宋 旭 王 蓉 肖 鋒 張圣熙 龔 敏 王秀玲 張 耘 黃錦陽

（上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬第七人民醫(yī)院 泌尿外科，上海 200137）

谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶（GSTP1）和MAPK在前列腺癌中的表達及其臨床意義

宋 旭 王 蓉 肖 鋒 張圣熙 龔 敏 王秀玲 張 耘 黃錦陽

（上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬第七人民醫(yī)院 泌尿外科，上海 200137）

目的探討谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶（GSTP1）和細胞促有絲分裂蛋白激酶（MAPK）在前列腺癌組織中的表達及其臨床意義。方法采用免疫組織化學(xué)方法檢測40例前列腺癌組織及42例前列腺增生組織中GSTP1和MAPK的表達，分析GSTP1和MAPK的表達與 Gleason分級之間的關(guān)系。結(jié)果GSTP1在前列腺增生組織中為高表達，40例前列腺癌組織中GSTP1表達率在高、中、低分化癌中分別為58.3%、20.0%、16.7%，呈下降趨勢，2組GSTP1表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。4-HNE在前列腺增生組織中陽性表達率低較低，僅為5.0%。MAPK在前列腺增生組織中陽性表達低較低，為7.1%。MAPK在18例低分化前列腺癌組織中有14例高表達，達4分；在高、中、低分化癌中分別為91.7%、90.0%、100.0%，呈明顯上升趨勢。2組中MAPK表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。結(jié)論GSTP1表達缺失和MAPK的高表達，可能在前列腺癌的進展中起重要作用。

前列腺腫瘤；谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶；細胞促有絲分裂蛋白激酶；免疫組織化學(xué)

去勢抵抗型前列腺癌的發(fā)生機制目前尚未明了，谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶（glutathione S -transferases，GSTs）為還原4-HNE、調(diào)控其細胞內(nèi)水平的主要酶[1]。本研究通過比較前列腺癌患者、前列腺增生患者前列腺癌組織中GSTP1及細胞促有絲分裂蛋白激酶（MAPK）的表達情況，來初步評價其在前列腺癌發(fā)生機制中的作用及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料：取自我院2013年10月至2016年2月收治的前列腺癌患者40例，其中前列腺癌切除標本15例，經(jīng)尿道電切標本6例，穿刺活檢組織標本19例。年齡61～86歲，平均年齡72歲。病理分級：根據(jù)Gleason評分標準分為高分化腺癌12例（Gleason評分2～4分），中分化腺癌10例（Gleason評分5～7分），低分化腺癌18例（Gleason評分8～10分）；42例同期手術(shù)切除的前列腺增生患者標本作為對照，年齡63～81歲，平均年齡69歲。

1.2 方法：鼠抗人GSTP1單克隆抗體和鼠抗人MAPK單克隆抗體均為美國抗體公司產(chǎn)品。每例標本石蠟連續(xù)切片3張，片厚4 μm，一張常規(guī)HE染色，另二張分別作GSTP1和MAPK抗原免疫組化染色。用PBS代替一抗作陰性對照，已知前列腺癌陽性切片作陽性對照。結(jié)果判定采用雙盲法，每張切片由2名病理科醫(yī)師分別判斷。每張切片選取5個具有代表性的高倍視野，計數(shù)500個細胞中的陽性細胞數(shù)，以陽性細胞數(shù)＜10%為為陰性表達，計0分；陽性細胞數(shù)≥10%為為陽性表達，按≥10%，＜25%計1分、≥25%，＜50%計2分、≥50%，＜75%計3分、≥75%計4分。陽性細胞占細胞總數(shù)的75%以上視為高表達。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理：應(yīng)用SPSS18.0進行分析。采用采用秩和檢驗比較前列腺癌與前列腺增生組織中GSTP 1及MAPK的陽性表達率，顯著性檢驗水平α=0.05。

