□ 鄭晶鑫 和順縣市場和質(zhì)量監(jiān)督管理局;和順縣質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢驗測試所
微生物種類不同所對應(yīng)的生長條件有所不同,其最不能小覷的因素就是pH值,因為不同的菌種所對應(yīng)的pH值有所不同,這主要由生長條件所決定。常規(guī)式的菌種,在pH值為4.5~9時,比較適合生長。我國對于微生物檢驗有著十分明確的規(guī)定,大腸菌群屬于一種可以進行發(fā)酵的乳糖,能夠產(chǎn)酸產(chǎn)氣,需氧和兼性厭氧的革蘭氏無芽孢桿菌。若想對它進行檢驗,需保證其培養(yǎng)基的pH值為7.4。在對食醋中的微生物進行檢驗時,由于其具備的酸性較強,它的酸堿度一定會比較低,若是一些制品直接添加其中,會導(dǎo)致培養(yǎng)基中的pH值受影響,導(dǎo)致其細菌無法正常生長,無法將食品真實的污染情況反映出[1]。下文主要就pH值對食醋中微生物檢驗的影響進行闡述。
1.1 儀器
在對食醋微生物進行檢驗時,需要的儀器種類比較多,其中最為典型的有滅菌平皿、高壓滅菌鍋、顯微鏡、菌落計數(shù)器、滅菌吸管以及恒溫培養(yǎng)箱,對于恒溫培養(yǎng)箱,需要確保其溫度在 0~600℃。
1.2 培養(yǎng)基與試劑
依據(jù)GB4789.28中的4.7規(guī)定,合理應(yīng)用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基;依據(jù)GB4789.28中4.25規(guī)定,合理利用伊紅美藍瓊脂;依據(jù)GB4789.28中4.9規(guī)定,合理利用乳糖膽鹽發(fā)酵管;依據(jù)GB4789.28中4.10規(guī)定,應(yīng)用乳糖發(fā)酵管;依據(jù)GB4789.28中2.2規(guī)定,合理利用革蘭氏染色液。另外,還需準備25%碳酸鈉溶液與生理鹽水,其二者能夠起到良好的滅菌效果。
1.3 檢樣
在市場中所銷售的食醋各有不同,其酸度自然存在一定差異,當(dāng)下市面中比較常見的食醋酸度分為這4種8 g/100 mL、4 g/100 mL、4.5 g/100 mL、3.5 g/1 00 mL,在進行檢驗之前需對其酸度進行校正,對其進行分別編號:編號1為 9 g/100 mL的食醋,它的實際酸度值為(8.73 g/100 mL);編號2為5 g/100 mL的食醋,它的實際酸度值為5.4 g/100 mL;編號3為4.5 g/100 mL的食醋,它的實際酸度值為4 g/100 mL;編號4為3.5 g/100 mL的食醋,它的實際酸度值為1.6 g/100 mL。
1.4 檢驗方法
1.4.1 樣品處理
對測定菌落總數(shù)的檢樣進行有效處理。取各個檢樣50 mL溶液,添加到已知菌落中,保障溶液滴落的均勻度,若是其不夠均勻,需要將其混勻;待其均勻后,吸取10 mL 25%碳酸鈉溶液,把它加入菌落中,至中性,備用。
1.4.2 檢驗程序操作
依據(jù) GB4789.2-3-1994中相關(guān)規(guī)定進行操作,只有保障操作流程的有序性,才能使檢驗結(jié)果的真實性與完整性得到保障。
2.1 大腸菌群檢驗結(jié)果
初期的實驗結(jié)果,通過對產(chǎn)酸產(chǎn)氣的乳糖膽鹽發(fā)酵管進行證實與分離實驗,發(fā)現(xiàn)產(chǎn)酸產(chǎn)氣的乳糖膽鹽發(fā)酵管均呈現(xiàn)大腸菌群陽性。經(jīng)過中和之后的大腸菌群,它的陽性檢出率有所提升,酸性較強的產(chǎn)品若是不進行中和,它所對應(yīng)的檢驗結(jié)果會失去真實性,無法將食醋污染程度反映出。除此之外,在實驗中還發(fā)現(xiàn),大腸菌群的pH值<4無法繼續(xù)生長,不同酸性的食醋中所對應(yīng)的大腸菌群的檢出率會存在差異,這便說明酸性越強的食醋對大腸菌群抑制性越強。
2.2 菌落總數(shù)的檢驗結(jié)果
把培養(yǎng)了48小時的平皿取,對其菌落進行計數(shù),具體報告結(jié)果見表1。
從表1能夠看出,中和前后的菌落總數(shù)有著巨大差異。通過實驗檢測得出,向15 mL營養(yǎng)瓊脂中加入大約1 mL未中和檢樣,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基pH值明顯小于6.0,進而使菌種正常生長受影響,這便會導(dǎo)致食醋的菌落檢驗總數(shù)變少。除此之外,對于中和酸性較強的食醋中,因為碳酸鈉的耗用量比較多,相對較麻煩。需要進行直接綜合,并進行10倍稀釋。
表1 菌落總數(shù)結(jié)果
對于食醋而言,其較強的酸度,會影響產(chǎn)品污染驗證,只能對其進行中和處理,這樣才會確保結(jié)果的真實性。若是不對其進行中和,勢必會使檢驗結(jié)果失去真實性,致使錯判的現(xiàn)象發(fā)生,無法為衛(wèi)生評價提供依據(jù)。因此,對檢樣的pH值進行調(diào)整尤為重要。
[1]劉萌.食醋微生物學(xué)檢驗方法的驗證[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2011(2):394-396.