孫 乾，曹群華，祝 偉，梅遠(yuǎn)東，顧 晨

(常熟市第二人民醫(yī)院手足外科，江蘇 常熟 215500)

經(jīng)皮電刺激對大鼠周圍神經(jīng)端側(cè)吻合效果的影響

孫 乾，曹群華，祝 偉，梅遠(yuǎn)東，顧 晨

(常熟市第二人民醫(yī)院手足外科，江蘇 常熟 215500)

研究報告

目的觀察和探索經(jīng)皮電刺激促進(jìn)神經(jīng)端側(cè)吻合后神經(jīng)再生的效果及其臨床價值。方法選取雄性SD大鼠32只，隨機(jī)分為正常對照組(A組)，肌皮神經(jīng)損傷后端端吻合至尺神經(jīng)組(B組)，肌皮神經(jīng)損傷后端側(cè)吻合至尺神經(jīng)組(C組)，肌皮神經(jīng)損傷后端側(cè)吻合至尺神經(jīng)+術(shù)后經(jīng)皮電刺激組(D組)。觀察各組大鼠患側(cè)肢體的肌力恢復(fù)情況以及神經(jīng)纖維的再生情況。結(jié)果C組和D組大鼠振幅、傳導(dǎo)速度低于A組，潛伏期高于A組；而D組大鼠振幅、傳導(dǎo)速度低于C組，潛伏期高于C組；B、C、D三組大鼠肱二頭肌濕重比以及肌纖維橫截面積均低于A組，且C組肌肉恢復(fù)最差；B、C、D三組大鼠NF-200表達(dá)明顯低于A組，D組NF-200表達(dá)明顯強(qiáng)于C組，但仍顯著少于B組，差異均具有顯著性(P< 0.05)。電鏡檢查顯示B組神經(jīng)纖維髓鞘成熟，C組以無髓神經(jīng)纖維為主，髓鞘成熟度差。D組髓鞘增生情況較C組好轉(zhuǎn)，但仍有部分無髓神經(jīng)纖維存在。結(jié)論神經(jīng)端側(cè)吻合術(shù)后經(jīng)皮電刺激能有效促進(jìn)神經(jīng)軸突再生以及延緩靶肌的失神經(jīng)萎縮，盡管較之神經(jīng)端端吻合存在差距，仍不失為臨床修復(fù)周圍神經(jīng)損傷的有效方法之一。

電刺激；端側(cè)縫合；神經(jīng)

周圍神經(jīng)長距離缺損一直是周圍神經(jīng)修復(fù)再生研究領(lǐng)域的難題，其中因暴力等因素導(dǎo)致的神經(jīng)長段缺損通常無法直接縫合修復(fù)[1]。臨床上主要利用神經(jīng)組織移植或神經(jīng)移位術(shù)作為修復(fù)這類長距離損傷的主要手段，但實際上可供選擇的移植神經(jīng)或動力神經(jīng)來源十分有限[2]。尤其高平面周圍神經(jīng)損傷，由于受損神經(jīng)近端難以利用，而神經(jīng)再生距離較長、靶器官較遠(yuǎn)，使得直接修復(fù)無法完成，移位修復(fù)效果亦受到影響；為克服這種較為嚴(yán)重的損傷狀況，臨床上進(jìn)行了各種嘗試，其中神經(jīng)端側(cè)縫合是較早進(jìn)入人們視線的一種術(shù)式[3]。神經(jīng)端側(cè)吻合作為一種可行的治療方法，其臨床療效一直存在爭議，目前相關(guān)研究的進(jìn)展相對主要局限于具體手術(shù)方式的改進(jìn)。經(jīng)皮肌電刺激可以讓肌肉有節(jié)律地收縮，維持其正?；顒樱乐挂蜷L期失用導(dǎo)致的廢用性萎縮；為受損神經(jīng)的修復(fù)再生，以及傳導(dǎo)功能的恢復(fù)提供寶貴時間和有利條件，上述觀點已被不少臨床研究所證實[4,5]。通過神經(jīng)端側(cè)吻合術(shù)后經(jīng)皮電刺激方法，提高神經(jīng)端側(cè)吻合術(shù)后神經(jīng)的側(cè)枝芽生，同時延緩失神經(jīng)肌肉的萎縮，從而提升了神經(jīng)端側(cè)吻合修復(fù)神經(jīng)損傷的手術(shù)療效，并與神經(jīng)端端吻合效果進(jìn)行對比。觀察和探討經(jīng)皮電刺激是否能有效提高神經(jīng)端側(cè)吻合的實際修復(fù)效果，為臨床治療長距離周圍神經(jīng)缺損特別是高平面周圍神經(jīng)損傷提供更多的參考和依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 實驗動物及分組

