劉佳文 呂紅艷

·論著·

結(jié)核抗體檢測(cè)聯(lián)合結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)的臨床診斷價(jià)值

劉佳文 呂紅艷

目的探討結(jié)核抗體檢測(cè)聯(lián)合結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)(T-SPOT.TB)在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用價(jià)值。方法選擇2016年1月1日至2017年4月12日就診于北京老年醫(yī)院的961例結(jié)核病患者[結(jié)核病組；包括364例菌陽(yáng)肺結(jié)核患者(通過(guò)細(xì)菌學(xué)診斷確診)和597例菌陰肺結(jié)核患者(通過(guò)臨床進(jìn)行診斷)]和非結(jié)核病的1046例患者(對(duì)照組)。所有患者同時(shí)使用上海奧普生物醫(yī)藥有限公司及新加坡MP生物醫(yī)學(xué)亞太私人有限公司生產(chǎn)的結(jié)核抗體金標(biāo)試劑(分別為T(mén)B-DOT、ASSURE TB試劑盒)檢測(cè)血清中的結(jié)核抗體；961例結(jié)核病組中的574例及1046例對(duì)照組中的664例患者同時(shí)使用T-SPOT.TB試劑盒和2種結(jié)核抗體金標(biāo)試劑進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)兩組患者采用3種實(shí)驗(yàn)室技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)或聯(lián)合檢測(cè)(包括串聯(lián)與并聯(lián))，對(duì)檢測(cè)結(jié)果的敏感度、特異度進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果TB-DOT和ASSURE TB檢測(cè)結(jié)核病組和對(duì)照組患者的敏感度和特異度分別為52.86%(508/961)、74.95%(784/1046)和45.99%(442/961)、76.00%(795/1046)。TB-DOT 和ASSURE TB對(duì)菌陽(yáng)和菌陰肺結(jié)核患者檢測(cè)的敏感度分別為64.84%(236/364)、62.09%(226/364)和45.56%(272/597)、36.18%(216/597)；菌陽(yáng)肺結(jié)核患者TB-DOT和ASSURE TB檢測(cè)的敏感度均高于菌陰肺結(jié)核患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2值分別為60.99、33.69，P值均<0.05)。結(jié)核病組和對(duì)照組患者在2種結(jié)核抗體金標(biāo)試劑和T-SPOT.TB試劑盒的串聯(lián)聯(lián)合檢測(cè)中，敏感度為24.04%(138/574)，但特異度達(dá)到89.91%(597/664)；并聯(lián)聯(lián)合檢測(cè)中，特異度為21.23%(141/664)，但敏感度達(dá)到89.55%(514/574)。結(jié)核病組和對(duì)照組在ASSURE TB、TB-DOT和T-SPOT.TB 3種檢測(cè)方法中，均為陽(yáng)性和均為陰性兩種譜型的構(gòu)成比分別為24.04%(138/574)、10.09%(67/664)和10.45%(60/574)、21.23%(141/664)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2值分別為43.37和26.32，P值均<0.05)。結(jié)論兩種結(jié)核抗體與T-SPOT.TB行串聯(lián)聯(lián)合檢測(cè)能夠提高檢測(cè)特異度，并聯(lián)聯(lián)合檢測(cè)能夠提高檢測(cè)敏感度；串聯(lián)聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，3種檢測(cè)方法結(jié)果均為陽(yáng)性和均為陰性兩種譜型在臨床上對(duì)結(jié)核病血清學(xué)診斷具有輔助診斷價(jià)值。

結(jié)核； 抗體； 干擾素γ； 試劑盒,診斷； 診斷技術(shù)和方法； 數(shù)據(jù)說(shuō)明,統(tǒng)計(jì)

近年來(lái)，血清學(xué)(抗原、抗體、蛋白芯片)檢測(cè)方法診斷活動(dòng)性結(jié)核病和肺外結(jié)核，在國(guó)內(nèi)外重新得到重視和研究，對(duì)其臨床意義和價(jià)值有了新的評(píng)價(jià)，認(rèn)為血清學(xué)檢測(cè)依然是結(jié)核病輔助診斷的重要手段之一[1]。

