林 琳，孫學(xué)亮，邢克智，郭永軍，陳成勛，于學(xué)權(quán)，王慶奎

( 1. 天津農(nóng)學(xué)院 水產(chǎn)學(xué)院，天津 300384； 2. 天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗室，天津 300384； 3. 天津市海發(fā)珍品實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司，天津 300452 )

養(yǎng)殖密度對豹紋鰓棘鱸生長和血液生化指標(biāo)的影響

林 琳1,2，孫學(xué)亮1,2，邢克智1,2，郭永軍1,2，陳成勛1,2，于學(xué)權(quán)3，王慶奎1,2

( 1. 天津農(nóng)學(xué)院 水產(chǎn)學(xué)院，天津 300384； 2. 天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗室，天津 300384； 3. 天津市海發(fā)珍品實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司，天津 300452 )

為探究養(yǎng)殖密度對濕體質(zhì)量為(132.75±0.51) g的豹紋鰓棘鱸生長和血液生化指標(biāo)的影響，設(shè)計了低(9.34 kg/m3)、中(19.23 kg/m3)、高(37.22 kg/m3)3個養(yǎng)殖密度，每個密度設(shè)3個重復(fù)，連續(xù)飽食投喂56 d后取樣，測定相關(guān)指標(biāo)。試驗結(jié)果表明，37.22 kg/m3組的終末體質(zhì)量、平均質(zhì)量增加率和特定生長率均顯著低于其他兩組(P<0.05)，而9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組間差異不顯著(P>0.05)；養(yǎng)殖密度對飼料系數(shù)、攝食率、瞬時生長率和熱量單位生長系數(shù)無顯著影響(P>0.05)。血清總超氧化物歧化酶的活力在37.22 kg/m3組最高，19.23 kg/m3組最低，且各密度組間差異顯著(P<0.05)；37.22 kg/m3組血清總抗氧化能力顯著低于其他兩組(P<0.05)，19.23 kg/m3組高于9.34 kg/m3組，但差異不顯著(P>0.05)；37.22 kg/m3組血清丙二醛顯著高于其他兩組(P<0.05)，而其他兩組間差異不顯著(P>0.05)；乳酸脫氫酶隨養(yǎng)殖密度的升高顯著增加，且各密度組間差異顯著(P<0.05)；37.22 kg/m3組谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶顯著高于其他兩組(P<0.05)，而37.22 kg/m3組的溶菌酶活性顯著低于其他兩組(P<0.05)，其他兩組間差異不顯著(P>0.05)；養(yǎng)殖密度對血漿葡萄糖、膽固醇、C反應(yīng)蛋白、總蛋白、乳酸無顯著影響。

養(yǎng)殖密度；豹紋鰓棘鱸；生長；血液生化指標(biāo)

豹紋鰓棘鱸(Plectropomusleopardus)，隸屬鱸形目、科、鰓棘鱸屬，俗稱東星斑，主要分布在西太平洋至印度洋海區(qū)，我國海南東岸和南部海區(qū)有少量分布[1]。豹紋鰓棘鱸體色鮮紅，肉味鮮美，營養(yǎng)豐富，含有二十幾種人體所需的微量元素，具有高蛋白，低脂肪，低膽固醇等優(yōu)點(diǎn)[2]，具有很高的經(jīng)濟(jì)價值。目前市場上銷售的豹紋鰓棘鱸絕大部分為野生魚，該魚的人工養(yǎng)殖尚處于起步階段。目前國內(nèi)對豹紋鰓棘鱸的研究報道見于胚胎及仔稚幼魚發(fā)育[3]，鹽度、光照度和溫度對其受精卵孵化和仔魚成活率的影響[4]，工廠化養(yǎng)殖試驗[5]，主要營養(yǎng)素源對工業(yè)化養(yǎng)殖豹紋鰓棘鱸生長、體色和消化吸收的影響[6]，投喂不同飼料對幼魚生長效果的影響[7]等方面；國外僅見豹紋鰓棘鱸幼魚游泳和定居行為[8]、野生種群生物學(xué)[9]的報道。目前，人工養(yǎng)殖條件下豹紋鰓棘鱸生長緩慢、成活率低、體色暗淡，養(yǎng)殖難度較大。與同亞科的石斑魚屬(Epinephelus)養(yǎng)殖魚類相比，豹紋鰓棘鱸不適于較高的養(yǎng)殖密度，但其適宜的養(yǎng)殖密度，目前尚未見報道。