SPF級雄性SD大鼠32只，體重(250±15)g，7周，購自上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司[SCXK(滬)2012-0002]。所有大鼠在南通大學(xué)動物實驗中心[SYXK(蘇)2007-0021]動物房常規(guī)喂養(yǎng)，隨機(jī)分為A組(正常對照組)，B組(肌皮神經(jīng)損傷后端端吻合至尺神經(jīng)組)，C組(肌皮神經(jīng)損傷后端側(cè)吻合至尺神經(jīng)組)，D組(肌皮神經(jīng)損傷后端側(cè)吻合至尺神經(jīng)+術(shù)后經(jīng)皮電刺激組)，每組8只。并按實驗動物使用的3R原則給予人道的關(guān)懷。

1.2 主要試劑和儀器

神經(jīng)絲蛋白200(NF200)抗體(武漢博士德生物工程有限公司，BM0100)；耀洋康達(dá)KT-90 A型神經(jīng)肌肉電刺激儀(北京耀洋康達(dá)醫(yī)療儀器有限公司，京食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2014第2260208號)；海鯊NDI-094C型海神肌電圖誘發(fā)電位儀(上海海神醫(yī)療電子儀器有限公司，粵食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2011第2210110號)；寧波成和顯微器械一套(寧波市成和顯微器械廠)；Philips CM-120透射電鏡(荷蘭飛利浦公司)；二甲苯、無水乙醇、95%、85%、75%乙醇、磷酸鹽緩沖液(PBS)、蘇木素伊紅染色液等試劑(南京化學(xué)試劑一廠)。

1.3 實驗方法

1.3.1 手術(shù)方法

C組與D組使用10%水合氯醛作為麻醉劑進(jìn)行腹腔注射。動物深度麻醉后取右上肢縱形切口，充分游離和暴露尺神經(jīng)、肌皮神經(jīng)，鈍性分離胸大肌、胸小肌，進(jìn)一步解剖尺神經(jīng)、肌皮神經(jīng)至外、內(nèi)側(cè)束起始處；隨后切除離起始段約1.5 mm處的尺神經(jīng)外膜，同時切斷肌皮神經(jīng)起始段，并將其與尺神經(jīng)外膜進(jìn)行縫合，以12-0縫線縫合3針；傷口內(nèi)撒入青霉素鈉粉末用以預(yù)防感染，最后以5-0縫線常規(guī)逐層縫合關(guān)閉傷口(見圖1)。A組完成神經(jīng)游離顯露后即關(guān)閉創(chuàng)面，作為實驗假手術(shù)對照組。B組將肌皮神經(jīng)與尺神經(jīng)進(jìn)行端端吻合，其余操作與C組與D組相同。術(shù)后1周，D組大鼠右側(cè)上肢用KT-90 A神經(jīng)肌肉電刺激儀(頻率為2 Hz,波長0.3 ms，電流峰值6～8 mA)給予經(jīng)皮電刺激；陽極置于右頸處，陰極置于肱二頭肌腹遠(yuǎn)端，刺激部位預(yù)先備皮脫毛，電極外敷導(dǎo)電糊后緊貼皮膚固定。成功進(jìn)行經(jīng)皮電刺激標(biāo)準(zhǔn)：電刺激時右上肢出現(xiàn)明顯二頭肌收縮，但動物無躁動及皮膚灼傷。經(jīng)皮電刺激每日進(jìn)行l(wèi)次，每次30 min，持續(xù)6周，動物常規(guī)飼養(yǎng)至13周處死。

