韓曉靜

山西藥科職業(yè)學(xué)院 山西省太原市 030031

近些年來(lái)，隨著人們飲食及生活習(xí)慣的改變，痛風(fēng)的發(fā)病率顯著提升，對(duì)人們的生活質(zhì)量帶來(lái)了極其嚴(yán)重的負(fù)面影響。痛風(fēng)靈膠囊由秦艽、防己、延胡索等組成，是醫(yī)療衛(wèi)生領(lǐng)域用于治療痛風(fēng)的主要中成藥，鎮(zhèn)痛效果顯著。為保證痛風(fēng)靈膠囊質(zhì)量達(dá)標(biāo)，確保藥物的療效能夠得到更大程度的發(fā)揮。本文采用照薄層色譜鑒別法，及高效液相色譜法等方法，對(duì)痛風(fēng)靈膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)問(wèn)題進(jìn)行了研究。得到報(bào)告如下：

1 儀器與試劑

本課題需準(zhǔn)備的儀器與試劑如下：（1）準(zhǔn)備高效液相色譜儀及紫外線檢測(cè)器。（2）準(zhǔn)備天平用于稱量藥物，準(zhǔn)備照薄層色譜系統(tǒng)，用于進(jìn)行照薄層色譜試驗(yàn)。（3）準(zhǔn)備痛風(fēng)靈膠囊對(duì)照品，以甲醇[1]作為色譜純、以磷酸作為分析純，完成高效液相色譜試驗(yàn)。

2 方法

2.1 照薄層色譜鑒別法

2.1.1 供試品制備方法

（1）準(zhǔn)備痛風(fēng)靈膠囊10粒作為樣本，取膠囊中的藥物研磨，加正丁醇50ml，于室溫狀態(tài)下靜置12h。（2）將浸泡12h的藥物超聲處理30min，以30ml水過(guò)濾，振蕩，待溶液量減少至5ml時(shí)，采用樹(shù)脂洗脫。（3）采用10%乙醇40ml洗脫，蒸干，加甲醇溶液1ml，制成痛風(fēng)靈膠囊供試品[2]。

2.1.2 照薄層色譜法

（1）取供試品及對(duì)照品溶液各10μg作為樣本。（2）將兩者點(diǎn)于硅膠G薄層板上，展開(kāi)，取出并將其晾干。（3）于105℃環(huán)境下加熱，觀察斑點(diǎn)顯示情況，判斷制劑是否為陰性。

表 1：延胡索含量的測(cè)定結(jié)果

2.1.3 秦艽及防己的檢驗(yàn)

（1）準(zhǔn)備痛風(fēng)靈膠囊30片作為樣本，研磨成為粉末狀，加20ml乙醚靜置1h。（2）將浸泡1h的藥物超聲處理30min，以30ml水過(guò)濾，揮干。（3）加1ml氯仿，制成供試品。（4）準(zhǔn)備秦艽及防己各1g作為對(duì)照品，同樣采用上述方法制成對(duì)照品溶液，以供試驗(yàn)所用。（5）取秦艽、防己的對(duì)照品溶液各1μg作為樣本，點(diǎn)于硅膠G薄層板上，展開(kāi)，晾干，觀察斑點(diǎn)顯示情況，判斷制劑是否為陰性。

2.1.4 延胡索的檢驗(yàn)

（1）準(zhǔn)備痛風(fēng)靈膠囊30片作為樣本，研磨成為粉末狀，加甲醇15ml后，超聲處理30min。（2）取超聲處理得到溶液的上清液作為延胡索供試品樣本。（3）取延胡索0.3g，同樣采用上述方法制成對(duì)照品溶液，以供試驗(yàn)所用。（4）觀察斑點(diǎn)顯示情況，判斷制劑是否為陰性。

2.2 痛風(fēng)靈膠囊藥物含量檢驗(yàn)方法

采用高效液相色譜法檢驗(yàn)，需做試驗(yàn)如下：

2.2.1 適用性試驗(yàn)

（1）色譜柱：250×4.6mm，共5μm。（2）流動(dòng)相：以甲醇作為流動(dòng)相，將溶液PH值調(diào)整為9.0。（3）試驗(yàn)波長(zhǎng)：262nm，室溫下試驗(yàn)。（4）色譜柱內(nèi)液體流速：1ml/min-1。（5）供試品及對(duì)照品溶液進(jìn)樣量均為5μL，判斷采用高效液相色譜法檢驗(yàn)痛風(fēng)靈膠囊的質(zhì)量是否適用。

2.2.2 線性關(guān)系試驗(yàn)

（1）準(zhǔn)備對(duì)照品溶液（濃度0.5mg·ml-1），將進(jìn)樣量分別確定為3.0μL、5.0μL、11.0μL、16.0μL 及 22.0μL。（2）觀察不同進(jìn)樣量下的不同峰面積情況，判斷兩者是否符合線性關(guān)系。（3）如符合線性關(guān)系，需判斷線性關(guān)系良好的進(jìn)樣量范圍。

2.2.3 精密度試驗(yàn)

（1）準(zhǔn)備對(duì)照品溶液5μL，分別進(jìn)樣，將進(jìn)樣次數(shù)控制為5次。（2）觀察每次進(jìn)樣時(shí)的峰面積變化情況。（3）計(jì)算峰面積值，判斷高效液相色譜試驗(yàn)所使用的儀器是否精密，判斷檢驗(yàn)結(jié)果是否能夠真實(shí)反映藥品的原有質(zhì)量。