在魚類集約化養(yǎng)殖過程中，較高的養(yǎng)殖密度雖然有利于提高單位水體魚產(chǎn)量，但也會導(dǎo)致養(yǎng)殖魚類產(chǎn)生應(yīng)激脅迫，生長減緩，飼料利用率下降，個體間生長差異增大[10]，更易患病[11]；較低的養(yǎng)殖密度雖然有利于養(yǎng)殖對象的生長和健康，但單位水體魚產(chǎn)量較低。因此，采用適宜的養(yǎng)殖密度既能保障養(yǎng)殖魚類的健康，又能提高單位水體魚產(chǎn)量。本試驗初步研究高、中、低3種養(yǎng)殖密度對豹紋鰓棘鱸生長和血液生化指標(biāo)的影響，探索豹紋鰓棘鱸在工廠化養(yǎng)殖條件下的適宜養(yǎng)殖密度，為其集約化健康養(yǎng)殖提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗魚

試驗魚210尾，濕體質(zhì)量(132.75±0.51) g，體長(18.69±0.24) cm。

1.2 試驗設(shè)計

將試驗魚隨機(jī)分配到9個水體容積為138 L的水族箱(80 cm×55 cm×40.5 cm)中，高密度組40尾/箱(37.22 kg/m3)，中密度組20尾/箱(19.23 kg/m3)，低密度組10尾/箱(9.34 kg/m3)，每個密度設(shè)3個重復(fù)。日飽食投喂2次，連續(xù)飽食投喂56 d后取樣，測定生長和血液生化指標(biāo)。

1.3 日常管理

試驗魚先在試驗水族箱內(nèi)馴化14 d，待其正常攝食后開始試驗。試驗期間每日7:30和19:30投喂天津市海發(fā)珍品實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司生產(chǎn)的海水魚配合飼料，投喂30 min后吸出殘餌，計算攝食量。試驗用海水為豹紋鰓棘鱸養(yǎng)殖車間的海水，海水通過管道流入水族箱中，通過溢水口溢出箱外。每個水族箱內(nèi)放置一個散氣石，連續(xù)充氣。試驗期間海水鹽度27.7～29.4，水溫(28.8±0.1) ℃，溶解氧(6.32±0.01) mg/L，氨氮0.023～0.146 mg/L，亞硝酸鹽0.005～0.025 mg/L。

1.4 樣品采集

分別在試驗開始和試驗結(jié)束時測量每尾魚的體質(zhì)量。試驗結(jié)束后，用間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽麻醉(100 mg/L)后，尾靜脈采血，肝素鈉抗凝。4 ℃，4000 r/min離心15 min，取血漿，-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5 測定指標(biāo)

1.5.1 計算公式

特定生長率/%·d-1=[lnmt-lnm0]/t×100%

平均質(zhì)量增加率/%=(mt-m0)/m0×100%

攝食率/%=mf/[0.5×(mt+m0)]t×100%

飼料系數(shù)=mf/(mt-m0)

瞬時生長率/%=mt=m0(1+α/100)t，α = (lnmt-lnm0)×100/t

公式中，mt為試驗結(jié)束體質(zhì)量(g)，m0為試驗開始體質(zhì)量(g)，t為試驗天數(shù)，mf為攝食量(g)，T為試驗期間平均水溫(℃)。

1.5.2 血液生化指標(biāo)

血漿中總超氧化物歧化酶、總抗氧化能力、丙二醛、溶菌酶、C反應(yīng)蛋白、總蛋白、乳酸、乳酸脫氫酶，采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測定。血糖、膽固醇、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶測定采用中生北控生物科技股份有限公司所生產(chǎn)的測試盒測定。

1.6 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)用SPSS 17.0軟件進(jìn)行方差分析，差異顯著(P<0.05)的用Duncan′s法作多重比較。表中數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié) 果

2.1 攝食和生長

試驗結(jié)束時，37.22 kg/m3組的終末體質(zhì)量、平均質(zhì)量增加率、特定生長率均顯著低于其他兩組；19.23 kg/m3組的上述指標(biāo)稍高于9.34 kg/m3組，但差異不顯著(P>0.05)；隨著密度的增加，各組飼料系數(shù)也隨之增加，但差異不顯著(P>0.05)；各組間的攝食率、瞬時生長率和熱量單位生長系數(shù)差異不顯著(P>0.05)(表1)。

表1 養(yǎng)殖密度對豹紋鰓棘鱸生長的影響

注：同一行數(shù)據(jù)標(biāo)有不同字母的，表示差異顯著(P<0.05).下同.

