韋金濤 李華 邱恩明

結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis，MTB)感染引起的一種慢性致死性傳染病，是目前全球單一病原體感染引起死亡的最主要原因，高于艾滋病[1]。作為一種胞內(nèi)寄生菌，MTB依靠宿主細胞獲取其生命所需多種營養(yǎng)物質(zhì)，并通過影響宿主細胞代謝從而引起宿主組織器官及各個系統(tǒng)水平的能量以及代謝紊亂[2]。因此，結(jié)核病患者體內(nèi)往往存在蛋白質(zhì)代謝、糖代謝等多種代謝紊亂。這為代謝組學(xué)研究廣泛應(yīng)用于結(jié)核病研究奠定了基礎(chǔ)。

結(jié)核病疫情現(xiàn)狀

據(jù)估計截至2014年，全球MTB潛伏感染者已多達17億，占全球總?cè)丝诘?/4[3]。受到HIV感染、營養(yǎng)不良、煙草等因素的影響，10%的MTB潛伏感染將在生命某一階段轉(zhuǎn)為活動性結(jié)核病[4]。WHO的報告顯示，2017年全球因結(jié)核病死亡例數(shù)多達130萬例(不包括30萬例HIV并發(fā)結(jié)核感染的死亡患者)，另外全球預(yù)計新發(fā)1000萬例結(jié)核病，新增55.8萬例利福平耐藥患者(其中82%為耐多藥結(jié)核病)[1]。耐藥結(jié)核病及HIV并發(fā)結(jié)核感染已成為終止結(jié)核病流行的重大障礙。

近年來，由于卡介苗接種、現(xiàn)有結(jié)核病診斷檢測手段的敏感度和特異度不足、新型檢測方法的成本高且臨床操作復(fù)雜等因素的影響，現(xiàn)有結(jié)核病診斷檢測手段已不能完全滿足當前結(jié)核病防治的需求。尋找高效、迅速、簡便且敏感度與特異度高的新型結(jié)核病診斷檢測方法是當務(wù)之急。同時，現(xiàn)有抗結(jié)核藥物存在多種不良反應(yīng)，迫切需要研制新型抗結(jié)核藥物，其藥物不良反應(yīng)產(chǎn)生的具體機制也有待進一步闡明；另外對患者經(jīng)抗結(jié)核藥物治療后的效果評估也日趨重要。除此之外，尋找MTB毒力的影響因素、耐藥結(jié)核病的成因等依舊是當前面臨的重大難題。

代謝組學(xué)研究的優(yōu)勢及現(xiàn)狀

代謝組學(xué)是一種對相對分子質(zhì)量<1000的小分子代謝物進行表征的新興組學(xué)技術(shù)，主要用于研究基因、蛋白質(zhì)和外界環(huán)境作用下機體代謝物的數(shù)量、種類及其變化規(guī)律。作為其他組學(xué)的最下游產(chǎn)物，代謝組學(xué)之前的基因、轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)組學(xué)任一層面的改變都將影響特定代謝物的數(shù)量甚至存在狀態(tài)[5]。與受到表觀遺傳調(diào)節(jié)和翻譯后修飾的基因和蛋白質(zhì)不同，代謝物可作為機體生化過程的直接標記，更加容易和表型相關(guān)聯(lián)[6]。因此，代謝組學(xué)與其他組學(xué)相比能更直接且全面地反映機體狀態(tài)。

目前，代謝組學(xué)研究模式主要分為靶向和非靶向兩種。常用技術(shù)主要包括核磁共振(MR)、質(zhì)譜(MS)、氣相色譜(GC)、液相色譜(LC)等。MR因為能提供大量物質(zhì)結(jié)構(gòu)信息而主要用于組織結(jié)構(gòu)鑒定[7]，但其敏感度稍弱且對低豐度代謝物的檢測能力較差，對儀器要求也更高更昂貴[8]。MS則對樣本需求小、成本低，能對脂質(zhì)、核苷類生物小分子，以及蛋白質(zhì)、多肽等大分子進行測定及結(jié)構(gòu)鑒定[7, 9]。近年來為了提高MS的敏感度、分辨率和選擇性，常將MS與多種技術(shù)聯(lián)用[8]。主要包括氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS) 及液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)等。MS與其他技術(shù)聯(lián)用已成為代謝組學(xué)研究的常態(tài)。在數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析方面，主成分分析法(PCA)、正交偏最小二乘法-判別分析(OPLS-DA)、偏最小二乘法-判別分析(PLS-DA)是當前代謝組學(xué)研究最常用的分析方法，在尋找疾病診斷標記物中扮演著重要角色。目前，代謝組學(xué)已廣泛應(yīng)用于卵巢癌、肺癌、糖尿病、肝癌、結(jié)核病等諸多臨床疾病的研究，在疾病診斷和治療方面的進展十分迅速，已成為一種不可或缺的臨床研究工具。