2 結(jié) 果

2.1 GSTP1在前列腺癌及前列腺增生組織中的表達情況：結(jié)果顯示，GSTP1在前列腺增生組織的細胞質(zhì)和細胞核內(nèi)高表達。40例前列腺癌組織中GSTP1表達在高、中、低分化癌中分別為58.3%、20.0%、16.7%，呈下降趨勢。2組中GSTP1表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。見表1。

2.2 MAPK在前列腺癌及前列腺增生組織中的表達情況：結(jié)果顯示，MAPK在前列腺增生組織中陽性表達低較低，為7.1%。MAPK在18例低分化前列腺癌組織中有14例高表達，達4分；在高、中、低分化癌中分別為91.7%、90.0%、100.0%，呈明顯上升趨勢。2組中MAPK表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。見表2。

3 討 論

MAPK在去勢抵抗性前列腺癌中表達明顯增加，并與前列腺癌分期、分級呈正相關(guān)。激素敏感型前列腺癌細胞轉(zhuǎn)染Ras基因可致MAPK激活及高表達從而導(dǎo)致激素逃逸的發(fā)生[2]。谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶（GST）及其同工酶為主要的抗氧化酶類，為還原4-HNE、調(diào)控其細胞內(nèi)水平的主要酶[1]。近年來在不同人種中進行流行病學(xué)研究均發(fā)現(xiàn)不同類別的GST低表達與前列腺癌發(fā)生的危險性呈正相關(guān)[3-4]。在本研究中，GSTP1在40例前列腺癌組織中表達率情況為：高分化腺癌58.3%，中分化腺癌20.0%，低分化腺癌16.7%。在42例前列腺增生組織中表達率為92.9%，二者之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），且GSTP1的不同表達率間Gleason分級差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。本研究結(jié)果顯示，MAPK在前列腺增生組織中陽性表達低較低，為7.1%。MAPK在18例低分化前列腺癌組織中有14例高表達，進一步研究還發(fā)現(xiàn)且GSTP1的表達和4-HNE的表達呈負相關(guān)，這一結(jié)果證實，隨著分解還原4-HNE的物質(zhì)GSTP1表達水平降低，致4-HNE表達水平升高，通過雄激素受體表達的旁路調(diào)節(jié)機制（MAPK、AKT介導(dǎo)），可能造成了前列腺癌細胞增殖及激素逃逸的發(fā)生，使患者易發(fā)展為去勢抵抗性前列腺癌，這尚需大樣本進一步研究。

[1] Awasthi YC,Yang Y,Tiwari NK,et al.Regulation of 4-hydroxynonenal-mediated signaling by glutathione S-transferases[J].Free Radic Biol Med,2004,37(5):607-619 .

[2] Bakin RE,Gioeli D,Sikes RA,et al.Constitutive activation of the Ras/mitogen-activated protein kinase signaling pathway promotes androgen hypersensitivity in LNCaP prostate cancer cells[J].Cancer Rec,2003,63(8):1981-1989.

[3] Agalliu I,Langeberg WJ,Lampe JW,et al.Glutathione S-transferase M1,T1,and P1 polymorphisms and prostate cancer risk in middle-aged men[J].Prostate,2006,66(2):146-156.

表1 GSTP1在前列腺癌及前列腺增生組織中的表達情況

表2 MAPK在前列腺癌及前列腺增生組織中的表達情況

[4] Pettazzoni P,Ciamporcero E,Medana C,et al.Nuclear factor erythroid 2-related factor-2 activity controls 4-hydroxynonenal metabolism and activity in prostate cancer cells[J].Free Radic Biol Med,2011,51(8):1610-1618.

R737.25

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1671-8194（2017）32-0016-02

上海市浦東新區(qū)衛(wèi)生和計劃生育委員會基金資助項目；項目編號 PWZz2013-16；浦東新區(qū)衛(wèi)生系統(tǒng)重點專科建設(shè)