2.2.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)

（1）取供試品溶液5μL，分別進(jìn)樣，將進(jìn)樣次數(shù)控制為10次。（2）10次進(jìn)樣的時(shí)間，需分別控制在1h、3h、5h、7h、9h、11h、13h、15h、17h、19h的標(biāo)準(zhǔn)。（3）計(jì)算峰面積值，判斷高效液相色譜試驗(yàn)是否穩(wěn)定，判斷檢驗(yàn)結(jié)果是否能夠穩(wěn)定反映藥品的原有質(zhì)量。

2.2.5 樣品量測(cè)定試驗(yàn)

（1）準(zhǔn)備3批次痛風(fēng)靈膠囊作為樣本，制備供試品溶液。（2）取供試品溶液及對(duì)照品溶液各5μL。（3）采用高效液相色譜法對(duì)供試品中以延胡索為代表的各成分的含量進(jìn)行檢驗(yàn)。

3 結(jié)果與討論

<< <<

3.1 結(jié)果

3.1.1 適用性及線性關(guān)系試驗(yàn)結(jié)果

通過(guò)對(duì)適用性試驗(yàn)結(jié)果的觀察發(fā)現(xiàn)：采用高效液相色譜法檢驗(yàn)痛風(fēng)靈膠囊的質(zhì)量符合適用性原則，采用該方法評(píng)估藥品的質(zhì)量具有一定的可行性。

通過(guò)對(duì)線性關(guān)系試驗(yàn)結(jié)果的觀察發(fā)現(xiàn)：當(dāng)進(jìn)樣量處于1.00-13.15μg范圍內(nèi)時(shí)，具有良好的線性關(guān)系。

3.1.2 精密度及穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

通過(guò)對(duì)精密度試驗(yàn)結(jié)果的觀察發(fā)現(xiàn)：峰面積數(shù)值為0.23%，表明，高效液相色譜試驗(yàn)所使用的儀器較為精密，檢驗(yàn)結(jié)果能夠真實(shí)反映藥品的原有質(zhì)量。

通過(guò)對(duì)穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果的觀察發(fā)現(xiàn)：峰面積數(shù)值為0.85%，表明，高效液相色譜試驗(yàn)較為穩(wěn)定，檢驗(yàn)結(jié)果能夠穩(wěn)定反映藥品的原有質(zhì)量。

3.1.3 延胡索含量的測(cè)定結(jié)果

通過(guò)對(duì)3個(gè)不同批次藥品中延胡索含量的測(cè)定，得到結(jié)果見(jiàn)表1。

結(jié)果顯示，3批次痛風(fēng)靈膠囊中，延胡索含量存在一定的差異，第3批次的藥品延胡索含量最高，為42.985μg/粒，偏差僅0.71%。表面檢驗(yàn)結(jié)果與藥品實(shí)際的延胡索含量基本相符。

3.2 討論

痛風(fēng)多由脾腎虛虧所引起，給予痛風(fēng)靈膠囊治療，能夠取得較好的療效[3]。但近些年來(lái)，部分廠商以次充好，將質(zhì)量未達(dá)標(biāo)的痛風(fēng)靈膠囊販賣至消費(fèi)者手中的現(xiàn)象逐漸增多，對(duì)人民的健康造成了極其嚴(yán)重的威脅，加強(qiáng)質(zhì)量檢驗(yàn)開(kāi)始顯得尤為必要。本文研究發(fā)現(xiàn)，痛風(fēng)靈膠囊中，秦艽、防己及延胡索照薄層色譜鑒別結(jié)果均為陽(yáng)性。表明質(zhì)量合格的藥品中，必須含有上述三種成分。采用高效液相色譜法檢驗(yàn)痛風(fēng)靈膠囊的質(zhì)量較為適用。當(dāng)進(jìn)樣量處于1.00-13.15μg范圍內(nèi)時(shí)，線性關(guān)系良好。通過(guò)對(duì)不同批次痛風(fēng)靈膠囊中成分含量的測(cè)定發(fā)現(xiàn)。批次1延胡索含量35.100μg/粒、偏差0.45%，批次2延胡索含量41.269μg/粒、偏差2.13%，批次1延胡索含量42.985μg/粒、偏差0.71%。表明不考慮其他成分的情況下，延胡索含量需居于 35.100μg/粒 -42.985μg/粒間，方可符合質(zhì)量檢驗(yàn)要求。

綜上所述，有關(guān)人員可將高效液相色譜法應(yīng)用到痛風(fēng)靈膠囊的質(zhì)量檢驗(yàn)中，判斷延胡索含量是否高于35.100μg/粒，以判斷藥品質(zhì)量是否達(dá)標(biāo)，提高藥品的使用的安全性。

[1]伍群業(yè).痛風(fēng)靈湯治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎72例臨床觀察[J].中國(guó)社區(qū)醫(yī)師 ,2017,33(30)：112+114.

[2]曾友長(zhǎng),周凡,周春權(quán).四妙痛風(fēng)靈對(duì)尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的影響[J].福建中醫(yī)藥 ,2015,46(02)：31-32.

[3]金偉.痛風(fēng)靈方聯(lián)合加味金黃膏外敷治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎32例[J].浙江中醫(yī)雜志,2013,48(09)：661.