馬 博 卜三平

（巴音郭楞職業(yè)技術(shù)學院，新疆庫爾勒 841000）

偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）是引起豬偽狂犬?。≒seudorabies，PR）的病原，PRV屬于皰疹病毒科、α皰疹病毒亞科中豬皰疹病毒Ⅰ型[1]。該病毒具有“噬神經(jīng)性”，常沿神經(jīng)干傳播，在豬的脊髓和大腦中出現(xiàn)，這與病毒的TK基因有關；常伴有發(fā)熱、腦脊髓炎、繁殖障礙等典型癥狀。豬是自然界中PRV的唯一宿主[2]，豬感染PRV后能引起腦脊髓炎癥、自身發(fā)熱，常引起妊娠母豬流產(chǎn)和仔豬死亡，且仔豬死亡率偏高，甚至有發(fā)病無一幸免的可怕程度[3]；牛、羊、犬、貓等多種動物感染PRV后，還會出現(xiàn)奇癢癥狀（豬除外）。PR在全球范圍流行，根除難度大[4]，易感動物感染PRV后，會終生帶毒，存在“不可逆轉(zhuǎn)性”。世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將之列為B類動物傳染病，我國將之列為二類動物傳染病[5，6]，是進出口貿(mào)易的必檢項目之一。

PR最早于1813年在美國被發(fā)現(xiàn)，1912年被定為一種獨立的疾病。我國最早報道該病是在1947年，20世紀60年代該病毒出現(xiàn)流行，2011年我國曾大面積暴發(fā)該病，給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大經(jīng)濟損失。自20世紀90年代，西方發(fā)達國家大多制定并啟動了根除PR的計劃。歐洲國家和我國均采用豬偽狂犬病病毒gE蛋白抗體ELISA檢測法對豬群進行監(jiān)測，以達到預防PR和凈化豬場PRV的目的[7，8]。我國在《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃（2012-2020）》中將PR列為優(yōu)先防治的動物疫病之一，也是種畜禽凈化的重點疫病之一，規(guī)劃中提出到2020年我國所有種豬場都要達到凈化PR標準。

1 豬偽狂犬病的診斷

1.1 臨床診斷方法

1.1.1 流行病學方面

中國工程院院士、華中農(nóng)業(yè)大學教授陳煥春說：“科學證明疫苗不能清除病毒，只能阻止臨床癥狀的發(fā)生?！盤R雖然在各季節(jié)均可發(fā)生，但冬季多發(fā)，潛伏期為1周左右。妊娠母豬感染PRV后，常出現(xiàn)流產(chǎn)、木乃伊胎、弱胎甚至死胎；PRV感染后具有高度隱性的特點，可持續(xù)性感染，耐過的母豬可呈潛伏感染，長期帶毒，嚴重影響?zhàn)B豬業(yè)發(fā)展[9]。2周齡以內(nèi)的仔豬感染PRV后，可100%致死；斷奶仔豬感染PRV后，死亡率可達20%。

病毒可在被感染動物的外周神經(jīng)定植，常呈現(xiàn)終生潛伏感染，動物免疫力降低或受到刺激時，PR會再次暴發(fā)，而溫暖季節(jié)的PR發(fā)病率較低。

1.1.2 臨床癥狀

感染PRV后，公豬常表現(xiàn)為睪丸腫脹、萎縮，或者“一大一小”，嚴重影響種用價值；后備母豬和空懷母豬常表現(xiàn)返情率明顯提高，影響繁殖效率；妊娠母豬常出現(xiàn)配種困難、流產(chǎn)、早產(chǎn)、產(chǎn)死胎、產(chǎn)木乃伊胎、受胎率下降、精神不佳等；日齡較小的仔豬常出現(xiàn)發(fā)熱（40℃以上）、嘔吐、拉稀，嚴重時出現(xiàn)共濟失調(diào)、角弓反張、呼吸急促等癥狀，死亡率最高可達100%；育肥豬常為隱性感染，癥狀輕微，臨床癥狀不明顯[10]；多數(shù)發(fā)病的豬只伴有呼吸困難、體溫升高、食欲不振等癥狀。

1.1.3 病豬解剖特點

感染PRV的豬群發(fā)病的共同特點是腦、脾臟、腸系膜淋巴結(jié)和肺組織出現(xiàn)不同程度的水腫，嚴重者可出現(xiàn)腦膜表面充血和腦顱腔、脊髓腔內(nèi)積液的現(xiàn)象。腎臟顏色為土黃色，表面有出血點；有的脾臟除水腫外，還伴有針尖狀壞死點；解剖發(fā)現(xiàn)，病豬也易出現(xiàn)肺臟表面出血和扁桃體壞死的現(xiàn)象。感染PRV的豬群會出現(xiàn)不同程度的呼吸道炎癥。采集病豬的脾臟、肺臟和扁桃體等樣品，經(jīng)PCR鑒定PRV的gE基因和TK基因，多呈陽性。