本研究通過(guò)回顧性分析，評(píng)價(jià)兩種結(jié)核抗體檢測(cè)試劑[上海奧普生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)的結(jié)核抗體金標(biāo)試劑(TB-DOT)和新加坡MP生物醫(yī)學(xué)亞太私人有限公司生產(chǎn)的結(jié)核抗體金標(biāo)試劑(ASSURE TB)]與結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)(T-SPOT.TB)聯(lián)合檢測(cè)在結(jié)核病輔助診斷中的臨床價(jià)值。

資料和方法

一、研究對(duì)象及診斷標(biāo)準(zhǔn)

1.研究對(duì)象：回顧性分析2016年1月1日至2017年4月12日就診于北京老年醫(yī)院結(jié)核門(mén)診和住院患者中同時(shí)采用TB-DOT和ASSURE TB兩種結(jié)核抗體進(jìn)行診斷的2007例患者。2007例患者中，診斷為結(jié)核病的患者961例(其中，菌陽(yáng)肺結(jié)核患者364例，均通過(guò)細(xì)菌學(xué)診斷確診；菌陰肺結(jié)核患者597例，均通過(guò)臨床進(jìn)行診斷；961例患者中同時(shí)行T-SPOT.TB檢測(cè)的患者574例)，診斷為非結(jié)核病的患者1046例(同時(shí)行T-SPOT.TB檢測(cè)的患者664例)。

2.分組情況：(1)結(jié)核病組：共961例；其中男644例，女317例，年齡13～94歲，平均年齡(50.33±22.09)歲。961例患者中，菌陽(yáng)肺結(jié)核患者364例，其中男261例，女103例，年齡14～91歲，平均年齡(51.52±22.55)歲；菌陰肺結(jié)核患者597例，其中男383例，女214例，年齡13～94歲，平均年齡(49.62±21.78)歲。(2)非結(jié)核病患者(對(duì)照組)1046例，其中男673例，女373例，年齡15～96歲，平均年齡(56.78±22.81)歲。包括肺部感染445例，慢性阻塞性肺疾病70例，慢性咳嗽46例，非結(jié)核性胸腔積液46例，發(fā)熱40例，煤工塵肺22例，細(xì)菌性肺炎17例，支氣管哮喘14例，慢性支氣管炎11例，矽肺9例，支氣管擴(kuò)張6例，其他疾病(包括肺癌、呼吸道出血、病毒性感冒等)320例。

3.診斷標(biāo)準(zhǔn)：(1)菌陽(yáng)肺結(jié)核：涂片和(或)培養(yǎng)陽(yáng)性且對(duì)硝基苯甲酸(PNB)試驗(yàn)陰性和噻吩-2羧酸肼(TCH)試驗(yàn)陽(yáng)性。(2)菌陰肺結(jié)核：以中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)核病學(xué)分會(huì)制定的《肺結(jié)核診斷和治療指南》[2]為依據(jù)，3次痰涂片及1次痰培養(yǎng)均為陰性的肺結(jié)核，具體診斷標(biāo)準(zhǔn)為：①典型肺結(jié)核臨床癥狀和胸部X線表現(xiàn)；②抗結(jié)核藥物治療有效；③臨床可排除其他非結(jié)核性肺部疾?。虎躊PD(5 IU)皮膚試驗(yàn)強(qiáng)陽(yáng)性，血清抗結(jié)核抗體陽(yáng)性；⑤痰結(jié)核分枝桿菌PCR+探針檢測(cè)呈陽(yáng)性；⑥肺外組織病理證實(shí)為結(jié)核病變；⑦支氣管肺泡灌洗液(BALF)檢出抗酸分枝桿菌；⑧支氣管或肺部組織病理證實(shí)結(jié)核病變。具備1～6條中的3項(xiàng)或7～8條中任何1項(xiàng)可確診。(3)非結(jié)核病患者：排除結(jié)核病診斷的呼吸系統(tǒng)疾病患者。

