欒雨

（江蘇省鎮(zhèn)江藥品檢驗(yàn)所 江蘇 鎮(zhèn)江 212003）

復(fù)方消旋山莨菪堿滴眼液是為復(fù)方制劑。用于治療青少年假性近視眼。本文通過(guò)RP-HPLC法測(cè)定復(fù)方消旋山莨菪堿滴眼液中硫酸軟骨素以氨基葡萄糖的含量，進(jìn)一步提高了該藥標(biāo)準(zhǔn)，方法簡(jiǎn)便、快速，重現(xiàn)性。

1.儀器與試藥

1.1 儀器

BP211D型電子天平（賽多利士）；Agilent1260高效液相色譜儀，UVA檢測(cè)器（美國(guó)Agilent公司）

1.2 試藥

D-鹽酸氨基葡萄糖對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所140649-201505 100%)；水為二次重蒸水；乙腈為色譜純；復(fù)方消旋山莨菪堿滴眼液（鎮(zhèn)江恒新藥業(yè)有限公司，批號(hào)：160903，160902，160901）

2.實(shí)驗(yàn)方法

2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent C-18柱（3.9 mm×250mm，5um），流動(dòng)相：水（水2000mL加磷酸1mL，用KOH溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0）—乙腈(3:2)，流速：1.0mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)195nm，理論塔板數(shù)：10000。

2.2 對(duì)照品溶液制備：

精密稱取在105℃干燥至恒重的鹽酸氨基，葡萄糖對(duì)照品適量，加流動(dòng)相稀釋成1mg/ml的溶液。

2.3 樣品溶液的制備

精密量取本品10mL，置100mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解稀釋至刻度，搖勻?yàn)V過(guò)，取續(xù)濾液。

圖1 鹽酸氨基葡萄糖對(duì)照品

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備的制備

取鹽酸氨基葡萄糖對(duì)照品溶液0.3mg/ml，分別進(jìn)樣1.0、2.0、3.0、4.0、5.0μl，以峰面積（y）為縱坐標(biāo)，相應(yīng)濃度（x）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，y=1772.1x-1.04 R=1，線性范圍0.3～1.5mg。結(jié)果表明種峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系。見(jiàn)圖1、2。

圖2 品色圖譜

2.5 精密度測(cè)定

取對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次，記錄峰面積分別為837.82、840.10、839.33、841.24、837.21。平均值為 839.14。RSD為 0.2%。

2.6 重復(fù)性測(cè)定

按照擬訂的含量測(cè)定方法，取同批號(hào)樣品5份，分別制備樣品供試液，在上述色譜條件下測(cè)定5次，鹽酸氨基葡萄糖的RSD為 1.06%。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

在本試驗(yàn)條件下，樣品溶液室溫放置12h，每隔一段時(shí)間進(jìn)樣10μL記錄峰面積。氨基葡萄糖峰面積平均值為677.6，RSD分別0.3%。

2.8 回收率試驗(yàn)

取氨基葡萄糖適量配制成1.1mg/ml，取1.0ml加入到樣品中照樣品測(cè)定法測(cè)定，測(cè)得結(jié)果：氨基葡萄糖回收率平均值為99.9%，RSD 為 0.4%。

2.9 樣品測(cè)定

取樣品溶液和對(duì)照品溶液，各進(jìn)樣10μL，讀取峰面積值，按外標(biāo)法計(jì)算含量，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 樣品含量測(cè)定結(jié)果（n=3）

3.討論

3.1 通過(guò)實(shí)驗(yàn)得知在195nm處有較大吸收，其它成分在該波長(zhǎng)處無(wú)干擾，因此可選擇此波長(zhǎng)作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

3.2 采用HPLC法測(cè)定中復(fù)方消旋山莨菪堿滴眼液以水氨基葡萄糖計(jì)的含量與原UV生物顯色法比較，結(jié)果一致，但方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好。原UV過(guò)程繁瑣，影響因素多，耗時(shí)長(zhǎng)，不利于生產(chǎn)環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì)，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)新藥轉(zhuǎn)正第47冊(cè)，化學(xué)工業(yè)出版社，2004，47.

[2]HPLC-ELSD法測(cè)定鹽酸氨基葡萄糖膠囊中鹽酸氨基葡萄糖的含量-淮陰師范學(xué)院學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）2015(1).