蛋白表達(dá)，上調(diào) HO-1 蛋白表達(dá)及胞核內(nèi) Nrf2 蛋白表達(dá)，其中迷迭香酸高劑量組較中劑量組作用更為顯著。表明迷迭香酸可通過激活 Nrf2/HO-1 通路，上調(diào) Bcl-2的表達(dá)，抑制 Bax 表達(dá)來(lái)發(fā)揮抗腦缺血再灌損傷作用的。

高麗萍等[26]也做了相似的在體研究，將大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)對(duì)照組、模型組、葛根素組、迷迭香酸高、低劑量組，制備局灶性腦缺血再灌模型，腹腔注射給藥3 d后造模，缺血4 h再灌2 h，然后進(jìn)行行為學(xué)評(píng)分，TTC染色測(cè)定腦梗死體積，用相應(yīng)試劑盒檢測(cè)大鼠血清中MDA含量，SOD、GSH-Px活力。研究發(fā)現(xiàn)，與模型組相比，迷迭香酸高、低劑量組及葛根素組均能顯著改善大鼠神經(jīng)功能缺損癥狀，減少腦梗死體積，降低血清中MDA含量、升高SOD活力，在劑量相同時(shí)，迷迭香酸作用與葛根素相當(dāng)；與模型組相比，迷迭香酸高劑量組及葛根素組均能增加GSH-Px活性，而迷迭香酸低劑量組無(wú)顯著性影響。因此，該研究認(rèn)為迷迭香酸可通過抑制MDA生成，升高SOD和GSH-Px的活性來(lái)發(fā)揮抗氧化作用，從而起到抗腦缺血再灌注損傷的作用。

李智勇等[27]從離體方面做了相關(guān)研究，選用原代培養(yǎng)大鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞，隨機(jī)分為對(duì)照組、缺血缺氧組、原兒茶酸高、中、低濃度干預(yù)組，建立缺血缺氧細(xì)胞模型，于1%低氧培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，無(wú)血清培養(yǎng)基中加入不同濃度的原兒茶酸，培養(yǎng) 24 h后，用MTT[3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽]法檢測(cè)細(xì)胞活力，LDH試劑盒檢測(cè)細(xì)胞上清液中乳酸脫氫酶含量，計(jì)數(shù)凋亡細(xì)胞，Western blot法檢測(cè)細(xì)胞中NF-κB p65、Notch1蛋白表達(dá)。結(jié)果顯示，與缺血缺氧組相比，原兒茶酸高、中、低濃度干預(yù)組可顯著增加細(xì)胞活力，降低乳酸脫氫酶釋放量，凋亡細(xì)胞減少，并呈濃度依賴性，顯著降低細(xì)胞內(nèi)NF-κB p65、Notch1的蛋白表達(dá)。實(shí)驗(yàn)表明，原兒茶酸具有很好的神經(jīng)保護(hù)作用，可能是通過調(diào)控Notch信號(hào)通路，進(jìn)而調(diào)節(jié)了NF-κB p65的表達(dá)，來(lái)減輕大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的。

6 小結(jié)

缺血性腦血管病已成為臨床上常見的不易根治的疾病，嚴(yán)重地影響著人類的健康，其發(fā)病機(jī)制異常復(fù)雜，因而研究開發(fā)治療腦缺血損傷的藥物是一項(xiàng)困難而艱巨的任務(wù)。丹參為中藥中的活血化瘀類藥物，其具有活血祛瘀、通經(jīng)止痛、清心除煩、涼血消癰的功效，主治胸痹心痛、脘腹脅痛、瘕瘕積聚、月經(jīng)不調(diào)等癥狀。以上藥理研究表明丹參中提取的水溶性成分丹參多酚酸及其主要活性成分可通過清除自由基、抗氧化應(yīng)激、抗炎、抗凋亡，抑制神經(jīng)興奮性毒性等途徑來(lái)發(fā)揮抗腦缺血損傷的作用，從而為臨床上治療缺血性腦血管病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。