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(寧波大學(xué)食品科學(xué)與工程系,浙江寧波 315211)

莧菜(AmaranthustricolorL.)為莧科莧屬、一年生草本植物,在氨基酸、脂肪酸及微量元素等組成和含量方面是一種難得的優(yōu)質(zhì)功能食品資源[1]。由于莧菜中不含草酸,所含鈣、鐵等礦物質(zhì)進(jìn)入人體后很容易被吸收利用[2]。因此,莧菜能促進(jìn)小兒的生長(zhǎng)發(fā)育,對(duì)骨折的愈合具有一定的食療價(jià)值[3]。另外,花紅莧和紅葉莧的根、莖、葉中富含一種由酮類和醌類衍生的次級(jí)代謝產(chǎn)物——莧紅素,它不同于花青素,屬于甜菜素類中甜菜紅素亞型的生物色素[4]。是一種易溶于水的含氮有機(jī)物,具有高抗癌、抗氧化的特性,并且具有降血脂,保護(hù)眼睛等藥用價(jià)值[5]。莧紅素作為一種天然色素逐漸受到人們的重視。

茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)最早發(fā)現(xiàn)于茉莉?qū)偎剀盎ㄖ?是茉莉花的主要芳香物質(zhì),它是調(diào)控植物次生代謝物合成的重要激素,可以作為信號(hào)分子激發(fā)植物的化學(xué)防御[6]。有研究表明茉莉酸甲酯能夠促進(jìn)莧菜中莧紅素的積累,并能影響莧紅素合成關(guān)鍵酶——酪氨酸酶的活性[7]。MeJA也能促進(jìn)苦玄參苷的積累,提高藥材品質(zhì)[8]。采用茉莉酸甲酯浸種,通過(guò)影響水稻幼苗葉片中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、過(guò)氧化物酶(peroxidase,POD)、過(guò)氧化氫酶(catalase,CAT)、抗壞血酸過(guò)氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)的活性來(lái)減輕水稻幼苗白葉枯病的發(fā)生[9]。本實(shí)驗(yàn)采用MeJA溶液培養(yǎng)莧菜種子,并對(duì)常用的評(píng)價(jià)植物化感作用的生物指標(biāo),包括種子萌發(fā)的各項(xiàng)指標(biāo)(發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù))、植物生長(zhǎng)指標(biāo)(根長(zhǎng)、全長(zhǎng))、植株生理生化指標(biāo)(抗氧化物保護(hù)酶活性)進(jìn)行檢測(cè)[10],為莧菜芽生長(zhǎng)過(guò)程中抗氧化酶活性的變化提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

莧菜種子(當(dāng)年產(chǎn)收) 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝店;乙醇、次氯酸鈉 分析純,購(gòu)自寧波百川生物科技有限公司;十二水和磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、檸檬酸、福林酚、聚乙烯吡咯烷酮(polyvinyl pyrrolidone,PVP) 均為分析純；超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)測(cè)試盒、H2O2測(cè)試盒 南京建成生物工程研究所。

RXZ-500D-LED型人工氣候箱 寧波江南儀器廠;DK-S22型電熱恒溫水浴鍋 上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;754型紫外分光光度計(jì) 上海菁華科技有限公司;TGL-16型高速冷凍離心機(jī) 湖南長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司;PHS-3C型pH計(jì) 上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 茉莉酸甲酯溶液的配制 用pH6.8的磷酸鹽緩沖液作為溶劑,加入茉莉酸甲酯配成質(zhì)量濃度為0.01 mol/L的茉莉酸甲酯母液(用超聲波清洗機(jī)輔助溶解),用溶劑將母液稀釋成10、20、50、80、100、150 μmol/L的處理液,實(shí)驗(yàn)前配制,緩沖液作對(duì)照處理。

1.2.2 莧菜種子的前處理和露白實(shí)驗(yàn) 參照農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程,挑選當(dāng)年產(chǎn)收、無(wú)霉變和破損,顆粒飽滿的莧菜種子,置于5～10 ℃的環(huán)境中破除種子休眠后取出,用超純水清洗兩遍,除去雜質(zhì)和灰塵,在75%的乙醇水溶液中浸泡30 s,再放入0.3%的NaClO溶液中浸泡30 min后置于無(wú)菌的濾紙上瀝干。將消毒后的種子均勻播于鋪有2層濾紙的發(fā)芽盒中,濾紙經(jīng)清水浸濕,其上覆蓋一層濕潤(rùn)的濾紙,整體置于溫度為26 ℃,濕度為85%的培養(yǎng)箱中,在黑暗條件下培養(yǎng),直至莧菜種子露白。