二、試劑及方法

1.試劑：結(jié)核分枝桿菌抗體檢測(cè)試劑盒采用上海奧普生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)的結(jié)核分枝桿菌抗體診斷試劑盒(膠體金法；TB-DOT)及新加坡MP生物醫(yī)學(xué)亞太私人有限公司生產(chǎn)的結(jié)核分枝桿菌抗體檢測(cè)試劑盒(膠體金法；ASSURE TB)進(jìn)行檢測(cè)。T-SPOT.TB試劑盒由英國(guó)牛津大學(xué)生產(chǎn)，上海復(fù)興醫(yī)藥股份有限公司提供。

2.TB-DOT檢測(cè)：采用純化的結(jié)核分枝桿菌特異性外膜抗原，利用斑點(diǎn)免疫膠體金滲濾技術(shù)檢測(cè)結(jié)核IgG抗體，嚴(yán)格按照該試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。方法如下：(1)在檢測(cè)板的反應(yīng)孔中間，加入2滴封閉液，等待薄膜吸入；(2)取40 μl新鮮的血清標(biāo)本，加入反應(yīng)孔中間，等待薄膜吸入；(3)在反應(yīng)孔中間，加入6滴洗滌液，等待薄膜吸入；(4)在反應(yīng)孔中間，加入2滴金標(biāo)液，等待薄膜吸入；(5)在反應(yīng)孔中間，加入6滴洗滌液，等待薄膜吸入，目測(cè)判斷結(jié)果。

3.ASSURE TB檢測(cè)：采用ASSURE TB結(jié)核抗體金標(biāo)試劑，嚴(yán)格按照該試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。步驟如下：(1)試劑盒及標(biāo)本恢復(fù)至室溫；(2)從原包裝鋁箔袋中取出試劑盒，應(yīng)在1 h內(nèi)盡快使用；(3)試劑盒置于干凈平坦的桌面上，用一次性塑料吸管垂直滴加25 μl無(wú)氣泡的標(biāo)本于試劑盒的加樣孔1內(nèi)；(4)當(dāng)樣品前沿剛剛越過(guò)粉紅色質(zhì)控線時(shí)加入3滴緩沖液；(5)拉下分離片直到感覺(jué)有阻力；(6)加1滴緩沖液于孔1中，測(cè)試結(jié)果應(yīng)在15 min時(shí)讀取。陽(yáng)性：AB或AC二條紅色條帶出現(xiàn)或ABC三條紅色條帶出現(xiàn)。B線和C線位于測(cè)試區(qū)(T)內(nèi)，A線位于質(zhì)控區(qū)(C)。結(jié)果表明標(biāo)本中含結(jié)核分枝桿菌抗體。

4.T-SPOT.TB檢測(cè)：嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作六步法。首先是外周血單個(gè)核細(xì)胞分離制備，其次是單個(gè)核細(xì)胞洗滌和計(jì)數(shù)，然后是制備工作濃度細(xì)胞懸液，再將細(xì)胞懸液和抗原加入微孔培養(yǎng)板，置于37 ℃，于5% CO2培養(yǎng)箱中孵育過(guò)夜，洗滌微孔板并加入酶標(biāo)抗體，再洗滌微孔板加入底物反應(yīng)液，最后進(jìn)行斑點(diǎn)計(jì)數(shù)。根據(jù)抗原A和(或)抗原B孔的反應(yīng)判斷結(jié)果：陰性對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)為0～5，陽(yáng)性樣本應(yīng)為：抗原A或抗原B斑點(diǎn)數(shù)-陰性對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)≥6；當(dāng)陰性對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)≥6，陽(yáng)性樣本應(yīng)為：抗原A或抗原B斑點(diǎn)數(shù)≥2×陰性對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)。

5.聯(lián)合檢測(cè)：961例結(jié)核病組患者中有574例、1046例對(duì)照組患者中有664例同時(shí)進(jìn)行2種結(jié)核抗體(TB-DOT、ASSURE TB)和T-SPOT.TB檢測(cè)。(1)串聯(lián)試驗(yàn)：形成8種不同的結(jié)果類(lèi)型，即8種譜型；ASSURE TB、TB-DOT和T-SPOT.TB檢測(cè)的結(jié)果均為陽(yáng)性視為陽(yáng)性，任意一項(xiàng)結(jié)果為陰性(7種譜型)視為陰性。(2)并聯(lián)試驗(yàn)：2種結(jié)核抗體(ASSURE TB、TB-DOT)和T-SPOT.TB的檢測(cè)結(jié)果，任意一項(xiàng)為陽(yáng)性視為陽(yáng)性；檢測(cè)結(jié)果均為陰性視為陰性。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS 17.0軟件對(duì)各項(xiàng)資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、兩種結(jié)核抗體診斷結(jié)核病的結(jié)果

