索朗卓嘎，周 琪，許建成*

(吉林大學(xué)第一醫(yī)院 1.檢驗(yàn)科；2.兒科，吉林 長(zhǎng)春130021)

長(zhǎng)春地區(qū)漢族健康人群血細(xì)胞分析參考區(qū)間適用性驗(yàn)證

索朗卓嘎1，周 琪2，許建成1*

(吉林大學(xué)第一醫(yī)院 1.檢驗(yàn)科；2.兒科，吉林 長(zhǎng)春130021)

目的驗(yàn)證衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T 405-2012《血細(xì)胞分析參考區(qū)間》，以判斷該標(biāo)準(zhǔn)是否適用于本地區(qū)。方法按WS/T 405-2012的推薦方法，選20-79歲漢族健康體檢者，每個(gè)性別每10歲取30例以上。使用Sysmex XE-2100全自動(dòng)血液分析儀進(jìn)行血細(xì)胞分析檢測(cè)。統(tǒng)計(jì)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中18個(gè)血細(xì)胞分析參數(shù)在性別和年齡之間的差異，分析超出參考區(qū)間的個(gè)體分布情況。結(jié)果女性各年齡段WBC值、男性各年齡段RBC值、HGB值、HCT值隨年齡增長(zhǎng)呈逐漸下降趨勢(shì)，男性各年齡段MCV值、MCH值隨年齡增長(zhǎng)呈逐漸上升趨勢(shì)，但各年齡段均值都在推薦參考范圍內(nèi)。男性、女性各年齡段12個(gè)亞組的18個(gè)血細(xì)胞分析參數(shù)90%以上落在參考區(qū)間內(nèi)，均通過(guò)了驗(yàn)證。結(jié)論衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T 405-2012血細(xì)胞分析參考區(qū)間可以應(yīng)用于本地區(qū)漢族人群。

血細(xì)胞；參考區(qū)間驗(yàn)證；健康參考個(gè)體

(ChinJLabDiagn,2017,21:2122)

血細(xì)胞分析是臨床常用的檢驗(yàn)項(xiàng)目，有助于臨床醫(yī)生初步判斷患者的身體狀況。2012年12月25日衛(wèi)生部發(fā)布了衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T 405-2012《血細(xì)胞分析參考區(qū)間》[1]，對(duì)中國(guó)成年人血細(xì)胞分析參考區(qū)間進(jìn)行了調(diào)整，該標(biāo)準(zhǔn)于2013年8月1日起實(shí)施，其發(fā)布實(shí)施對(duì)血細(xì)胞分析參考區(qū)間的建立和應(yīng)用具有重要指導(dǎo)意義。但由于種族、地域、環(huán)境、遺傳、飲食、年齡、性別等諸多因素的影響，美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)文件C28-A3[2]及我國(guó)衛(wèi)生部衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T 402-2012[3]均要求醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室在應(yīng)用新的參考區(qū)間時(shí)，應(yīng)進(jìn)行適用性驗(yàn)證。因此為保證臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目的安全可靠性，本研究采用WS/T 405-2012[1]推薦要求以驗(yàn)證血細(xì)胞分析參考區(qū)間是否適用于本地區(qū)。

1 資料與方法

1.1研究對(duì)象參考個(gè)體均來(lái)自2016年7-10月吉林大學(xué)第一醫(yī)院體檢中心體檢人群，按WS/T 405-2012《血細(xì)胞分析參考區(qū)間》附錄A的要求，通過(guò)體格檢查、實(shí)驗(yàn)室檢查、影像學(xué)檢查篩選出符合要求的健康個(gè)體。本研究篩選出20-29歲、30-39歲、40-49歲、50-59歲、60-69歲、70-79歲的男性健康個(gè)體分別為30名、59名、44名、61名、31名、32名，女性健康個(gè)體分別為30名、81名、81名、37名、30名、30名。

1.2儀器與試劑Sysmex XE-2100全自動(dòng)血液分析儀及配套試劑、質(zhì)控物。

1.3標(biāo)本采集采血前3天保持正常生活習(xí)慣，正常飲食。受檢者空腹8小時(shí)后于上午7:30-9:30安靜坐位自肘前靜脈真空采集靜脈血2 ml，常溫送至檢驗(yàn)科，采血管為廣州陽(yáng)普醫(yī)療科技股份有限公司生產(chǎn)的EDTA-K2抗凝管。

1.4標(biāo)本檢測(cè)排除采血量不足、肉眼觀察有凝塊、溶血、脂血、高膽紅素、顯微鏡下有血小板聚集等不合格標(biāo)本后，用自動(dòng)模式上機(jī)測(cè)定。標(biāo)本在2 h內(nèi)測(cè)定完成。