1.2.3 莧菜種子最優(yōu)培養(yǎng)液濃度的篩選 將露白的莧菜種子播于新的鋪有濾紙的培養(yǎng)盒中,加入不同濃度(10、20、50、80、100和150 μmol/L)的MeJA溶液作為培養(yǎng)液,空白對(duì)照加入pH6.8的磷酸鹽緩沖液。培養(yǎng)條件為:26 ℃下,12 h光周期,12 h暗周期,光照強(qiáng)度為6000 LX,種子放入以后用保鮮膜蓋好,不同處理每隔48 h添加3 mL相應(yīng)濃度的培養(yǎng)液。8 d后采收,根據(jù)莧菜芽的生長(zhǎng)情況及莧紅素的含量確定最優(yōu)培養(yǎng)液濃度。實(shí)驗(yàn)重復(fù)5次以上。

1.2.4 茉莉酸甲酯溶液對(duì)莧菜種子萌發(fā)的影響 采用1.2.2中的方法將種子消毒,并用相同的方法使種子露白。將每50粒露白的種子放入有兩層濾紙的培養(yǎng)瓶中,用最優(yōu)濃度的MeJA溶液和pH6.8磷酸鹽緩沖液作為培養(yǎng)液,在與1.2.3相同的條件下進(jìn)行培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。記錄種子每天的萌發(fā)數(shù)量(以胚根突破種皮為準(zhǔn)),統(tǒng)計(jì)種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽指數(shù)、種子活力指數(shù)。種子萌發(fā)過(guò)程中每隔2 d取樣,用游標(biāo)卡尺測(cè)定莧菜的根長(zhǎng)和全長(zhǎng)。每次隨機(jī)取樣,挑出30根(每組重復(fù)各10根)莧菜芽進(jìn)行測(cè)定。

發(fā)芽率(%)=發(fā)芽種子數(shù)/供試種子數(shù)×100

發(fā)芽勢(shì)(%)=規(guī)定日期內(nèi)(3 d)發(fā)芽種子數(shù)/供試種子數(shù)×100

式中:Dt-發(fā)芽實(shí)驗(yàn)第幾日;Gt-第幾日的發(fā)芽數(shù)。

1.3.1 面積 種公羊面積需求為每只4m2以上，妊娠母羊面積需求為每只1m2以上，空懷母羊面積需求為每只0.8m2以上，育成羊面積需求為每只0.6m2以上。

活力指數(shù)(VI)=S×Gi

式中：Gi-發(fā)芽指數(shù);S-種苗生長(zhǎng)量。

1.2.5 莧菜芽的培育 采用1.2.2和1.2.3中的方法培育莧菜芽,每隔2 d取樣,液氮冷凍后放入-20 ℃冰箱內(nèi)保存,用于生理生化指標(biāo)測(cè)定。

1.3 指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 莧紅素含量測(cè)定 參照Sanjay等[11]的方法稍加改動(dòng)。稱取莧菜樣品0.5 g于研缽中,加少量石英砂及5 mL、pH6.5的檸檬酸-磷酸緩沖液研磨后,于4 ℃冰箱中靜置30 min。在10000 r/min的條件下冷凍離心15 min后取上清液,用提取液稀釋5倍后,在538 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。按以下公式計(jì)算莧紅素含量:

式中,A為538 nm處的吸光度值;Df為樣品稀釋倍數(shù);Mw為甜菜紅素的相對(duì)分子質(zhì)量(550 g/mol);Vd為勻漿液體積(mL);ε為甜菜紅素摩爾消光系數(shù)(60000 L/mol·cm);L為光程(cm);Wd為樣品質(zhì)量(g)。

表1 不同濃度MeJA溶液對(duì)莧菜種子發(fā)芽指標(biāo)的影響Table 1 Effect of various MeJA concentrations on the seed germination index of amaranth