注：U：尺神經(jīng)；M:正中神經(jīng)；MC：肌皮神經(jīng)。圖1 手術(shù)示意圖Note.U: Ulnar nerve；M: Median nerve; MC: Musculocutaneous nerve.Fig.1 Sketch map of the surgical operation

1.3.2 行為學(xué)評估及大體觀察

術(shù)后每周觀察各組大鼠患側(cè)肢體肌力恢復(fù)情況。通過在大鼠頭頂部皮膚手術(shù)側(cè)滴加冰水，觀察大鼠是否出現(xiàn)反射性屈肘、抬高患肢和抓撓頭頂?shù)仁嵯磩幼?，?jù)此評估大鼠的屈肘功能恢復(fù)情況。另外，通過二次手術(shù)肉眼大體觀察吻合神經(jīng)以及肱二頭肌外觀和形態(tài)。

1.3.3 電生理及組織學(xué)觀察

術(shù)后通過肌電圖檢測肌皮神經(jīng)傳導(dǎo)速度(nerve conductive velocity，NCV)和肌復(fù)合動作電位(compound muscle action potentials，CMAPs)進(jìn)行電生理學(xué)評估。術(shù)后13周，室溫下成功腹腔麻醉大鼠并稱重，術(shù)區(qū)常規(guī)備皮、消毒和鋪巾。再次打開右上肢內(nèi)側(cè)縱形切口暴露肌皮神經(jīng)，小心分離神經(jīng)旁增生黏連的結(jié)締組織，充分游離神經(jīng)后，進(jìn)行復(fù)合肌動作電位的測定：按Suzuki法把記錄電極前上方45°插入靶肌肱二頭肌中點0.2 cm深，干擾電極放在分離皮膚上，依次把電極放于肌皮神經(jīng)斷端吻合口遠(yuǎn)側(cè)和近側(cè)，電擊兩次，記錄CMAPs，測量波幅。測量兩次電極刺激位置之間的距離A(mm)及潛伏期差值B(ms)，A/B即可以得到神經(jīng)傳導(dǎo)速度，單位為 m/s。刺激參數(shù)：頻率1.1 Hz，波寬0.2 ms，刺激強(qiáng)度：3.0 mA。

利用免疫組織化學(xué)染色觀察神經(jīng)組織結(jié)構(gòu)，抗神經(jīng)絲蛋白-200(NF-200)染色特異性標(biāo)記神經(jīng)軸突以分析新生神經(jīng)纖維再生軸突情況，NF-200的陽性信號的多少反映再生神經(jīng)軸突的數(shù)量。

分離完整的肱二頭肌，分析天平上稱量其濕重，濕重比=(實驗側(cè)肌濕重/對側(cè)肌濕重)× 100%。

取肱二頭肌肌腹中部常規(guī)甲醛固定后行石蠟包埋切片，HE染色后用數(shù)字圖像分析法計算肱二頭肌肌纖維橫截面積，評價各組大鼠神經(jīng)纖維的再生情況以及肱二頭肌萎縮和神經(jīng)重支配狀況。

取吻合口遠(yuǎn)端2 mm處神經(jīng)組織標(biāo)本，常規(guī)戊二醛固定、脫水、樹脂包埋、超薄切片、鋨酸染色后利用透射電鏡進(jìn)行超微機(jī)構(gòu)的觀察。觀察神經(jīng)髓鞘再生成熟情況。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 行為學(xué)以及大體觀察觀察

