譚柳萍，楊柯，曾春暉

(廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530200)

馬錢子為馬前科植物馬前Strychnosnux-bomicaL.的干燥成熟種子，具有通絡(luò)止痛、消腫散結(jié)的功效，為開通經(jīng)絡(luò)要藥，可用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[1]。馬錢子生品毒性較大，臨床通常選擇其炮制品入藥，不宜多服久服，極不適宜大面積涂敷。2015年版《中華人民共和國藥典》一部中制馬錢子的炮制方法為砂燙法。馬錢子砂燙品在炮制過程中影響因素較多，火候、顏色等因素易受到人為主觀控制而使得成品質(zhì)量不均一；目前在臨床中出現(xiàn)了一些疑為馬錢子中毒的病例報(bào)告，馬錢子砂燙品的臨床使用也受到很大限制。本文將對(duì)馬錢子的現(xiàn)代炮制工藝進(jìn)行闡述和整理，并對(duì)馬錢子砂燙品及其他炮制品的成分變化、藥理作用、毒性等方面進(jìn)行總結(jié)，為馬錢子的減毒研究、臨床使用提供思路，及其炮制品的生產(chǎn)工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考。

1 馬錢子炮制方法及炮制工藝

1.1 馬錢子傳統(tǒng)炮制方法

1.1.1砂燙 2015年版《中華人民共和國藥典》一部中制馬錢子的方法為砂燙法[2]，取潔凈河砂置于炒制器具中，武火加熱使河砂呈現(xiàn)滑利狀態(tài)時(shí)，投入馬錢子。炒至鼓起同時(shí)顯棕褐色或深棕色。徐穎等[3]采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，以炮制過程中的砂礫度、砂藥比、炮制溫度和炮制時(shí)間及炮制后的馬錢子堿、士的寧堿含量為考慮因素，結(jié)果表明，馬錢子投入量為砂量的1/7，使用砂徑為300～600 μm的砂在190 ℃條件下炒制4 min為馬錢子砂燙品的最佳工藝。

1.1.2油制 孫麗榮等[4]采取不同的炮制溫度對(duì)馬錢子進(jìn)行油制，并對(duì)其生物堿成分進(jìn)行提取分析，結(jié)果表明炮制油溫在220 ℃以上時(shí)，油溫越高馬錢子中士的寧和馬錢子堿的含量越低，異士的寧、異馬錢子堿、異馬錢子堿氮氧化物開始增加。炮制油溫達(dá)260 ℃以上時(shí)，馬錢子中總生物堿含量都顯著降低。因此選擇油制馬錢子的炮制油度為230～250 ℃，此油溫下，馬錢子油制品的總生物堿、士的寧、馬錢子堿含量下降，其中毒性較大的馬錢子堿下降幅度最大，而一些毒性較小的具有生物活性馬錢子堿氮氧化物、士的寧氮氧化物、異馬錢子堿、異馬錢子堿氮氧化物等生物堿含量增加。

1.2 地區(qū)習(xí)用的馬錢子炮制方法

1.2.1 童便制 江西傳統(tǒng)炮制技術(shù)代表樟幫采用童便制法對(duì)馬錢子進(jìn)行炮制[5]。將馬錢子放入童便中浸漬49 d至鼓脹，清水漂洗21 d，去茸毛，用水漂洗7 d，撈出，瀝干水，切片曬干。龔千鋒等[6]除了采用樟幫童便制馬錢子，還采用了建幫童便制砂炒法和樟幫童便制滑石粉炒法制馬錢子。

1.2.2 醋制 醋制馬錢子為廣東地區(qū)的傳統(tǒng)炮制方法，主要分為水浸、醋煮、砂炒三個(gè)環(huán)節(jié)。曾佩瑜等[7]采用正交試驗(yàn)，以水浸時(shí)間、輔料白醋濃度、醋煮時(shí)間作為正交試驗(yàn)中的三個(gè)考慮因素，結(jié)果表明水浸5 d，白醋濃度2.5%，醋煮1 h的炮制條件為馬錢子醋制品的最佳炮制工藝。龔千鋒等[6]采用醋酸浸法、醋酸浸泡砂炒法、醋酸煮法、醋酸煮砂炒法對(duì)馬錢子進(jìn)行炮制。