1.5調(diào)查參數(shù)白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、中性粒細(xì)胞絕對(duì)值(Neut#)、淋巴細(xì)胞絕對(duì)值(Lymph#)、嗜酸性粒細(xì)胞絕對(duì)值(Eos#)、嗜堿性粒細(xì)胞絕對(duì)值(Baso#)、單核細(xì)胞絕對(duì)值(Mono#)、中性粒細(xì)胞百分?jǐn)?shù)(Neut%)、淋巴細(xì)胞百分?jǐn)?shù)(Lymph%)、嗜酸性粒細(xì)胞百分?jǐn)?shù)(Eos%)、嗜堿性粒細(xì)胞百分?jǐn)?shù)(Baso%)、單核細(xì)胞百分?jǐn)?shù)(Mono%)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、血紅蛋白濃度(Hb)、紅細(xì)胞壓積(Hct)、紅細(xì)胞平均體積(MCV)、平均血紅蛋白量(MCH)、平均血紅蛋白濃度(MCHC)和血小板計(jì)數(shù)(PLT)。

1.6質(zhì)量控制吉林大學(xué)第一醫(yī)院檢驗(yàn)科于2012年通過(guò)中國(guó)國(guó)家合格評(píng)定委員會(huì)(CNAS)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量與能力認(rèn)可?？剖易?011年起使用Sysmex XE-2100全自動(dòng)血液分析儀，每日進(jìn)行高、中、低3個(gè)水平的室內(nèi)質(zhì)控，室內(nèi)質(zhì)控的變異系數(shù)在允許范圍內(nèi)方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。檢測(cè)系統(tǒng)每年進(jìn)行兩次校準(zhǔn)及性能驗(yàn)證。科室近年來(lái)參加的衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心及吉林省臨床檢驗(yàn)中心的室間質(zhì)量評(píng)價(jià)均合格。

1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)分析使用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。離群值檢驗(yàn)采用WS/T 405-2012推薦的Dixon方法，數(shù)據(jù)中若有疑似離群值，則將疑似離群值與其相鄰值的差D和數(shù)據(jù)全距R相除，若D/R≥1/3為離群值，應(yīng)棄之。如有兩個(gè)以上疑似離群值，將最小疑似離群值做上述處理，若D/R均≥1/3則應(yīng)將所有點(diǎn)棄去。參考區(qū)間驗(yàn)證按照WS/T 405-2012推薦的方法：按篩選標(biāo)準(zhǔn)從本地募集參考個(gè)體20人，采樣并測(cè)定，將20個(gè)測(cè)定值與衛(wèi)生部頒布的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)比較，如落在參考區(qū)間外的測(cè)定值不超過(guò)2個(gè)，則驗(yàn)證通過(guò)。否則需重新篩選20人，重復(fù)上述操作。單樣本K-S檢驗(yàn)判斷數(shù)據(jù)是否為正態(tài)分布。兩組比較采用兩樣本t檢驗(yàn)，多組間兩兩比較采用單因素方差分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1血細(xì)胞分析參數(shù)均值18個(gè)血細(xì)胞分析參數(shù)在性別間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。女性各年齡段WBC值隨年齡增長(zhǎng)呈逐漸下降趨勢(shì)。男性各年齡段RBC值、HGB值、HCT值隨年齡增長(zhǎng)呈逐漸下降趨勢(shì)，而女性各年齡段的均值相差較小。男性各年齡段MCV值、MCH值隨年齡增長(zhǎng)呈逐漸上升趨勢(shì)，而女性各年齡段的均值相差較小，見(jiàn)表1。

2.2血細(xì)胞分析參考區(qū)間驗(yàn)證男性、女性各年齡段12個(gè)亞組的18個(gè)血細(xì)胞分析參數(shù)90%-100%落在參考區(qū)間內(nèi)，均通過(guò)了驗(yàn)證。長(zhǎng)春地區(qū)漢族健康人群靜脈血細(xì)胞分析的驗(yàn)證結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 長(zhǎng)春地區(qū)漢族健康人群18個(gè)靜脈血細(xì)胞分析參數(shù)均值

3 討論

臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間是解釋檢驗(yàn)結(jié)果、判斷疾病診治、進(jìn)行健康評(píng)估的重要依據(jù)，因此建立準(zhǔn)確、合適的參考區(qū)間具有重要意義[4]。然而參考區(qū)間建立的工作量和成本巨大，對(duì)參考個(gè)體的選擇也有嚴(yán)格要求，因此要求每個(gè)實(shí)驗(yàn)室的所有檢測(cè)項(xiàng)目及不同檢測(cè)系統(tǒng)均建立參考區(qū)間并不現(xiàn)實(shí)。在全國(guó)多中心研究項(xiàng)目努力下，2012年衛(wèi)生部發(fā)布衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T 405-2012《血細(xì)胞分析參考區(qū)間》，使我國(guó)有了全國(guó)性的血細(xì)胞分析參考區(qū)間。但由于參考區(qū)間受種族、地域、環(huán)境、遺傳、飲食、年齡、性別等諸多因素的影響，加之各實(shí)驗(yàn)室使用的檢測(cè)系統(tǒng)及檢測(cè)方法不同，因此各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)驗(yàn)證參考區(qū)間的可靠性和適用性，以確認(rèn)該參考區(qū)間是否可用于本地區(qū)人群[5]。