兩組患者兩種抗體檢測(cè)結(jié)果分布情況見(jiàn)表1。ASSURE TB和TB-DOT金標(biāo)試劑檢測(cè)的敏感度分別為45.99%(442/961)、52.86%(508/961)，特異度分別為76.00%(795/1046)、74.95%(784/1046)，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值分別為63.78%(442/693)、65.97%(508/770)，陰性預(yù)測(cè)值分別為60.50%(795/1314)、63.38%(784/1237)，一致率分別為61.63%(1237/2007)、64.37%(1292/2007)。

ASSURE TB和TB-DOT試劑盒檢測(cè)菌陽(yáng)肺結(jié)核患者的陽(yáng)性率分別為62.09%(226/364)、64.84%(236/364)，明顯高于菌陰肺結(jié)核患者的36.18%(216/597)、45.56%(272/597)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2值分別為60.99、33.69，P值均<0.05)。

二、結(jié)核抗體檢測(cè)聯(lián)合T-SPOT.TB診斷結(jié)核病的結(jié)果

結(jié)核病組與對(duì)照組同時(shí)采用兩種結(jié)核抗體金標(biāo)試劑與T-SPOT.TB聯(lián)合檢測(cè)的結(jié)果見(jiàn)表2、3。

兩組患者檢測(cè)兩種結(jié)核抗體金標(biāo)試劑與T-SPOT.TB試劑盒，行串聯(lián)試驗(yàn)時(shí)，如表2所示，當(dāng)ASSURE TB、TB-DOT和T-SPOT.TB 三項(xiàng)結(jié)果均為陽(yáng)性時(shí)，構(gòu)成比為24.04%，即敏感度為24.04%(138/574)，特異度達(dá)到89.91%(597/664)；兩組之間當(dāng)ASSURE TB、TB-DOT和T-SPOT.TB 三項(xiàng)結(jié)果均為陽(yáng)性和均為陰性時(shí)，兩種譜型的構(gòu)成比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

兩組患者檢測(cè)兩種結(jié)核抗體金標(biāo)試劑與T-SPOT.TB試劑盒，行并聯(lián)試驗(yàn)時(shí)，如表3所示，當(dāng)ASSURE TB、TB-DOT和T-SPOT.TB 三項(xiàng)結(jié)果任意一項(xiàng)為陽(yáng)性時(shí)，其敏感度高達(dá)89.55%(514/574)，但特異度僅為21.23%(141/664)。

表1 不同組別患者采用兩種結(jié)核抗體金標(biāo)試劑的檢測(cè)結(jié)果

注“合計(jì)”指ASSURE TB與TB-DOT檢測(cè)結(jié)果任意一項(xiàng)為陽(yáng)性

表2 兩種結(jié)核抗體與T-SPOT.TB試劑盒檢測(cè)不同譜型在結(jié)核病組與對(duì)照組中的構(gòu)成情況

注結(jié)核病組中574例(包括菌陽(yáng)肺結(jié)核患者189例，通過(guò)細(xì)菌學(xué)確診；菌陰肺結(jié)核患者385例，通過(guò)臨床進(jìn)行診斷)同時(shí)進(jìn)行了ASSURE TB、TB-DOT、T-SPOT.TB檢測(cè)；對(duì)照組中664例同時(shí)進(jìn)行了ASSURE TB、TB-DOT、T-SPOT.TB檢測(cè)

表3 兩種結(jié)核抗體與T-SPOT.TB試劑盒單獨(dú)、串聯(lián)及并聯(lián)檢測(cè)結(jié)核病組與對(duì)照組患者的診斷價(jià)值

