趙文榮 郝京誠(chéng),* Heinz Hoffmann

?

磁性非對(duì)稱(chēng)雙鏈長(zhǎng)表面活性劑囊泡凝膠

趙文榮1郝京誠(chéng)1,*Heinz Hoffmann2

(1山東大學(xué)，膠體與界面化學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，濟(jì)南 250100；2Physikalische Chemie I, Bayreuth University, D-95440, Germany)

合成了一系列含磁性反離子的非對(duì)稱(chēng)雙疏水鏈長(zhǎng)的陽(yáng)離子表面活性劑，其中三氯一溴鐵合十六烷基戊基二甲基銨(C16C5DMA+[FeCl3Br]?)與偶氮羧酸鈉鹽(AzoNa4)在酸性條件水溶液中形成磁性囊泡凝膠。運(yùn)用cryo-透射電鏡(TEM)、冷凍蝕刻TEM (FF-TEM)、流變儀、傅里葉變換紅外光譜(FT-IR)和超導(dǎo)量子干涉(SQUID)等表征技術(shù)對(duì)囊泡凝膠進(jìn)行了結(jié)構(gòu)和性質(zhì)研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：凝膠含有曲率多變的融合性的雙層囊泡，這些雙分子層結(jié)構(gòu)模構(gòu)了自然界中各種物象的結(jié)構(gòu)輪廓，展現(xiàn)了不可預(yù)測(cè)的多變曲率和良好柔性。聚集體雙分子層膜內(nèi)由長(zhǎng)短不對(duì)稱(chēng)烷基鏈采取交錯(cuò)相扣的雙分子層排列模式，這種構(gòu)建模式結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，短烷基鏈可游離出囊泡雙分子層并伸向外部水相介質(zhì)。兩個(gè)相鄰囊泡間的短鏈在疏水相互作用下形成非共價(jià)的囊泡“補(bǔ)丁”，疏水的囊泡“補(bǔ)丁”克服相鄰囊泡之間的斥力而融合。磁性反離子[FeCl3Br]?不僅賦予囊泡磁性，且在囊泡的形成過(guò)程中調(diào)控烷基鏈的組裝。這種多形態(tài)融合性囊泡為揭示膜曲率的調(diào)節(jié)機(jī)制和構(gòu)建人工細(xì)胞提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和理論參考。

非對(duì)稱(chēng)雙鏈長(zhǎng)表面活性劑；粘連囊泡；磁性凝膠；雙分子層；多曲率

1 引言

生命是動(dòng)態(tài)的細(xì)胞自組裝體1，細(xì)胞雙層膜內(nèi)包裹著各種用于合成生物大分子和生產(chǎn)蛋白的細(xì)胞器2。但單個(gè)細(xì)胞是如何組裝成一個(gè)整體？這個(gè)過(guò)程中又存在何種相互作用，驅(qū)動(dòng)力又是什么？為了回答這些問(wèn)題，進(jìn)行細(xì)胞模擬和制備人工細(xì)胞等科學(xué)探究變得越來(lái)越有必要。在過(guò)去的幾十年里，許多課題組已通過(guò)制備囊泡，脂質(zhì)體，聚合物3和兩親嵌段共聚物膠束4等，復(fù)制和構(gòu)建了人工細(xì)胞2雙層結(jié)構(gòu)。特別是，Luisi課題組5報(bào)道了在細(xì)胞模擬合成生物學(xué)中的有趣過(guò)程。其他課題組針對(duì)刺激響應(yīng)性囊泡進(jìn)行了精巧的設(shè)計(jì)，如黏連性囊泡的溫度適應(yīng)性反應(yīng)1，呼吸性聚合物膠束以CO2調(diào)節(jié)膜通透性3，以及細(xì)菌雙層膜對(duì)環(huán)境壓力適應(yīng)性6。細(xì)胞中的脂質(zhì)雙分子層曲率有多種產(chǎn)生方式，如：膜蛋白片段非對(duì)稱(chēng)插入雙分子層或彎曲的蛋白結(jié)構(gòu)粘附到膜表面等7。