2.2 抗氧化指標(biāo)

總超氧化物歧化酶活力在各養(yǎng)殖密度組間差異顯著(P<0.05)，37.22 kg/m3組高于其他兩組；37.22 kg/m3組總抗氧化能力顯著低于其他兩組(P<0.05)；而37.22 kg/m3組丙二醛含量顯著高于其他兩組(P<0.05)，而9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組差異不顯著(P>0.05)(表2)。

表2 養(yǎng)殖密度對豹紋鰓棘鱸抗氧化指標(biāo)的影響

2.3 血液生化指標(biāo)

乳酸脫氫酶活性隨養(yǎng)殖密度的升高而增加，且各組間差異顯著(P<0.05)；37.22 kg/m3組谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶活力顯著高于其他兩組(P<0.05)，9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組差異不顯著(P>0.05)；37.22 kg/m3組的溶菌酶活性顯著低于其他兩組(P<0.05)；葡萄糖、膽固醇、C反應(yīng)蛋白、總蛋白、乳酸在各密度組間差異不顯著(P>0.05)(表3)。

表3 養(yǎng)殖密度對豹紋鰓棘鱸血液生化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 養(yǎng)殖密度對水產(chǎn)動物生長的影響

養(yǎng)殖密度是影響魚類生長的一個重要因子。一般來說，低養(yǎng)殖密度能促進(jìn)水產(chǎn)動物的生長，而過高的養(yǎng)殖密度則會對其造成脅迫。在高養(yǎng)殖密度下，低溶解氧、高氨氮和亞硝酸鹽、對食物和生活空間的競爭等，都會對水產(chǎn)動物的生長和代謝產(chǎn)生負(fù)面影響。眼斑星麗魚(Astronotusocellatus)幼魚質(zhì)量增加率、體長增加率、特定生長率和質(zhì)量平均日增長均隨養(yǎng)殖密度的增加而降低，高養(yǎng)殖密度組(400尾/m2，200尾/m2)個體生長速度離散度明顯加大[12]。施氏鱘(Acipenserschrenckii)在養(yǎng)殖密度為1.347 kg/m2和2.469 kg/m2時生長效率、特定生長率和質(zhì)量日增長顯著降低，且各密度組生長差異顯著[13]。王永波等[5]報道，在工廠化養(yǎng)殖豹紋鰓棘鱸過程中，當(dāng)水溫適宜、溶解氧充足、鹽度適宜、水質(zhì)清澈、換水率達(dá)50%～200%時，豹紋鰓棘鱸放養(yǎng)密度可按10～20 kg/m3計算，在魚體質(zhì)量為150 g時，其參考的放養(yǎng)密度為9～15 kg/m3。本試驗中，37.22 kg/m3組的終末體質(zhì)量、平均質(zhì)量增加率和特定生長率均顯著低于9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組，而9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組間差異不顯著?？紤]到養(yǎng)殖成本，豹紋鰓棘鱸養(yǎng)殖密度以19.23 kg/m3為宜，這與上述報道接近。黃姑魚(Nibeaalbiflora)在1.49、3.0、4.8 kg/m3和5.81 kg/m34個密度下養(yǎng)殖30 d，4.8 kg/m3和5.81 kg/m3養(yǎng)殖密度的飼料系數(shù)明顯升高，分別為1.12和1.26[14]。本試驗中各養(yǎng)殖密度組攝食率差異不顯著(P>0.05),飼料系數(shù)隨養(yǎng)殖密度的增加而增加，平均質(zhì)量增加率9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組差異不顯著，但均顯著高于37.22 kg/m3組，顯示高密度(37.22 kg/m3)的養(yǎng)殖條件導(dǎo)致豹紋鰓棘鱸生長緩慢。