各組大鼠術(shù)后切口愈合良好，未發(fā)生感染，各組大鼠梳洗試驗患肢出現(xiàn)不同程度的活動受限；2周時大鼠患肢屈肘活動較差；第8周時B組、C、D出現(xiàn)好轉(zhuǎn)。所有神經(jīng)吻合口處均無神經(jīng)瘤產(chǎn)生，周緣無明顯疤痕增生卡壓等情況。C組大鼠在第二次手術(shù)時可發(fā)現(xiàn)吻合口遠(yuǎn)端神經(jīng)明顯變細(xì)，肱二頭肌萎縮比較明顯。B組與D組神經(jīng)大體無明顯區(qū)別，肱二頭肌較A組輕度萎縮。

2.2 神經(jīng)電生理

術(shù)后肌皮神經(jīng)振幅、潛伏期、傳導(dǎo)速度結(jié)果見表1，C組和D組大鼠振幅、傳導(dǎo)速度低于A組，潛伏期高于A組；而D組大鼠振幅、傳導(dǎo)速度低于C組，潛伏期高于C組，差異有顯著性(P< 0.05)。

2.3 肱二頭肌濕重比及肌纖維橫截面積

各組大鼠肱二頭肌濕重比結(jié)果見表2，肌纖維橫截面積結(jié)果見表3，HE染色結(jié)果見圖2。從結(jié)果以及圖像中可見B、C、D三組大鼠肱二頭肌濕重比以及肌纖維橫截面積均低于A組，且C組肌肉恢復(fù)最差，差異有顯著性(P< 0.05)。

表1 各組大鼠肌皮神經(jīng)振幅、潛伏期、神經(jīng)傳導(dǎo)速度Tab.1 The amplitude, latency and nerve conduction velocity of the musculocutaneous nerve in the rats of each group

注：與A組比較，*P< 0.05；與C組比較，#P< 0.05。

Note.Compared with the group A，*P< 0.05. Compared with the group C,#P< 0.05.

注： A：A組；B：B組；C：C組；D：D組。圖2 肌纖維橫截面積(HE×200)Note.A:group A. B: group B. C: group C. D: group D.Fig.2 Cross-sectional area of muscle fibers. HE staining表2 各組大鼠肱二頭肌肌濕重比Tab.2 Wet weight ratio of biceps brachii muscle of the rats in each group

組別Groups濕重比WetweightratioA9865±370B8827±538?#C7234±519?D8485±436?#

注：與A組比較，*P< 0.05；與C組比較，#P< 0.05。

Note.Compared with the group A，*P< 0.05. Compared with the group C,#P< 0.05.

表3 各組大鼠肱二頭肌肌纖維橫截面積Tab.3 Transverse sectional area of biceps brachii muscle fibers in the rats of each group

注：與A組比較，*P< 0.05；與C組比較，#P< 0.05。

Note.Compared with the group A，*P< 0.05. Compared with the group C,#P< 0.05

2.4 新生神經(jīng)纖維軸突增生情況

D組NF-200陽性面積高于C組，但仍明顯低于B組，見表4。從表中可看出，D組NF-200表達(dá)明顯強(qiáng)于C組，但仍顯著少于B組，經(jīng)皮電刺激雖然能顯著提高端側(cè)吻合后神經(jīng)軸突再生能力，但仍與傳統(tǒng)的端端吻合有明顯差距。

表 4 各組大鼠肌皮神經(jīng)NF-200染色陽性的 面積百分比Tab.4 Ratios of NF-200 positive staining in the musculocutaneous nerve fibers of rats in each group

注：與A組比較，*P< 0.05；與C組比較，#P< 0.05；與B組比較，▲P< 0.05。

Note.Compared with the group A,*P< 0.05. Compared with the group C,#P< 0.05. Compared with the group B,▲P< 0.05.

