靖云閣，鄒亞杰，胡清秀，張瑞穎，馮作山，杜 芳，楊小紅

（中國農業(yè)科學院農業(yè)資源與農業(yè)區(qū)劃研究所，北京 100081）

白靈側耳栽培基質C/N研究*

靖云閣，鄒亞杰，胡清秀**，張瑞穎，馮作山，杜 芳，楊小紅

（中國農業(yè)科學院農業(yè)資源與農業(yè)區(qū)劃研究所，北京 100081）

分別以尿素和麥麩為補充氮源，調節(jié)栽培基質的C/N，對不同C/N下白靈側耳（Pleurotus eryngii var.tuoliensis）菌絲生長速度、子實體發(fā)育和產量等指標進行測定和數(shù)據(jù)分析。結果表明，栽培基質的C/N在30:1～51:1范圍內菌絲生長速度較快，但添加尿素時菌絲生長速度更快；在相同C/N條件下，添加麩皮的配方比添加尿素的配方現(xiàn)蕾時間更短、生物學效率更高；在添加麩皮的配方中，生物學效率隨著C/N的降低（麩皮添加量增加）而升高，但當C/N為25:1時出菇率僅為73.3%，最佳C/N為36:1～41.5:1；在添加尿素的配方中，C/N為36:1時，生物學效率最高，達到52.15%，出菇率為96.67%。

白靈側耳；碳氮比；菌絲生長速度；子實體生長發(fā)育；生物學效率

白靈側耳（Pleurotus eryngii var.tuoliensis） 是1種異養(yǎng)真菌，馴化栽培的歷史較短，栽培方法和技術還不是很完善，其中栽培基質中的C/N是影響菌絲體生長和子實體發(fā)育的重要因素。但是目前關于白靈側耳栽培基質最優(yōu)碳氮比說法不一。萬魯長[1]報道，白靈側耳菌絲生長的最適碳源是葡萄糖，最適氮源是蛋白胨，最適碳氮比為20:1。李冠喜等[2]報道白靈側耳菌絲生長的最適碳源是蔗糖，最適氮源是蛋白胨，最適碳氮比是40:1。在實際生產中，主要依靠經驗或借鑒雙孢蘑菇（Agaricus bisporus） 培養(yǎng)料的碳氮比進行原料配比，給白靈側耳的生產帶來一定的盲目性。本文分別以尿素和麥麩為補充氮源，研究栽培基質的C/N對白靈側耳的菌絲生長、出菇時間、出菇率和生物學效率的影響。

1 材料與方法

1.1 菌種

白靈側耳-中農翅鮑，編號00485，由國家食用菌標準菌株庫提供。

1.2 原料

原料：棉籽殼、玉米芯、麩皮、木屑、玉米粉、尿素、石膏、石灰。各種原料的碳、氮含量見表1。

表1 各種栽培料的碳含量和氮含量Tab.1 Content of carbon and nitrogen in cultivation material

1.3 試驗方法和設計

1.3.1 菌種培養(yǎng)

原種制作：按小麥1 kg、石膏10 g、石灰3 g的比例進行培養(yǎng)基配制。常規(guī)方法分裝，滅菌，接種，培養(yǎng)箱（25±1）℃培養(yǎng)15 d。

1.3.2 栽培方法

栽培料配方：棉籽殼、玉米芯、木屑按照干重6.5:1:1配比，添加玉米粉5%、石灰1%、石膏1%，pH自然。

按常規(guī)方法拌料，含水量約為65%，采用33 cm×17 cm聚丙烯塑料袋裝料，每袋裝料200 g，滅菌（121℃高壓滅菌2 h），冷卻后接種，接種麥粒種10 g。接種后于（25±1）℃培養(yǎng)，菌絲長滿菌袋后后熟管理30 d，再經過4℃～14℃溫差刺激，在15℃條件進行出菇管理。

1.3.3 試驗設計

在進行栽培試驗時，在栽培料配方中，添加尿素和麩皮調整C/N，見表2～表3，每個處理30袋。

1.4 試驗數(shù)據(jù)說明

試驗期間記錄菌絲生長速度、生長勢、長滿菌袋時間、子實體發(fā)生時間等，疏蕾時保留1個較好的菇蕾，采收時記錄每個子實體重量。

現(xiàn)蕾時間，從接種開始至第1個菇蕾出現(xiàn)的時間；子實體生長期，從現(xiàn)蕾至采收的時間；采收期，開始采菇至結束采菇的天數(shù)；生產周期，從開始接種至采收結束的天數(shù)。