本實(shí)驗(yàn)室擬采用WS/T 405-2012推薦的血細(xì)胞分析參考區(qū)間。按照WS/T 405-2012提供的參考區(qū)間評(píng)估、驗(yàn)證和使用要求，驗(yàn)證的個(gè)體應(yīng)在20例以上，超出參考區(qū)間的數(shù)據(jù)不超過(guò)10%則通過(guò)驗(yàn)證。本驗(yàn)證選取的參考人群年齡范圍為20歲-79歲，每個(gè)性別每10歲選取30例以上健康體檢者納入，共選取12個(gè)組分別進(jìn)行驗(yàn)證。本研究發(fā)現(xiàn)18個(gè)血細(xì)胞參數(shù)均有性別差異，但男女均值都在推薦的參考范圍內(nèi)。WS/T 405-2012推薦的血細(xì)胞分析參考區(qū)間并未對(duì)年齡進(jìn)行分組，但本研究發(fā)現(xiàn)多個(gè)參數(shù)在不同年齡間有差異。女性各年齡段WBC值、男性各年齡段RBC值、HGB值、HCT值隨年齡增長(zhǎng)呈逐漸下降趨勢(shì)，男性各年齡段MCV值、MCH值隨年齡增長(zhǎng)呈逐漸上升趨勢(shì)，但各年齡段均值都在推薦的參考范圍內(nèi)。本研究根據(jù)參考區(qū)間建立時(shí)的分組分別進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果顯示參與驗(yàn)證的所有項(xiàng)目超出參考區(qū)間的數(shù)據(jù)均不超過(guò)10%，因此衛(wèi)生部發(fā)布的血細(xì)胞參考區(qū)間可用于本實(shí)驗(yàn)室。

參考區(qū)間是使用最廣泛的醫(yī)學(xué)決策根據(jù)，是判斷個(gè)體是否健康的標(biāo)準(zhǔn)。參考區(qū)間不同，則對(duì)疾病判斷結(jié)論不同。由于RBC計(jì)數(shù)、Hb、PLT計(jì)數(shù)的參考區(qū)間與此前的標(biāo)準(zhǔn)不同，因此在臨床應(yīng)用上如輸血指標(biāo)、貧血程度判斷指標(biāo)、出血判斷指標(biāo)等是否需要修改還需要進(jìn)一步探討。當(dāng)采用的參考區(qū)間發(fā)生變化時(shí)應(yīng)加強(qiáng)與臨床溝通，告知新的參考區(qū)間值及其制定過(guò)程，增強(qiáng)臨床醫(yī)生的認(rèn)可度及接受度。

[1]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.血細(xì)胞分析參考區(qū)間[J].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2012.

[2]Horowitz GL,Altaie S,Boyd JC,et al.The Clinical and Laboratory Standards Institute and IFCC.Defining,establishing,and verifying the reference intervals in a clinical laboratory;Approved Guideline-Third edition [S].C28-A3,CLSI,2008.

[3]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間的制定[M].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2012.

[4]尚 紅，陳文祥，潘柏申，等.建立基于中國(guó)人群的臨床常用檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間[J].中國(guó)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，2013，4(1)：17.

[5]Mu R,Chen W,Pan B,et al.First definition of reference intervals of liver function tests in China:a large-population-based multi-center study about healthy adults[J].PLoS One,2013,8(9):e72916.

ValidationforreferenceintervalsofcompletebloodcountforhealthyHanpopulationinChangchun

SuoLangZhuoGa,ZHOUQi,XUJian-cheng.

(TheFirtHospitalofJilinUniversity,Changchun130021,China)

ObjectiveThe aim of this study was to verify the standard WS/T405-2012 Referenceintervalsforbloodcellanalysisand determine whether the standard isapplicable to this area.MethodsAccording to the method recommended by WS/T405-2012,healthyHan reference individuals from 20 to 79 years old were selected as reference individuals and there were more than 30 cases for each sex in every 10 years old group.Theblood samples were detected by SysmexXE-2100 automatic blood cell analyzer.Differences between sex andage for 18 blood cell analysis parameters were evaluated and distribution beyond range in reference individuals was analyzed.ResultsThe value of WBC in different age periods offemale,and RBC,HGB,and HCT among different age periods of male was shown a downward trend.The value of MCV and MCHshowed upward trend with the age growth in male.However,the average value of groups was within the recommended reference range.Over 90% of verification for 18 blood cell analysis parameters in all 12 groups was in the reference range andall passedvalidation.ConclusionWS/T 405-2012 is suitable for healthy Han population in this area.

blood cells；verification of reference intervals；reference individuals

吉林省衛(wèi)生廳重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室科研課題(2012Z059)

*通訊作者

1007-4287(2017)12-2122-03

R331.1

A

2017-09-10)