目前，人們開(kāi)始拓寬對(duì)構(gòu)建雙分子層結(jié)構(gòu)(如囊泡)的認(rèn)知，如研究脂質(zhì)離子液體的側(cè)鏈不飽和性8或Gemini表面活性劑的鏈不對(duì)稱(chēng)性9。雙分子層中側(cè)鏈不飽和性8和非對(duì)稱(chēng)性9可以用來(lái)探究結(jié)構(gòu)因素對(duì)膜動(dòng)力學(xué)的影響。在上個(gè)世紀(jì)Zana等10報(bào)道研究了不對(duì)稱(chēng)雙尾鏈單頭基表面活性劑。然而，雙分子層結(jié)構(gòu)中的長(zhǎng)短鏈的研究卻僅僅局限于常規(guī)不對(duì)稱(chēng)Gemini表面活性劑，對(duì)于單頭基非對(duì)稱(chēng)陽(yáng)離子表面活性劑形成的聚集結(jié)構(gòu)研究較少。本文合成了一系列非對(duì)稱(chēng)雙疏水尾鏈的磁性表面活性劑，其長(zhǎng)鏈為含有16個(gè)碳原子的飽和烴鏈，而短鏈含碳數(shù)為1、2、5、16不等。并以合成的不對(duì)稱(chēng)磁性陽(yáng)離子表面活性劑為基礎(chǔ)，在酸性環(huán)境下借助一種偶氮苯衍生物分子AzoNa4作為凝膠誘導(dǎo)劑，制備了磁性囊泡凝膠。AzoNa4分子含有四個(gè)羧酸基團(tuán)，帶負(fù)電荷，在溶液中類(lèi)似電解質(zhì)能夠有效地屏蔽表面活性劑分子帶正電頭基間的靜電斥力，減小頭基的有效面積，利于聚集體的構(gòu)建。此外，AzoNa4分子的四個(gè)羧酸基團(tuán)可以對(duì)pH值做出響應(yīng)，當(dāng)體系為酸性時(shí)，AzoNa4分子可以形成分子間氫鍵，在靜電作用下可以有效地固定磁性陽(yáng)離子表面活性劑分子，形成囊泡聚集體結(jié)構(gòu)，從而固定溶劑水的流動(dòng)，形成凝膠。本體系中制備的囊泡凝膠內(nèi)含豐富的雙分子層結(jié)構(gòu)。這些雙分子層結(jié)構(gòu)巧妙地模仿了自然界中各種物象的結(jié)構(gòu)輪廓(如西西里島和花生等)，展現(xiàn)了不可預(yù)測(cè)的多變曲率和良好柔性。通過(guò)傅里葉紅外(FT-IR)，發(fā)現(xiàn)體系在AzoNa4分子氫鍵和靜電屏蔽作用下，雙分子層中長(zhǎng)短烷基鏈交錯(cuò)相扣形成穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。密堆積的雙分子層聚集體不但具有不同的曲率和形狀，最有趣的是這些變形囊泡可以相互粘連，形成囊泡串珠結(jié)構(gòu)。而囊泡的粘連聚集會(huì)形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，固定水相的流動(dòng)9，從而形成凝膠。那么為什么囊泡會(huì)黏連成串？此前有人利用不對(duì)稱(chēng)Gemini表面活性劑制備了粘連囊泡，我們據(jù)此提出部分囊泡的短鏈會(huì)脫離囊泡雙分子層并伸向水相，在疏水作用驅(qū)動(dòng)下會(huì)與相鄰囊泡的疏水短鏈形成囊泡“補(bǔ)丁”。因此，疏水的囊泡“補(bǔ)丁”可以抵消囊泡間的排斥力，從而形成粘連結(jié)構(gòu)。通過(guò)SQUID研究，陰離子[FeCl3Br]?不僅僅賦予凝膠樣品以磁性，在雙分子層中烷基鏈的排布中也會(huì)起到重要的調(diào)節(jié)作用。本文的研究結(jié)果為制備功能性凝膠材料、磁性材料、膜曲率研究、模擬細(xì)胞制備等具有指導(dǎo)意義。

2 材料與方法

2.1 實(shí)驗(yàn)試劑

十六烷基戊基二甲基溴化胺，簡(jiǎn)寫(xiě)為(C16C5DMABr)，由德國(guó)Bayreuth大學(xué)Heinz Hoffmann教授贈(zèng)送。三氯一溴鐵合十六烷基戊基二甲基銨(C16C5DMA+[FeCl3Br]?)是將等摩爾的C16C5DMABr與無(wú)水三氯化鐵混合，以甲醇做溶劑溶解，室溫下攪拌過(guò)夜，之后80°C下旋蒸除去溶劑，生成暗棕色固體。其他三種非對(duì)稱(chēng)磁性表面活性劑(C16TMA+[FeCl3Br]?, C16C2DMA+[FeCl3Br]?, C16C16DMA+[FeCl3Br]?)也是用類(lèi)似方法合成所得。偶氮苯羧酸鈉鹽衍生物AzoNa4是根據(jù)之前的合成步驟合成所得。實(shí)驗(yàn)中所用超純水由成都優(yōu)普UPHW-III-90T型超純水儀制備，其電阻率為18.25 MΩ·cm。

2.2 樣品制備

凝膠樣品是按照以下步驟制備：將0.2331 g C16C5DMA+[FeCl3Br]?與0.0630 g AzoNa4溶于9.0 mL水中制備母液(濃度為44.44 mmol?L?1C16C5DMA+[FeCl3Br]?/11.11 mmol?L?1AzoNa4)。用濃度為200 mmol?L?1的HCl溶液進(jìn)行酸化。取HCl溶液(0.1000 g，200 mol?L?1)滴加到0.9000 g上述母液中，形成凝膠，此時(shí)樣品中各物質(zhì)的量濃度為40 mmol?L?1C16C5DMA+[FeCl3Br]?/10 mmol·L?1AzoNa4/20 mmol?L?1HCl(pH = 3.93)。其它三種非對(duì)稱(chēng)磁性表面活性劑(C16TMA+[FeCl3Br]?, C16C2DMA+[FeCl3Br]?, C16C16DMA+[FeCl3Br]?)也是用類(lèi)似方法制備。

2.3 實(shí)驗(yàn)儀器和方法

超導(dǎo)量子干涉儀測(cè)定：將凍干的樣品用聚丙烯膜包封并固定于塑料管上，置于超導(dǎo)量子干涉儀(SQUID, MPMSXL, Quantum Design, San Diego, CA)中進(jìn)行測(cè)定，測(cè)試在26.85°C (300 K)下進(jìn)行。

表面張力測(cè)定：表面張力是在德國(guó)KRUSS公司K100型程序表面張力儀上完成，實(shí)驗(yàn)溫度為(25.0±0.1) °C。測(cè)定采用的是動(dòng)態(tài)的Wilhelmy Pt片法。

圖1 變形蟲(chóng)顯微照片

The white arrows show the pseudopodium, which is a temporary projection of the cytoplasm. The bar indicates 100 μm. The green arrow directs the illustrating model of the plasma membrane (b, cell membrane) of(a). Model and molecular illustrate phospholipid (c, d).

