張 哲

（遼寧盤錦市檢驗(yàn)檢測(cè)中心，遼寧 盤錦 124010）

隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，臨床對(duì)于藥品檢測(cè)工作的要求也越來越高，近年來近紅外線藥物快速檢測(cè)技術(shù)的運(yùn)用很普遍，但是其應(yīng)用只能針對(duì)藥品的初步篩選，還會(huì)存在篩選死角將不能做進(jìn)一步的確認(rèn)[1]。目前臨床提出高效液色譜法針對(duì)藥品快速檢測(cè)，其具備高效性、檢測(cè)徹底、靈活度好、可重復(fù)使用、應(yīng)用廣泛等特點(diǎn)，為藥品的進(jìn)一步檢測(cè)提供可靠依據(jù)[2]。

1 HPLC快速檢測(cè)藥品的研究思路建立

針對(duì)藥品的功能和其成分結(jié)構(gòu)分類不同，在參照現(xiàn)有藥品成分標(biāo)準(zhǔn)和相關(guān)文獻(xiàn)以及藥品成分介紹，建立HPLC快速檢測(cè)藥品的方法。

1.1 研究特點(diǎn)：針對(duì)高效液相色譜法的研究，在臨床操作來看相對(duì)簡(jiǎn)單，不需要大量的臨床檢驗(yàn)樣品，且根據(jù)色譜柱采用C8或者C18色譜柱，其流動(dòng)相色一般不要用離子試劑，能夠?qū)⑵淇焖龠_(dá)到平衡，特有的色譜柱既能將區(qū)分結(jié)構(gòu)類似的藥品，要求最晚出峰時(shí)間不低于20 min[3]。新建立的色譜方式，著重于方法的重復(fù)性，對(duì)于藥品色譜的專屬相色區(qū)分與中國(guó)藥典方法相比，不對(duì)有關(guān)物質(zhì)強(qiáng)行要求實(shí)現(xiàn)完全分離。并且此類方法采用樣品的最小劑量，不浪費(fèi)檢驗(yàn)藥品的同時(shí)根據(jù)原法定方法的含量限度和裝量差異限度確定實(shí)際樣品的限度方式更加有效與經(jīng)濟(jì)。

1.2 方法思路：先將藥品功能和結(jié)構(gòu)進(jìn)行分組，對(duì)于同一組藥品采用相同色譜系統(tǒng)檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)采用盡可能少的色譜對(duì)多種藥品的分離分析，流動(dòng)相色爭(zhēng)取少切換或不切換，從而實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)的目的。對(duì)相對(duì)保留時(shí)間和紫外光譜相似度雙指標(biāo)進(jìn)行藥品定性，增強(qiáng)其定性能力；在不同組別中各選擇一種藥品作為參照，建立標(biāo)準(zhǔn)相色，其余藥品根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)相色來確定色譜分化，以達(dá)到少用或不用對(duì)照品就能達(dá)到藥品的定性和定量的目的。

1.3 考查內(nèi)容和方法驗(yàn)證：針對(duì)不同藥品的考察研究，其內(nèi)容包括：①不同色譜條件的建立；②光譜庫(kù)的形成；③優(yōu)化光譜處理方法；④確定公用對(duì)照物質(zhì)；⑤規(guī)劃相對(duì)保留時(shí)間。再通過實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證和不同方法的結(jié)果對(duì)比來驗(yàn)證其方法的準(zhǔn)確性。

