葉建生，趙素珍，陳小江，韓興鵬，劉美劍

( 江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇 泰州 225300 )

不同餌料對(duì)胭脂魚(yú)生長(zhǎng)和腸道消化酶活性的影響

葉建生，趙素珍，陳小江，韓興鵬，劉美劍

( 江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇 泰州 225300 )

研究了不同餌料(鹵蟲(chóng)、飼料、水蚯蚓、水蚯蚓+飼料)對(duì)胭脂魚(yú)生長(zhǎng)和消化酶活性的影響。在水溫(18±2) ℃將初始體質(zhì)量為(6.60±0.40) g的胭脂魚(yú)隨機(jī)分成4組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)放養(yǎng)10尾魚(yú)，分別飼喂鹵蟲(chóng)、飼料、水蚯蚓、水蚯蚓+飼料，試驗(yàn)周期56 d。試驗(yàn)結(jié)果表明，水蚯蚓+飼料混合組和水蚯蚓組生長(zhǎng)效果最佳，混合組優(yōu)于水蚯蚓組(P<0.05)，飼料組和鹵蟲(chóng)組次之，飼料組優(yōu)于鹵蟲(chóng)組(P<0.05)；腸道消化酶活性鹵蟲(chóng)組<飼料組<水蚯蚓組<混合組，鹵蟲(chóng)組和飼料組3種消化酶活性均最低，水蚯蚓組與水蚯蚓+飼料混合組差異顯著(P<0.05)。

胭脂魚(yú)；餌料；生長(zhǎng)；消化酶活性

胭脂魚(yú)(Myxocyprinusasiaticus)屬鯉形目、亞口魚(yú)科、胭脂魚(yú)屬，分布于長(zhǎng)江和閩江水系中，在長(zhǎng)江上、中、下游皆有分布，但以上游數(shù)量為多；福建閩江亦產(chǎn)，但少見(jiàn)。胭脂魚(yú)屬低溫高氧魚(yú)，在任何水質(zhì)中都能活潑生長(zhǎng)，喜好在水體中部和底部活動(dòng)，攝食頻繁，屬雜食性魚(yú)類(lèi)，以食底棲生物、硅藻、有機(jī)碎屑、水蚯蚓、紅蟲(chóng)為主。胭脂魚(yú)是我國(guó)特有珍稀魚(yú)類(lèi)，國(guó)家二級(jí)瀕危保護(hù)動(dòng)物，具有較高的科研價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值[1-2]。由于過(guò)度捕撈、水域環(huán)境污染、水利設(shè)施建設(shè)等人為因素的影響，野生資源量正逐年趨于下降，其資源增殖保護(hù)和人工養(yǎng)殖已經(jīng)顯得尤為迫切。

在胭脂魚(yú)的苗種培育和人工養(yǎng)殖過(guò)程中，優(yōu)質(zhì)餌料是影響胭脂魚(yú)生長(zhǎng)和消化酶活性乃至產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素。研究者從胚胎發(fā)育、生活行為、開(kāi)口餌料、營(yíng)養(yǎng)需求等多方面進(jìn)行了大量研究[2-12]。筆者就不同餌料對(duì)胭脂魚(yú)的生長(zhǎng)和消化酶活性的影響開(kāi)展研究，探討不同餌料影響魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)和消化酶活性的影響機(jī)理，以期為胭脂魚(yú)的人工繁殖和養(yǎng)殖、資源增殖以及產(chǎn)業(yè)化發(fā)展等方面的科研和生產(chǎn)實(shí)踐提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用胭脂魚(yú)購(gòu)自泰興市水產(chǎn)良種場(chǎng)，先在實(shí)驗(yàn)室條件下馴化暫養(yǎng)7 d后，挑選體質(zhì)健壯、個(gè)體規(guī)格均勻的胭脂魚(yú)[(6.60±0.40) g]進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)用水是經(jīng)過(guò)曝氣的自來(lái)水，溫度(18±2) ℃，溶解氧>5 mg/L。

試驗(yàn)用4種餌料：飼料(表1)、水蚯蚓、鹵蟲(chóng)(Artemia)、飼料+水蚯蚓混合，其中水蚯蚓和鹵蟲(chóng)購(gòu)自水族市場(chǎng)。

表1 飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平 %

注：(1)預(yù)混料為每千克飼料提供: Fe 150 mg; Zn 100 mg; Mn 13 mg; Co 12.4 mg; I 5.7 mg; Cu 4.5 mg; Se 0.3 mg; VA2000 IU; VD2000 IU; VC300 mg ;VE100 mg; VK10 mg; VB15 mg; VB210 mg; VB610 mg; 煙酸100 mg; 泛酸鈣40 mg; 葉酸5 mg; VB120.02 mg; 生物素1 mg.(2)能蛋比=總能/粗蛋白質(zhì).