1.2.3 奶制 維吾爾醫(yī)和蒙醫(yī)使用牛奶對(duì)一些有毒藥材進(jìn)行浸煮以達(dá)到減毒效果，馬錢子也是維醫(yī)和蒙醫(yī)的常用藥材。阿米娜·阿巴斯等[8]采用牛奶冷浸和牛奶熱浸的方法對(duì)馬錢子進(jìn)行炮制。牛奶冷漬法采用常溫牛奶浸泡馬錢子3 d，每天更換使用新牛奶，然后使用開水浸泡1 d后去種皮茸毛、胚芽，曬干。牛奶熱漬法為把馬錢子放置在水中浸泡3～7 d后去種皮茸毛和胚芽，將浸潤后的馬錢子用紗布懸于鍋中牛奶浸沒煮沸2 h，隨后雜碎，曬干。

1.3 馬錢子炮制新技術(shù)

1.3.1烘焙 烘焙法采用烘箱等設(shè)備對(duì)馬錢子進(jìn)行加熱，通過設(shè)置時(shí)間和溫度來調(diào)控馬錢子的炮制質(zhì)量。屈艷格等[9]采用電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱在加熱溫度為215 ℃的條件下對(duì)馬錢子進(jìn)行烘烤15 min，所得馬錢子烘焙品中總生物堿含量、馬錢子堿氮氧化物的含量與砂燙品接近，烘制后的馬錢子種皮上的有毒茸毛更容易脫落。180 ℃、40 min的條件下所得馬錢子烘焙品中士的寧和馬錢子堿的含量最高。烘焙法中烘焙溫度對(duì)炮制品中士的寧和馬錢子堿含量的影響大于烘焙時(shí)間[10]。

1.3.2 爆壓 丁宗華等[11]采用爆米花機(jī)制馬錢子，使用中火加熱5 min，加熱的過程中以15 r·min-1的速度旋轉(zhuǎn)爆米花機(jī)，使之加熱均勻，待腔內(nèi)壓力達(dá)到152 kPa時(shí)減壓爆出馬錢子，待涼后除去茸毛。結(jié)果表明馬錢子爆壓品中士的寧含量相對(duì)穩(wěn)定。爆壓法制馬錢子相對(duì)于傳統(tǒng)砂炒法操作簡單、條件易控，有效成分穩(wěn)定。減少了因操作經(jīng)驗(yàn)的差異導(dǎo)致馬錢子質(zhì)量不穩(wěn)定的情況發(fā)生。

1.3.3 發(fā)酵 傳統(tǒng)的發(fā)酵法中參與發(fā)酵的菌種不穩(wěn)定不易控制，現(xiàn)代“雙向”發(fā)酵法篩選出對(duì)藥材適應(yīng)性佳和生物轉(zhuǎn)化能力強(qiáng)的真菌后，接種于藥材上，所得發(fā)酵產(chǎn)物具有一定的可控性和穩(wěn)定性[12]。陳龍等[13]采用六種真菌(裂褶菌、竹黃、單色云芝、雞油菌、白僵菌、蟬花)與馬錢子進(jìn)行發(fā)酵得到六種發(fā)酵品(褶馬菌質(zhì)、竹馬菌質(zhì)、單馬菌質(zhì)、油馬菌質(zhì)、白馬菌質(zhì)、花馬菌質(zhì))。發(fā)酵前馬錢子在一定壓力和溫度下進(jìn)行滅菌，再接種相應(yīng)的真菌，保持一定溫度、濕度在發(fā)酵容器中進(jìn)行發(fā)酵，待菌絲體成長布滿發(fā)酵容器后取出進(jìn)行干燥，即為馬錢子真菌發(fā)酵品。