2 降糖藥物驗(yàn)證研究

2.1 基本資料：對(duì)二甲雙胍、苯乙雙胍、格列吡嗪、甲苯磺丁脲、格列波脲、格列齊特、格列本脲、格列美脲、格列喹酮、伏格列波糖、那格列奈、羅格列酮等12種降糖藥物由藥店、生產(chǎn)廠家、醫(yī)院等不同渠道獲取，采用津島雙泵液相色譜儀器進(jìn)行藥品檢測(cè)分析，使用甲醇為色譜純，其余試劑為分析純，公用對(duì)照物質(zhì)采用羅格利酮緩釋片（5批次）。2.2 方法：將對(duì)照品和供試品分別配置成溶液，采用Inertsil ODS-SP色譜柱，流動(dòng)相色為0.02 mol/L磷酸二氫鉀（磷酸調(diào)pH 3.5）-甲醇（30∶70），流速取1.0 mL/min，柱溫30 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)選擇每個(gè)藥品都有紫外吸收的任意波長(zhǎng)點(diǎn)。根據(jù)上述提供參照以及檢驗(yàn)條件下針對(duì)12種不同藥品之間原始光譜相似度和一階導(dǎo)數(shù)光譜相似度進(jìn)行確認(rèn)，并擴(kuò)大其藥品之間的差異，以便提高定性的準(zhǔn)確性。在12種藥品中選擇一種作為對(duì)照物質(zhì)，確定其他藥品的校正因子。在對(duì)照物質(zhì)的選擇應(yīng)當(dāng)與被分析藥品在采用的色譜體系中完全分離，由于各色譜柱的性能差異選擇5根色譜柱，將其具有一致性的相對(duì)保留時(shí)間作為定性依據(jù)。將對(duì)照物和其他藥品相對(duì)色相根據(jù)色譜柱不同體現(xiàn)分別作出區(qū)分，確定其不同藥品之間的區(qū)別性。

3 討 論

高效液相色譜法是當(dāng)前臨床上較為常見的一類檢驗(yàn)方式，又被稱為高壓液相色譜、高分離度液相色譜和近代柱色譜等，是色譜法檢驗(yàn)中的重要類型。高效液相色譜法的本質(zhì)即是使用液體來作為流動(dòng)相，并且使用高壓輸液系統(tǒng)，將兩種有著不同極性的單一溶劑或是不同比例的緩沖液以及混合溶劑等流動(dòng)相裝入到有著固定相的色譜柱中。并且在色譜柱中各種成分被分離完全后，將其放入檢測(cè)器中檢測(cè)的一類方法。由于高效液相色譜法檢驗(yàn)方法簡(jiǎn)單、結(jié)果準(zhǔn)確、花費(fèi)時(shí)間較少等特點(diǎn)，當(dāng)前在化學(xué)檢驗(yàn)、工業(yè)檢驗(yàn)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)和法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)等很多學(xué)科中均有著比較高的應(yīng)用概率。同時(shí)在諸多的研究中也顯示，使用高效液相色譜法的方法能夠起到較好的檢驗(yàn)效果，因此分析高效液相色譜法的應(yīng)用非常重要。

本文針對(duì)高效液相色譜法對(duì)于藥品檢測(cè)分析的原理、思路以及方法進(jìn)行研究探討；其相對(duì)傳統(tǒng)近紅外快速藥品檢測(cè)方式操作簡(jiǎn)單，且能夠?qū)⑺幤烽g差異高效區(qū)分，可被大量運(yùn)用于藥品的快速分析檢測(cè)[4]。在高效液相色譜法快速檢測(cè)藥品的過程中，區(qū)別不同藥品差異的主要因素在于對(duì)照物質(zhì)的確定，光譜建立以及其差異區(qū)分，在不同色譜領(lǐng)域做到盡量減少流動(dòng)相色等操作，增加操作的可行性與準(zhǔn)確性。

經(jīng)本研究對(duì)12種降糖藥的分析，確定不同藥品之間的相對(duì)差異，明確其對(duì)于疾病用藥藥理作用和差異效果，對(duì)于臨床選擇用藥起到很好的參照性作用。

經(jīng)本文研究可知，針對(duì)藥品使用高效液相色快速分析檢測(cè)方式，能有效區(qū)別藥品之間細(xì)微差異，幫助臨床用藥做具體選擇。

綜上所述，HPLC快速檢測(cè)藥品的研究思路操作過程簡(jiǎn)單，也并不需要大量樣品，在藥物的快速分析方面效果較好，值得推廣使用。