注：A：A組；B：B組；C：C組；D：D組。圖3 電鏡檢查結(jié)果(×6000)Note.A: group A. B: group B. C: group C. D: group D.Fig.3 Ultrastructural changes of the nerve fibers

2.5 電鏡結(jié)果

電鏡檢查顯示B組神經(jīng)軸突結(jié)構(gòu)發(fā)育良好，神經(jīng)中絲、微管與線粒體較豐富，神經(jīng)纖維髓鞘成熟；C組雪旺細(xì)胞增生活躍，可見到新生的軸突及其散在分布、薄而不整的髓鞘，部分髓鞘形成同心圓板層結(jié)構(gòu)；D組有明顯的神經(jīng)束結(jié)構(gòu)，髓鞘厚度接近正常。電鏡檢查顯示B組神經(jīng)纖維髓鞘成熟，C組以無髓神經(jīng)纖維為主，髓鞘成熟度差。D組髓鞘增生情況較C組好轉(zhuǎn)，但仍有部分無髓神經(jīng)纖維存在。

3 討論

神經(jīng)端側(cè)吻合給臨床修復(fù)長段周圍神經(jīng)缺損尤其高位神經(jīng)損傷提供了一個可能的解決方法，但是神經(jīng)端側(cè)縫合和端端縫合修復(fù)結(jié)果是否等效，實驗結(jié)果是否代表臨床治療效果，仍存在廣泛的爭論[6,7]。研究表明，端側(cè)縫合可以達(dá)到端端縫合神經(jīng)再生能力的約76%～80%，為正常的55%～70%[8,9]。另一些實驗結(jié)果卻恰恰相反，神經(jīng)端側(cè)吻合后側(cè)枝萌出神經(jīng)纖維數(shù)量極少[10,11]。結(jié)果顯示，神經(jīng)端側(cè)吻合術(shù)后，主干神經(jīng)確有側(cè)枝萌出通過吻合口長入肌皮神經(jīng)，但與神經(jīng)端端吻合相比有明顯差距。神經(jīng)絲蛋白(NF)是構(gòu)成神經(jīng)細(xì)胞軸突中間絲的蛋白質(zhì)，常作為軸突特異性標(biāo)志之一，主要由NF-L、NF-M、NL-H三種特定的蛋白亞基組裝而成，為神經(jīng)纖維提供彈性防止斷裂[12]。NF-200表達(dá)水平可間接反映神經(jīng)軸突損傷再生程度；其表達(dá)越強(qiáng)，表示神經(jīng)纖維越多，說明神經(jīng)再生良好[13,14]。實驗結(jié)果表明，B組NF-200表達(dá)明顯強(qiáng)于C組，其結(jié)果有顯著性差異，證明端端吻合術(shù)后神經(jīng)軸突的恢復(fù)效果明顯優(yōu)于端側(cè)吻合，這與之前的一些報道相一致。通過電鏡進(jìn)行再生神經(jīng)組織的超微結(jié)構(gòu)觀察，可以看出C組神經(jīng)髓鞘結(jié)構(gòu)不完整，神經(jīng)纖維髓鞘成熟度差，見部分無髓神經(jīng)纖維。組織學(xué)的差距相應(yīng)反應(yīng)到實際生理功能，導(dǎo)致C組電生理指標(biāo)也與B組有明顯差距。綜合所有觀察指標(biāo)，神經(jīng)端側(cè)吻合術(shù)后確有神經(jīng)側(cè)枝萌出，但實際的效果仍與端端吻合存在一定差距。