1.1.4 PR鑒別診斷

集約化養(yǎng)殖帶來了豬群養(yǎng)殖空間密集和傳染病易群發(fā)的特點，也是導致豬群發(fā)生混合感染的原因之一，單靠以往的臨床癥狀不易進行區(qū)分，給PR的診斷和預防帶來了更大的困難，需要借助分子生物學技術(shù)進行準確判斷。PR與豬細小病毒病、豬藍耳病、布氏桿菌病、乙型腦炎等在流產(chǎn)、木乃伊胎、產(chǎn)死胎癥狀上相似；與豬肺疫、豬鏈球菌病、傳染性胸膜肺炎、豬瘟、豬藍耳病、豬圓環(huán)病毒病等在呼吸道癥狀上有相似之處；與豬瘟、仔豬水腫病、鏈球菌性腦膜炎等在神經(jīng)癥狀上相似。

1.2 實驗室診斷方法

生物化學實驗室技術(shù)在現(xiàn)代生物學研究中發(fā)揮著重要作用，分子生物學就是其中非常重要的學科，主要利用核酸雜交、PCR等生物學技術(shù)進行疾病檢測。病毒分離鑒定是診斷PRV最準確的方法，也是診斷方法中的標準方法；PRV的細胞譜較廣，用于分離PRV的細胞較多，其中患病豬的腦部的PRV含量較高。血清學試驗，如常見的ELISA試驗、血清中和試驗、乳膠凝集試驗、血凝和血凝抑制試驗，動物接種試驗，如取含PRV的部位制成10%的細胞懸液，凍融幾次后離心取上清液，在動物的皮下或者腦部進行接種，上述是實驗室鑒定PRV的幾種重要方法[11]。其中實驗室較常見的是ELISA試驗，具有操作簡單、結(jié)果相對準確、檢測樣品容易獲得和易從整體上評價豬群的免疫情況的特點，PCR試驗因具有特異性強、準確度高、用時短的特點而得到廣泛應用[12]。研究發(fā)現(xiàn)，PRV還可在一定程度上破壞宿主的免疫系統(tǒng)，干擾其機體產(chǎn)生免疫抗體[13]。

2 凈化措施

PRV在豬群中具有一定的潛伏期，潛伏天一般為3～10天，易因應激而在豬群中暴發(fā)，且妊娠母豬和新生仔豬易感染，新生仔豬在出生后30天內(nèi)最為易感，一旦感染，死亡率極高。PR嚴重威脅養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展，凈化PR是一項意義重大的工作，不容忽視和懈怠。然而，PR在全國各地區(qū)的不同豬場中常有暴發(fā)，根除凈化各豬場中PR具有一定的難度。豬場出現(xiàn)PR臨床癥狀后，全群可進行弱毒苗緊急免疫接種，有望在1～2周內(nèi)得到有效控制。同時，應在種豬場進行PR的根除計劃，發(fā)現(xiàn)患病種豬要及時進行淘汰，并實行嚴格的消毒制度，避免更多豬群感染PRV。

2.1 建立健全行之有效的生物安全體系

生物安全體系是防控PRV進入豬場的第一道屏障，建立一套行之有效的生物安全體系并嚴格執(zhí)行具有重要意義。

外來人員和車輛進行嚴格的消毒后才可進入場區(qū)，建議建設參觀通道或者電子顯示屏，使外來參觀人員不進入圈舍就可觀察到豬群的實時情況；嚴禁在豬場飼養(yǎng)其他動物，也要及時有效地驅(qū)散驅(qū)趕其他野生動物（如老鼠、野貓和犬等，這些動物容易傳播PRV），避免動物之間互相傳染疾病；出豬臺往往是豬場比較容易忽視的地方，要及時對臺面和支架進行嚴格的清潔和消毒工作，避免微生物在出豬臺上的進一步滋生；必須建立清潔生產(chǎn)區(qū)和隔離生產(chǎn)區(qū)，安排人員打掃消毒，禁止員工出現(xiàn)串區(qū)的情況，加強消毒意識，減少各區(qū)之間疾病的傳播；要嚴格按照相關規(guī)定對豬場內(nèi)的用水進行檢測和消毒，避免因水而引起的生物安全問題；在規(guī)?；i場，全進全出和自繁自養(yǎng)是有效防控疾病的重要措施，被稱為有效的保護屏障。嚴禁從疫區(qū)引進豬只和精液；從非疫區(qū)引進豬只和精液前，要做好嚴格的檢測、消毒和隔離工作，避免攜帶病毒的外來豬群和生物制品進入。科學嚴格的消毒程序是另一道防止病原菌進入場區(qū)的有效措施，應該嚴格施行。對于病死的豬只要進行類似深埋的無害化處理，有條件的單位可在高壓滅菌柜中高溫高壓滅菌后再進行處理。