2 炮制對(duì)馬錢子化學(xué)成分影響

2.1 生馬錢子主要的化學(xué)成分

馬錢子化學(xué)成分為生物堿類化合物、萜類、甾體及苷類等，生物堿類化合物約占馬錢子化學(xué)成分的1.5%～5%，主要為士的寧和馬錢子堿，另含有異士的寧、異馬錢子堿、異士的寧氮氧化物、異馬錢子堿氮氧化物等。士的寧和馬錢子堿為主要的有效成分同時(shí)也是產(chǎn)生毒性的主要成分。士的寧的藥效是馬錢子堿的40倍，毒性是馬錢子堿的20倍，成人用5～10 mg即可發(fā)生中毒現(xiàn)象，30 mg可致死[14]。

2.2 傳統(tǒng)砂燙法和油炸法對(duì)馬錢子化學(xué)成分的影響

閆靜等[15]采用電噴霧質(zhì)譜技術(shù)分析到砂燙馬錢子炮制后士的寧和馬錢子堿含量下降，同時(shí)還監(jiān)測(cè)到士的寧氮氧化物、α-可魯勃林、4-羥基依卡精和馬錢子堿氮氧化物，其中士的寧氮氧化物和馬錢子堿氮氧化物含量明顯增加。孫麗榮等[4]采用薄層層析的方法對(duì)不同炮制油溫下的馬錢子油制品中生物堿進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，炮制油溫在220～240 ℃，馬錢子堿含量明顯降低，異士的寧、異馬錢子堿、異馬錢子堿氮氧化物含量增加。馬錢子堿毒性大，異士的寧、異馬錢子堿、異馬錢子堿氮氧化物等生物堿毒性相對(duì)小同時(shí)具有一定的生物活性。由此可推測(cè)傳統(tǒng)沿用至今的砂燙法和油制法對(duì)馬錢子的減毒存效具有一定作用，通過降低馬錢子的含量同時(shí)生成一些毒性較小具有一定生物活性的馬錢子堿氮氧化物、士的寧氮氧化物、異馬錢子堿等生物堿。

2.3 地區(qū)習(xí)用炮制方法對(duì)馬錢子化學(xué)成分影響

王明昭等[16]選用樟幫童便制法、醋浸法、醋浸砂炒法、醋煮法、醋煮砂炒法、砂燙法、油炸法對(duì)馬錢子進(jìn)行炮制。采用高效液相色譜法對(duì)各炮制品中馬錢子堿含量進(jìn)行測(cè)定，各炮制品中馬錢子堿的含量由高到低依次是油炸品、砂燙品、醋煮品、樟幫尿泡品、醋煮砂炒品、醋浸品、醋浸砂炒品。馬錢子經(jīng)由醋制法、童便制和一些醋制改良法炮制后各炮制品中所含的馬錢子堿含量與傳統(tǒng)砂燙法比較差異較大，表現(xiàn)為不同程度的降低。馬恩耀等[17]建立了醋馬錢子的HPLC指紋圖譜，結(jié)果顯示炮制后士的寧和馬錢子含量明顯降低，一些生物堿也表現(xiàn)出降低的趨勢(shì)同時(shí)有其他的物質(zhì)生成。分析推測(cè)使用醋對(duì)馬錢子進(jìn)行炮制后可能形成一些可溶性鹽。研究表明，與傳統(tǒng)砂燙法比較，使用牛奶對(duì)馬錢子進(jìn)行炮制可以顯著降低馬錢子中士的寧和馬錢子堿的含量，其中維醫(yī)的牛奶熱浸法和蒙醫(yī)的脫脂酸牛奶熱煮法效果更顯著。推測(cè)可能由于牛奶中的蛋白質(zhì)與馬錢子中生物堿發(fā)生反應(yīng)形成其他物質(zhì)，馬錢子中生物堿含量下降，由此達(dá)到減毒效果[8，18]。