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)在100 cm×80 cm×60 cm的水族箱中進(jìn)行，試驗(yàn)持續(xù)56 d。將選取的胭脂魚(yú)分別投入水族箱中，每個(gè)水族箱10尾。試驗(yàn)設(shè)飼料組、水蚯蚓組、鹵蟲(chóng)組和水蚯蚓+飼料(以下簡(jiǎn)稱混合組，其中水蚯蚓和飼料各占50%)4個(gè)處理，每個(gè)處理設(shè)置3個(gè)重復(fù)，日投餌量為箱魚(yú)體質(zhì)量的3%～5%，定時(shí)清除殘餌和糞便。

1.2.2 樣本處理與酶液制備

試驗(yàn)過(guò)程中，取出各組胭脂魚(yú)用濾紙輕輕吸干魚(yú)體表面水分，立即解剖取出腸道，清洗稱量質(zhì)量，置于冰箱中-20 ℃保存，分析時(shí)將樣本按其質(zhì)量分別加入10倍的冷凍去離子水(4 ℃)，低溫下使用玻璃勻漿器后，以4000 r/min低溫離心20 min，取上清液測(cè)定酶活性。

1.3 酶活性測(cè)定

蛋白酶活性測(cè)定采用福林—酚試劑法[13]。在pH 7.5和底物酪蛋白質(zhì)量濃度1.0 mg/mL條件下，反應(yīng)溫度下水浴20 min，以酶液1 min內(nèi)水解酪蛋白產(chǎn)生1 μg酪氨酸為1個(gè)酶活力單位(U)。

淀粉酶活性測(cè)定：應(yīng)用淀粉酶檢測(cè)試劑盒(南京建成生物工程研究所生產(chǎn))，反應(yīng)于96孔酶標(biāo)板中，用酶標(biāo)儀測(cè)量各反應(yīng)體在660 nm波長(zhǎng)下OD值。淀粉酶活性定義為：在37 ℃與底物作用30 min，水解10 mg淀粉為1個(gè)酶活力單位(U)。

脂肪酶活性測(cè)定：應(yīng)用脂肪酶檢測(cè)試劑盒(南京建成生物工程研究所生產(chǎn))，反應(yīng)于96孔酶標(biāo)板中，用酶標(biāo)儀測(cè)量各反應(yīng)體在420 nm波長(zhǎng)下OD值。淀粉酶活性定義為：在37 ℃條件下，每克組織蛋白在本反應(yīng)體系中與底物作用1 min，每消耗1 μmol底物為1個(gè)酶活力單位(U)。

1.4 計(jì)算公式

存活率/%=n1/n×100%

平均末質(zhì)量=mt/n

質(zhì)量增加率/%=(m2-m1) /m1×100%

特定生長(zhǎng)率/%·d=(lnm2-lnm1)/t×100%

餌料系數(shù)=m3/(m2-m1)

式中，m1和m2為胭脂魚(yú)的初始體質(zhì)量和終末體質(zhì)量(g)，t為試驗(yàn)周期(d)，mt為單個(gè)水族箱中胭脂魚(yú)的總質(zhì)量(g)，n為試驗(yàn)胭脂魚(yú)數(shù)量(尾)，n1為存活胭脂魚(yú)數(shù)量(尾)，m3為以質(zhì)量表示的胭脂魚(yú)的攝食量(g)。

1.5 數(shù)據(jù)處理

所得數(shù)據(jù)用Excel 2007和SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，統(tǒng)計(jì)結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，以0.05作為差異顯著水平。

2 結(jié) 果

2.1 不同餌料對(duì)胭脂魚(yú)生長(zhǎng)的影響

經(jīng)56 d飼養(yǎng)，不同餌料投喂胭脂魚(yú)存活率均為100%，而在對(duì)促進(jìn)胭脂魚(yú)生長(zhǎng)指標(biāo)上存在明顯差異。平均終末質(zhì)量和質(zhì)量增加率兩個(gè)指標(biāo)均是混合組和水蚯蚓組優(yōu)于飼料組和鹵蟲(chóng)組(P<0.05)，其中混合組優(yōu)于水蚯蚓組，飼料組稍優(yōu)于鹵蟲(chóng)組，混合組促進(jìn)胭脂魚(yú)生長(zhǎng)效果最佳(表2)。

