王曉華，騫田

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·論著·

Rh系統(tǒng)類抗體在臨床輸血中的鑒定及應(yīng)用(附1例分析)

王曉華，騫田

目的：通過對1例自身免疫性溶血性貧血患者(AIHA)Rh系統(tǒng)類抗體的鑒定與分析，指導(dǎo)臨床安全、有效地用血。方法：應(yīng)用鹽水法、抗人球蛋白法及酸放散等試驗對患者血漿和放散液中的抗體進行鑒定，并結(jié)合其自身紅細(xì)胞血型抗原分析其抗體特異性。結(jié)果：患者血漿及放散液中抗體具有抗-D特異性，且自身紅細(xì)胞抗原RhD為陽性，具備Rh血型系統(tǒng)類抗體的血清學(xué)特征，經(jīng)鑒定為類抗-D抗體。予D抗原陰性血液配合性輸注，臨床輸注有效。結(jié)論：少數(shù)AIHA患者自身抗體具有類Rh血型系統(tǒng)特異性，在臨床輸血中應(yīng)予相應(yīng)抗原陰性的血液配合性輸注，保障臨床用血安全、有效。

自身免疫性溶血性貧血；Rh血型系統(tǒng)； 類抗體； 輸血

臨床輸血過程中，經(jīng)常會遇到自身免疫性溶血性貧血患者輸血治療的情況，該類患者血漿中的自身抗體大多數(shù)沒有特異性，與自身紅細(xì)胞凝集，也與所有供者的紅細(xì)胞凝集，這就增加的配血的難度，很難找到相容的血液制品；也有極少數(shù)的自身抗體有類似于血型抗體的“特異性”。筆者就近期實驗工作中遇到的1例類Rh系統(tǒng)的自身抗體鑒定分析如下。

1 資料與方法

1.1 資料 患者女，56歲。于2016年2月因腦梗塞入院，后追加診斷自身免疫性溶血性貧血；患者入院后備血,抗體篩查結(jié)果為陽性。

1.2 方法 (1)儀器及試劑：TD-3A型微柱孵育器，F(xiàn)TQ型離心機(長春博研)，離心機(KUBOTA KA-220)、DK-600型電熱恒溫水槽；抗球蛋白微柱凝膠卡(長春博訊)；單克隆抗-A，抗-B，ABO反定型細(xì)胞，單克隆抗-D(IgM)，抗-E，抗-C，抗-e，抗-c，抗人球蛋白試劑、不規(guī)則抗體篩檢細(xì)胞(20157041)、譜細(xì)胞(批號20160104)以上試劑均為上海血液生物產(chǎn)品，酸放散試劑盒(長春博訊)，各種試劑均在有效期之內(nèi)使用。(2)實驗方法：血型鑒定采用鹽水試管法和微柱凝膠法，不規(guī)則抗體篩選試驗及交叉配血分別采用鹽水試管法、抗人球蛋白凝膠技術(shù)檢測。用鹽水法和微柱凝膠抗球蛋白法對標(biāo)本進行抗體篩檢和鑒定。直接抗人球蛋白試驗同時使用多抗和單抗-IgG和抗-C3檢測，對抗-IgG陽性患者紅細(xì)胞進行酸放散，方法按照操作說明書，對放散液進行抗體檢測。

2 結(jié)果

2.1 血型鑒定 患者血型為AB型，RhD陽性，Rh表型CcDEe，直接抗人球蛋白試驗：多抗及抗-IgG均為陽性，抗-C3為陰性。見表1。

2.2 抗體篩選 取患者血清與篩選細(xì)胞及自身細(xì)胞在鹽水介質(zhì)反應(yīng)為陰性，抗人球蛋白方法均為陽性。見表2。

2.3 抗體鑒定及放散實驗 為進一步確定該抗體有無特異性，取患者血清與譜細(xì)胞在鹽水介質(zhì)及抗人球蛋白介質(zhì)反應(yīng)，結(jié)果7，9號為陰性反應(yīng)，其余細(xì)胞均為陽性反應(yīng)，根據(jù)反應(yīng)格局，說明患者血清中存在類抗-D抗體。采用酸放散的方法對患者紅細(xì)胞進行放散，放散液與譜細(xì)胞反應(yīng)，如果濃度太高，進行稀釋。放散液反應(yīng)格局同血清，放散液中抗體特異性與血清中一致。見表3。

表1 ABO和Rh血型鑒定及直接抗球蛋白試驗結(jié)果

表2 抗體篩選結(jié)果

表3 抗體鑒定結(jié)果

2.4 交叉配血實驗 選擇與患者同型的AB型RhD陰性的供血者洗滌紅細(xì)胞進行交叉配血實驗，鹽水法、抗人球蛋白法主側(cè)均為陰性，同時加一RhD陽性懸浮紅細(xì)胞做對照，鹽水法主側(cè)均無凝集溶血，抗人球法主側(cè)凝集，進一步驗證了類抗-D抗體存在。經(jīng)血液配合性實驗，為患者備血2個單位，輸注效果良好，無輸血反應(yīng)，血紅蛋白有所上升。后患者經(jīng)激素及其他等對癥治療之后情況好轉(zhuǎn)，未再輸血。