代謝組學(xué)在結(jié)核病研究中的進展

一、 MTB毒力的相關(guān)研究

MTB的毒力強弱與其致病性密切相關(guān)，其毒力相關(guān)因子很可能是未來抗結(jié)核藥物作用的潛在靶標。研究表明，MTB毒力主要與早期分泌蛋白、肽聚糖、分枝菌酸、代謝及轉(zhuǎn)錄因子等有關(guān)[10]。代謝作為MTB毒力的先決條件，在維持MTB毒力過程中不可或缺[11]。Puckett等[12]利用液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)對惟一編碼蘋果酸合酶的glcB基因敲除菌株進行代謝監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)蘋果酸合酶的缺失會引起乙醛酸的積累及蘋果酸、天冬氨酸的減少，最終造成蘋果酸合酶缺陷菌株毒力衰減并出現(xiàn)生長抑制甚至死亡，雖然具體生理機制有待闡明，但蘋果酸合酶維持正常乙醛酸水平的功能已被證明對MTB毒力的維持至關(guān)重要。Ganapathy 等[13]基于代謝組學(xué)平臺發(fā)現(xiàn)果糖二磷酸酶(FBPase)的缺失能夠造成糖異生途徑的中斷，導(dǎo)致MTB毒力喪失從而被機體清除，但糖異生途徑中斷造成的磷酸化產(chǎn)物積累可能不是導(dǎo)致MTB被清除的原因。目前的研究表明，某些代謝途徑的中斷會導(dǎo)致MTB毒力減弱甚至死亡，但具體生理機制及其與代謝物積累之間的關(guān)系還需做進一步研究。

二、MTB與宿主營養(yǎng)機制的研究

從宿主細胞獲取營養(yǎng)是MTB存活的基礎(chǔ)。Zimmermann等[14]基于四級桿-飛行時間質(zhì)譜(Q-TOF)對MTB感染的細胞進行非靶向代謝組學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)宿主細胞能為MTB提供氨基酸、核苷酸、脂質(zhì)、脂肪酸等多種營養(yǎng)物質(zhì)；將其代謝組學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)數(shù)據(jù)整合到無偏基因組規(guī)模代謝網(wǎng)絡(luò)模型，發(fā)現(xiàn)MTB在感染宿主巨噬細胞的早期需要消耗膽固醇、硬脂酸鹽、胞苷等33種不同的營養(yǎng)物質(zhì)，這種宿主的多重營養(yǎng)供應(yīng)將使MTB對外界干擾(如機體先天性免疫、抗生素等)具有一定的抵抗性，可望成為結(jié)核干預(yù)治療的代謝靶標。

宿主可通過“營養(yǎng)免疫”策略對在宿主細胞內(nèi)消耗的營養(yǎng)物質(zhì)進行調(diào)控來限制MTB生長[11]。Fe是MTB體內(nèi)多種酶的氧化還原輔助因子，也是MTB在巨噬細胞中生長的必需元素[15]。Kurthkoti等[16]發(fā)現(xiàn)，結(jié)核肉芽腫中存在“Fe限制”環(huán)境，該環(huán)境中MTB對Fe的獲取受限從而阻礙MTB生長；超高液相色譜-質(zhì)譜(UPLC-MS)聯(lián)合轉(zhuǎn)錄組學(xué)測序技術(shù)(RNAseq)研究發(fā)現(xiàn)，MTB通過對蛋白質(zhì)中Fe的重吸收利用來抵抗這一不利環(huán)境。由此可見，宿主細胞既為MTB提供營養(yǎng)，又通過一系列策略消滅MTB，探索二者之間的關(guān)系對未來抗結(jié)核治療具有重要意義。

