滿 洋，楊 璞，李晞睛，曲映紅

(上海海洋大學，食品科學與工程國家級實驗教學示范中心，上海 201306)

銀杏葉、烏飯樹葉和桑葉含有多種生物活性成分，其中的黃酮類化合物具有抗氧化、防止衰老、抑菌抗病毒等功效，且安全可靠，食用健康，可用于加工藥品和保健食品。從植物中提取黃酮通常使用的溶劑是水或乙醇水溶液，并輔以微波、超聲波等以提高提取效率[1-6]。本文用乙醇水溶液浸提銀杏葉、烏飯樹葉和桑葉中的粗黃酮，并考察提取物對DPPH自由基的清除能力，旨在為開發(fā)綠色安全的天然抗氧化劑提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

干燥的銀杏葉、烏飯樹葉和桑葉購于上海。

試劑：1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)，乙醇，均為分析純。

儀器：LLJ-306Z粉碎機，江門市貝爾斯頓電器有限公司；AL204電子天平，梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司；KQ5200E超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；752N紫外可見分光光度計，上海儀電分析儀器有限公司。

1.2 試驗方法

1.2.1 粗黃酮的提取

分別將已干燥的銀杏葉、烏飯樹葉和桑葉粉碎，過60目篩。精確稱取10 g碎葉粉末，料液比分別為1:30、1:25、1: 20、1: 15、1:10條件下，用70%乙醇于70℃超聲浸提[7-8]120 min，5000 rpm離心5 min，上清液即為銀杏葉、烏飯樹葉和桑葉醇提粗黃酮溶液。其他條件不變，以水為提取劑時，可得到銀杏葉、烏飯樹葉和桑葉水提粗黃酮溶液。

1.2.2 DPPH自由基清除率的測定

將提取得到的粗黃酮溶液按照方敏和勾明玥[9-10]的實驗方法，測定粗黃酮溶液和空白反應混合物在517 nm處的吸光度，根據(jù)下列公式計算清除率：

K(%)=[1-(A1- A2)/A0]×100 式中，K為樣品對DPPH 自由基的清除率，A1為DPPH溶液加粗黃酮溶液后的吸光度，A2為粗黃酮溶液在測定波長的吸光度， A0為DPPH溶液不加粗黃酮溶液的吸光度。

2 結(jié)果與討論

圖1 醇提粗黃酮對DPPH自由基的清除率Fig.1 The scavenging rate of crude flavonoids extracted with ethanol to DPPH radicals

從圖1可以看出，三種植物葉的醇提粗黃酮對DPPH自由基的清除率隨料液比的提高而增大，大小順序為烏飯樹葉>桑葉>銀杏葉。選定的五種料液比條件下，烏飯樹葉醇提粗黃酮的DPPH清除率都在80%以上，顯示出優(yōu)良的抗氧化活性。隨料液比的增加，桑葉醇提粗黃酮的DPPH清除率快速上升，當料液比達到1:10時，清除率已上升至近80%。銀杏葉醇提粗黃酮對DPPH自由基的清除率隨料液比的增加上升緩慢，均為50%以下。

圖2 水提粗黃酮對DPPH自由基的清除率Fig.2 The scavenging rate of crude flavonoids extracted with water to DPPH radicals

從圖2可以看出，三種植物葉的水提粗黃酮對DPPH自由基的清除率隨料液比的提高而增大，大小順序為銀杏葉>烏飯樹葉>桑葉。當料液比升至1:20時，銀杏葉水提粗黃酮的DPPH自由基清除率達80%以上；料液比達1:15時，烏飯樹葉水提粗黃酮的DPPH自由基清除率也上升至70%以上。桑葉水提粗黃酮對DPPH自由基的清除率較低，為60%以下。

銀杏葉水提粗黃酮的DPPH自由基清除率高于醇提粗黃酮，而烏飯樹葉和桑葉醇提粗黃酮的DPPH自由基清除率高于水提粗黃酮。當料液比上升到1:15時，烏飯樹葉醇提和水提粗黃酮都顯示出較高的DPPH自由基清除能力。

3 結(jié)論

銀杏葉、烏飯樹葉和桑葉的醇提和水提粗黃酮均有一定的DPPH自由基清除能力，其中，烏飯樹葉水提粗黃酮和銀杏葉醇提粗黃酮顯示了較高的抗氧化能力，是良好的天然抗氧化劑，值得進一步開發(fā)利用。

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