流變測(cè)定：流變學(xué)性質(zhì)研究在美國(guó)HAAKE RS6000型流變儀上進(jìn)行。通過(guò)同軸圓筒-轉(zhuǎn)子傳感系統(tǒng)(Z41 Ti)測(cè)量較低黏度溶液樣品，轉(zhuǎn)子直徑(41.420 mm)/轉(zhuǎn)筒直徑(43.400 mm)；通過(guò)錐板傳感系統(tǒng)(C35/1°Ti L07116)測(cè)量較高黏度溶液樣品。

傅里葉變換-紅外光譜：德國(guó)Bruker Optics公司的VERTEX-70/70v紅外光譜儀。

低溫透射電鏡表征：在環(huán)境可控玻璃化系統(tǒng)(CEVS)中完成。環(huán)境溫度為25 °C。制樣過(guò)程如下：移取5 μL樣品涂于覆有碳支持膜的銅制微柵上，用兩片濾紙對(duì)銅制微柵上的樣品輕輕拍吸減薄，形成極薄的液膜。等待5 s后，將樣品迅速垂直沖置到液態(tài)乙烷制樣池中(–165 °C，液氮冷卻)。冷凍后的玻璃化的樣品保存在液氮中，之后由Gatan 626樣品桿轉(zhuǎn)移到TEM樣品腔中(日本電子，型號(hào)JEOL，JEM-1400，操作電壓為120 kV，溫度)進(jìn)行觀察。TEM的冷阱中以液氮維持低溫(–174 °C)。通過(guò)Gatan型多掃CCD采集樣品圖像。

冷凍蝕刻透射電鏡觀察(FF-TEM)：采用冷凍蝕刻透射電子顯微鏡(FF-TEM)觀察高粘度樣品中的聚集結(jié)構(gòu)。樣品通過(guò)冷凍蝕刻裝置(EM BAF 060，德國(guó)徠卡)進(jìn)行蝕刻和復(fù)型，溫度控制在?150 °C。通過(guò)日本JEOL生產(chǎn)的型號(hào)為JEM-1400電鏡觀察，電壓120 kV，通過(guò)Gatan型多掃CCD采集樣品圖像。

3 結(jié)果與討論

3.1 囊泡凝膠制備

首先，由非對(duì)稱(chēng)雙鏈陽(yáng)離子表面活性劑(C16C5DMA+[FeCl3Br]?)和偶氮苯羧酸鈉鹽衍生物AzoNa4在酸性環(huán)境下制備了囊泡凝膠。在自然界中變形蟲(chóng)是一種單細(xì)胞原生動(dòng)物，可以利用細(xì)胞質(zhì)的臨時(shí)凸起形成的偽足(圖1a)進(jìn)行變形運(yùn)動(dòng)。臨時(shí)的細(xì)胞質(zhì)偽足屬于一種脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)，為細(xì)胞質(zhì)膜(圖1b)。各種因素如鈣離子(Ca2+)11和肌動(dòng)蛋白12均可對(duì)細(xì)胞質(zhì)膜雙分子層的形狀變化和運(yùn)動(dòng)起重要的調(diào)節(jié)作用。細(xì)胞質(zhì)膜具有可變的曲率和較好的柔性，雙分子層的外部是親水頭基，內(nèi)部為疏水尾鏈。磷脂分子作為構(gòu)建細(xì)胞質(zhì)膜的基本單元分子，有一個(gè)極性頭基(親水性)和兩個(gè)非極性尾鏈(疏水性)，如圖1c和1d所示。當(dāng)前生物擬態(tài)學(xué)異常繁榮，其中一項(xiàng)便是以雙分子層組裝體為基本單元，復(fù)制和模仿生物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能。

受磷脂分子結(jié)構(gòu)啟發(fā)，我們合成了一系列具有兩條不同長(zhǎng)度尾鏈的不對(duì)稱(chēng)磁性表面活性劑，其長(zhǎng)鏈為含有16個(gè)碳原子的飽和烴鏈，而短鏈含碳數(shù)為1，2，5，16不等(圖2a和2b)。我們?cè)谒嵝原h(huán)境下(pH = 3.93)借助一種偶氮苯衍生物分子AzoNa4(圖2c)作為凝膠誘導(dǎo)劑，制備了雙分子層聚集體凝膠(圖2d)。這些陽(yáng)離子表面活性劑(磁性離子液體表面活性劑)由于其特殊的陰離子[FeCl3Br]?，所以本身帶有順磁性13(SQUID，圖3a)。隨著短鏈長(zhǎng)度的不同，其磁性質(zhì)和表面張力性能(圖3b和表1)差異明顯。由于短鏈鏈長(zhǎng)的不同，這一系列表面活性劑制備的樣品中的微觀結(jié)構(gòu)也有所不同，如蠕蟲(chóng)狀膠束和囊泡(圖4)。換句話說(shuō)，聚集體的類(lèi)型取決于較短鏈的長(zhǎng)度。顯而易見(jiàn)，固定長(zhǎng)鏈長(zhǎng)度，較短鏈越長(zhǎng)，表面活性劑的疏水性則越強(qiáng)。因此，較短鏈的長(zhǎng)度增長(zhǎng)會(huì)誘導(dǎo)聚集體從一維生長(zhǎng)的蠕蟲(chóng)狀膠束轉(zhuǎn)變到三個(gè)維度的變形雙分子層囊泡。根據(jù)臨界堆積參數(shù)理論 (Critical Packing Parameter Theory)，/00，其中，代表臨界堆積參數(shù)；0代表表面活性劑分子的平均頭基橫截面積；0代表表面活性劑分子平均疏水鏈鏈長(zhǎng)；代表疏水鏈體積。當(dāng)< 1/3時(shí)，聚集體一般為球狀膠束；當(dāng)1/3 << 1/2時(shí)，一般容易形成蠕蟲(chóng)狀膠束；當(dāng)1/2 << 1時(shí)，一般易形成囊泡。在我們這個(gè)體系中，由于疏水短鏈越來(lái)越長(zhǎng)，造成疏水鏈的體積增大，最終造成臨街堆積參數(shù)值的增大。所以我們觀察到我們的體系聚集體結(jié)構(gòu)由蠕蟲(chóng)狀膠束(1/3 << 1/2)轉(zhuǎn)變到囊泡(1/2 << 1)。當(dāng)較短鏈增長(zhǎng)至16個(gè)碳時(shí)，疏水性最強(qiáng)，最終導(dǎo)致過(guò)于疏水而不能形成聚集體。下面我們將詳細(xì)討論所形成聚集體的結(jié)構(gòu)形態(tài)，粘附性和曲率等。

