姜強,李建婷,婁凱,陸勇,黃國寶

濟(jì)南市中心醫(yī)院內(nèi)分泌科 ，山東濟(jì)南 250013

糖尿病足是一種糖尿病多見并發(fā)癥[1]，表現(xiàn)為足部軟組織與骨關(guān)節(jié)畸形與破壞，遷延難愈。創(chuàng)面負(fù)壓由多側(cè)空引流管、醫(yī)用泡沫材料以及負(fù)壓引流裝置組成，可以及時排除創(chuàng)面及腔隙中的液化、滲液壞死組織，加速毛細(xì)血管的生長，促進(jìn)腔隙及創(chuàng)面有效斂合，在深部腹部開放創(chuàng)口的愈合中發(fā)揮重要作用[2]。bFGF屬于多功能外源性生長因子[3]，有促進(jìn)外胚層及中胚層的細(xì)胞修復(fù)及再生作用，是促進(jìn)創(chuàng)面愈合的關(guān)鍵因子。我們對創(chuàng)面負(fù)壓對糖尿病足患者創(chuàng)面bFGF的影響進(jìn)行了觀察總結(jié)。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015年2月—2017年2月，在該院就診的50例糖尿病足患者：常規(guī)組女11例，男14例，年齡均值（58.46±5.52）歲；干預(yù)組女10例，男15例，年齡均值（58.51±5.31）歲。兩組病患性別、年齡等資料存在良好一致性（P＞0.05）。

1.2 治療方法

常規(guī)組：常規(guī)紗布換藥，依照敷料浸濕的具體情況，每2～3 d換1次藥，將失活壞死的組織及膿液及時清理。

干預(yù)組：對創(chuàng)面常規(guī)消毒，將壞死失活的組織有效清除，確保創(chuàng)面、創(chuàng)腔無異物及膿液殘留。依照患者創(chuàng)面實際大小設(shè)計合適的修剪敷料，深腔底部填塞敷料；將半透性黏貼薄膜覆蓋創(chuàng)面，確保創(chuàng)面的封閉性；用連接管連接負(fù)壓引流裝置，保證敷料與半透明薄膜因負(fù)壓吸引于皮膚凹陷；如有漏氣，需再次將創(chuàng)面封閉；設(shè)置負(fù)壓在-125mmHg，總計治療1周。治療期間需對患者引流管堵塞、出血及漏氣等情況密切觀察，一旦發(fā)現(xiàn)異常需盡早處理。

治療前后每位患者均取創(chuàng)面肉芽組織2份，厚度0.5 cm，直徑0.8 cm。一份采取免疫組織化學(xué)染色；另外一份置于-80℃儲藏柜中保存。收集標(biāo)本后，通過Western blotting法對bFGF蛋白的表達(dá)進(jìn)行檢測。

1.3 效果評價

兩組治療1周后，對選取的創(chuàng)面肉芽組織切片依次行HE（蘇木素伊紅）染色、Masson染色（以圖像分析軟件分析切片中膠原含量）、免疫組化染色（以圖像分析系統(tǒng)分析光密度值表示bFGF含量），并用Western blotting法分析bFGF表達(dá)的情況。

對比治療5、10 d和15 d時，兩組的創(chuàng)面愈合面積。愈合面積=（治療前潰瘍面積-治療后剩余未愈合面積）/治療前潰瘍面積×100.00%。

1.4 統(tǒng)計方法

整理及匯總實驗數(shù)據(jù)，用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件處理，（±s）表示計量資料，t檢驗表示組間差異，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者HE染色情況對比

干預(yù)組治療后肉芽組織HE染色存在新鮮肉芽組織，主要表現(xiàn)為成纖維細(xì)胞、中性粒細(xì)胞浸潤，并形成大量的新生毛細(xì)血管；常規(guī)組成纖維細(xì)胞與中性粒細(xì)胞浸潤與干預(yù)組相比要少。

2.兩組織Masson染色對比

干預(yù)組治療前后膠原纖維沉積為（9.9±3.2） %VS（23.3±6.9）%，t=-11.251，（P＜0.05）；常規(guī)組治療前后為（9.2±2.5）%VS（10.3%±3.5）， t=-1.924。干預(yù)組治療前后膠原面密度差值（13.3±5.4）%顯著高于常規(guī)組（1.2±2.5）%，t=9.257（P=0.002）。

表1 治療后創(chuàng)面愈合面積對比（x ±s）

2.3 免疫組化染色分析

bFGF陽性細(xì)胞在免疫組化切片顯示為棕黃色或棕褐色顆粒。干預(yù)組治療后棕黃色顆粒明顯增加，光密度顯示bFGF表達(dá)水平為（0.424±0.090），顯著高于治療前（0.22±0.03），t=14.356（P＜0.05）；常規(guī)組治療前后變化不明顯，（P＞0.05）；干預(yù)組治療前后光密度差值（0.20±0.05）vs常規(guī)組（0.02±0.02）差異有統(tǒng)計學(xué)意義，t=12.04（P＜0.05）。

2.4 Western blotting法分析

干預(yù)組治療前肉芽組織bFGF表達(dá)水平為0.67±0.20，治療后為 2.99±1.12，t=-10.723（P＜0.05）；常規(guī)組治療前后（0.63±1.20 vs 0.70±0.17）差異不明顯；干預(yù)組治療前后bFGF灰度差值（2.31±0.99）與常規(guī)組（0.11±0.08）比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，（t=10.142，P＜0.05）。

2.5 兩組治療后創(chuàng)面愈合面積比較

常規(guī)組治療5、10 d與15 d后，創(chuàng)面愈合的面積均小于干預(yù)組，具體數(shù)據(jù)見表1。

3 討論

該研究發(fā)現(xiàn)創(chuàng)面負(fù)壓治療可使糖尿病足患者創(chuàng)面肉芽組織中纖維細(xì)胞、成纖維細(xì)胞以及毛細(xì)血管胚芽的數(shù)量多于常規(guī)組，bFGF表達(dá)高于常規(guī)治療組，并使創(chuàng)面愈合快于常規(guī)治療組。

糖尿病足具有遷延不愈的特點。細(xì)胞因子在傷口愈合中的作用至關(guān)重要[3]。bFGF是促進(jìn)創(chuàng)面愈合的一種關(guān)鍵因子，通過刺激成纖維細(xì)胞增殖、遷移、分化，調(diào)節(jié)血管生成和促進(jìn)膠原蛋白沉積，加速創(chuàng)面愈合[3]。該研究顯示，創(chuàng)面負(fù)壓可以增加bFGF在糖尿病足創(chuàng)面表達(dá)，促進(jìn)肉芽組織中纖維細(xì)胞、成纖維細(xì)胞以及毛細(xì)血管胚芽生長，在加速糖尿病足創(chuàng)面愈合中發(fā)揮了重要作用，值得進(jìn)一步推廣。

[1]中國醫(yī)療保健國際交流促進(jìn)會糖尿病足病分會.中國糖尿病足診治指南[J].中華醫(yī)學(xué)雜志, 2017,97(4) :251-258

[2]Bertelsen,C.A.,Fabricius,R.,Kleif,J. et al. Outcome of negativepressure wound therapy for open abdomen treatment after nontraumatic lower gastrointestinal surgery: Analysis of factors affectingdelayed fascial closure in 101 patients[J]. World Journal of Surgery, 2014,38(4):774-781.

[3] Schweigerer L, Neufeld G, Friedman J, et al. Capillary endothelial cells express basic fibroblast growth factor, a mitogen that promotes their own growth[J]. Nature. 1987，325(6101):257-259.