王桂清

摘 要：目的：實(shí)驗(yàn)人員通過采取高效液相色譜法來對沙丁胺醇?xì)忪F劑里面存在的沙丁胺醇的含量進(jìn)行檢測。方法：把辛烷基硅烷鍵合硅膠當(dāng)作相應(yīng)的填充劑，而且還需要從庚烷磺酸鈉溶液精確提取2.87g的庚烷磺酸鈉及其2.5g的磷酸二氫鉀，添加適量的水進(jìn)行充分溶解，然后稀釋到大概1000ml的容量，這個(gè)時(shí)候?qū)嶒?yàn)人員通過使用磷酸溶液（1→2）調(diào)節(jié)該pH值到3.65]-乙腈（78：22）當(dāng)作相應(yīng)的流動相；在實(shí)際檢測的波長是220nm。結(jié)果：在系統(tǒng)適用性進(jìn)行的試驗(yàn)中存在的沙丁胺醇以及硫酸特布他林有著較好的分離效果，并且在0.112～1.12μg濃度范圍里面，沙丁胺醇進(jìn)樣量能夠和峰面積處于良好的狀態(tài)；得到的回收率是99.94%，RSD是1.40%；采取中間精密度進(jìn)行試驗(yàn)得到的RSD是1.25%；樣品溶液通常是在8小時(shí)的時(shí)候才能夠處于穩(wěn)定的狀態(tài)；重復(fù)性RSD是0.34%；對于沙丁胺醇的定量來說，一般控制在8.43ng的范圍。結(jié)論：通過使用該方法有著較多的優(yōu)勢，例如操作簡單，有著較強(qiáng)的準(zhǔn)確性，能夠當(dāng)作沙丁胺醇?xì)忪F劑里面對沙丁胺醇的含量的一種測試手段，值得在未來的道路上得到大力的推廣。

關(guān)鍵詞：沙丁胺醇?xì)忪F劑；沙丁胺醇；高效液相色譜法

顯而易見的是，沙丁胺醇?xì)忪F劑當(dāng)作我國相關(guān)藥典收藏的一種藥品，對于藥品存在的含量選擇的測定手段當(dāng)作高效液相色譜法，然而因?yàn)槠湎到y(tǒng)適用性得到的分離效果不明顯，這樣就需要實(shí)驗(yàn)人員對含量測定手段做好了詳細(xì)的分析，并對含量的測定方法進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

高效液相色譜儀，泵：LC-10AT，檢測器：RID-10A，工作站：N2000雙通道色譜工作站。

1.2 試藥

沙丁胺醇對照品（中國藥品生物制品檢定所，供含量測定用，批號為100204-200702）；硫酸特布他林對照品（中國藥品生物制品檢定所，供含量測定用，批號為100273-199701）；乙腈（色譜純），重蒸餾水，其余試劑為分析純。

2 方法和結(jié)果

2.1 色譜條件

用辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以庚烷磺酸鈉溶液[取庚烷磺酸鈉2.87g與磷酸二氫鉀2.5g，加水溶解并稀釋至1000ml，用磷酸溶液（1→2）調(diào)節(jié)pH值至3.65]-乙腈（78：22）為流動相；檢測波長為220nm；進(jìn)樣量20μl。

2.2 溶液制備

實(shí)驗(yàn)人員對照品溶液進(jìn)行制備的過程中，需要將沙丁胺醇對照品通過精密的方式進(jìn)行提取，并且加流動相進(jìn)行溶解并稀釋成每毫升大概為0.2mg的溶液。

實(shí)驗(yàn)人員通過系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)來對對照品存在的溶液進(jìn)行制備，并通過精密的方式將硫酸特布他林對照品及其相關(guān)沙丁胺醇對照品存在的含量進(jìn)行提取，加流動相進(jìn)行溶解的過程中需要稀釋成每毫升大概為0.2mg的溶液。

在對供試品溶液進(jìn)行制備的時(shí)候，實(shí)驗(yàn)人員將含有沙丁胺醇?xì)忪F劑樣品通過精密的方式提取了1瓶，采取撳壓噴射數(shù)次的手段放置到指定的容器中，采取精密的方式添加到流動相10ml，并且采取超聲的方式能夠促使沙丁胺醇得到充分的溶解，經(jīng)過認(rèn)真的過濾，提取濾液當(dāng)作相應(yīng)的供試品溶液。這個(gè)時(shí)候?qū)嶒?yàn)人員將不含有沙丁胺醇的樣品進(jìn)行提取，依據(jù)此種方法對陰性溶液進(jìn)行制備。

2.3 測定方法

精密量取供試品溶液和對照溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，見圖1～3。

3 方法學(xué)

3.1 檢測波長的確定

取沙丁胺醇對照品溶液，于190～400nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行紫外掃描，在220nm有最大吸收，故確定檢測波長為220nm。

3.2 線性試驗(yàn)