注：同列不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(p<0.05)。表2同。1.3.2 總酚含量的測(cè)定 在王行等[12]方法的基礎(chǔ)上有所改進(jìn)。稱取0.5 g樣品,用5 mL 70%(v∶v)乙醇研磨,在10000 r/min,4 ℃的條件下離心10 min后取上清液稀釋10倍,取0.5 mL稀釋液與反應(yīng)液(包含0.25 mL福林酚試劑,1.375 mL水,0.75 mL 10% Na2CO3)混合均勻,20 ℃水浴1 h,在765 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光值。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。相同方法下采用沒(méi)食子酸制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(y=0.0143x+0.0289)。

1.3.3 H2O2含量測(cè)定 稱取0.5 g樣品加5 mL 0.05 mol/L磷酸緩沖液(pH7.0,含3% PVP),冰浴研磨,4 ℃ 12000 r/min離心20 min,取上清液。之后根據(jù)H2O2測(cè)試盒的說(shuō)明進(jìn)行測(cè)定。

表2 MeJA處理對(duì)莧菜芽根長(zhǎng)和全長(zhǎng)的影響Table 2 Effect of MeJA treatment on the root length and overall length of amaranth bud

1.3.4 抗氧化酶活性測(cè)定 POD和CAT活性測(cè)定參照Toivonen等[13]的方法稍加改動(dòng)。POD采用愈創(chuàng)木酚法進(jìn)行測(cè)定,以每分鐘內(nèi)A470光吸收值變化0.01為一個(gè)酶活力單位。CAT以反應(yīng)液在每分鐘內(nèi)A240光吸收值減少0.1為一個(gè)酶活力單位。APX活性的測(cè)定參照成少寧等[14]的方法有所改動(dòng)。APX以反應(yīng)液每分鐘內(nèi)A290光吸收值變化0.1為一個(gè)酶活力單位。樣品制備同H2O2,之后按照超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)試盒測(cè)定SOD活性。

1.4 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)中各指標(biāo)均重復(fù)測(cè)定3次,取其平均值。數(shù)據(jù)圖片用Origin Pro 8.0繪制,并采用SAS 9.0軟件方差分析中的Duncan’s Multiple Range Test(p<0.05)進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度MeJA處理對(duì)莧菜種子發(fā)芽情況的影響

發(fā)芽率能近似地反應(yīng)出苗率,而發(fā)芽勢(shì)的大小表明發(fā)芽速率的快慢,發(fā)芽指數(shù)是發(fā)芽率指標(biāo)的細(xì)化和深化,它放大了種子活力的特征,使好壞種子的差異加大,活力指數(shù)是種子發(fā)芽速率和生長(zhǎng)量的綜合反映。

由表1可知,不同濃度的MeJA處理對(duì)莧菜芽的生長(zhǎng)均有不同程度的影響。與空白對(duì)照組相比,MeJA抑制了莧菜種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)。50 μmol/L MeJA處理抑制作用較明顯,其他濃度抑制作用相差不大。

2.2 不同濃度MeJA處理對(duì)莧紅素含量的影響

茉莉酸甲酯是調(diào)控植物次生代謝物合成的重要激素,可以調(diào)控多種植物次生代謝物質(zhì)的產(chǎn)生。由圖1可知,MeJA處理顯著(p<0.05)提高了莧菜中莧紅素的含量。與空白對(duì)照相比,在濃度為10～150 μmol/L的范圍中,100 μmol/L MeJA處理組效果最好,其莧紅素含量約為空白對(duì)照的2.38倍。戰(zhàn)晴晴等[15]研究表明,MeJA處理對(duì)北柴胡不定根中柴胡皂苷含量的積累有明顯的促進(jìn)作用,并且當(dāng)MeJA濃度為200 μmol/L時(shí),柴胡皂苷含量最高;與Cao等[16]的研究結(jié)果一致,當(dāng)茉莉酸甲酯的濃度為100 μmol/L時(shí),莧菜中莧紅素的含量達(dá)到最高。低于此濃度時(shí),隨著濃度的升高,莧紅素得到進(jìn)一步的積累,而高于此濃度時(shí),莧紅素的合成則受到抑制,這與賓金華等[17]關(guān)于MeJA對(duì)水稻和花生種子的萌發(fā)表現(xiàn)出“雙重性”效應(yīng)的研究結(jié)果相似。

圖1 不同濃度MeJA處理對(duì)莧紅素含量的影響Fig.1 Effect of various MeJA concentrations on content of amaranthin注：標(biāo)有不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(p<0.05)。