2.4 現(xiàn)代炮制新技術(shù)對(duì)馬錢子化學(xué)成分的影響

研究表明馬錢子經(jīng)由烘焙或爆壓的方式進(jìn)行炮制后，馬錢子中總生物堿的含量下降，其中毒性較大的馬錢子堿的含量下降明顯，而藥效較大的士的寧炮制后變化較小，含量較穩(wěn)定，由此可見烘焙法和爆壓法有利于馬錢子的減毒存效[11，19]。

研究發(fā)現(xiàn)把真菌朱紅栓菌接種在馬錢子上，由此得到馬錢子發(fā)酵品，可從中分離獲得10個(gè)生物堿成分，與生品比較其中16-甲氧基士的寧、士的寧氮氧化物、馬錢子堿氮氧化物、喜樹次堿可能為馬錢子經(jīng)過朱紅栓菌發(fā)酵后產(chǎn)生的新成分[20]。而毒性成分士的寧和馬錢子堿總含量降低了16.10%[21]。

3 炮制對(duì)馬錢子藥理作用影響

3.1 馬錢子藥理作用

馬錢子中的部分生物堿對(duì)整個(gè)中樞神經(jīng)系統(tǒng)具有興奮作用，對(duì)心肌細(xì)胞離子通道具有激動(dòng)作用。同時(shí)馬錢子還具有鎮(zhèn)痛抗炎作用，現(xiàn)代研究表明制馬錢子水煎液及馬錢子堿具有抑制腫瘤生長的作用，馬錢子中的馬錢子堿和馬錢子堿氮氧化物具有抗血小板聚集和抗血栓形成的作用[14]。

3.2 不同炮制方法對(duì)馬錢子抗炎鎮(zhèn)痛作用的影響

楊紅梅等[22]通過小鼠抗炎鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)得出結(jié)果，與傳統(tǒng)砂燙法和油炸法比較，醋制品對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的抑制作用最強(qiáng)，對(duì)醋酸腹腔刺激致小鼠疼痛有顯著抑制作用，鎮(zhèn)痛率為46.2%，對(duì)小鼠熱水甩尾潛伏期的影響也最大。地力努爾·吐爾遜江等[23]通過對(duì)生馬錢子、維醫(yī)牛奶熱浸制馬錢子和冷浸制馬錢子的鎮(zhèn)痛作用進(jìn)行研究，結(jié)果顯示，維醫(yī)牛奶冷浸品和熱浸品的低劑量組與模型組比較具有顯著性差異，對(duì)醋酸所致扭體反應(yīng)次數(shù)明顯減少，鎮(zhèn)痛作用大于生品。研究表明馬錢子由裂褶菌、竹黃、單色云芝、雞油菌、白僵菌和蟬花、朱紅栓菌分別進(jìn)行發(fā)酵后，7種發(fā)酵品均具有良好的鎮(zhèn)痛和抗炎作用與生品比較無顯著差異。由此推斷馬錢子經(jīng)由7種真菌發(fā)酵后鎮(zhèn)痛抗炎作用沒有減弱[12，24]。

3.3 炮制對(duì)馬錢子其他作用的影響

吳奕富等[25]采用砂燙、油制、童便制方法炮制馬錢子，并測(cè)定不同炮制品對(duì)小鼠超氧化歧化酶和睪酮的作用。結(jié)果表明，與傳統(tǒng)砂燙法比較，油制馬錢子和童便制馬錢子可使小鼠血清中睪酮含量升高，SOD活力降低，其中童便制馬錢子組睪酮含量與砂燙品相比具有顯著差異?？赏茢嗤阒岂R錢子具有提高機(jī)體抗氧化的能力，減輕氧化性損傷的作用。