精密稱取沙丁胺醇對照品約14mg，置于50ml量瓶內(nèi)，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻；分別精密吸取1.0，3.0，5.0，7.0，10.0ml置50ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。照《中國藥典2010年版二部》附錄“高效液相色譜法”，在220nm波長處，分別吸取20μl測定峰面積，以峰面積-濃度求回歸方程，計(jì)算相關(guān)系數(shù)。

線性方程為：y=16424.59909x+543.19457，相關(guān)系數(shù)r=0.99999。

3.3 回收率試驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)人員采取精密的方法對不含有沙丁胺醇存在的陰性樣品9瓶的液體提取出來，并分別在鋁聽的側(cè)壁上面數(shù)字順著指定的位置鉆上適量的小孔，將其插入到相應(yīng)的注射針頭中（禁止和液面減少接觸的機(jī)會），把已經(jīng)氣化的拋射劑放入到具有50ml流動相中存在的100ml量瓶里面進(jìn)行注入，等到拋射劑除盡以后，除了要把鋁蓋除去之外，實(shí)驗(yàn)人員還需要對空瓶及其有關(guān)閥門零件通過流動相的方式洗滌幾次，并且每一次洗滌的數(shù)量是10ml，洗液并放置到指定的容器里面，編號為：實(shí)驗(yàn)人員需要通過精密的方法將沙丁胺醇原料提取含量為22.4mg、28mg、33.6mg各有三份，使用到上面的100ml容量瓶里面，通過振搖的方法促使其可以得到充分的溶解，通過加流動相的方法稀釋到指定的位置，經(jīng)過搖勻的方法，通過精密測量的方式提取5ml，放入到指定數(shù)量的量瓶中，通過采取加流動相的方法稀釋到指定的容量中，經(jīng)過充分的搖勻，當(dāng)作相應(yīng)的供試品溶液。不僅僅如此，實(shí)驗(yàn)人員采取精密的方法將沙丁胺醇對照品含量提取大概14mg，放置到指定的容器中，通過加流動相的方法進(jìn)行溶解并達(dá)到指定的位置，采取精密的方式提取為5.0ml的溶液放入到50ml量瓶里面，采取流動相的方式稀釋到指定的位置，通過搖勻的方法當(dāng)作相應(yīng)的對照品溶液。這個(gè)時(shí)候?qū)嶒?yàn)人員需要對上述供試品溶液及其對照品溶液進(jìn)行了分析，提取20μl在220nm波長階段對產(chǎn)生的定峰面積進(jìn)行了詳細(xì)的檢測，分別對沙丁胺醇含有的回收量及其回收率進(jìn)行分別的預(yù)算。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)得到的結(jié)果平均回收率大概在100.2%、99.9%、100.1%，而RSD是0.34%。

3.4 中間精密度試驗(yàn)

取同一批沙丁胺醇?xì)忪F劑樣品，由不同分析人員于不同時(shí)間按上法測定含量，RSD為0.49%；小于3.0%。

3.5 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)

取沙丁胺醇?xì)忪F劑按上法制備樣品溶液，分別于0、3、6、9、12小時(shí)進(jìn)樣，記錄苦參堿峰面積，RSD為1.28%，小于3.0%，樣品溶液在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

3.6 重復(fù)性

取沙丁胺醇?xì)忪F劑，分別按上法制備樣品溶液六份，測定沙丁胺醇的含量，結(jié)果含量分別為98.0%、98.3%、99.0%、98.7%、97.7%、97.6%，平均回收率為98.2%，RSD為0.58%。

3.7 定量限

取線性試驗(yàn)最低濃度的樣品溶液繼續(xù)稀釋，照《中國藥典2010年版二部》附錄“高效液相色譜法”在220nm波長處測定。以信噪比10：1的相應(yīng)濃度為定量限，結(jié)果，定量限為8.43ng。

4 樣品含量測定

用上述確定的方法對3批沙丁胺醇?xì)忪F劑樣品進(jìn)行含量測定，結(jié)果如下：

5 討論

該法能夠準(zhǔn)確而有效的測定沙丁胺醇?xì)忪F劑的含量，能夠有效的控制產(chǎn)品質(zhì)量。

參考文獻(xiàn)

[1]汪麟，劉立群，白政忠.沙丁胺醇?xì)忪F劑含量測定方法的改進(jìn)[J].黑龍江醫(yī)藥，2014（01）.

[2]何美燕，劉海燕.沙丁胺醇?xì)忪F劑致聲嘶1例[J].藥物流行病學(xué)雜志，2010（09）.

[3]霍天鳳.沙丁胺醇?xì)忪F劑微生物限度檢查的方法建立和驗(yàn)證[J].中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè)，2012（07）.

[4]謝艾莉，唐容，姚歡，李樹偉，張姝.共振光散射光譜法測定沙丁胺醇的研究[J].化學(xué)研究與應(yīng)用，2016（05）.endprint