圖2 非對(duì)稱(chēng)表面活性劑的(a)化學(xué)結(jié)構(gòu)式和(b)填充模型；(c)AzoNa4分子結(jié)構(gòu)；(d) C16C5DMA+[FeCl3Br]?/10 mmol?L?1與AzoNa4/20 mmol?L?1 HCl分子形成的凝膠照片

(a) (I) C16TMA+[FeCl3Br]?, (II) C16C2DMA+[FeCl3Br]?, (III) C16C5DMA+[FeCl3Br]?, (IV) C16C16DMA+[FeCl3Br]?. (d) The viscous sample can be referred to in the following.

圖3 磁性陽(yáng)離子表面活性劑的(a)磁滯回線和(b)表面張力曲線

表1 不同表面活性劑在(25.0 ± 0.1) oC時(shí)的表面張力

C16C16DMA+[FeCl3Br]?has a poor solubility, and it is hard to get its exact surface tensional values.

圖4 樣品cryo-TEM形貌。四種磁性陽(yáng)離子表面活性劑(40 mmol?L?1)與AzoNa4分子(10 mmol?L?1)在20 mmol?L?1 HCl存在時(shí)形成的凝膠微觀結(jié)構(gòu)

surfactants: (a) C16TMA+[FeCl3Br]?, (b) C16C2DMA+[FeCl3Br]?, (c) C16C5DMA+[FeCl3Br]?, (d) C16C16DMA+[FeCl3Br]?. For different shorter chain lengths, the morphologies vary as denoted by the illustrations.

圖5 粘性凝膠樣品的Cryo-TEM圖

圖6 粘性凝膠樣品的Cryo-TEM (a, b)和FF-TEM (c, d)圖片和粘連囊泡串Cryo-TEM (e, f)形貌

本文中表面活性劑的不對(duì)稱(chēng)性顯而易見(jiàn)，這種不對(duì)稱(chēng)性會(huì)在制備雙分子層聚集體的結(jié)構(gòu)中得到反映。選取非對(duì)稱(chēng)性最為明顯的C16C5DMA+[FeCl3Br]?分子(圖2)，包含一條含16個(gè)碳的長(zhǎng)鏈，一條含5個(gè)碳的短鏈，以及順磁性陰離子[FeCl3Br]?。我們固定AzoNa4濃度，通過(guò)改變C16C5DMA+[FeCl3Br]?和酸的濃度，發(fā)現(xiàn)在濃度為40 mmol?L?1C16C5DMA+[FeCl3Br]?/10 mmol?L?1AzoNa4/20 mmol?L?1HCl時(shí)的樣品呈現(xiàn)凝膠狀態(tài)。如圖5為該凝膠樣品的冷凍透射電鏡結(jié)果，可以看到一系列不同形狀的封閉的膠體雙層聚集體結(jié)構(gòu)。這些囊泡具有不可預(yù)知的曲率和較好的柔性。大部分極度變形的囊泡(圖5)的尺寸分布在100到500 nm之間。對(duì)于含長(zhǎng)短烷基鏈的不對(duì)稱(chēng)Gemini表面活性劑，Menger等9認(rèn)為不對(duì)稱(chēng)性會(huì)導(dǎo)致特殊的形貌。然而，他們采用的不對(duì)稱(chēng)Gemini表面活性劑含有兩個(gè)極性頭基，而在本實(shí)驗(yàn)中我們所使用的表面活性劑只有一個(gè)極性頭基?？紤]到這兩種不對(duì)稱(chēng)表面活性劑的結(jié)構(gòu)相似性(不對(duì)稱(chēng)性)和差異性(頭基數(shù)目和反離子)，我們推測(cè)這種特殊的表面活性劑的兩個(gè)烷基鏈的不對(duì)稱(chēng)性和磁性反離子對(duì)于決定聚集體結(jié)構(gòu)至關(guān)重要。對(duì)于不對(duì)稱(chēng)性表面活性劑，長(zhǎng)短烷基鏈交錯(cuò)相扣有助于形成穩(wěn)定的囊泡聚集體結(jié)構(gòu)，在疏水作用驅(qū)動(dòng)下會(huì)與相鄰囊泡的疏水短鏈形成囊泡“補(bǔ)丁”。磁性反離子(如[FeCl3Br]?等)由于具有磁性和疏水特性，疏水的反離子[FeCl3Br]?會(huì)進(jìn)入囊泡或者膠束的疏水內(nèi)核，與陽(yáng)離子表面活性劑的烷基鏈產(chǎn)生疏水相互作用，并與AzoNa4(或AzoH4)分子之間發(fā)生相互作用，甚至將其磁化。