與式(3)一樣，本文將把6項制度指標分別帶入式(4)中，依次尋找門檻值和進行實證結果的回歸，具體結果見表7。

表2 添加尿素調節(jié)C/N（配方A系列）Tab.2 Adjusting C/N ratio by adding urea(A series of formula)

表3 添加麩皮調節(jié)C/N（配方B系列）Tab.3 Adjusting C/N ratio by adding wheat bran(B series of formula)

生長勢：采用四級記錄，分別用“＋”、“＋＋”、“＋＋＋”、“＋＋＋＋”表示。其中“＋”表示菌絲生長較弱、稀疏、纖細；“＋＋”表示菌絲長勢一般、略密；“＋＋＋”表示菌絲長勢較好、濃密；“＋＋＋＋”表示菌絲長勢旺盛、濃密、粗壯。

菌絲生長速度：每個配方隨機抽取5個菌袋，接種10 d后第1次劃線，之后每間隔5 d劃1次線并測量菌絲生長的長度，第3次測量后，計算平均生長速度。生物學效率為子實體濕重除以培養(yǎng)料干重乘以100%。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用計算機軟件Microsoft Excel與DPS7.05進行分析。各處理平均數(shù)間的多重比較采用最小顯著差數(shù)法（亦稱LSD法），差異顯著性水平定為α=0.05，極差異顯著性水平定為α=0.01。

2 結果與分析

2.1 栽培基質中的C/N對菌絲生長速度的影響

不同C/N的栽培基質中菌絲生長速度、滿袋時間、菌絲生長勢的統(tǒng)計結果見表4、表5。

表4 配方A系列間菌絲生長速度和生長勢比較Tab.4 Comparison of mycelia growth rate and mycelia vigor among A series of formula

表5 配方B系列間的菌絲生長速度和生長勢比較Tab.5 Comparison of mycelia growth rate and mycelia vigor among B series of formula

表4、表5結果顯示，在添加尿素的配方中，C/N在30:1～51:1的范圍內，菌絲長勢旺盛、濃密、粗壯，菌絲生長速度差異不顯著，但顯著快于25:1、20:1、15:1的C/N配方下的菌絲生長速度，其中A8配方的菌絲生長速度極慢，15 d～20 d停止生長；在添加麩皮的配方中，C/N在30:1～51:1的范圍內，菌絲生長速度差異不顯著，但顯著快于25:1的C/N配方下的菌絲生長速度。

由此可見，在30:1～51:1的C/N范圍內，白靈側耳菌絲生長速度受C/N變化的影響不大。但C/N低于25:1時，菌絲長勢變弱，菌絲生長明顯受到抑制。

2.2 栽培基質中的C/N對子實體分化和生長的影響

配方A、配方B系列的現(xiàn)蕾天數(shù)，以及不同C/N栽培基質的現(xiàn)蕾天數(shù)見表6～表8。

表6 配方A系列的現(xiàn)蕾天數(shù)Tab.6 Days of primordium formation for A series of formula

表7 配方B系列的現(xiàn)蕾天數(shù)Tab.7 Days of primordium formation for B series of formula

表8 不同C/N栽培基質的現(xiàn)蕾天數(shù)Tab.8 Days of primordium formation at the different C/N ratio

表6～表8的結果顯示，現(xiàn)蕾時間與C/N有一定相關性，在添加尿素的各配方中，現(xiàn)蕾時間少于120 d的配方中C/N均在30:1～51:1內，這一點與菌絲生長速度的適宜C/N范圍一致；但在添加麥麩的各配方中，現(xiàn)蕾時間均少于120 d，其中，B3配方現(xiàn)蕾最早，培養(yǎng)108.6 d時現(xiàn)蕾；對A系列和B系列配方進行比較，結果顯示，A1與B1，A2與B2現(xiàn)蕾時間差異不顯著，而在其它相同C/N條件下，添加麩皮的配方比添加尿素的配方現(xiàn)蕾時間短，且差異性非常顯著，A3與B3、A4與B4、A5與B5和A6與B6配方間的現(xiàn)蕾時間分別相差5 d、8 d、8 d和10 d。