注結(jié)核病組中574例(包括菌陽(yáng)肺結(jié)核患者189例，通過(guò)細(xì)菌學(xué)確診；菌陰肺結(jié)核患者385例，通過(guò)臨床進(jìn)行診斷)同時(shí)進(jìn)行了ASSURE TB、TB-DOT、T-SPOT.TB檢測(cè)；對(duì)照組中664例同時(shí)進(jìn)行了ASSURE TB、TB-DOT、T-SPOT.TB檢測(cè)。敏感度=真陽(yáng)性例數(shù)/(真陽(yáng)性例數(shù)+假陰性例數(shù))×100%，特異度=真陰性例數(shù)/(真陰性例數(shù)+假陽(yáng)性例數(shù))×100%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值=真陽(yáng)性例數(shù)/(真陽(yáng)性例數(shù)+假陽(yáng)性例數(shù))×100%，陰性預(yù)測(cè)值=真陰性例數(shù)/(真陰性例數(shù)+假陰性例數(shù))×100%

討 論

2017年6月30日，“全國(guó)結(jié)核病診療與防控暨第二屆中西醫(yī)結(jié)合治療基礎(chǔ)與臨床新進(jìn)展研討會(huì)”在宜昌市召開(kāi)，會(huì)議期間召開(kāi)了“結(jié)核抗體檢測(cè)專(zhuān)家共識(shí)討論會(huì)”，血清結(jié)核抗體檢測(cè)的臨床輔助診斷價(jià)值得到與會(huì)專(zhuān)家的一致認(rèn)可。但是目前國(guó)內(nèi)結(jié)核抗體在生產(chǎn)和檢驗(yàn)使用中存在亂象，促使大家重新去審視結(jié)核抗體在國(guó)內(nèi)應(yīng)用的現(xiàn)狀，思考其在臨床診斷中的影響因素和存在問(wèn)題，以及怎樣使用結(jié)核抗體，筆者就這些問(wèn)題也做了一些思考。

筆者認(rèn)為，雖然目前應(yīng)用血清學(xué)檢測(cè)方法來(lái)診斷活動(dòng)性結(jié)核病和肺外結(jié)核有一定的局限性，但是血清學(xué)仍然是臨床實(shí)驗(yàn)室診斷的重要補(bǔ)充。血清學(xué)檢測(cè)在提高試劑盒檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定性的基礎(chǔ)上，還有提高其敏感度和特異度的必要，以及拓展更多的臨床意義。

結(jié)核抗體檢測(cè)試劑注冊(cè)申報(bào)需要三項(xiàng)重要的技術(shù)資料，為主要原材料研究資料、分析性能評(píng)估資料和臨床試驗(yàn)資料[1]。但是，即使是有注冊(cè)證的試劑，試劑相同、分組相同，不同的研究獲得的敏感度差異也很大，對(duì)于臨床上不同的結(jié)核抗體檢測(cè)結(jié)果，差異就會(huì)更大，所以結(jié)核抗體應(yīng)用的標(biāo)準(zhǔn)化需要走很長(zhǎng)的路。本研究結(jié)果顯示，TB-DOT試劑盒對(duì)菌陽(yáng)肺結(jié)核和菌陰肺結(jié)核患者檢測(cè)的敏感度分別為64.84%、45.56%，但同樣是采用TB-DOT 試劑盒，不同研究對(duì)菌陽(yáng)肺結(jié)核和菌陰肺結(jié)核患者檢測(cè)的敏感度差異也很大，分別為97%和86.8%[3]、88.3%和73.5%[4]、81.9%和73.3%[5]、80.0%和52.5%[6]，以及66.7%和63.6%[7]。其中熊峻峰[4]報(bào)道的研究條件(時(shí)間跨度和例數(shù))與本研究較為相似，但結(jié)果(分別為88.3%、64.84%和73.5%、45.56%)差異很大。出現(xiàn)較大的差異，一部分來(lái)源于試劑使用的關(guān)鍵性風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)，如楊蕾等[8]指出結(jié)核病診斷中酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)存在受試者的病原學(xué)狀態(tài)、抗結(jié)核藥物治療進(jìn)程和是否使用免疫抑制劑等關(guān)鍵性風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)。此外，環(huán)境設(shè)施、儀器耗材和檢測(cè)方法涉及到試劑的儲(chǔ)存運(yùn)輸、實(shí)驗(yàn)操作和質(zhì)量控制，也可能影響到酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)試劑的檢測(cè)結(jié)果。