三、 MTB耐藥性的相關(guān)研究

MTB耐藥性是“消滅結(jié)核病”的一大障礙。編碼藥物作用靶分子的基因產(chǎn)生突變是目前MTB耐藥性形成的主要原因，但臨床上依然有5%～35%的MTB耐藥性形成不能用已知的基因突變解釋[17]。代謝組學(xué)已成為尋找未知MTB耐藥機制的有力工具。Nandakumar等[18]基于液相色譜-飛行時間質(zhì)譜(LC-TOF-MS)技術(shù)對抗結(jié)核藥物作用的MTB內(nèi)源代謝庫進行表征，發(fā)現(xiàn)MTB內(nèi)部的異檸檬酸裂解酶(ICL)能夠抵抗抗生素誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激，從而介導(dǎo)廣泛的抗生素耐受性。對于生理濃度下NaCl介導(dǎo)的MTB表型耐藥性，Larrouy-Maumus等[19]運用LC-MS聯(lián)合13C標記技術(shù)發(fā)現(xiàn)，一定濃度的NaCl可導(dǎo)致MTB三羧酸循環(huán)和糖異生途徑的廣泛改變，但這并非生理濃度下NaCl介導(dǎo)MTB表型耐藥性產(chǎn)生的原因。HPLC-MS的脂質(zhì)組學(xué)研究證實，質(zhì)膜和外膜脂質(zhì)重塑才是生理濃度下NaCl介導(dǎo)MTB表型耐藥性產(chǎn)生的原因。

表征MTB耐藥菌株的代謝特征能夠為未來耐藥結(jié)核病的治療尋找新的思路。rpoB、katG等基因的突變是導(dǎo)致MTB對INH、RFP等藥物產(chǎn)生耐藥性的主要原因[17]。Loots等[20-21]運用全二維氣相色譜-飛行時間質(zhì)譜(GC×GC-TOF MS)檢測方法分別對rpoB和katG基因突變誘導(dǎo)的對RFP和INH耐藥的菌株進行代謝監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)對RFP耐藥的菌株中當烏頭酸全部耗竭會導(dǎo)致MTB 的mRNA不穩(wěn)定，進而干擾MTB能量產(chǎn)生和代謝障礙，最終影響MTB生長；發(fā)現(xiàn)對INH耐藥的菌株中對羥基苯甲酸、尸胺等抗氧化應(yīng)激物質(zhì)增加，表明katG基因的缺失會導(dǎo)致INH耐藥菌株中氧化應(yīng)激增強，MTB可利用抗壞血酸合成途徑等多種途徑來抵抗增強的氧化應(yīng)激。耐藥基因突變會造成MTB內(nèi)部較為特異的代謝改變，這些代謝改變很可能成為未來治療耐藥結(jié)核病的干擾靶標。

四、代謝組學(xué)在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用

早診斷是早治療的前提，也是控制結(jié)核病傳播的關(guān)鍵。目前，臨床結(jié)核病實驗室的診斷方法主要有痰涂片鏡檢、PPD皮膚試驗和結(jié)核感染T細胞斑點試驗(T-SPOT.TB)。痰涂片鏡檢最為特異且操作簡便，但陽性率極低。PPD試驗易受機體免疫和卡介苗接種的影響而出現(xiàn)假陽性結(jié)果[22-23]。臨床敏感度和特異度較高的結(jié)核病診斷手段是T-SPOT.TB。有研究顯示，其敏感度和特異度可分別達到79.7%和85.5%，但由于操作復(fù)雜、成本昂貴使其在基層的推廣和應(yīng)用受限[24-25]。因此，亟待開發(fā)敏感、特異、且簡便快速的新型診斷方法。代謝組學(xué)是一種能對生物樣品中的代謝物進行無偏差多重分析和比較的新興技術(shù)，具有擴展診斷生物標記物庫的潛力[26]。利用代謝組學(xué)對機體代謝進行監(jiān)測并篩選異于常態(tài)的代謝診斷標記物是未來結(jié)核病診斷的新方向。