多年來，國內(nèi)外學(xué)者通過大量的研究，已經(jīng)證實了電刺激的促進(jìn)神經(jīng)再生作用[15]。研究采用更容易在臨床中實踐應(yīng)用的經(jīng)皮電刺激方法，通過組織學(xué)以及電生理等技術(shù)手段檢測；結(jié)果顯示經(jīng)皮電刺激能有效促進(jìn)端側(cè)吻合后側(cè)枝神經(jīng)萌出，促進(jìn)側(cè)枝神經(jīng)萌出后的髓鞘成熟，但其與神經(jīng)端端吻合的再生結(jié)果相比仍有一定差距。同時，經(jīng)皮電刺激能顯著緩解肌肉的失神經(jīng)性萎縮，經(jīng)皮電刺激組術(shù)后的肱二頭肌組織學(xué)指標(biāo)與端端吻合組無明顯差異，證實經(jīng)皮電刺激在防止失神經(jīng)性肌肉萎縮方面作用較大，從而為神經(jīng)對于靶肌的再支配創(chuàng)造有利條件。因此，提高神經(jīng)端側(cè)吻合的實際臨床修復(fù)效果，側(cè)重點在于努力提高神經(jīng)側(cè)枝萌出數(shù)量，提高側(cè)枝萌出后神經(jīng)纖維髓鞘的成熟度；可以考慮經(jīng)皮電刺激的基礎(chǔ)上，通過改善神經(jīng)吻合技術(shù)、改善局部神經(jīng)再生微環(huán)境等途徑進(jìn)一步提高神經(jīng)端側(cè)吻合后側(cè)枝萌出的效率，配合電刺激對靶肌萎縮的保護(hù)作用，不失為一個有價值的臨床周圍神經(jīng)損傷修復(fù)的選擇。

[1] 孫宇楠, 李二平, 董世芬, 等. 實驗性糖尿病周圍神經(jīng)病變大鼠模型的步態(tài)行為分析 [J]. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志, 2014, 24(12): 14-19.

[2] 華飛, 陳冬萍. 經(jīng)皮電刺激在周圍神經(jīng)損傷中的臨床應(yīng)用[J]. 現(xiàn)代實用醫(yī)學(xué), 2014, 26(2): 169-170.

[3] Alrashdan MS, Park JC, Sung MA, et al. Thirty minutes of low intensity electrical stimulation promotes nerve regeneration after sciatic nerve crush injury in a rat model [J]. Acta Neurol Belg, 2010, 110(2): 168-179.

[4] 邱海勝, 林嘉豪, 繆道一, 等. 經(jīng)皮電刺激促進(jìn)腓總神經(jīng)損傷后神經(jīng)再生的臨床研究 [J]. 浙江創(chuàng)傷外科, 2012, 17(1): 16-18.

[5] 賈英偉, 段王平, 梁炳生, 等. 不同吻合面積影響神經(jīng)端側(cè)吻合法修復(fù)效果的實驗研究[J]. 實用骨科雜志, 2013, 19(5): 429-431.

[6] 賈英偉, 韋健, 梁炳生, 等. 外束膜開窗影響神經(jīng)端側(cè)吻合法修復(fù)效果的實驗研究 [J]. 山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報, 2013, 44(6): 439-442.

[7] 王煜, 閔祥輝, 張勤, 等. 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對大鼠周圍神經(jīng)端側(cè)吻合后神經(jīng)再生的影響 [J]. 中國醫(yī)學(xué)工程, 2014, 22(12): 5-6.

[8] Goheen-Robillard B, Myckatyn TM, Mackinnon SE, et al. End-to-side neurorrhaphy and lateral axonal sprouting in a long graft rat model [J]. Laryngoscope, 2002, 112(5): 899-905.

[9] Cederna PS, Kalliainen LK, Urbanchek MG, et al. “Donor” muscle structure and function after end-to-side neurorrhaphy [J]. Plast Reconstr Surg, 2001, 107(3): 789-796.

[10] 王瑜, 陳小剛, 李兵, 等. 利用端側(cè)神經(jīng)吻合方法建立人工體神經(jīng)—內(nèi)臟神經(jīng)反射弧的實驗研究 [J]. 中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志, 2013, 23(3): 19-22.

[11] 董傳江, 謝宗蘭, 張路生, 等. 內(nèi)臟神經(jīng)-體神經(jīng)端側(cè)吻合與端端吻合修復(fù)膀胱功能的比較 [J]. 中華實驗外科雜志, 2016, 33(6): 1461-1463.