從子實體生長的情況來看，A7和A6配方的子實體生長期最長，分別為26.5 d和23.1 d，而B系列各配方的子實體生長發(fā)育速度相差不大，平均所需時間為（20.6±1.2） d，與A3、A4、A5配方的子實體生長時間近似。

由此可見，C/N對子實體分化和生長發(fā)育的影響與氮源種類相關，采用尿素調整栽培基質中的C/N，最適C/N為30:1～41.5:1，而麥麩由于營養(yǎng)豐富，對子實體分化和生長發(fā)育的影響不顯著。

2.3 C/N對生產周期和出菇性狀的影響

生產周期指從菌種培養(yǎng)至出菇結束整個生產過程所需的時間，生產周期越短，管理成本和勞動力成本越低。不同配方的生產周期和出菇率情況見表9、表 10。

表9 配方A系列的生產周期和出菇率Tab.9 Production cycle and fruiting rate for A series of formula

表10 配方B系列的生產周期和出菇率Tab.10 Production cycle and fruiting rate for B series of formula

研究表明，以尿素為補充氮的各配方中，A2、A3、A4三個配方的生產周期不超過140 d，但隨著含氮量增加，生產周期延長，其中A7配方的生產周期達到161.9 d；而以麥麩為補充氮源的各配方中，生產周期均為130 d～140 d。

出菇期長短和出菇率可以反映出菇的整齊度，特別是在白靈側耳生產中，常常出現(xiàn)不出菇的菌袋，即所謂“啞巴袋”，因此，出菇性狀對白靈側耳生產具有重要意義。本研究表明，在添加尿素的各配方中，A1～A6配方的出菇率均在90%以上，而A7配方的出菇率顯著下降，僅50%；在添加麩皮的配方中，B6配方的出菇率也僅為73.33%。其中A7配方和B6配方中的C/N均為20:1，可見，在合理的C/N范圍內，白靈側耳出菇率高；如果氮源含量過高，會造成部分菌袋不出菇的現(xiàn)象。

2.4 C/N對產量和生物學效率的影響

C/N對產量和生物學效率的影響見表11～表13。

表11 配方A系列的產量和生物學效率Tab.11 Yield and biological efficiency for A series of formula

表12 配方B系列的產量和生物學效率Tab.12 Yield and biological efficiency for B series of formula

在添加尿素的系列配方中，A4配方的單包產量、平均產量和生物學效率最高，A1和A7的生物學效率僅為32.15%、36.57%；在添加麥麩的各配方中，B6配方的產量和生物學效率最高，隨著麥麩添加量的增加，產量呈上升趨勢。可見，不同氮源對產量和生物學效率的影響不同，麥麩中的營養(yǎng)物質豐富，除氮源外，還含有纖維素、半纖維素、淀粉、脂肪以及礦物質等，其均可以促進白靈側耳子實體的生長。

表13 不同碳氮比配方的出菇率和生物學效率Tab.13 Yield and biological efficiency at the different C/N ratio

3 結論與討論

本研究分別以尿素和麥麩為補充氮源，調節(jié)栽培基質中的C/N，通過栽培試驗對不同C/N栽培基質白靈側耳的菌絲生長速度、子實體的分化狀況和生長狀況、出菇性狀和產量等進行分析，得出如下結論。

3.1 白靈側耳的生長發(fā)育對氮源有選擇性

氮源種類不同會直接影響白靈側耳菌絲生長速度、子實體的分化和生長、出菇和產量，分別以尿素和麥麩為補充氮源的栽培試驗表明，麥麩比尿素更加有利于白靈側耳的分化和生長發(fā)育，尤其表現(xiàn)在子實體分化時間和生物學效率方面，在C/N相同的情況下，添加麥麩配方的產量高于添加尿素配方的產量，說明白靈側耳對有機氮源的利用優(yōu)于無機氮源。

3.2 尿素的適量添加可提高白靈側耳菌絲生長速度和產量

尿素是1種高濃度氮肥，易溶于水，在20℃時水溶液呈中性反應，遇熱容易水解，在110℃下1 h內的水解量為3%，水解過程中產生NH4HCO3、NH3、CO2和H2O。因此，經過滅菌后，栽培基質中的尿素分子就會水解產生菌絲容易利用的銨根離子。試驗結果表明，白靈側耳對尿素的利用優(yōu)于香菇等其它菇類。特別是在菌絲生長階段，在適宜的C/N（30∶1～51∶1） 條件下，添加尿素的配方中菌絲生長速度大于添加麥麩的配方中菌絲生長速度。由此可見，在菌絲生長階段，無機氮對菌絲生長的促進作用優(yōu)于有機氮。