3.2 黏連性囊泡

雙層囊泡的凝聚是一個(gè)重要而有趣的現(xiàn)象。當(dāng)膠束一維生長(zhǎng)，形成蠕蟲(chóng)狀膠束13?15或囊泡16時(shí)，便很容易形成凝膠態(tài)樣品。揚(yáng)州大學(xué)郭榮老師課題組17利用離子液體表面活性劑研究了鏈長(zhǎng)對(duì)于六角相液晶-蠕蟲(chóng)狀膠束-凝膠的轉(zhuǎn)變的影響。上海交通大學(xué)的顏德岳老師課題組18報(bào)道了聚合物囊泡的多級(jí)組裝過(guò)程，囊泡通過(guò)特異性的位點(diǎn)識(shí)別結(jié)合黏連形成線狀、枝狀和網(wǎng)絡(luò)狀的囊泡鏈狀結(jié)構(gòu)，我們體系中也觀察到相同的現(xiàn)象。那么這種溶液樣品是如何形成粘性囊泡凝膠的呢？由Cryo-TEM圖像和FF-TEM圖像(圖6(a?d))清晰的看到密堆積的具有不同曲率和形狀的雙分子層結(jié)構(gòu)(變形囊泡)。有趣的是，他們有些是粘連的或有粘連的趨勢(shì)，甚至形成了囊泡串(圖6(e, f))。囊泡的粘連吸附形成了復(fù)雜的變形囊泡網(wǎng)絡(luò)，將水固定9形成凝膠樣品。與文獻(xiàn)對(duì)比9，結(jié)合我們涉及的體系，可以推測(cè)這種囊泡間的黏連源于囊泡組成分子(即C16C5DMA+[FeCl3Br]?和AzoH4)間的作用力。主要討論四點(diǎn)：(1) 對(duì)于不對(duì)稱(chēng)性表面活性劑，長(zhǎng)短烷基鏈交錯(cuò)相扣有助于形成穩(wěn)定的囊泡聚集體結(jié)構(gòu)9，在疏水作用驅(qū)動(dòng)下會(huì)與相鄰囊泡的疏水短鏈形成囊泡“補(bǔ)丁”，這會(huì)造成囊泡之間的黏連；(2) 對(duì)于我們這個(gè)體系中所采用的含四個(gè)羧基的偶氮苯衍生物分子AzoNa4，AzoNa4的加入利于屏蔽表面活性劑分子的帶正電的頭基間的靜電斥力，減小頭基有效面積，利于囊泡16的形成；(3) 在酸性條件下，AzoNa4被質(zhì)子化為AzoH4，AzoH4之間存在分子間氫鍵作用，這會(huì)增強(qiáng)聚集體囊泡的強(qiáng)度；(4)較AzoNa4分子而言，質(zhì)子化后的AzoH4的疏水性更強(qiáng)，通過(guò)疏水作用，AzoH4分子更易與C16C5DMA+[FeCl3Br]?疏水鏈C16C5DMA+發(fā)生作用，在疏水作用下形成囊泡聚集體。

3.3 囊泡間的作用力

囊泡之間存在靜電斥力，那么C16C5DMA+[FeCl3Br]?分子間存在何種作用力可以抵消使囊泡分離的靜電斥力？根據(jù)前人建立的理論模型9，對(duì)于具有兩個(gè)不等長(zhǎng)度烷基鏈的非對(duì)稱(chēng)表面活性劑，他們自組裝成雙分子層囊泡的示意圖如圖7所示。在自組裝過(guò)程中，在雙分子層結(jié)構(gòu)中較長(zhǎng)鏈和較短鏈相互交錯(cuò)勾連，并產(chǎn)生曲率(圖7)。長(zhǎng)短鏈的相互補(bǔ)償交錯(cuò)可以穩(wěn)定雙分子層結(jié)構(gòu)。FT-IR數(shù)據(jù)如圖8所示，在酸性條件下，AzoH4分子形成分子間氫鍵16。加入酸(HCl)后，偶氮苯衍生物分子中羰基(C＝O)的非對(duì)稱(chēng)伸縮振動(dòng)峰由1574.09 cm?1(AzoNa4)位移至1725.78 cm?1(AzoH4)，AzoH4分子形成分子間氫鍵。FT-IR數(shù)據(jù)表明：由于C16C5DMA+[FeCl3Br]?分子的極性頭基-+N(CH3)2C16C5既沒(méi)有氫鍵受體也沒(méi)有氫鍵供體，所以分子間的氫鍵只存在于AzoH4分子之間，然而C16C5DMA+[FeCl3Br]?分子烴鏈質(zhì)子振動(dòng)峰的明顯振動(dòng)位移表明C16C5DMA+[FeCl3Br]?分子受AzoH4分子之間氫鍵的影響。也就是說(shuō)，由于靜電作用，C16C5DMA+[FeCl3Br]?分子緊密的排布在氫鍵鏈接的AzoH4分子周?chē)?。換句話說(shuō)，疏水的AzoH4分子可以被精巧的包裹進(jìn)C16C5DMA+[FeCl3Br]?雙分子層。此外，較AzoNa4分子而言，質(zhì)子化后的AzoH4的疏水性更強(qiáng)，通過(guò)疏水作用，AzoH4分子更易與C16C5DMA+[FeCl3Br]?疏水鏈C16C5DMA+發(fā)生作用，在疏水作用下形成囊泡聚集體。我們知道，向表面活性劑體系添加鹽類(lèi)，可以通過(guò)靜電屏蔽作用壓縮了表面活性劑的頭基面積0，提高了臨界堆積參數(shù)因子數(shù)值，創(chuàng)造合適構(gòu)筑囊泡結(jié)構(gòu)的有效分子幾何。在我們這個(gè)體系中，引入AzoH4分子可以屏蔽C16C5DMA+頭基之間的靜電斥力，使得疏水鏈的堆積更加緊密。這種補(bǔ)償交錯(cuò)的機(jī)理不僅適用于我們的體系，對(duì)于含有長(zhǎng)短鏈烷基的不對(duì)稱(chēng)Gemini表面活性劑9和含不飽和烷基鏈的腰果兩親分子1也同樣適用。那為什么囊泡能黏連成囊泡串珠？對(duì)于含有長(zhǎng)短鏈烷基的不對(duì)稱(chēng)Gemini表面活性劑9，科學(xué)家認(rèn)為，短鏈會(huì)游離出囊泡雙層并伸向外部9。同樣道理，我們認(rèn)為兩個(gè)相鄰囊泡間的短鏈在疏水相互作用下形成非共價(jià)的囊泡“補(bǔ)丁”，從而將相鄰的囊泡“黏連”在一起，形成囊泡串珠結(jié)構(gòu)。