4 炮制對(duì)馬錢子毒性的影響

沈玉杰等[19]通過急性毒性實(shí)驗(yàn)比較馬錢子生品和壓爆品的最大致死量和半數(shù)致死量，結(jié)果顯示爆壓品的急性毒性比生品下降了38.3%。龔千鋒等[6]采用醋酸浸法、醋酸浸泡砂炒法、醋酸煮法、醋酸煮砂炒法、樟幫童便制法、樟幫童便制滑石粉炒法、建幫童便制砂炒法對(duì)馬錢子進(jìn)行炮制，測(cè)定不同炮制品中LD50，結(jié)果表明各炮制品的LD50都有所提高其中醋浸品LD50最大，可信范圍較寬。地力努爾·吐爾遜江等[23]通過毒性實(shí)驗(yàn)比較馬錢子生品、牛奶熱浸品和牛奶冷浸品的LD50，結(jié)果顯示，與馬錢子生品比較，維醫(yī)牛奶熱浸品和維醫(yī)牛奶冷浸品的LD50增高，其中維醫(yī)牛奶熱浸品提高較為顯著。研究發(fā)現(xiàn)馬錢子經(jīng)過7種真菌：裂褶菌、竹黃、單色云芝、雞油菌、白僵菌、蟬花、朱紅栓菌發(fā)酵后，毒性降低，各馬錢子發(fā)酵品的LD50上升率為27.8%～50.6%[12，24]。

5 結(jié)語

童便制法、醋制法、奶制法各采用不同的輔料對(duì)馬錢子進(jìn)行炮制。童便自身具有滋陰解毒，引藥下行的作用[26]；醋可引藥入肝、緩和藥性[27]。不同性質(zhì)的輔料在炮制過程與藥材發(fā)生反應(yīng)，馬錢子的各炮制品之間士的寧和馬錢子堿的含量具有較大差異，所產(chǎn)生的毒性和臨床療效也各有差異。在用藥過程中可考慮針對(duì)不同的適應(yīng)癥及用藥對(duì)象體質(zhì)、年齡等因素使用不同的炮制品，如：發(fā)生于下肢的風(fēng)濕頑痹骨折腫痛等癥適宜使用童便制馬錢子，利用童便引藥下行的作用增強(qiáng)馬錢子的治療效果；小兒、老人等瘦弱者對(duì)馬錢子的耐受力較弱，可使用醋制馬錢子，利用醋緩和藥性的作用增加馬錢子的使用范圍。

烘焙法、爆壓法、砂燙法通過不同的加熱方式使馬錢子中毒性較大的生物堿含量降低，同時(shí)毒性小存在一定生物活性的生物堿含量提高，達(dá)到減毒作用。與砂燙法相比，烘焙法和爆壓法操作簡單，只需對(duì)儀器的溫度、時(shí)間、壓力等條件進(jìn)行設(shè)置，即可得到馬錢子炮制品；同時(shí)受到操作經(jīng)驗(yàn)的影響較少，不需要對(duì)“火候”等因素進(jìn)行主觀判斷，成品質(zhì)量均一?？芍贫R錢子的爆壓或烘焙法的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范，實(shí)現(xiàn)馬前子炮制品的大批量生產(chǎn)，提高生產(chǎn)效率。

發(fā)酵法炮制過程中，真菌接種于藥材上進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化，過程復(fù)雜。馬錢子在發(fā)酵過程中有毒生物堿與真菌相互作用產(chǎn)生毒性小而具有一定生物活性的物質(zhì)，“雙向發(fā)酵”是馬錢子減毒存效的新途徑。

馬錢子具有通絡(luò)止痛，消腫散結(jié)的功效，臨床效果顯著，但是其大毒的性質(zhì)使臨床使用受到限制。通過炮制減輕其毒性是當(dāng)前馬錢子減毒的重要手段，從古至今馬錢子的炮制方式各異，對(duì)馬錢子的各炮制方法進(jìn)行綜述有助于尋找一種新的炮制方法，要取得具有顯著減毒存效作用的炮制方法，這仍需進(jìn)一步的考察和研究。