由特定生長(zhǎng)率可以看出，混合組的特定生長(zhǎng)率(1.32)最高，其次為水蚯蚓組(1.23)、飼料組 (0.81)，鹵蟲(chóng)組(0.75)最低。結(jié)果表明鹵蟲(chóng)組和飼料組生長(zhǎng)效果最差，差異不顯著，但和水蚯蚓組、混合組存在顯著差異(P<0.05)；由鹵蟲(chóng)組(2.23)、飼料組(2.14)、水蚯蚓組(1.41)、混合組(1.53)的餌料系數(shù)可以看出，水蚯蚓組和混合組餌料系數(shù)最低，以水蚯蚓組效果最佳，但兩者差異不顯著。

表2 不同餌料對(duì)胭脂魚(yú)生長(zhǎng)的影響

注：同一列中具有不同上標(biāo)字母的平均值組間差異顯著 (P<0.05).

2.2 不同餌料對(duì)胭脂魚(yú)消化酶的影響

經(jīng)過(guò)56 d的飼養(yǎng)，不同餌料對(duì)胭脂魚(yú)腸道蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性的影響存在明顯差異(表3)。4個(gè)試驗(yàn)組胭脂魚(yú)腸道蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性以混合組和水蚯蚓組高于飼料組和鹵蟲(chóng)組(P<0.05)，且混合組高于水蚯蚓組，飼料組稍高于鹵蟲(chóng)組，混合組3種酶活性最高。鹵蟲(chóng)組和飼料組最低，與水蚯蚓組和混合組相比差異顯著(P<0.05)。

表3 不同餌料對(duì)胭脂魚(yú)腸道消化酶活性的影響 U/mg

注：同一列中具有不同上標(biāo)字母的平均值組間差異顯著 (P<0.05).

3 討 論

3.1 不同餌料對(duì)胭脂魚(yú)生長(zhǎng)的影響

試驗(yàn)表明，不同餌料對(duì)胭脂魚(yú)生長(zhǎng)的影響差異明顯，以水蚯蚓+飼料的混合組飼養(yǎng)效果最好，水蚯蚓次之。水蚯蚓廣泛存在于淡水水域中，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高(干物質(zhì)中含粗蛋白 62%，必需氨基酸總和達(dá) 35%)，是胭脂魚(yú)喜食的餌料。水蚯蚓形體細(xì)，適合胭脂魚(yú)主動(dòng)捕食的攝食習(xí)性，所以水蚯蚓組促生長(zhǎng)效果較好；水蚯蚓+飼料混合投喂，正好彌補(bǔ)了單一飼料所缺乏的營(yíng)養(yǎng)，從而促進(jìn)了胭脂魚(yú)的生長(zhǎng)，顯著提高其質(zhì)量增加率和特定生長(zhǎng)率。

龔宏偉等[6]用不同組合的餌料投喂胭脂魚(yú)魚(yú)苗，研究結(jié)果表明，用配合飼料作開(kāi)口餌料時(shí)，長(zhǎng)江胭脂魚(yú)的開(kāi)口率、成活率和出池規(guī)格均顯著低于投喂水蚯蚓的魚(yú)苗。唐輝旭[5]用不同餌料喂養(yǎng)胭脂魚(yú)幼魚(yú)，在水蚯蚓配合飼料投喂的模式中，飼料添加比例在50%～60%時(shí)魚(yú)苗生長(zhǎng)最佳，飼料投喂的魚(yú)苗抗病力不及混合投喂和水蚯蚓投喂的魚(yú)苗抗病力強(qiáng)。在其他魚(yú)類(lèi)研究中也有類(lèi)似結(jié)果，如用鹵蟲(chóng)、冰凍輪蟲(chóng)、水蚯蚓、人工配合飼料喂養(yǎng)四川裂腹魚(yú)(Schizothoraxkozlovi)仔魚(yú)[14]，研究結(jié)果也表明，投喂水蚯蚓能保證四川裂腹魚(yú)仔魚(yú)具有較快的生長(zhǎng)速度和較高的成活率，而人工配合飼料組生長(zhǎng)速度明顯低于其他組，且成活率最低。