2.2 凈化原則和方法

常采用基因缺失苗來免疫豬群，通過檢測gE抗體的情況監(jiān)測某頭豬是否被PRV野毒感染，及時淘汰感染的豬群。在進行豬群擴群時，必須選用無PRV感染的種豬。國內(nèi)常使用的控制和凈化PR的基本步驟如下：

先檢測待凈化PR的豬群，然后篩選出符合要求的豬群，使用PRV-gE基因缺失苗進行免疫；至少每個季度對豬群進行抽樣檢查或根據(jù)豬群大小進行全免，及時淘汰野毒感染PRV的病豬；對檢出的健康豬群進行二次檢測，提高準確度。

國外多個國家開展了PR根除計劃，主要的方案為：檢測和清群方案、后代隔離方案、銷毀/重建方案[14]。我國也有成功實現(xiàn)凈化PR的案例[15，16]。

2.3 種豬和種豬場根除PRV的措施

種豬場是豬場的核心，也是大型規(guī)?；B(yǎng)殖場效益好壞的“縮影”，因此種豬場的疾病預防工作更為重要，尤其是種公豬。對未免疫接種的豬群進行g(shù)E抗體檢測，及時區(qū)分陰性個體和陽性個體，并對陰性個體每半年進行1次PRV-gE基因缺失苗免疫，定期進行血清學檢測，確定最佳免疫時間，并及時淘汰陽性個體。逐漸淘汰PRV野毒感染的豬群，最終達到根除豬場PR的目的。

疫苗的有效免疫接種是控制和凈化PR的有力保障。對已經(jīng)免疫過的豬群每3～4個月進行1次PRV-gE基因缺失苗免疫（一般采用肌肉注射的方法），保證豬群PRV-gE抗體保持高合格率，起到有效抵御PRV感染的作用；每5～6個月進行1次血清學檢測，篩選出PR陽性個體并淘汰；與此同時，也要及時淘汰生產(chǎn)性能不佳、免疫耐受的種豬。對欲留作種用的仔豬，在出生后3個小時進行PRV-gE蛋白檢測，淘汰陽性個體。對配種前、產(chǎn)前1個月的種豬（母豬產(chǎn)前也要進行檢測，以便側(cè)面評價即將出生的仔豬的情況）要進行PRV-gE基因缺失苗的加強免疫；對仔豬進行全免，以防感染PRV。對于新引進的種豬，要嚴格執(zhí)行引種檢疫的制度，至少隔離3個月，并作ELISA檢測PRV-gE蛋白抗體，確實安全才可合群。一般常檢測出生后70～100日齡的豬群，因為仔豬PRV-gE母源抗體在65日齡左右降至最低，以此作為調(diào)查豬群野毒感染情況的有利依據(jù)。

3 小結(jié)

PR的凈化不會一蹴而就，需要有步驟、有計劃地開展，常根據(jù)PRV-gE抗體檢測情況設計并實施凈化。結(jié)合國內(nèi)外臨床經(jīng)驗發(fā)現(xiàn)，凈化PR的整體思路是“檢測—免疫—淘汰”[17，18]，做好監(jiān)測淘汰。要想做到豬場PR的凈化，進行檢疫診斷、疫苗免疫、淘汰陽性動物、培養(yǎng)健康動物的綜合凈化措施是最為行之有效的，如此才能達到集約化高效健康養(yǎng)豬的目的。PR凈化是全世界共同的話題和任務，需要互相合作，目前歐洲有些國家已經(jīng)達到了凈化PR的目的。加強豬場的飼養(yǎng)管理，改善飼養(yǎng)環(huán)境（如降低豬舍內(nèi)的氨濃度，保持新鮮的空氣，做到既保溫又通風，適當降低飼養(yǎng)密度等措施），減少豬群應激，免疫接種PRV-gE基因缺失苗的綜合預防措施是非常重要的，要按計劃嚴格實施，以達到推動凈化豬場PR的目的，并實現(xiàn)一定的社會效益、經(jīng)濟效益和生態(tài)效益。