區(qū)超華 鐘楚俊 賀順連

摘 要：?? 為了減輕小瓜蟲(chóng)病對(duì)觀賞魚(yú)養(yǎng)殖的嚴(yán)重危害，試驗(yàn)選擇過(guò)氧乙酸對(duì)七彩神仙魚(yú)進(jìn)行殺滅小瓜蟲(chóng)的有效性試驗(yàn)，在此基礎(chǔ)上再進(jìn)行過(guò)氧乙酸對(duì)神仙魚(yú)急性毒性試驗(yàn)，并在安全濃度下對(duì)患有小瓜蟲(chóng)病的神仙魚(yú)進(jìn)行治療試驗(yàn)。結(jié)果顯示：過(guò)氧乙酸對(duì)七彩神仙魚(yú)的安全濃度為8.55 mg/L，過(guò)氧乙酸在神仙魚(yú)安全濃度內(nèi)對(duì)小瓜蟲(chóng)的幼蟲(chóng)和包囊都具有較好的殺滅效果，過(guò)氧乙酸濃度在4.26～8.55 mg/L的治愈率達(dá)70%。

關(guān)鍵詞： 七彩神仙魚(yú);小瓜蟲(chóng)病;過(guò)氧乙酸;有效性;急性毒性

?多子小瓜蟲(chóng)（ Ichthyophthirius marinus ）屬原生動(dòng)物門，小瓜蟲(chóng)屬，主要寄生在體表和鰓，形成肉眼可見(jiàn)的白色小點(diǎn)狀胞囊 ?[1] 。小瓜蟲(chóng)廣泛分布各大水域，感染淡水魚(yú)類、海水魚(yú)類和兩棲動(dòng)物，感染力強(qiáng)，病程急，容易在春末夏初和夏秋交替季節(jié)突發(fā)，造成繼發(fā)感染和交叉感染，對(duì)養(yǎng)殖業(yè)尤其是觀賞魚(yú)養(yǎng)殖帶來(lái)嚴(yán)重的危害 ?[2-7] 。

被稱之為“熱帶魚(yú)之后”的神仙魚(yú) ?[8] ，是熱帶觀賞魚(yú)家族的主要成員之一，深受廣大觀賞魚(yú)愛(ài)好者喜歡。但神仙魚(yú)經(jīng)常受到小瓜蟲(chóng)病的危害，給養(yǎng)殖生產(chǎn)造成了較大的經(jīng)濟(jì)損失。目前有些藥物對(duì)殺滅離體的小瓜蟲(chóng)取得了較好的療效 ?[9-15] ，但對(duì)于小瓜蟲(chóng)病的防治仍以化學(xué)藥物防治為主 ?[2-7，16] ，能殺滅神仙魚(yú)身上的小瓜蟲(chóng)的藥物和試驗(yàn)暫未見(jiàn)報(bào)道。

過(guò)氧乙酸對(duì)不同發(fā)育時(shí)期的離體小瓜蟲(chóng)及包囊都有一定的殺滅作用 ?[17] 。而過(guò)氧乙酸既是良好氧化劑，又是廣譜、高效、速效、廉價(jià)的滅菌劑，具備增氧、殺菌、殺蟲(chóng)、抑藻、改善水質(zhì)等多種作用，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中已有一定應(yīng)用 ?[18] 。因此我們選擇了過(guò)氧乙酸對(duì)神仙魚(yú)進(jìn)行殺滅小瓜蟲(chóng)的有效性試驗(yàn)，在此基礎(chǔ)上再進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)，并在安全濃度下對(duì)患有小瓜蟲(chóng)病的神仙魚(yú)進(jìn)行治療試驗(yàn)。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

試驗(yàn)藥劑：天津福晨化學(xué)試劑廠生產(chǎn)的過(guò)氧乙酸，按照說(shuō)明書A液和B液（1∶1）混合均勻，現(xiàn)配現(xiàn)用。試驗(yàn)魚(yú)為七彩神仙魚(yú)，購(gòu)自廣州芳村花鳥(niǎo)蟲(chóng)魚(yú)市場(chǎng)，平均體重為1.7 g，全長(zhǎng)約為4～5 cm，試驗(yàn)魚(yú)暫養(yǎng)7 d，待適應(yīng)環(huán)境且確認(rèn)健康無(wú)疾病后用于試驗(yàn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)容具