不同餌料對(duì)胭脂魚(yú)生長(zhǎng)的影響存在顯著差異。結(jié)合胭脂魚(yú)的生長(zhǎng)指標(biāo)和餌料投喂成本情況分析，以水蚯蚓+飼料的混合餌料投喂方案是最佳的投喂模式，可能由于水蚯蚓營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，氨基酸含量較多，其比例與胭脂魚(yú)體內(nèi)氨基酸組成比例相近。同時(shí)降低了飼料投喂成本，達(dá)到了降低生產(chǎn)成本并增加經(jīng)濟(jì)效益的雙重目的。因此，在胭脂魚(yú)的人工養(yǎng)殖生產(chǎn)中，可以輔助投喂水蚯蚓來(lái)補(bǔ)充飼料中營(yíng)養(yǎng)的不足。

3.2 不同餌料對(duì)胭脂魚(yú)酶活性的影響

魚(yú)類(lèi)食性與消化器官組織結(jié)構(gòu)和消化機(jī)能相互適應(yīng)，消化器官組織結(jié)構(gòu)不同，消化酶的活性也呈現(xiàn)出明顯差異[15]。消化酶活力是反映魚(yú)類(lèi)消化生理的基本特征[16]，在腸、胃、肝胰臟3種消化器官中，腸道中3種消化酶的比活力均最高[17-20]。另外，魚(yú)類(lèi)的機(jī)械消化能力較差，主要靠消化酶進(jìn)行化學(xué)性消化，故消化酶活性可反映魚(yú)類(lèi)攝食能力和類(lèi)型，也可反映魚(yú)類(lèi)對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的選擇性吸收傾向。因此餌料成分對(duì)魚(yú)類(lèi)消化酶活性的影響具有復(fù)雜性[21]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，不同餌料對(duì)胭脂魚(yú)腸道蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性均有影響，水蚯蚓+飼料混合組3種酶活性最高，水蚯蚓組次之，飼料組和鹵蟲(chóng)組最低。說(shuō)明水蚯蚓+飼料混合投喂能夠顯著提高腸道酶的活性，從而提高魚(yú)類(lèi)對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率。

綜上所述，在人工養(yǎng)殖條件下，餌料對(duì)胭脂魚(yú)的存活、攝食和生長(zhǎng)等起著重要作用，但在人工養(yǎng)殖生產(chǎn)中，尚無(wú)專(zhuān)用配合飼料。需要對(duì)胭脂魚(yú)的營(yíng)養(yǎng)需求作系統(tǒng)研究，配制出更能適合其生長(zhǎng)的優(yōu)質(zhì)配合飼料。

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EffectsofDifferentDietsonGrowthandIntestinalDigestiveEnzymeActivityinChineseSuckerMyxocyprinusasiaticus

YE Jiansheng, ZHAO Suzhen, CHEN Xiaojiang, HAN Xingpeng, LIU Meijian

( Jiangsu Agri-animal Husbandry Veterinary College, Taizhou 225300,China )

The effects of different diets(brine shrimp， feed， tubifex, tubifex+feed)on growth and activities of intestinal digestive enzymes were studied in Chinese suckerMyxocyprinusasiaticus. The Chinese sucker with body weight of (6.60±0.40) g was raised in the water temperature of (18±2) ℃，and randomly divided into 4 groups, and fed brine shrimp, feed, tubifex， or tubifex+feed for 56 d with triplication. The results showed that the best growth was observed in the tubifext plus feed group, significantly better than that in tubifex group(P<0.05), followed by in feed and brine shrimp, better than brine shrimp(P<0.05). Determination of intestinal digestive enzyme activities revealed that the order of the digestive enzyme activity was expressed as brine shrimp

Myxocyprinusasiaticus; diet; growth; digestive enzyme activity

10.16378/j.cnki.1003-1111.2017.01.019

S965.199

A

1003-1111(2017)01-0109-04

2015-12-28；

2016-04-25.

江蘇省大學(xué)生實(shí)踐創(chuàng)新訓(xùn)練項(xiàng)目(201312806015Y)；江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院科研項(xiàng)目(NSFYB1408).

葉建生(1981—)，男，講師；研究方向：經(jīng)濟(jì)水產(chǎn)動(dòng)物養(yǎng)殖生態(tài)學(xué)和營(yíng)養(yǎng)學(xué).E-mail: yejianshengye@sohu.com.