3 討論

自身免疫性溶血性貧血(AIHA)是機體免疫功能調(diào)節(jié)紊亂，產(chǎn)生了針對自身紅細(xì)胞的抗體和(或)補體，自身抗體吸附于紅細(xì)胞表面導(dǎo)致紅細(xì)胞溶血[1]。該類患者血漿中的自身抗體大多數(shù)沒有特異性，與自身紅細(xì)胞及所有供者的紅細(xì)胞凝集；也有少部分自身抗體具有“特異性”，即類同種特異性自身抗體?；颊哐蜑锳B型，RhD陽性，抗體篩查結(jié)果為陽性，進一步譜細(xì)胞血清和放散液抗體鑒定發(fā)現(xiàn)具有抗-D特異性，而患者血型為RhD陽性，這與自身血型結(jié)果相矛盾?；颊邌慰?IgG陽性，對其紅細(xì)胞進行放散，結(jié)果放散液中抗體特異性同血清中一致，可排除同種抗體的存在[2]。另外，患者貧血嚴(yán)重，取其紅細(xì)胞做自身抗體吸收不太可取，患者血清血清中抗體量少(血清與譜紅細(xì)胞反應(yīng)強度≤1+)，其強度不足以掩蓋明顯的同種抗體,因此我們未進行自身吸收試驗[3]?；颊邽樽陨砻庖咝匀茇毣颊撸蜃陨砻庖咝匝苎讓?dǎo)致腦出血，結(jié)合病史，考慮該抗體為類同種特異性自身抗體。

Rh系統(tǒng)是血型系統(tǒng)中最復(fù)雜的血型系統(tǒng)，少數(shù)AIHA患者的自身抗體具有的血型特異性以Rh特異性為多見[4]。Rh系統(tǒng)中又以類抗-e抗體最常見[5]，其次抗-c,-E,-D,-C均可見報道。關(guān)于產(chǎn)生類抗-D抗體產(chǎn)生的機制尚未明確，有報道認(rèn)為可能與D抗原D變異體有關(guān)，D變異體導(dǎo)致D抗原表達(dá)減弱或者性質(zhì)上的改變，這些個體都有可能出現(xiàn)類D抗體，其產(chǎn)生的原因還有待進一步探討[6]。

AIHA患者輸血的危險性遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于普通患者,輸血不當(dāng)就會加重溶血。因此，對AIHA的輸血治療應(yīng)嚴(yán)格掌握其輸血指征,要充分考慮其輸血的必要性和危險性[7]。大多數(shù)AIHA患者自身抗體沒有特異性，在病情危急緊急輸血時，配血方案采取最低不相容原則即選取凝集度最低的血液少量輸注。輸注時放慢速度，密切觀察。對于少數(shù)AIHA患者自身抗體有類特異性，我們在為患者輸血時，應(yīng)選擇配合型血液輸注，先不必考慮患者自身相應(yīng)的抗原，避開類抗體特異性的紅細(xì)胞抗原進行輸注。有報道認(rèn)為避開類抗體特異性的紅細(xì)胞可以明顯延長體內(nèi)存活時間，國內(nèi)報道的類抗體方面的文獻(xiàn)還是以主張避開類抗體方案為主[3]也有人主張類同種自身抗體AIHA患者可能不引起急性或延遲溶血性輸血反應(yīng)。如果AIHA患者血清中只含有類同種自身抗體，不一定要輸注抗原陰性紅細(xì)胞，有同種抗體的患者才有必要輸注抗原陰性紅細(xì)胞，上述觀點只是一種推測，還需要大量的實驗來證實[8]?；颊哂蓄惪?D抗體，經(jīng)血液配合性實驗，為之備AB型RhD陰性洗滌紅細(xì)胞2個單位，輸注效果良好，無輸血反應(yīng)，血紅蛋白有所上升。后患者經(jīng)激素及其他等對癥治療之后情況好轉(zhuǎn)，未再輸血。

[1] 王明慧，楊濤，方春燕，等．不同輸血方法在自身免疫性溶血性貧血患者中的效果分析[J]．現(xiàn)代醫(yī)學(xué)，2014，42(8):880-883.

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[7] 汪傳喜，田兆嵩.AIHA病人的輸血前檢查和成分輸血[J]．中國輸血雜志，2000，13(1):61-65.

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Identification and application of Rh blood group system similar antibodies in clinical blood transfusion(a case analysis attached)

WANGXiao-hua，QIANTian．

(DepartmentofTransfusion,TheFirstPeople'sHospitalofLianyungang,Jiangsu222002,China)

Objective:To offer guide for the safety and effectiveness of clinical blood use by identification and analysis of Rh blood group system similar antibodies in patients with autoimmune hemolytic anemia (AIHA).Methods：Saline method, antiglobulin test and acid elution test were employed to identify the antibodies in plasma and elution, and the antibodies' specificity was analyzed by combining its own red blood cell group antigen.Results:The antibodies had the serological characteristics of Rh blood group system which were identified as similar anti-D antibody.The antibodies in plasma and elution had anti-D specificity and its red blood cell RhD antigen were positive.The clinical effect was better in the case of cooperative D antigen-negative blood transfusion.Conclusion:The small number of AIHA patients with the specificity of similar Rh blood group system should be infused with corresponding antigen negative blood with antibodies in order to ensure the safety and effectiveness of clinical blood use.

Autoimmune hemolytic anemia; Rh blood group system; Similar antibodies; Blood transfusion

江蘇省連云港市第一人民醫(yī)院 輸血科，222002

王曉華(1981-)，女，主管技師，研究生。

10.14126/j.cnki.1008-7044.2017.01.013

R 457.11

A

1008-7044(2017)01-0034-03

2016-08-25)