尿液樣本因代謝信息豐富、無創(chuàng)獲取、且便于保存而被廣泛應(yīng)用。Isa等[26]基于高效液相色譜-質(zhì)譜(HPLC-MS)技術(shù)確定了活動性肺結(jié)核患者尿液樣本中10種ROC曲線下面積值>85%的代謝物，最終發(fā)現(xiàn)N-乙?；禾前贰⑼僖核?、新喋呤和二乙?；返?種物質(zhì)聯(lián)合來區(qū)別活動性肺結(jié)核和非結(jié)核性肺病的敏感度和特異度都超過了82.0%。Luier和Loots[27]利用GCxGC-TOF MS鑒定了苯乙酸、色氨酸等17種泌尿系統(tǒng)結(jié)核的代謝標記物，表明結(jié)核病可引起患者機體脂肪酸和氨基酸特別是色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸的代謝異常，使患者具有與苯丙酮尿癥患者相似的代謝物譜。酪氨酸-苯丙氨酸途徑很可能是未來結(jié)核病診斷的潛在靶標。

血液是機體代謝物轉(zhuǎn)運的主要媒介。Feng等[28]利用超高效液相色譜-質(zhì)譜(UPLC-MS)對結(jié)核病患者血清進行分析，鑒定了包括溶血磷脂酰膽堿、棕櫚酸等12種特征代謝標記物，研究表明溶血磷脂酰膽堿、山崳酸、蘇氨酰-γ-谷氨酸、前角鯊烯二磷酸等四者的組合是區(qū)分活動性結(jié)核病最適合的生物標志物組。對難以診斷的小兒結(jié)核病，Sun等[29]發(fā)現(xiàn)t-纈氨酸，丙酮酸和甜菜堿等3種標志物組合可用于兒童結(jié)核病診斷，其敏感度與特異度分別為82.4%和83.9%。

呼出氣體是呼吸系統(tǒng)結(jié)核病最直接的樣本來源。Kuntzel等[30]基于氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)對接種分枝桿菌的培養(yǎng)基和對照組培養(yǎng)基上方的揮發(fā)性有機物(VOC)進行對比分析，鑒定了包括戊烷、庚烷等在內(nèi)的17種VOC作為顯示分枝桿菌生長的潛在生物標志物。這表明通過對患者呼出氣體的標本進行代謝物分析有望成為未來診斷呼吸系統(tǒng)結(jié)核病的新手段。

結(jié)核病是引起胸腔積液的主要原因之一。Wang等[31]基于1H-NMR技術(shù)對20例結(jié)核性胸腔積液、20例惡性胸腔積液及18例滲出性胸腔積液標本進行分析，鑒定了包括L-乳酸、果糖、L-絲氨酸在內(nèi)的26種特征代謝標記，其中乙酸、蛋氨酸、肌酸、檸檬酸、L-丙氨酸、LDL、L-乳酸、L-蘇氨酸等8種代謝物有助于區(qū)分上述3種胸腔積液。Che等[32]通過整合半靶向代謝組學(xué)平臺，并運用LC-MS/MS技術(shù)對156例患者胸腔積液標本(115例結(jié)核性胸腔積液、41例惡性胸腔積液)進行分析，發(fā)現(xiàn)結(jié)核性胸腔積液患者體內(nèi)來自色氨酸代謝的犬尿氨酸途徑顯著增強，該研究表明色氨酸/犬尿氨酸比率在區(qū)分結(jié)核性胸腔積液和惡性胸腔積液方面的特異度和敏感度可分別達到86.1%、92.7%，當與腺苷脫氨酶(ADA)聯(lián)合診斷結(jié)核性胸腔積液時其敏感度和特異度可達到91.3%、97.6%。

結(jié)核性腦膜炎(TBM)診斷或治療的延遲都可能導(dǎo)致嚴重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥甚至死亡。Li等[33]基于1H MR技術(shù)對比了TBM和病毒性腦膜炎(VM)患者腦脊液的代謝特征，最終鑒定了甘氨酸、葡萄糖、L-谷氨酰胺等25種可用于TBM鑒別診斷的潛在生物標志物。Mason等[34]基于高敏感度氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)對比了兒童TBM患者和對照組腦脊液的氨基酸譜，發(fā)現(xiàn)TBM患者腦脊液內(nèi)丙氨酸、天冬酰胺、甘氨酸、賴氨酸和脯氨酸等5種氨基酸水平顯著上升，該研究表明TBM患者中腦脊液中存在大量未開發(fā)的生化信息，通過GC-MS進行氨基酸譜分析對TBM的早診斷、早治療有重要意義。

