李 楊,趙 野,梁海英,賈玉璽*

(1 杭州市第三人民醫(yī)院 皮膚科,浙江 杭州310000;2.吉林大學中日聯(lián)誼醫(yī)院 a.皮膚科;b.輸血科,吉林 長春130033)

復方倍他米松對小鼠白癜風模型抗氧化的影響

李 楊1,趙 野2a,梁海英2b,賈玉璽2a*

(1 杭州市第三人民醫(yī)院 皮膚科,浙江 杭州310000;2.吉林大學中日聯(lián)誼醫(yī)院 a.皮膚科;b.輸血科,吉林 長春130033)

白癜風是一種常見的皮膚或粘膜色素脫失性疾病，近年來研究表明黑素細胞的缺失在白癜風的發(fā)病機制中扮演著至關重要的角色[1]，相關研究結(jié)果顯示氧化應激可能是導致黑素細胞變性的始動因素，與白癜風的發(fā)生和發(fā)展有著密切的關系[2]。本研究通過分析復方倍他米松注射液對小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽氧化酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)活力及含量的影響，以闡明復方倍他米松在抗氧化作用方面治療白癜風的作用機制。

1 材料與方法

1.1樣品來源

復方倍他米松(商品名：得寶松國藥準字J20140160,進口藥品注冊證號H201301888批號6BBKADAC03)。過氧化氫 (開原化學試劑一廠 批號20161109)。

1.2試劑

GSH試劑盒，批號：20120213；SOD試劑盒，批號：20120223；MDA試劑盒，批 號：20122213；均為南京建成生物工程制品研究所生產(chǎn)。

1.3小鼠白癜風模型的制作

取C57BL/6小鼠40只，體重17.5-20.5 g，雌雄均等，由吉林大學基礎醫(yī)學院動物實驗中心提供，合格證號：SCXK(J2016-0003)。采用隨機數(shù)字表法各取10只為正常對照組、模型對照組、陽性對照組(復方卡力孜然酊)、實驗組(復方倍他米松)。所有小鼠電動剃毛刀剃去背部黑色短毛約2 cm×2 cm作為實驗區(qū)。除正常對照組外，模型對照組、陽性對照組、實驗組小鼠均在皮膚實驗區(qū)涂抹5%過氧化氫0.5 ml，每天2次，平均每日剃毛1次，連續(xù)50天。正常對照組在實驗區(qū)涂抹等量蒸餾水，每天2次，平均每日剃毛 1次，連續(xù)50天。模型對照組、陽性對照組、實驗組自第11天開始給藥，陽性對照組涂抹等量0.5 ml復方卡力孜然酊，模型組涂抹等量0.5 ml蒸餾水，實驗組皮損局部用二氧化碳點陣激光造孔后外涂復方倍他米松0.5 ml，每周1次。于治療第50天，以3%水合氯醛10 ml/kg腹腔注射麻醉，摘除眼球取血，測量血清中的SOD、GSH-Px、MDA含量。

1.4檢測方法

采用亞硝酸鹽法測定血清SOD活力；硫代巴比妥酸法測定血清MDA的含量；硫代二硝基苯甲酸直接法測定GSH-Px活力。

1.5統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

模型組小鼠血清中SOD、GSH-Px含量比正常對照組明顯降低，而MDA含量明顯升高，復方卡力孜然酊組和復方倍他米松組小鼠血清中SOD、GSH-Px含量明顯升高， MDA含量明顯降低。表明復方卡力孜然酊和復方倍他米松具有治療白癜風的作用。見表1。

表1 得寶松對白癜風小鼠血清中SOD、GSH-Px、MDA的影響

注：與模型對照組比較*P<0.05，**P<0.011

3 討論

白癜風是一種獲得性色素脫失性皮膚病，病因及發(fā)病機制尚未明確，研究表明其與氧化應激、黑素細胞自毀、遺傳因素、自身免疫狀態(tài)、酪氨酸缺乏等因素有關[3]。白癜風治療相對困難，常見傳統(tǒng)的治療方法有糖皮質(zhì)激素、免疫調(diào)節(jié)治療、準分子光、UVB治療、中醫(yī)療法、手術等，部分患者經(jīng)上述系統(tǒng)用物后仍不能取得滿意療效，推測其皮損局部免疫可能處于異常狀態(tài)。筆者采用5%過氧化氫化學脫色法制備白癜風的小鼠模型，模型對照組肉眼觀察及切片鏡下結(jié)果均符合白癜風患者臨床和病理特征。氧化應激在致黑素細胞變性中起著至關重要的作用[4-6]，表皮內(nèi)活性氧族過度聚集使黑素細胞膜脂質(zhì)合成及循環(huán)紊亂，導致黑色素細胞的凋亡和破壞，抗氧化劑如谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、MDA 是脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應的終產(chǎn)物，為氧化應激發(fā)生的指標。Yildirim M等[7]研究發(fā)現(xiàn)白癜風患者皮損活體組織中MDA含量較正常人皮膚中的含量明顯升高，推測白癜風患者體內(nèi)氧化應激的失衡導致活性氧族過度產(chǎn)生，繼而介導脂質(zhì)過氧化，誘導黑色素細胞的凋亡。

復方倍他米松注射液是一種長效類糖皮質(zhì)激素，由倍他米松磷酸二鈉及二丙酸倍他米松組成，其中倍他米松磷酸二鈉溶于水，在體內(nèi)可被迅速吸收而起效,二丙酸倍他米松微溶于水，在體內(nèi)可緩慢釋放而維持療效具有抑制炎癥反應、降低毛細血管通透性、抑制免疫反應及減輕脂質(zhì)過氧化反應等作用[8]。有研究表明糖皮質(zhì)激素可以改善急性睪丸扭轉(zhuǎn)復位后睪丸抗氧化能力及精子的活力[9]，本實驗發(fā)現(xiàn)，復方倍他米松注射液可顯著增加小鼠血液中SOD、GSH-Px的含量，降低可致細胞損傷的脂質(zhì)過氧化分解產(chǎn)物MDA的含量。說明復方倍他米松注射液具有清除氧自由基的抗氧化作用，對白癜風可以起到治療作用。

總之，本研究表明復方倍他米松注射液改變了實驗性白癜風小鼠的某些抗氧化參數(shù)，推測氧化應激在白癜風的發(fā)病機制中可能起重要作用，然而，尚需要進一步研究，以驗證通過抗氧化治療是否能作為治療白癜風患者有效方法，并進一步闡明其發(fā)病機制。

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吉林省科技廳項目(3D515P033430)

*通訊作者

1007-4287(2017)12-2185-02

2017-02-05)