綜合莧菜種子的發(fā)芽情況和莧紅素含量,選取100 μmol/L MeJA處理用于后面的生理生化實(shí)驗(yàn)。

2.3 MeJA溶液對(duì)莧菜芽生長(zhǎng)過(guò)程中根長(zhǎng)和全長(zhǎng)的影響

表2反映了種子萌發(fā)過(guò)程中莧菜芽根長(zhǎng)和全長(zhǎng)的變化。隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),莧菜芽的根長(zhǎng)和全長(zhǎng)逐漸增長(zhǎng),在第2～4 d時(shí)生長(zhǎng)速度較快,隨后幾天速度減緩。相比于空白對(duì)照,經(jīng)100 μmol/L MeJA處理過(guò)的莧菜芽的根長(zhǎng)和全長(zhǎng)受到了顯著(p<0.05)的抑制,并且在培養(yǎng)過(guò)程中,MeJA處理組的莧菜芽葉片展開(kāi)的時(shí)間也較空白對(duì)照晚。因此,MeJA處理對(duì)莧菜種子生長(zhǎng)無(wú)積極影響。

雖然MeJA的使用能夠富集莧菜中的莧紅素,但經(jīng)過(guò)處理的莧菜芽,其根長(zhǎng)和全長(zhǎng)受到了顯著地抑制,這是由于MeJA可以促進(jìn)乙烯生成,抑制植物生長(zhǎng),減少植物生物量的生成[18-19]。用茉莉酸甲酯噴施苦玄參幼苗,雖然提高了苦玄參苷的積累量,但同時(shí)會(huì)抑制其株高、葉片以及分枝的生長(zhǎng),將其成熟期提前,縮短了其生育期。這與謝陽(yáng)嬌等[8]研究結(jié)果相似。

2.4 MeJA處理對(duì)莧菜芽生長(zhǎng)過(guò)程中莧紅素含量的影響

由圖2可見(jiàn),莧紅素的含量隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)呈上升趨勢(shì),而在整個(gè)生長(zhǎng)周期內(nèi),MeJA處理組中莧紅素的含量極顯著(p<0.01)高于空白對(duì)照。且在相同的培養(yǎng)時(shí)間內(nèi),MeJA處理組中莧紅素的積累量約為空白對(duì)照組的3.25倍。結(jié)果表明,外源MeJA處理能夠顯著促進(jìn)莧紅素的合成。

圖2 培養(yǎng)過(guò)程中莧紅素含量的變化Fig.2 Change of amaranthin content in the process of cultivation注:與空白組比較，“**”在 0.01水平(雙側(cè))上有顯著差異,“*”在0.05水平(雙側(cè))上有顯著差異；圖3～圖5同。

2.5 MeJA處理對(duì)莧菜芽中總酚含量的影響

圖3 培養(yǎng)過(guò)程中總酚含量的變化Fig.3 Changes of total phenolic content in the process of cultivation

酚類物質(zhì)具有抗氧化能力,能夠幫助幼苗適應(yīng)周?chē)兓沫h(huán)境[20]。圖3反映出莧菜芽在生長(zhǎng)過(guò)程中總酚含量的變化。在莧菜種子發(fā)芽初期(2～4 d),MeJA處理組總酚含量急劇下降,這與種子萌發(fā)后酚類物質(zhì)結(jié)合一些有機(jī)物如碳水化合物或蛋白質(zhì)有關(guān)[21],隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),其下降趨勢(shì)趨于平緩,而空白對(duì)照組在發(fā)芽初期總酚含量基本不變,4 d后急劇下降,但整個(gè)過(guò)程中,MeJA處理組中總酚含量始終顯著(p<0.01)高于對(duì)照組,表明MeJA能夠提高莧菜芽中總酚含量。

2.6 MeJA處理對(duì)莧菜芽中H2O2含量的影響

H2O2含量在莧菜芽的整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程中均處于上升趨勢(shì)。在發(fā)芽初期,MeJA處理組與空白對(duì)照組中H2O2含量相差不大,但當(dāng)發(fā)芽進(jìn)行到第8 d時(shí),空白對(duì)照組中H2O2迅速積累,含量約為處理組的1.97倍。H2O2的積累不利于莧菜芽的生長(zhǎng),而MeJA的使用能夠降低H2O2的積累速度,減輕對(duì)植物的損傷,有效提高莧菜芽品質(zhì)。