塑料方形桶（長(zhǎng)59 cm，寬49 cm，高40 cm）、增氧機(jī)、過(guò)濾泵、溫度計(jì)、飼料、25目撈網(wǎng)、燒杯、量筒、廣口瓶、注射器等。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 過(guò)氧乙酸對(duì)小瓜蟲(chóng)有效性預(yù)試驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)室養(yǎng)殖的5 cm左右的金魚(yú)魚(yú)體和鰓部均有白點(diǎn)，病魚(yú)食欲減退，活動(dòng)能力較弱，相繼出現(xiàn)死亡，鏡檢后發(fā)現(xiàn)符合小瓜蟲(chóng)形態(tài)特征。取10尾已感染小瓜蟲(chóng)的金魚(yú)和250尾健康神仙魚(yú)混養(yǎng)。混養(yǎng)7 d后，可觀察到所有魚(yú)的魚(yú)鰓、體表皆有白點(diǎn)，同時(shí)分泌大量黏液，活動(dòng)能力減弱，攝食量減少，符合小瓜蟲(chóng)病的特征，并隨機(jī)取樣進(jìn)行鏡檢，可見(jiàn)小瓜蟲(chóng)活蟲(chóng)蟲(chóng)體，表明所有試驗(yàn)魚(yú)均感染小瓜蟲(chóng)病，且原用作感染用的病魚(yú)已經(jīng)死亡。

將感染了小瓜蟲(chóng)的七彩神仙魚(yú)放入待試藥液中，藥液濃度參考趙飛等 ?[17] 所使用劑量，按等對(duì)數(shù)間距設(shè)計(jì)5個(gè)梯度濃度。試驗(yàn)魚(yú)飼養(yǎng)在塑料方形桶，每桶放曝氣自來(lái)水50 L，每桶隨機(jī)放入30尾已感染小瓜蟲(chóng)的七彩神仙魚(yú)，試驗(yàn)期間水溫20.5～23℃，曝氣自來(lái)水pH值7.4，溶解氧4～5 mg/L。記錄觀察各組試驗(yàn)魚(yú)的行為及死亡等效應(yīng)。試驗(yàn)結(jié)果如表1所示。

2.2 過(guò)氧乙酸對(duì)神仙魚(yú)的急性毒性試驗(yàn)

制定過(guò)氧乙酸對(duì)七彩神仙魚(yú)的急性毒性試驗(yàn)濃度梯度，根據(jù)預(yù)試驗(yàn)初步確定七彩神仙魚(yú)全死和全活的濃度范圍，按等對(duì)數(shù)間距設(shè)計(jì)5個(gè)梯度濃度試驗(yàn)組和一個(gè)空白對(duì)照組 ?[19] 。隨機(jī)取200尾七彩神仙魚(yú)，每個(gè)處理隨機(jī)放20尾七彩神仙魚(yú)，實(shí)驗(yàn)條件為曝氣自來(lái)水pH值7.2～7.4，水溫控制在23～24 ℃，溶解氧4～5 mg/L，采用半靜態(tài)喂食試驗(yàn)法，每24 h更換一次藥液，觀察記錄各組試驗(yàn)魚(yú)的中毒行為、癥狀及死亡率，試驗(yàn)時(shí)間96 h，試驗(yàn)結(jié)果如表2所示。計(jì)算過(guò)氧乙酸對(duì)神仙魚(yú)的半致死濃度LC 50 和安全濃度SC：實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表3所示。