圖7 囊泡雙分子層互補(bǔ)交錯(cuò)模型和多曲率囊泡黏附機(jī)理

圖8 樣品FT-IR譜圖

stock solution (green line), the viscous sample (pink line), pure AzoNa4(blue line), AzoH4(red line) and C16C5DMA+[FeCl3Br]?(purple line). color online.

3.4 黏連性囊泡凝膠的流變學(xué)性質(zhì)

疏水的囊泡“補(bǔ)丁”可以克服相鄰囊泡間雙分子層膜的斥力，并誘發(fā)囊泡的黏連。由于囊泡串珠結(jié)構(gòu)是在弱疏水作用力下形成，施加額外應(yīng)力極有可能會(huì)破壞這種弱的囊泡聯(lián)結(jié)作用?？梢韵胂螅缛裟遗荽榻Y(jié)構(gòu)破壞，會(huì)反映于樣品的宏觀流動(dòng)特性。為驗(yàn)證我們的假設(shè)，我們通過(guò)流變儀施加外界應(yīng)力，并測(cè)量流變數(shù)據(jù)。在應(yīng)力掃描模式(圖9)下我們對(duì)含有囊泡串珠的粘性凝膠樣品施加不同的剪切力。發(fā)現(xiàn)粘性凝膠樣品屈服于外加應(yīng)力，樣品的彈性模量?在2?10 Pa的應(yīng)力范圍內(nèi)逐漸下降，屈服應(yīng)力為2 Pa。由實(shí)驗(yàn)可得出，粘性凝膠樣品在破壞性應(yīng)力扭矩超過(guò)屈服應(yīng)力時(shí)，囊泡間的粘連會(huì)被破壞。當(dāng)然，疏水的囊泡“補(bǔ)丁”不僅可以誘導(dǎo)囊泡串珠的形成，也可以限制水的隨意流動(dòng)，增加樣品的粘彈性。在這個(gè)非對(duì)稱(chēng)表面活性劑聚集體模型體系中，如果表面活性劑的短鏈很短(如C16C2DMA+[FeCl3Br]?)，囊泡間的疏水相互作用會(huì)減弱，反映到聚集體結(jié)構(gòu)上我們看到囊泡融合，甚至形成囊泡的團(tuán)簇(圖4b)；如果表面活性劑的短鏈太長(zhǎng)或是與長(zhǎng)鏈等長(zhǎng)(如C16C16DMA+[FeCl3Br]?)，他們將很難脫離雙分子層，甚至不能聚集(圖4d)，這是因?yàn)殚L(zhǎng)鏈脫離雙分子層進(jìn)入水相在能量上是極不穩(wěn)定的。此外，長(zhǎng)鏈脫離雙分子層會(huì)對(duì)雙分子層造成嚴(yán)重的缺陷，遺留不穩(wěn)定位點(diǎn)。綜上所述，兩個(gè)相鄰囊泡間較短烷基鏈的疏水締合造成了囊泡間的粘連，從而形成囊泡串珠結(jié)構(gòu)。

圖9 粘性凝膠樣品的應(yīng)力掃描模式圖

elastic modulus? and viscous modulus? for the viscous sample as a function of imposed stress.

圖10 粘性凝膠樣品對(duì)于磁鐵(1 T)的響應(yīng)性照片(a)和磁滯回線(b,c)

3.5 囊泡凝膠磁性質(zhì)