五、代謝組學(xué)在結(jié)核病治療中的應(yīng)用

(一)抗結(jié)核藥物不良反應(yīng)的代謝組學(xué)研究

抗結(jié)核藥物不良反應(yīng)是抗結(jié)核治療失敗的重要原因，明確其不良反應(yīng)的產(chǎn)生機制對未來指導(dǎo)結(jié)核病治療具有積極意義。代謝組學(xué)能夠監(jiān)測藥物在機體的代謝狀況及藥物代謝引起的宿主代謝波動，在藥物不良反應(yīng)研究方面具有很大的價值。Rawat等[35]首次將MR技術(shù)應(yīng)用于吡嗪酰胺(PZA)對肝臟不良反應(yīng)產(chǎn)生機制的研究，發(fā)現(xiàn)PZA的代謝產(chǎn)物吡嗪酸(PA)及5-羥基吡嗪酸(5-OHPA)通過介導(dǎo)氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)來誘導(dǎo)大鼠肝不良反應(yīng)的產(chǎn)生，且5-OHPA誘導(dǎo)肝產(chǎn)生不良反應(yīng)的能力更強。有研究基于UPLC-MS方法發(fā)現(xiàn)抗結(jié)核藥物所致肝不良反應(yīng)與磷酸戊糖途徑、嘌呤代謝和嘧啶代謝通路有關(guān)，其中嘌呤代謝中的黃嘌呤氧化酶能夠促進超氧化物的形成從而加重PZA及內(nèi)源代謝物對產(chǎn)生肝不良反應(yīng)的效應(yīng)[36-37]。Ruan等[38]基于MR技術(shù)對INH產(chǎn)生急性不良反應(yīng)的大鼠血清和腦脊液進行分析，發(fā)現(xiàn)INH能夠以劑量依賴方式誘導(dǎo)氧化應(yīng)激、興奮/抑制性神經(jīng)遞質(zhì)紊亂、能量代謝紊亂及滲透壓平衡。Li等[39]利用超高效液相色譜(UPLC)-四極桿飛行時間質(zhì)譜(QTOF MS)發(fā)現(xiàn)高劑量的INH能夠以劑量依賴性方式引起小鼠肝臟線粒體功能障礙，以及血紅蛋白、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)等物質(zhì)積累，并能消耗肝臟中Vit B6從而阻斷Vit B6依賴的胱硫醚降解途徑。這些代謝改變都可能與INH誘導(dǎo)的肝不良反應(yīng)有關(guān)。目前的研究表明，藥物代謝能夠影響機體內(nèi)部眾多內(nèi)生代謝途徑從而增加肝損傷風險，藥物代謝產(chǎn)物在這一過程中扮演著重要角色。

(二)代謝組學(xué)與新型抗結(jié)核藥物開發(fā)

不良反應(yīng)及耐多藥結(jié)核病的產(chǎn)生需要研發(fā)新型抗結(jié)核藥物。但過去50年僅有德拉馬尼和貝達喹啉兩種新型抗結(jié)核藥物投入臨床(我國還未廣泛應(yīng)用)，這遠遠不足以抵抗當前結(jié)核病的流行。

