雷 楊，韓 宇

（1.通化市食品藥品檢驗所，吉林 通化 134000；2.吉林市食品藥品檢驗所，吉林 吉林 132000）

HPLC法測定胃痛丸中延胡索乙素的含量

雷 楊1，韓 宇2

（1.通化市食品藥品檢驗所，吉林 通化 134000；2.吉林市食品藥品檢驗所，吉林 吉林 132000）

胃痛丸由沉香、丁香、延胡索（醋炒）、姜半夏、當(dāng)歸等18味中藥材組成，延胡索為主藥。對治療經(jīng)閉痛經(jīng)，產(chǎn)后瘀阻，跌撲腫痛有較好療效。

胃痛寧丸；延胡索乙素；反向高效液相色譜法

1 資料與方法

1.1 儀器、試劑與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

紫外-可見分光光度計：日本島津UV-1700；高效液相色譜儀：戴安Ultimate3000、日立；對照品為延胡索乙素，對照品、試劑均在有資質(zhì)的經(jīng)銷商處購買。

1.2 方法

1.2.1 儀器、試劑與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

色譜柱：C18（4.6×250 mm，5 μm）；流動相：甲醇-0.1%磷酸溶液（三乙胺調(diào)pH值至6.0）（55：45）；檢測波長、280 nm。

1.2.2 對照品溶液的制備

取延胡索乙素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含46 μg的溶液，即得。

1.2.3 供試品溶液的制備

取本品研細，取約1.0 g，精密稱定，置平底燒瓶中，精密加入濃氨試液-甲醇（1：20）混合溶液50 mL，稱定重量，冷浸1小時后加熱回流1小時，放冷，再稱定重量，用濃氨試液-甲醇（1：20）混合溶液補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液25 mL，蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至5 mL量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得見圖1、圖2。

圖1

圖2

2 系統(tǒng)適用性試驗

2.1 測定波長選擇

取延胡索乙素對照品甲醇溶液，經(jīng)UV-1700型紫外-可見分光光度計在250～300 nm范圍內(nèi)測定延胡索乙素在280.3 nm的波長處有最大吸收

2.2 流動相的選擇

分別采用乙腈-0.1%冰醋酸溶液（60:40）、甲醇-0.1%冰醋酸溶液（55:45）、甲醇-0.1%磷酸溶液（三乙胺調(diào)pH值至6.0）（55：45）為流動相，結(jié)果以甲醇-0.1%磷酸溶液（三乙胺調(diào)pH值至6.0）（55：45）為流動相，保留時間適宜且色譜峰對稱性好，主峰與雜質(zhì)峰分離度大。溶劑在主峰保留時間處無色譜峰，不存在干擾。用二極管陣列檢測器對色譜峰純度進行檢測，確定供試品中延胡索乙素為單一成分，故擬定標(biāo)準(zhǔn)選擇甲醇-0.1%磷酸溶液（7:93）為流動相。

2.3 提取方法考察

供試品溶液提取溶劑的確定：

（1）方法為上述供試品提取方法

（2）取供試品1.0 g，加氨試液2 mL使?jié)駶?，精密加甲?0 mL，稱定重量，加熱回流2小時，防冷，再稱定重量，用甲醇補足損失的重量，搖勻，取續(xù)濾液作為供試品溶液。實驗結(jié)果顯示方法1提取完全，分離效果好。

2.4 提取時間考察

正文中提取時間為冷浸1小時后加熱回流1小時，同時我們也考察了冷浸2小時，加熱回流2小時，結(jié)果是正文中提取的雜質(zhì)少，主峰含量高，故選冷浸1小時后加熱回流1小時為該方法的提取時間。

3 方法學(xué)驗證

3.1 線性

結(jié)果表明延胡索乙素在0.12519～1.3687 mg，線性關(guān)系良好。

3.2 精密度

數(shù)據(jù)顯示，本方法精密度良好。

3.3 重復(fù)性試驗

取同一供試品，依正文方法獨立測定6份，數(shù)據(jù)顯示本法重復(fù)良好。

3.4 準(zhǔn)確度試驗

取重復(fù)性試驗同批次樣品（含量：0.058 mg/g）6份，每份取約0.5 g，精密稱定，再分別加入延胡索乙素對照品適量，按標(biāo)準(zhǔn)正文含量測定項下方法測定，計算回收率。實驗結(jié)果表明，本方法回收率良好，該方法適合本品的含量測定。

3.5 穩(wěn)定性考察

精密吸取同一供試品溶液5 μL，分別在0，2，8，12，16，22 h進樣，計算峰面積的RSD值。結(jié)果表明供試品溶液在22h內(nèi)穩(wěn)定。

4 討 論

我們對取樣量、提取方法、流動相類型、流動相比例、提取溶劑、提取時間都進行了細致的考察，結(jié)果是按上述條件分離效果好，提取完全，含量高，方法相對簡便。同時也考察了陰性和溶劑，確定無干擾。

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ISSN.2095-8242.2017.069.13475.02

本文編輯：趙小龍