這些磁表面活性劑不僅具有兩親性分子的基本特征(兩親性)，而且其反離子中包含有鹵素和過(guò)渡金屬元素，如[FeCl4]?、[FeCl3Br]?、[CoCl4]2?、MnCl4]2?和[GdCl6]3?等19，這類(lèi)含特殊磁性反離子的磁性表面活性劑在一定溫度范圍內(nèi)(50?350 K)表現(xiàn)為順磁性行為。對(duì)于我們上文制備的囊泡凝膠樣品，反離子[FeCl3Br]?也賦予其順磁特性和微弱的鐵磁性。囊泡凝膠樣品能保持穩(wěn)定一個(gè)月以上，時(shí)間更長(zhǎng)則會(huì)逐漸出現(xiàn)相分離。通過(guò)施加垂直磁場(chǎng)(1T)，沉淀物可以被磁場(chǎng)吸引并遷移至空氣-水界面(圖10a)，證實(shí)樣品具有微弱的鐵磁性。SQUID測(cè)試(圖10b)表明凍干樣品為典型的順磁性，這意味著它可以被外部磁場(chǎng)微弱磁化。如圖10c中給出了可近乎忽略不計(jì)的磁滯回線，說(shuō)明樣品同時(shí)具有微弱的鐵磁性。需要指出的是，陰離子[FeCl3Br]?不僅僅賦予樣品以磁性，在烷基鏈的組裝過(guò)程中也會(huì)起到重要的作用。Eastoe等20認(rèn)為陰離子[FeCl3Br]?為疏水性的，會(huì)與陽(yáng)離子表面活性劑的烷基鏈發(fā)生疏水相互作用，從而插入到膠束疏水內(nèi)核中。同樣，我們推測(cè)疏水陰離子[FeCl3Br]?會(huì)與磁性陽(yáng)離子表面活性劑的疏水烷基鏈發(fā)生作用，進(jìn)而插入到雙分子層的疏水鏈中，導(dǎo)致聚集體產(chǎn)生磁性。文獻(xiàn)報(bào)道，在不同烷基鏈長(zhǎng)度的海洋細(xì)菌21中，通過(guò)引入三價(jià)鐵(III)離子，觀察到了由膠束向囊泡的自發(fā)相變。對(duì)于囊泡凝膠樣品，含鐵反離子[FeCl3Br]?對(duì)于C16C5DMA+[FeCl3Br]?分子形成雙分子層結(jié)構(gòu)所起的作用必將是一個(gè)有意義的課題。在金屬離子對(duì)烷基鏈的聚集，曲率的產(chǎn)生、手性雙分子層結(jié)構(gòu)22?28以及結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變過(guò)程中調(diào)控機(jī)理等，我們還需繼續(xù)進(jìn)一步研究探索。需要指出的是，磁響應(yīng)陽(yáng)離子表面活性劑具有良好的應(yīng)用前景，由于磁性表面活性劑是分子磁體，區(qū)別于傳統(tǒng)的磁流體(鐵磁流體)，而傳統(tǒng)的磁流體是將直徑約10 nm磁性膠體粒子分散在載體液中。而且，這些磁性表面活性劑即便溶解于稀水溶液中依然具有磁響應(yīng)性質(zhì)。此外，溶于水的磁性表面活性劑可以進(jìn)一步組裝形成聚集體結(jié)構(gòu)，例如可以形成蠕蟲(chóng)狀膠束，通過(guò)蠕蟲(chóng)狀膠束的形成，可以為我們提供一種新思路：那就是通過(guò)形成膠體聚集體結(jié)構(gòu)(如蠕蟲(chóng)狀膠束、囊泡等)來(lái)調(diào)控磁性。在我們之前的報(bào)道中，蠕蟲(chóng)狀膠束的形成使得磁性離子液體復(fù)合物的鐵磁性升高至約原來(lái)的4倍。這一研究結(jié)果可以后來(lái)的研究者提出一種新的策略，即通過(guò)形成膠體聚集體，優(yōu)化和調(diào)控磁性離子液體的磁性，并理解分子磁體磁性產(chǎn)生的根源和本質(zhì)。

4 結(jié)論

詳細(xì)研究了非對(duì)稱(chēng)陽(yáng)離子表面活性劑制備的順磁性囊泡凝膠。通過(guò)Cryo-TEM、FF-TEM、FT-IR、SQUID和流變學(xué)方法對(duì)囊泡凝膠樣品進(jìn)行了表征。根據(jù)文獻(xiàn)，在自組裝過(guò)程中雙分子層結(jié)構(gòu)中較長(zhǎng)鏈和較短鏈相互交錯(cuò)勾連，可以穩(wěn)定雙分子層結(jié)構(gòu)。FT-IR光譜表明：酸性環(huán)境下，AzoH4分子形成分子間氫鍵，屏蔽雙分子層C16C5DMA+頭基之間的靜電斥力，促進(jìn)疏水鏈的緊密堆積。由SQUID測(cè)試和文獻(xiàn)可得，陰離子[FeCl3Br]?不僅僅賦予樣品以磁性，在烷基鏈的組裝過(guò)程中也會(huì)起到重要的調(diào)控作用。本文旨在研究鏈不對(duì)稱(chēng)表面活性劑囊泡體系的形態(tài)和黏附性等，不僅有助于揭示調(diào)節(jié)膜曲率的基本機(jī)制，也會(huì)為更好地了解細(xì)胞內(nèi)吞作用(吞噬和胞飲)、變形運(yùn)動(dòng)和人工制備細(xì)胞提供數(shù)據(jù)支持和理論指導(dǎo)。

(1) Balachandran, V. S.; Jadhav, S. R.; Pradhan, P.; Carlo, S. D.; John, G.2010,, 9509. doi: 10.1002/anie.201002260

(2) Martino, C.; Kim, S. H.; Horsfall, L.; Abbaspourrad, A.; Rosser, S. J.; Cooper, J.; Weitz, D. A.2012,, 6416.

doi: 10.1002/anie.201201443

(3) Yan, Q.; Wang, J.; Yin, Y.; Yuan, J.2013,, 5070. doi: 10.1002/anie.201300397

(4) Goertz, M. P.; Marks, L. E.; Monta?o, G. A.2012,, 1532. doi: 10.1021/nn204491q

(5) Luisi, P. L.; Stano, P.2011,755. doi: 10.1038/nchem.1156

(6) Lee, J.; Jung, S.; Lowe, S.; Zeikus, J. G.; Hollingsworth, R. I.1998,, 5855. doi: 10.1021/ja980126k

(7) Kirchhausen, T.2012,, 906. doi: 10.1038/ncb2570

(8) Murray, S. M.; O?Brien, R. A.; Mattson, K. M.; Ceccarelli, C.; Sykora, R. E.; West, K. N.; Davis, Jr., J. H.2010,, 2755. doi: 10.1002/anie.200906169