要解決這個(gè)問(wèn)題，筆者認(rèn)為在實(shí)際工作中必須做好幾件事情。首先，應(yīng)該做試劑盒的性能驗(yàn)證，應(yīng)該與原理相同質(zhì)量公認(rèn)的試劑盒做比對(duì)，還要做好室內(nèi)質(zhì)量控制。其次，需要撰寫(xiě)操作手冊(cè)文件，培訓(xùn)員工，做好記錄。再次，需要對(duì)工作環(huán)境、存放試劑冰箱溫度嚴(yán)加控制。就此建立起一套完整的質(zhì)量體系，才能從根本上解決結(jié)核抗體在檢驗(yàn)科使用的亂象，才能保證不同實(shí)驗(yàn)室間結(jié)果的可比性。加強(qiáng)質(zhì)量控制，不僅同一試劑盒在實(shí)驗(yàn)室間的結(jié)果能具有可比性，不同的試劑盒結(jié)果也可有一定的可比性。如本研究的TB-DOT和ASSURE TB試劑盒的檢測(cè)結(jié)果，敏感度為52.86%、45.99%，特異度為74.95%、76.00%，具有可比性。

TB-DOT檢測(cè)主要針對(duì)外膜抗原，而ASSURE TB檢測(cè)主要針對(duì)38 kDa抗原(相對(duì)分子質(zhì)量為38 000 的抗原，簡(jiǎn)稱為“38 kDa抗原”)，而T-SPOT.TB試驗(yàn)是針對(duì)早期分泌抗原靶蛋白6(ESAT-6)和培養(yǎng)濾液蛋白10(CFP 10)。2種結(jié)核抗體檢測(cè)在菌陰肺結(jié)核和菌陽(yáng)肺結(jié)核患者的檢測(cè)中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，有利于結(jié)核病療效的監(jiān)測(cè)。這與劉毅等[9]報(bào)道的38 kDa蛋白血清抗體檢測(cè)在診斷活動(dòng)性肺結(jié)核上有較好的診斷和應(yīng)用價(jià)值的結(jié)果一致。劉毅等[9]同時(shí)也指出3種蛋白(38 kDa、線粒體通透性轉(zhuǎn)換蛋白64、肝素結(jié)合血凝素蛋白)在結(jié)核感染和發(fā)病中具有不同的臨床應(yīng)用和診斷價(jià)值，并聯(lián)分析會(huì)提高檢測(cè)的敏感度。同理，當(dāng)2種結(jié)核分枝桿菌抗體與T-SPOT.TB聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，可以提高結(jié)核病診斷檢出率。本研究顯示，3種檢測(cè)技術(shù)并聯(lián)應(yīng)用時(shí)，檢測(cè)敏感度達(dá)到了89.55%，3種檢測(cè)技術(shù)串聯(lián)檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)特異度達(dá)到了89.91%。此外，串聯(lián)檢測(cè)會(huì)形成多種不同的譜型，可以初步掌握結(jié)核病組與對(duì)照組之間的差異譜型，為今后將譜型用于結(jié)核病的輔助診斷提供研究基礎(chǔ)。

機(jī)體感染結(jié)核分枝桿菌后體液免疫被激活，產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，但由于結(jié)核分枝桿菌菌體結(jié)構(gòu)復(fù)雜，抗原成分多種多樣，此外個(gè)體的免疫背景不同也會(huì)表現(xiàn)出不同的抗體譜[10]。結(jié)核抗體譜的意義會(huì)在將來(lái)開(kāi)發(fā)出來(lái)。所以未來(lái)應(yīng)研究多種抗原并聯(lián)檢測(cè)患者血清中的多個(gè)抗體的試劑盒，以提高檢測(cè)敏感度為目的，未來(lái)結(jié)核抗體檢測(cè)研究還應(yīng)分析不同抗體譜在結(jié)核病患者不同階段的應(yīng)用價(jià)值。