3.2 養(yǎng)殖密度對水產(chǎn)動物抗氧化指標(biāo)的影響

抗氧化指標(biāo)的高低能反映魚體的健康狀況。總抗氧化能力能清除機(jī)體代謝過程中產(chǎn)生的過多的活性氧自由基，保護(hù)機(jī)體免受自由基氧化損傷，因而總抗氧化能力與機(jī)體健康程度密切相關(guān)[15]。機(jī)體中的各種抗氧化大分子、抗氧化小分子和抗氧化酶的總水平，即體現(xiàn)了總抗氧化能力。丙二醛是多烯不飽和脂肪酸被自由基氧化生成的脂質(zhì)過氧化代謝產(chǎn)物，其含量的多少可間接反映細(xì)胞膜的氧化損傷程度。養(yǎng)殖密度對魚類總抗氧化能力的影響，目前尚未見報道。本試驗中，37.22 kg/m3組總抗氧化能力顯著低于9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組，而丙二醛含量顯著高于9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組；9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組總抗氧化能力和丙二醛含量差異不顯著。這表明，高養(yǎng)殖密度(37.22 kg/m3)導(dǎo)致豹紋鰓棘鱸總抗氧化能力顯著降低，機(jī)體遭受明顯的氧化損傷；而中、低養(yǎng)殖密度(19.23 kg/m3、9.34 kg/m3)不會對豹紋鰓棘鱸總抗氧化能力產(chǎn)生顯著影響，機(jī)體氧化損傷程度較低。

超氧化物歧化酶能清除超氧陰離子自由基，保護(hù)細(xì)胞免受自由基損傷[16-17]。半滑舌鰨(Cynoglossussemilaevis)在高養(yǎng)殖密度(8.20 kg/m2)下，總超氧化物歧化酶顯著低于中(4.83 kg/m2)、低(2.32 kg/m2)養(yǎng)殖密度組[18]。本試驗中，各密度組間總超氧化物歧化酶活力差異顯著(P<0.05)，且37.22 kg/m3試驗組顯著高于其他兩組，這與半滑舌鰨[18]的研究結(jié)果相反。

3.3 養(yǎng)殖密度對水產(chǎn)動物血液生化指標(biāo)的影響

高養(yǎng)殖密度會導(dǎo)致魚類血液溶菌酶活力降低。如黃姑魚在5.81 kg/m3的養(yǎng)殖密度下，其血清溶菌酶活力顯著低于養(yǎng)殖密度為4.84、3.00、1.49 kg/m3的試驗魚[14]。8.20 kg/m2試驗組半滑舌鰨血漿溶菌酶活力顯著低于4.83 kg/m2、2.23 kg/m2組[18]。同樣，密度脅迫也會導(dǎo)致鯽魚(Carassiusauratus)血清溶菌酶活性顯著降低[19]。本試驗也發(fā)現(xiàn)，37.22 kg/m3組豹紋鰓棘鱸血漿溶菌酶活性顯著低于9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組，這與上述報道一致。

正常狀態(tài)下，機(jī)體中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶主要存在于肝臟細(xì)胞中，血清中含量很少，當(dāng)細(xì)胞受到損傷時，二者由肝臟細(xì)胞擴(kuò)散到血液，導(dǎo)致血清中這兩種酶的活性升高[20-21]。因此，檢測血液中這兩種酶的活性，可用來判斷肝細(xì)胞是否受到損傷[22-23]。本試驗中，37.22 kg/m3組豹紋鰓棘鱸血漿中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著升高，9.34 kg/m3、19.23 kg/m3組中兩種酶活力差異不顯著，表明高養(yǎng)殖密度加劇了豹紋鰓棘鱸肝細(xì)胞損傷。

乳酸是機(jī)體劇烈運(yùn)動時肌肉無氧呼吸酵解的代謝產(chǎn)物，乳酸脫氫酶將乳酸催化生成丙酮酸，丙酮酸可參與糖異生作用生成葡萄糖[24]。在此過程中，乳酸脫氫酶的活性顯著提高。點(diǎn)帶石斑魚(Epinephelusmalabaricus) 在1.1、2.1、3.2、4.2 kg/m34個養(yǎng)殖密度下飼養(yǎng)42 d，后2個養(yǎng)殖密度試驗魚肝胰臟中的乳酸脫氫酶顯著升高[25]。本試驗發(fā)現(xiàn)，隨養(yǎng)殖密度增加，試驗魚血漿乳酸脫氫酶活力顯著升高，但各組間乳酸含量卻差異不顯著，這可能是19.23 kg/m3、37.22 kg/m3組較高的乳酸脫氫酶活性將一部分乳酸催化生成丙酮酸所致。在豹紋鰓棘鱸飼養(yǎng)過程中也發(fā)現(xiàn)，隨著養(yǎng)殖密度的增大，其游動頻率和速度也增加。

