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        鹽水交叉配血法判定紅細(xì)胞血型的實(shí)驗(yàn)觀察

        2017-12-07 22:19:47王晟宇
        文理導(dǎo)航 2017年32期
        關(guān)鍵詞:血型鹽水紅細(xì)胞

        王晟宇

        【摘 要】目的 通過(guò)鹽水交叉配血實(shí)驗(yàn)判定紅細(xì)胞血型,認(rèn)識(shí)紅細(xì)胞血型的不同分型及其特點(diǎn)。方法 隨機(jī)選擇南通市中心血站參加無(wú)償獻(xiàn)血的健康獻(xiàn)血者六人,采集外周靜脈血標(biāo)本,各自分離出血清和血球,利用紅細(xì)胞上的抗原與血清中的抗體的特異性反應(yīng),運(yùn)用交叉配血的方法分別進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 結(jié)果 六支標(biāo)本因血型不同,而發(fā)生凝集和不凝集的現(xiàn)象。相同血型的血清血球結(jié)合不發(fā)生凝集;不同血型的血清和血球結(jié)合時(shí)會(huì)發(fā)生凝集或不凝集;O型血球和任何血型血清都不凝集;AB型血清和任何血型血球都不凝集。 結(jié)論 鹽水交叉配血法實(shí)驗(yàn)?zāi)芘袛喑鯫型和AB型血,A型和B型血不能準(zhǔn)確區(qū)分。紅細(xì)胞血型的鑒定最好使用標(biāo)準(zhǔn)血清和標(biāo)準(zhǔn)血球進(jìn)行正反定型試驗(yàn)。

        【關(guān)鍵詞】鹽水;交叉配血;紅細(xì)胞;血型

        人類的血型系統(tǒng)是根據(jù)人的紅細(xì)胞表面同族抗原的差別而進(jìn)行的一種分類。由于人類紅細(xì)胞所含凝集原的不同,而將血液分成若干型,故稱血型。人類血型有很多種型,而每一種血型系統(tǒng)都是由遺傳因子決定的,并具有免疫學(xué)特性。最多而常見的血型系統(tǒng)為ABO血型,分為A、B、O、AB四型;其次為Rh血型系統(tǒng),主要分為Rh陽(yáng)性和Rh陰性;再次為MN及MNSs血型系統(tǒng)。據(jù)目前國(guó)內(nèi)外臨床檢測(cè),發(fā)現(xiàn)人類血型有30余種之多。

        不同血型人的紅細(xì)胞與另一人的血清混合時(shí),紅細(xì)胞則粘聚在一起,發(fā)生凝集反應(yīng),致紅細(xì)胞受損害發(fā)生溶血。臨床上將受血者的紅細(xì)胞與血清分別同供者的血清與紅細(xì)胞混合,觀察有無(wú)凝集現(xiàn)象稱為交叉配血。根據(jù)這一現(xiàn)象,我們可以應(yīng)用于判定不同的紅細(xì)胞血型實(shí)驗(yàn)。

        1.材料與方法

        1.1標(biāo)本的選擇。隨機(jī)選擇南通市中心血站參加無(wú)償獻(xiàn)血的健康獻(xiàn)血者六人,采集外周靜脈血3ml,分別注入干燥潔凈的試管,編號(hào)1,2,3,4,5,6。

        1.2儀器及試劑。實(shí)驗(yàn)室用800電動(dòng)離心機(jī)、血型檢定卡、0.9%生理鹽水、空白試管、手持式加樣槍、一次性注射器、一次性加樣吸頭、碘伏、棉簽等。

        1.3方法。將抽取的6支標(biāo)本室溫靜置1小時(shí),低速(2000轉(zhuǎn)/分)離心10分鐘,分離出血清和血球,將6支標(biāo)本分離出的血球以生理鹽水洗滌并稀釋,在分出的6支血球試管中加入1ml生理鹽水,混勻,離心,移除上清液,重復(fù)此過(guò)程2次,得到6支標(biāo)本的標(biāo)準(zhǔn)血球。取6支空白試管,每管加入生理鹽水1ml,分別吸取6支血球標(biāo)本50ul加于6支生理鹽水試管中,混勻,配成5%的紅細(xì)胞生理鹽水懸液待用。血型檢定卡上橫排和豎排都標(biāo)注序號(hào)1-6號(hào),首先在血型檢定卡上第一行六個(gè)凹槽中分別加1號(hào)標(biāo)本血清0.2ml,依次在6個(gè)凹槽中加入1-6號(hào)標(biāo)本的紅細(xì)胞生理鹽水懸液,混勻,觀察凝集現(xiàn)象。在第二行的六個(gè)凹槽中分別加入2號(hào)標(biāo)本血清0.2ml,依次加入1-6號(hào)標(biāo)本的紅細(xì)胞生理鹽水懸液,混勻,觀察現(xiàn)象。依此類推,直到全部做完6號(hào)標(biāo)本結(jié)束。