由于本研究資料有限，只是分析了結(jié)核病患者與非結(jié)核病患者結(jié)核抗體與T-SPOT.TB聯(lián)合檢測(cè)各種譜型組合后的結(jié)果。結(jié)核病患者與非結(jié)核病患者在兩種結(jié)核抗體和T-SPOT.TB試劑盒聯(lián)合檢測(cè)的各種譜型中，當(dāng)3項(xiàng)結(jié)果均為陽(yáng)性和均為陰性時(shí)兩種譜型的構(gòu)成比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其他譜型的意義目前還不明確。分析譜型在臨床方面的應(yīng)用由于缺乏資料，還有待于進(jìn)一步研究。

筆者大膽預(yù)測(cè)，未來(lái)會(huì)建立更多標(biāo)準(zhǔn)的單獨(dú)的結(jié)核抗體檢測(cè)體系，通過(guò)研究它們組成的各種譜型在潛伏性結(jié)核感染與活動(dòng)性結(jié)核病患者、初治結(jié)核病患者與復(fù)治結(jié)核病患者之間的差異，找到各自在治療監(jiān)測(cè)中的作用，將能夠更好地為臨床服務(wù)。

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EvaluationoftwoserologicaltestsandT-SPOT.TBmethodfortuberculosisdiagnosis

LIUJia-wen,LYUHong-yan.

DepartmentofClinicalLabortory,BeijingGeriatricHospital,Beijing100095，China

LIUJia-wen,Email：no818@163.com

ObjectiveTo explore the value of tuberculosis antibody (TB-Ab) detection and T-SPOT.TB test in TB diagnosis.MethodsBetween January 1,2016 and April 12,2017 in Beijing Geriatric Hospital,961 TB patients (defined as TB group; including 364 smear positive pulmonary TB cases (bacteriologically diagnosed) and 597 smear negative pulmonary TB cases (clinically diagnosed)) and 1046 non-TB patients (defined as control group) were included in this study.All subjects conducted serological TB-Ab detection by using TB-DOT (Shanghai Upper Bio-Tech Pharma Co.,LTD) and ASSURE TB (MP Biomedicals Asia Pacific Pte Ltd.in Singapore) kits; among them,574 patients in the TB group and 664 patients in the non-TB control group

both T-SPOT.TB test and TB-Ab detections using the two gold standard reagents.The sensitivity and specificity of those three kinds of laboratory detection techniques or joint detection (including tandem detection and parallel detection) were analyzed.ResultsThe sensitivity and specificity of TB-DOT test were 52.86% (508/961) and 74.95% (784/1046),and those of ASSURE TB test were 45.99% (442/961) and 76.00% (795/1046).The sensitivity of TB-DOT and ASSURE TB were 64.84% (236/364) and 62.09% (226/364) for smear positive pulmonary TB patients versus 45.56% (272/597) and 36.18% (216/597) for smear negative pulmonary TB patients,which indicated that the sensitivity of TB-DOT and ASSURE TB was higher for smear positive patients compared with smear negative ones; the differences were statistically significant (χ2=60.99 and 33.69,allP<0.05).Tandem detection of two TB-Ab detections and T-SPOT.TB showed a sensitivity of 24.04% (138/574) and a high specificity of 89.91% (597/664).The parallel detection had a specificity of 21.23% (141/664) and a high sensitivity of 89.55% (514/574).24.04% (138/574) patients in the TB group and 10.09% (67/664) patients in the non-TB control group reacted positively in all of the three tests including ASSURE TB,TB-DOT and T-SPOT.TB detection,while 10.45% (60/574) cases in the TB group and 21.23% (141/664) cases in the non-TB control group reacted negatively; the differences were statistically significant (χ2=43.37 and 26.32,allP<0.05).ConclusionTandem of two TB-Ab detections and T-SPOT.TB test can improve the specificity,whereas parallel detection can improve the sensitivity in TB diagnosis.All positive and all negative profile in all of the three detections has an auxiliary value in serological diagnosis of TB.

Tuberculosis; Antibodies; Interferon-gamma; Reagent kits,diagnostic; Diagnostic techniques and procedures; Data interpretation,statistical

10.3969/j.issn.1000-6621.2018.01.008

100095 北京老年醫(yī)院檢驗(yàn)科

劉佳文，Email：no818@163.com

2017-08-11)

郭萌)