(9) Menger, F. M.; Peresypkin, A. V.2003,, 5340. doi: 10.1021/ja021298r

(10) Lianos, P.; Lang, J.; Zana, R.1983,, 276. doi: 10.1016/0021-9797(83)90333-8

(11) Cobbold, P. H.1980,, 441. doi: 10.1038/285441a0

(12) H?ckl, W.; B?rmann, M.; Sackmann, E.1998,, 1786. doi: 10.1103-PhysRevLett.80.1786

(13) Zhao, W.; Dong, S.; Hao, J.2015,, 11243.

doi: 10.1021/acs.langmuir.5b03148

(14) Zhao, W.; Wang, D.; Lu, H.; Wang, Y.; Sun, X.; Dong, S.; Hao, J.2015,, 2288. doi: 10.1021/acs.langmuir.5b00423

(15) Zhao, W.; Hao, J.2016,, 303.

doi: 10.1016/j.jcis.2016.06.018

(16) Zhao, W.; Feng, L.; Xu, L.; Xu, W.; Sun, X.; Hao, J.2015,, 5748. doi: 10.1021/acs.langmuir.5b01147

(17) Hu, Y.; Han, J.; Ge, L.; Guo, R.2015,, 12618.

doi: 10.1021/acs.langmuir.5b03382

(18) Jin, H.; Zhou, Y.; Huang, W.; Yan, D.2010,, 14512.

doi: 10.1021/la102963w

(19) Sesto, R. E. D.; McCleskey, T. M.; Burrell, A. K.; Baker, G. A.; Thompson, J. D.; Scott, B. L.; Wilkes, J. S.; Williams, P.2008, 447. doi: 10.1039/b711189d

(20) Brown, P.; Bushmelev, A.; Butts, C. P.; Cheng, J.; Eastoe, J.; Grillo, I.; Heenan, R. K.; Schmidt, A. M.2012,, 2464. doi: 10.1002/ange.201108010

(21) Martinez, J. S.; Zhang, G. P.; Holt, P. D.; Jung, H. T.; Carrano, C. J.; Haygood, M. G.; Butler, A.2000,, 1245. doi: 10.1126/science.287.5456.1245

(22) Kunitake, T.; Nakashima, N.; Hayashida, S.; Yonemori, K.1979,, 1413. doi: 10.1246/cl.1979.1413

(23) Nakashima, N.; Morimitsu, K.; Kunitake, T.1984,, 3253. doi: 10.1246/bcsj.57.3253

(24) Ouyang, Z.; Liu, J.1990,, 1679. doi: 10.1103/PhysRevLett.65.1679

(25) Mohanty, A.; Dey, J.2004,, 8452. doi: 10.1021/la035958x

(26) Nakashima, N.; Asakuma, S.; Kunitake, T.1985,, 509. doi: 10.1021/ja00288a043

(27) Fuhrhop, J. H.; Schnieder, P.; Rosenberg, J.; Boekema, E.1987,, 3387. doi: 10.1021/ja00245a032

(28) Fuhrhop, J. H.; Demoulin, C.; Rosenberg, J.; Boettcher, C.1990,, 2827. doi: 10.1021/ja00163a069

Vesicle Gels of Magnetic Asymmetric Surfactants

ZHAO Wen-Rong1HAO Jing-Cheng1,*Heinz Hoffmann2

(1;2)

This report details the synthesis of a series of special magnetic cationic surfactants that contained two asymmetric alkyl chains, cetylpentyldimethylammonium trichloromonobromoferrate (C16C5DMA+[FeCl3Br]?). The fabrication of magnetic, adhesive, poly-morphological bilayer vesicle gels with unpredictable curvature and high flexibility was investigated in detail. These colloidal bilayer nano-transformers self-adhered to form a string; they also exhibited transformable morphologies that were investigated using cryo-transmission electron microspcopy (TEM), freezing-fracture transmission electron microscopy (FF-TEM), rheological analysis, Fourier transform infrared spectrometry (FT-IR), and superconducting quantum interference device (SQUID) techniques. Significantly, the deformed vesicles cohered to the gibbous bilayer protrusions, which closely resembled the pseudopodia of. These bilayer nano-transformers were capable of imitating structures and outlines of the natural world that, through human imagination, ranged from the island of Sicily in Italy to the larva of theand the common peanut. Most of the bilayer nano-transformers were endowed with unpredictable multi-curvature and high flexibility. A mechanism for the interlocking of the long and short alkyl chains in a bilayer arrangement was proposed in this study. The short chains departed from the bilayer to protrude externally; then, they associated non-covalently into inter-vesicular patches because of their hydrophobic interactions. Consequently, the hydrophobic inter-vesicular patches could supersede the repulsion between the vesicle membranes and allowed the vesicles to cohere. Of equal importance was that the anions [FeCl3Br]?could not only impart magnetism to the transformable vesicles, but could also tune the organization through the arrangements of the alkyl chains during the assembly process. Thus, the poly-morphology, adhesiveness, and curvature protrusions of this astounding colloidal “” are eminently exploitable. This not only revealed the rudimentary regulatory mechanism of the membrane curvature, but also provided clues for the advancement of artificial cell fabrication.

Asymmetric surfactant; Cohesive vesicle; Magnetic gel; Bilayer; Multi-curvature

February 28, 2017;

March 20, 2017;

April 19, 2017.

Corresponding author. Email: jhao@sdu.edu.cn; Tel: +86-531-88366074.

10.3866/PKU.WHXB201704193

O648

The project was supported by the National Natural Science Foundation of China (2140102006), and the Specialized Research Fund for the Doctoral Program of Higher Education, China (20130131130005).

國(guó)家自然科學(xué)基金(2140102006)項(xiàng)目和高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專(zhuān)項(xiàng)科研基金(20130131130005)資助