X m ：最大劑量組劑量的對(duì)數(shù)值。 i ：相鄰兩組劑量（d）對(duì)數(shù)值之差，或相鄰兩組高劑量與低劑量之比的對(duì)數(shù)。 P ：各組動(dòng)物的死亡率，用小數(shù)表示。Σ P ：為各組動(dòng)物死亡率的總和。 n ：每組動(dòng)物數(shù)。S x50 ：logLC 50 的標(biāo)準(zhǔn)誤。SC 50 ：安全濃度。

2.3 過(guò)氧乙酸對(duì)神仙魚(yú)小瓜蟲(chóng)病治療試驗(yàn)

用25目自制手抄網(wǎng)從水中采取蟲(chóng)體，或魚(yú)體表病灶上采取病原體，在顯微鏡下進(jìn)行觀察，根據(jù)觀察結(jié)果確定小瓜蟲(chóng)的發(fā)育階段和感染強(qiáng)度。實(shí)驗(yàn)條件;曝氣自來(lái)水pH值7.2～7.4，水溫控制在23～24℃，溶解氧4～5 mg/L。試驗(yàn)結(jié)果如表4所示。

3 結(jié)論和分析

3.1 過(guò)氧乙酸對(duì)小瓜蟲(chóng)有效性預(yù)試驗(yàn)

根據(jù)表1可知，空白對(duì)照組的試驗(yàn)魚(yú)在24 h內(nèi)就全部死亡，而其他不同過(guò)氧乙酸濃度組在96 h內(nèi)都還有部分試驗(yàn)魚(yú)存活，除藥液濃度為1.6 mg/L組，其他高濃度組的在2個(gè)月后仍有部分試驗(yàn)魚(yú)存活，且死亡數(shù)并未增加，表明過(guò)氧乙酸對(duì)治療小瓜蟲(chóng)是有效果的，也保證后面的試驗(yàn)是有意義的。

3.2 過(guò)氧乙酸對(duì)神仙魚(yú)的急性毒性試驗(yàn)

根據(jù)表3可知，過(guò)氧乙酸對(duì)七彩神仙魚(yú)的安全濃度為8.55 mg/L，用過(guò)氧乙酸治療患病的七彩神仙魚(yú)時(shí)，藥液濃度不可大于安全濃度8.55 mg/L，否則會(huì)危害到魚(yú)也會(huì)影響水環(huán)境。

3.3 過(guò)氧乙酸對(duì)神仙魚(yú)小瓜蟲(chóng)病治療試驗(yàn)

根據(jù)表4，試驗(yàn)開(kāi)始12 h后，Ⅰ組（8.55 mg/L）、Ⅱ組（4.26 mg/L）、Ⅲ組（2.14 mg/L）中可用肉眼觀察到實(shí)驗(yàn)魚(yú)體表白點(diǎn)變淡。24 h后Ⅰ組（8.55 mg/L）、Ⅱ組（4.26 mg/L）、Ⅲ組（2.14 mg/L）實(shí)驗(yàn)魚(yú)體表白點(diǎn)消失，Ⅳ組（1.07 mg/L）實(shí)驗(yàn)魚(yú)體表白點(diǎn)變淡。Ⅴ組（0.55 mg/L）1尾魚(yú)出現(xiàn)死亡，對(duì)照組2尾魚(yú)出現(xiàn)死亡。36 h后Ⅰ組（8.55 mg/L）、Ⅱ組（4.26 mg/L）、Ⅲ組（2.14 mg/L）、Ⅳ組（1.07 mg/L）均無(wú)異常現(xiàn)象，Ⅴ組（0.55 mg/L）及對(duì)照組實(shí)驗(yàn)魚(yú)全部死亡，鏡檢后Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組雖觀察到小瓜蟲(chóng)蟲(chóng)體，但纖毛不動(dòng)，確認(rèn)已死亡。在Ⅴ組及對(duì)照組中，發(fā)現(xiàn)大量游動(dòng)小瓜蟲(chóng)。在安全濃度下，治療效果與藥液濃度呈正比。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，過(guò)氧乙酸在神仙魚(yú)安全濃度內(nèi)對(duì)小瓜蟲(chóng)的幼蟲(chóng)和包囊都具有較好的殺滅效果，治愈率達(dá)70%。

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