代謝組學(xué)能對體內(nèi)藥物的定量代謝速率和相關(guān)代謝產(chǎn)物進行監(jiān)測，為藥物優(yōu)化提供依據(jù)，更好地指導(dǎo)抗菌素的設(shè)計和優(yōu)化[40]。目前，代謝組學(xué)已具有監(jiān)測異煙肼毒性的能力[41]。代謝組學(xué)還可用于諸多抗結(jié)核候選藥物未知機制的探索。例如Koen等[42-43]通過GC×GC-TOF MS方法證實了硫酸黏桿菌素和多黏菌素E主要通過破壞MTB細胞壁產(chǎn)生殺菌作用。Baptista等[44]發(fā)現(xiàn)pretomanid(一種新型抗結(jié)核藥)主要作用于磷酸戊糖途徑，最終導(dǎo)致有毒甲基乙二醛的積累。代謝組學(xué)還是尋找和評估新型藥物靶標的有力工具。例如Marshall等[45]基于NMR技術(shù)發(fā)現(xiàn)MTB細胞壁肽聚糖生成有關(guān)的D-丙氨酸途徑的關(guān)鍵酶丙氨酸消旋酶(Alr)不適合作為新型抗結(jié)核藥物的靶標，特定的Alr抑制劑也無殺菌效應(yīng)。Prosser等[46]也提出，現(xiàn)有Alr抑制劑BCDA(β-氯-d-丙氨酸)真正的藥物靶標是谷氨酸消旋酶(Murl)而非D-丙氨酸途徑。除此之外，為了更早且更有效地開發(fā)新型藥物，Zampieri等[47]開發(fā)了一種能對未知生物活性化合物的作用模式(MOAS)進行快速分類的系統(tǒng)性代謝分析策略，該策略能對生物活性化合物處理后的分枝桿菌的特異性代謝響應(yīng)進行分析，以鑒定該化合物的MOAS，最終加快藥物開發(fā)。

(三)代謝組學(xué)與抗結(jié)核藥物治療效果評估

抗結(jié)核藥物治療效果對患者預(yù)后及控制結(jié)核病傳播十分重要。代謝組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，在不同時間點接受抗結(jié)核藥物治療的患者尿液代謝譜呈現(xiàn)出明顯的治療依賴性趨勢，且痊愈的患者具有與健康患者相似的代謝特征[48]。結(jié)核病患者體內(nèi)的某些特異性代謝物水平也會隨著抗結(jié)核藥物的治療而下降[26]，表明代謝組學(xué)在結(jié)核病治療效果評價方面具有巨大潛力。近來Luies等[49]基于GC×GC-TOF MS對21例治療成功和10例治療失敗的結(jié)核病患者尿液代謝譜進行分析，鑒定了2種與腸道菌群失衡相關(guān)的代謝因子3,5-二羥基苯甲酸和3-(4-羥基-3-甲氧基苯基)丙酸，二者可在診療之前預(yù)測一線抗結(jié)核藥物治療能否成功。 Zetola等[50]將電子鼻(傳感器陣列)技術(shù)用于結(jié)核病診斷和治療效果監(jiān)測，通過將51例肺結(jié)核(31例為HIV陽性)患者在不同治療時間點的呼吸標本與健康者呼吸標本進行檢測分析，發(fā)現(xiàn)該方法區(qū)別結(jié)核病患者和健康者的敏感度與特異度分別為94.1%和90.0%，因為呼吸信號的改變是不同時間點觀察到的，所以該實驗表明其可以用于對抗結(jié)核藥物治療效果的監(jiān)測。

結(jié) 語

技術(shù)突破是實現(xiàn)“終止全球結(jié)核病流行”的關(guān)鍵。代謝組學(xué)是一種高通量、高敏感度的新興組學(xué)技術(shù)，能夠通過對機體內(nèi)源性代謝進行定量監(jiān)測來直觀地反映機體狀態(tài)。該技術(shù)目前已被廣泛應(yīng)用于結(jié)核病的研究，并在某些方面開始與轉(zhuǎn)錄組學(xué)等技術(shù)進行聯(lián)合研究。未來多組學(xué)技術(shù)聯(lián)合研究是組學(xué)技術(shù)的發(fā)展方向。

目前，代謝組學(xué)在結(jié)核病領(lǐng)域的研究還存在諸多問題。例如，現(xiàn)行研究尚處于小樣本范疇，已鑒定的診斷標記物等研究成果能否應(yīng)用于臨床尚需進行大樣本研究來加以驗證；代謝極易受到外界環(huán)境干擾，如何消除年齡、飲食等因素對代謝的影響是代謝組學(xué)面臨的困難；由于技術(shù)限制，目前還無法將研究標本中的代謝產(chǎn)物完全呈現(xiàn)并進行完整的代謝信息分析。盡管如此，隨著檢測和分析技術(shù)的不斷發(fā)展，代謝組學(xué)將極大地推動結(jié)核病防治領(lǐng)域的研究。