通過對本試驗結果的各指標進行綜合分析得知，以尿素為補充氮源，基質中最佳C/N為36∶1，最佳配方為棉籽殼71%、玉米芯10.5%、木屑10.5%、尿素0.83%、玉米粉5%、石灰1%、石膏1%。

3.3 麩皮作為補充氮源

麩皮作為補充氮源栽培試驗表明，生物學效率隨著C/N的降低（麩皮添加量增加）而升高，B6配方的生物學效率最高，達到56.64%，單位最高產量為154.23g，但B6配方的出菇率最低，僅為73.33%；B4、B5配方的生物學效率分別為52.36%和54.77%，出菇率均在90%以上，并且B1～B4配方的菌絲生長速度、子實體分化等指標差異不顯著。因此，結合試驗結果可知，在白靈側耳的生產栽培中，建議以麥麩為補充氮源，最佳C/N為36∶1～41.5∶1，配方中的麥麩量為15%～25%。

目前，關于白靈側耳栽培基質中C/N的研究較少，且主要借鑒雙孢蘑菇的研究結果，雙孢蘑菇發(fā)酵料的最優(yōu)C/N為17∶1[3-4]，而本文的研究結果表明，白靈側耳栽培基質中的最適C/N范圍為36∶1～41.5∶1，與雙孢蘑菇栽培的最優(yōu)C/N存在顯著的差異。因此，有必要對不同食用菌栽培所需的C/N進行系統(tǒng)的研究，從而為食用菌的精準化栽培提供理論依據(jù)。

[1]萬魯長，單洪濤，黃春燕，等.白靈側耳菌絲生長對碳氮營養(yǎng)需求的研究[J].食用菌學報，2005，12（4）：27-32.

[2]李冠喜，邵世光，華國棟.白靈側耳菌絲生長所需的營養(yǎng)及環(huán)境條件研究[J].中國農村小康科技，2006（9）：71-73.

[3]橋本一哉.蘑菇栽培法[M].北京：科學出版社，1998.

[4]王賀祥.食用菌栽培學[M].北京：中國農業(yè)大學出版社，2008.

Study on the C/N Ratio in the Cultivation Substrate for Pleurotus eryngii var.tuoliensis

JING Yun-ge,ZOU Ya-jie,HU Qing-xiu,ZHANG Rui-ying,FENG Zuo-shan,DU Fang,YANG Xiao-hong
(Institute of Agro-Resources and Regional Planning,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100081,China)

Using urea and wheat bran separately as a supplementary nitrogen source,the different formulas were designed in the experiment by regulating C/N ratio of cultivation substrate for Pleurotus eryngii var.tuoliensis.The results showed that the appropriate range of the C/N ratio was 30:1 to 51:1 for mycelia growth,but mycelia growth rate was faster when urea was added in the culture substrate.In the same C/N ratio conditions,the primordia time in the formula added wheat bran was shorter,and the biological efficiency in that was higher.In the formula added wheat bran,biological efficiency rose along with the decrease of C/N ratio,and the optimum range of the C/N ratio was 36:1～41.5:1 for biological efficiency.In the formula added urea,when the C/N ratio was 36:1,biological efficiency was 52.15%,and fruiting rate was 96.67%.

Pleurotus eryngii var.tuoliensis;C/N ratio;mycelia growth rate;development of fruiting body;biological efficiency

S646.1

A

1003-8310（2017）06-0039-05

10.13629/j.cnki.53-1054.2017.06.008

現(xiàn)代農業(yè)產業(yè)技術體系建設專項資金（CARS20）；公益性行業(yè)（農業(yè)）科研專項（201503137）。

靖云閣（1993-），男，在讀碩士研究生，主要研究方向為食用菌栽培研究。E-mail:16553682＠163.com

**通信作者：胡清秀（1963-），女，博士，研究員，主要從事食用菌栽培研究。E-mail:huqingxiu＠caas.cn

2017-09-21