圖4 培養(yǎng)過(guò)程中H2O2含量的變化Fig.4 Changes of H2O2 content in the process of cultivation

2.7 MeJA處理對(duì)莧菜芽中抗氧化酶活性的影響

圖5 培養(yǎng)過(guò)程中抗氧化酶活性的變化Fig.5 Changes of antioxidase activity in the process of cultivation注:A:POD;B:CAT;C:APX;D:SOD。

結(jié)合圖4、圖5B和圖5C看出,莧菜種子發(fā)芽初期,由于CAT與APX活性較高,SOD活性較低,莧菜芽中積累的H2O2較少,隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),空白對(duì)照與茉莉酸甲酯處理組中CAT、APX活性均呈下降趨勢(shì),SOD活性也逐漸升高,芽中H2O2也開(kāi)始積累。但茉莉酸甲酯的使用,延緩了CAT、APX活性的下降,因此可減緩H2O2的積累速度。這與Cao等[24]的研究結(jié)果一致。圖5A中POD的活性呈上升趨勢(shì),茉莉酸甲酯的使用雖能提高POD的活性來(lái)清除多余的H2O2,但POD能使組織中所含的某些碳水化合物轉(zhuǎn)化成木質(zhì)素而抑制了莧菜芽的生長(zhǎng),胡海英等[25]也發(fā)現(xiàn)MeJA對(duì)甘草胚根和子葉生長(zhǎng)的抑制作用可能是通過(guò)提高POD的活性來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

3 結(jié)論

芽苗菜在我國(guó)具有十分悠久的歷史,品種也十分豐富,比如豆芽、芥菜芽、蘿卜芽、香椿芽、苜蓿等,開(kāi)發(fā)芽苗菜新品種能夠使芽苗菜具有更好的品質(zhì)、附加值和功能性作用,能夠帶動(dòng)整個(gè)芽苗菜產(chǎn)業(yè)的經(jīng)濟(jì)利益,具有十分廣闊的應(yīng)用前景[26]。本文提供了一種富含莧紅素的莧菜芽的培育方法,并且研究也發(fā)現(xiàn)外源MeJA能夠提高總酚含量,通過(guò)調(diào)節(jié)酶活性抑制的H2O2積累,提高莧菜芽品質(zhì)。但芽苗菜在生產(chǎn)過(guò)程中需考慮溫度、水分、通風(fēng)、光照等各種環(huán)境因素,否則容易出現(xiàn)爛種、芽苗不整齊、過(guò)老等問(wèn)題[27],另外芽苗菜組織幼嫩,運(yùn)輸和儲(chǔ)存困難。因此莧菜芽的推廣和應(yīng)用還需進(jìn)一步研究。

[1]玄永浩,金銀哲,劉旭,等. 莧菜藥理作用研究進(jìn)展[J]. 長(zhǎng)江蔬菜,2010,27(22):1-4.

[2]劉臨. 原子吸收分光光譜法測(cè)定莧菜中微量元素[J]. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,47(12):1504-1505.

[3]于淑玲. 藥食保健野菜—莧菜的開(kāi)發(fā)利用[J]. 資源開(kāi)發(fā)與市場(chǎng),2010,26(2):141-142.

[4]邵玲. 弱光對(duì)不同品種莧菜葉片抗氧化物質(zhì)的影響[J]. 肇慶學(xué)院學(xué)報(bào),2010,31(5):43-46.

[5]張玉霜,許慶軒,李紅俠,等. 甜菜色素種類分布和應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),2015,31(24):149-156.

[6]雒曉鵬,朱冬寅,黃云吉,等. 茉莉酸甲酯對(duì)芽期苦蕎黃酮積累及相關(guān)基因表達(dá)的影響[J]. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué),2015,34(5):1040-1046.

[7]金顥,朱昌華,夏凱,等. 茉莉酸甲酯對(duì)莧菜中莧紅素積累的影響[J]. 生物學(xué)雜志,2016,33(2):54-56.

[8]謝陽(yáng)姣,何志鵬,林偉. 茉莉酸甲酯對(duì)苦玄參生長(zhǎng)及苦玄參苷積累的影響研究[J]. 作物雜志,2013(2):80-84.