        2.結(jié)果

        出現(xiàn)凝集用“+”表示,未出現(xiàn)凝集的“-”表示,結(jié)果見下表。

        3.討論

        六支標(biāo)本因血型不同,而發(fā)生凝集和不凝集的現(xiàn)象。O型血球因其紅細(xì)胞表面不含有A或B凝集原,O型血球和任何血型血清都不發(fā)生凝集;AB型血清中因不含有抗A或抗B抗體,AB型血清和任何血型血球都不凝集。結(jié)合上表可以看出,3號(hào)和4號(hào)血球與6例血清都不發(fā)生凝集,可以說(shuō)明3和4號(hào)標(biāo)本紅細(xì)胞上不含有A或B凝集原,即可推斷3號(hào)和4號(hào)標(biāo)本管為O型血;6號(hào)血清管和6例血球均未出現(xiàn)凝集,說(shuō)明6號(hào)血清中不含有抗A或者抗B抗體,那么6號(hào)管為AB型血;相同血型的血清血球結(jié)合未發(fā)生凝集,表中1號(hào)和2號(hào)反應(yīng)完全相同,1號(hào)、2號(hào)血型相同,5號(hào)的凝集反應(yīng)和1號(hào)、2號(hào)相反,說(shuō)明5號(hào)血型和1號(hào)、2號(hào)必定不同,若1、2號(hào)為A型,5號(hào)則為B型,若1、2號(hào)為B型,5號(hào)則為A型。根據(jù)這個(gè)實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論,不同血型的血清和血球結(jié)合時(shí)會(huì)發(fā)生凝集或不凝集;凝集反應(yīng)取決于紅細(xì)胞表面的凝集原及血清中的抗體。實(shí)驗(yàn)中O型和AB型可根據(jù)凝集反應(yīng)表結(jié)果而判斷出,但A型和B型在未知抗原抗體的情況下無(wú)法準(zhǔn)確區(qū)分。

        交叉配血法臨床用于輸血前檢查,是保證輸血安全的重要措施。在血型鑒定的基礎(chǔ)上,通過(guò)交叉配血試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)受血者和供血者之間不存在血型不合的抗原一抗體反應(yīng),以保證受血者的輸血安全。血型鑒定和交叉配血是利用紅細(xì)胞上的抗原與血清上相應(yīng)的抗體發(fā)生特異性凝集的原理,標(biāo)本的血清效價(jià)低或者存在紅細(xì)胞抗原弱或者紅細(xì)胞亞型的情況下,試驗(yàn)結(jié)果易出現(xiàn)假陰性。另外,試管不清潔干燥、補(bǔ)體、低滲鹽水等都有可能造成溶血反應(yīng),從而導(dǎo)致假陰性反應(yīng),影響結(jié)果的判定。實(shí)驗(yàn)中對(duì)環(huán)境溫濕度進(jìn)行了控制,對(duì)實(shí)驗(yàn)器材都按標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行操作,未發(fā)生溶血現(xiàn)象,但未考慮弱抗原或紅細(xì)胞亞型結(jié)果假陰性的可能。觀察實(shí)驗(yàn)中的凝集出現(xiàn)時(shí)間有早有晚,凝集顆粒有多有少,考慮可能為弱抗原的影響。實(shí)驗(yàn)?zāi)軠?zhǔn)確判定出O型和AB型血,但無(wú)法區(qū)分A型和B型血。紅細(xì)胞血型的鑒定最好使用標(biāo)準(zhǔn)血清和標(biāo)準(zhǔn)血球進(jìn)行正反定型試驗(yàn)。

        【參考文獻(xiàn)】

        [1]張玲.血液科輸血管理與實(shí)踐[J].實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志,2008.14:96-97

        [2]牛小斌.血型鑒定及交叉配血中的假陰性反應(yīng)及原因分析[J].河南預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2006.17.6:371-372endprint

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