4 結(jié) 論

高養(yǎng)殖密度(37.22 kg/m3)導(dǎo)致豹紋鰓棘鱸生長性能顯著下降，血液總抗氧化能力、溶菌酶活力顯著降低，丙二醛含量、轉(zhuǎn)氨酶和乳酸脫氫酶活力顯著升高。中(19.23 kg/m3)、低(9.34 kg/m3)養(yǎng)殖密度對豹紋鰓棘鱸生長、血液總抗氧化活力、丙二醛含量、轉(zhuǎn)氨酶和溶菌酶無顯著影響。建議豹紋鰓棘鱸的養(yǎng)殖密度為19.23 kg/m3。

致謝

在本試驗的養(yǎng)殖過程中，天津市海發(fā)珍品實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司董事長張樹森先生、楊永?？偨?jīng)理、朋禮泉經(jīng)理、王禎輝副經(jīng)理、馮建華主任給予了大力支持，在此一并表示衷心感激。

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EffectsofStockingDensityonGrowthandBloodBiochemicalParametersinPlectropomusleopardus

LIN Lin1, 2, SUN Xueliang1, 2, XING Kezhi1, 2, GUO Yongjun1, 2, CHEN Chengxun1, 2，YU Xuequan3, WANG Qingkui1, 2

( 1. College of Fisheries, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China; 2. Tianjin Key Laboratory of Aqua-ecology and Aquaculture, Tianjin 300384, China; 3. Tianjin Haifa Seafood Industrial Development Co., Ltd,Tianjin 300452, China )

A 56-day experiment was performed at three stocking densities of low density (9.34 kg/m3, Group L), medium density (19.23 kg/m3, Group M) and high density (37.22 kg/m3, Group H) with triplication to evaluate the effects of stocking density on the growth, serum biochemical parameters ofPlectropomusleoparduswith initial body weight of (132.75±0.51) g. Results showed that the final body weight, percent weight gain and specific growth rate in Group H were significantly lower than those in Group M and Group L, while no significant difference were observed between Group M and Group L. No significant difference was observed in food conversion ratio, food intake, instantaneous growth rate and thermal-unit growth coefficient among three groups. Significant difference was observed on superoxide dismutase activity, with the maximum in Group H and the minimum in Group M. The total antioxidant capacity in Group H was significantly lower than that in Groups M and L. There was significantly higher malondialdehyde level in Group H than that in Groups M and L, without significant difference between Group M and Group L. The lactic dehydrogenase activity increased with the augment of stocking density, with significant difference among the three groups. The glutamic-pyruvic transaminase level and glutamic-oxaloacetic transaminase level in Group H were statistically higher than those in Group M and Gruop L, while lysozyme activity was significantly lower than those in Group M and Group L. No significant difference was observed on levels of plasma glucose, cholesterol, C-reactive protein, total protein, and lactic acid among the three groups.

stocking density;Plectropomusleopardus; growth; blood biochemical parameter

10.16378/j.cnki.1003-1111.2017.01.014

S965.399

A

1003-1111(2017)01-0083-05

2016-03-08；

2016-05-23.

國家自然科學(xué)基金(面上)項目(31270456)；國家農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化項目(2014GB2A100528)；天津市科技支撐計劃項目(12ZCDZNC05900，13ZCZDNC00700)；天津市高等學(xué)?？萍及l(fā)展基金計劃項目(20120625).

林琳(1990—)，女，碩士研究生；研究方向：水產(chǎn)增養(yǎng)殖學(xué). E-mail:919890544@qq.com.通訊作者：王慶奎(1978—)，男，副教授；研究方向：水產(chǎn)動物增養(yǎng)殖學(xué). E-mail: wangqk@tjau.edu.cn.