[9]向妙蓮,付永琦,何永明,等. 茉莉酸甲酯浸種對(duì)水稻幼苗白葉枯病抗性及抗氧化酶活性的影響[J]. 中國(guó)水稻科學(xué),2014,28(4):419-426.

[10]宋亮,潘開(kāi)文,王進(jìn)闖,等. 酚酸類物質(zhì)對(duì)苜蓿種子萌發(fā)及抗氧化物酶活性的影響[J]. 生態(tài)學(xué)報(bào),2006,26(10):3393-3403.

[11]Sanjay P,Sheth N R,Rathod I S,et al. Analysis of betalains from fruits of opuntia species[J]. Phytochem Reviews,2013,12(1):35-45.

[12]王行,馬永昆,于立志. 貯藏條件對(duì)超高壓處理藍(lán)莓汁酚類物質(zhì)及抗氧化活性的影響[J]. 現(xiàn)代食品科技,2014,30(1):101-107.

[13]Toivonen P,Sweeney M. Differences in chlorophyll loss at 13 ℃ for two broccoli(BrassicaoleraceaL.)cultivars associated with antioxidant enzyme activities[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry,1998,46(1):20-24.

[14]成少寧. 萌發(fā)蕎麥抗氧化活性及抑菌效果研究[D]. 上海:上海師范大學(xué),2010.

[15]戰(zhàn)晴晴,金鉞,魏建和,等. 北柴胡不定根培養(yǎng)及茉莉酸甲酯處理對(duì)柴胡皂苷含量的影響[J]. 生物技術(shù)通訊,2011,22(1):57-60.

[16]Cao S F,Liu T,Jiang Y M,et al. The effects of host defence elicitors on betacyanin accumulation in amaranthus mangostanus seedlings[J]. Food Chemistry,2012,134(4):1715-1718.

[17]賓金華,黃勝琴,何樹(shù)春,等. 茉莉酸甲酯對(duì)水稻種子萌發(fā)和貯藏物質(zhì)降解的影響[J]. 植物學(xué)報(bào),2011,43(6):578-585.

[18]Mangas S,Bonfill M,Osuna L. The effect of methyl jasmonate on triterpene and sterol metabolisms of centella asiatica,Ruscus aculeatus and Galphimia glauca cultured plants[J]. Phytochemistry,2006,67(18):2041-2049.

[19]Kim O T,Kim M Y,Hong M H. Stimulation of asiaticoside production from centella asiatica whole plant cultures by elicitors[J]. Plant Cell Report,2004,23(5):339-344.

[21]Khandelwal S,Udipi S A,Ghugre P. Polyphenols and tannins in Indian pulses:effect of soaking germination and pressure cooking[J]. Food ResInt,2010,43(2):526-530.

[22]李榮沖,沈亮余,梁晶龍,等. 高溫高濕脅迫下茉莉酸甲酯對(duì)紫蘇種子萌發(fā)及生理特性的影響[J]. 西北植物學(xué)報(bào),2012,32(2):312-317.

[23]劉淑敏,邵興鋒,魏彥珍,等. 加拿大一枝黃花精油熏蒸處理對(duì)采后草莓品質(zhì)和生理的影響[J]. 核農(nóng)學(xué)報(bào),2016,30(10):1967-1975.

[24]Cao S F,Zheng Y H,Wang K T,et al. Methyl jasmonate reduces chilling injury and enhances antioxidant enzyme activity in postharvest loquat fruit[J]. Food Chemistry,2009,115(4):1458-1463.

[25]胡海英,賀海明,梁新華,等. 茉莉酸甲酯對(duì)烏拉爾甘草種子萌發(fā)和過(guò)氧化物酶活性的影響[D]. 寧夏:寧夏大學(xué),2011.

[26]李宗哲,李德遠(yuǎn),蘇丹,等. 我國(guó)芽苗菜生產(chǎn)現(xiàn)狀及發(fā)展對(duì)策研究[J]. 食品研究與開(kāi)發(fā),2015,36(23):193-196.

[27]Goyal A,Siddiqui S,Upadhyay N,et al. Effects of ultraviolet irradiation,pulsed electric field,hot water and ethanol vapours treatment on functional properties of mung bean sprouts[J]. Journal of Food Science and Technology,2014,51(4):708-714.