[12] 王一兵, 何剪太, 馮永強(qiáng), 等. 蛋白基因產(chǎn)物9.5與神經(jīng)絲蛋白標(biāo)記瘢痕神經(jīng)效果的比較[J]. 中國臨床解剖學(xué)雜志, 2010, 28(3): 327-329.

[13] 楊立民, 李秀華, 張基仁, 等. 吻合口位置對周圍神經(jīng)端側(cè)吻合術(shù)后神經(jīng)再生的影響 [J]. 山東醫(yī)藥, 2011, 51(26): 26-28.

[14] Cavalcante Miranda de Assis CD, Martins Lima, Teixeira Goes B, et al. The parameters of transcutaneous electrical nerve stimulation are critical to its regenerative effects when applied just after a sciatic crush lesion in mice [J]. Biomed Res Int 2015, 2014(7): 1-8.

[15] Maciel FO, Viterbo F, Chinaque Lde F, et al. Effect of electrical stimulation of the cranial tibial muscle after end-to-side neurorrhaphy of the peroneal nerve in rats [J]. Acta Cir Bras, 2013, 28(1): 39-47.

Promotingeffectofpercutaneouselectricalstimulationonnerveregenerationafterend-to-sideneurorrhaphyinrats

SUN Qian， CAO Qun-hua， ZHU Wei， MEI Yuan-dong， GU Chen

(Department of Hand and Foot Surgery, the Second People’ s Hospital of Changshou City, Changshu 215500, China)

ObjectiveTo observe and explore the effect and clinical value of percutaneous electrical stimulation on nerve regeneration after end-to-side neurorrhaphy in rats.MethodsThirty-two SPF male S-D rats were randomly divided into four groups (n=8): group A, the normal control group; group B, with end to end neurorrhaphy of musculocutaneous nerve injury matched to the ulnar nerve; group C, with end to side neurorrhaphy of musculocutaneous nerve injury matched to the ulnar group; and group D, with end to side neurorrhaphy of musculocutaneous nerve injury matched to the ulnar nerve plus postoperative transcutaneous electrical stimulation (30 min per day for 6 weeks). Electromyography, postoperational nerve conduction velocity, the histological and ultrastructural changes of the nerve fibers were examined, and NF-200 expression in frozen sections was observed using imunohistological staining, to assess the recovery of muscle strength of the diseased side limb and the neuroregeneration in the rats after treatment.ResultsThe amplitude and conduction velocity of the groups C and D were lower than that of the group A, the latency was higher than that of the group A, while the amplitude and conduction velocity of the group D were lower than that of the group C, and the latency was higher than that of the group C. The wet weight ratio of the biceps brachii muscle and the cross-sectional area of muscle fibers in the groups B, C and D were lower than those in the group A, and the recovery of muscle in the group C was the worst. The expression of NF-200 in the rats of groups B, C and D was significantly lower than that in the group A, and the expression of NF-200 in the group D was significantly higher than that in the group C, but still significantly less than that in the group B (P< 0.05). Electron microscopy showed mature myelinated fibers in the group B, whereas unmyelinated fibers were the main component and the myelin sheath was poorly developed in the group C. The myelin regeneration in the group D was better than that in the group C, but still some unmyelinated nerve fibers were seen.ConclusionsThe percutaneous electrical stimulation can effectively promote nerve axonal regeneration and can delay the atrophy of the target muscle after end-to-side neurorrhaphy. Though there is difference compared with the end-to-end neurorrhaphy, the end-to-side neurorrhaphy is still an effective method in clinical repair of peripheral nerve injury.

Rat; Peripheral nerve injury; End to side neurorrhaphy; End to end neurorraphy; Neuroregeneration; Electrical stimulation; Histology; Electron microscopy

常熟市科技計劃項目任務(wù)書(csws201302)。

孫乾(1979-)，男，碩士生，主治醫(yī)師，研究方向：周圍神經(jīng)損傷。E-mail： sunqian1528sqywx@qq.com

R-33

A

1671-7856(2017) 12-0073-06

10.3969.j.issn.1671-7856. 2017.12.013

2017-04-07