謝朝云, 熊 蕓, 孫 靜, 楊忠玲, 胡 陽(yáng), 楊 懷

(1 貴州醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院, 貴州 都勻 558000; 2 貴州省人民醫(yī)院, 貴州 貴陽(yáng) 550002)

·論著·

91株惡臭假單胞菌流行病學(xué)特征及耐藥性

謝朝云1, 熊 蕓1, 孫 靜1, 楊忠玲1, 胡 陽(yáng)1, 楊 懷2

(1 貴州醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院, 貴州 都勻 558000; 2 貴州省人民醫(yī)院, 貴州 貴陽(yáng) 550002)

目的分析臨床分離惡臭假單胞菌的流行病學(xué)與耐藥特點(diǎn)，為臨床合理防治其感染提供依據(jù)。方法收集2010年1月—2015年12月臨床分離的惡臭假單胞菌及其感染者臨床資料，以美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)中的K-B紙片擴(kuò)散法、藥敏判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)及其結(jié)果判斷，以WHONET 5.5軟件對(duì)分離菌株藥敏結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果臨床標(biāo)本共分離出91株惡臭假單胞菌，以60歲以上老年患者為主(占70.33%)；基礎(chǔ)疾病以社區(qū)獲得性肺炎檢出最多(占23.08%)，其次慢性肺原性心臟病(占15.38%)；標(biāo)本主要來源于深部痰(占57.14%)，其次為中段尿(占27.47%)；主要分布于呼吸內(nèi)科(占28.57%)，其次為心血管內(nèi)科(占13.19%)。除對(duì)氨曲南耐藥率(52.75%)較高外，對(duì)慶大霉素、亞胺培南、左氧氟沙星、頭孢他啶、美羅培南、環(huán)丙沙星等耐藥率較低，分別為7.78%、9.89%、2.20 %、9.89%、7.69%、2.22 %，對(duì)阿米卡星和多粘菌素的耐藥率均為0。結(jié)論惡臭假單胞菌感染主要發(fā)生于伴有基礎(chǔ)疾病的老年患者，以呼吸道感染為主，對(duì)多數(shù)抗菌藥物的耐藥率<10%。

惡臭假單胞菌; 流行病學(xué); 抗菌藥物; 抗藥性, 微生物; 耐藥性

惡臭假單胞菌(Pseudomonasputida)為人類和魚類共患病原菌，是一種常見的環(huán)境污染菌，也是人類咽部的正常菌群。偶可從人類感染標(biāo)本中分離出，是人類少見的條件致病菌，不為臨床所重視。因此，對(duì)其臨床流行病學(xué)與耐藥性研究較少，但人體感染后該菌自溶可釋放內(nèi)毒素而使人體出現(xiàn)中毒癥狀，可造成多器官感染、敗血癥、感染性休克，甚至危及生命。隨著近年來廣譜抗菌藥物和免疫抑制劑的廣泛應(yīng)用，惡臭假單胞菌的感染和耐藥率均有上升趨勢(shì)，且以耐藥菌株感染多見。因此，對(duì)惡臭假單胞菌進(jìn)行流行病學(xué)與耐藥特征分析，對(duì)其防控具有重要指導(dǎo)意義。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 2010年1月—2015年12月某院臨床送檢標(biāo)本分離出的惡臭假單胞菌及其感染患者的臨床資料。

1.2 菌株鑒定與藥敏試驗(yàn) 細(xì)菌的培養(yǎng)鑒定按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行，抗菌藥物敏感試驗(yàn)及藥敏結(jié)果判斷按美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)中的K-B藥敏紙片法及其判斷標(biāo)準(zhǔn)，并結(jié)合藥敏紙片說明書進(jìn)行藥敏結(jié)果判定。質(zhì)控菌株為銅綠假單胞菌(ATCC 27853)、大腸埃希菌(ATCC 25922)，標(biāo)準(zhǔn)株均購(gòu)自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析 應(yīng)用WHONET 5.5軟件包對(duì)分離株的藥敏結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié) 果

2.1 一般資料 2010年1月一2015年12月臨床標(biāo)本共分離出惡臭假單胞菌91株，91例患者感染，其中男性63例，女性28例，年齡6～94歲，平均年齡(64.97±17.42)歲。同期檢出假單胞菌屬細(xì)菌2 376株，惡臭假單胞菌占同期檢出假單胞菌屬細(xì)菌3.83%，其中91～100歲占同期同年齡檢出的假單胞菌屬細(xì)菌百分率(4/38，10.53%)，占比最高；其次為81～90歲(5/53，9.43%)、71～80歲(34/388，8.76%)、61～70歲(21/502，4.18%)、0～10歲(2/73，2.74%)、51～60歲(13/511，2.54%)、41～50歲(6/319，1.88%)、31～40歲(5/311，1.61%)、11～20歲(1/109，0.92%)，21～30歲組未檢出(0/72，0.00%)?；A(chǔ)疾病以社區(qū)獲得性肺炎檢出最多(占23.08%)，其次為慢性肺原性心臟病(占15.38%)。以終未期腎病檢出惡臭假單胞菌占同期同類基礎(chǔ)疾病檢出的假單胞菌屬細(xì)菌百分率最高(8.26%)，其次為嚴(yán)重軟組織損傷(7.89%)。見表1。

表1惡臭假單胞菌在不同基礎(chǔ)疾病中構(gòu)成及其在假單胞菌屬細(xì)菌中所占比率

Table1Constituent ofP.putidain different underlying diseases and its proportion inPseudomonasspp.strains

基礎(chǔ)疾病假單胞菌屬株數(shù)構(gòu)成比(%)惡臭假單胞菌株數(shù)構(gòu)成比(%)惡臭假單胞菌/假單胞菌屬(%)終未期腎病1215．091010．998．26嚴(yán)重軟組織損傷763．2066．597．89慢性肺原性心臟病1958．211415．387．18感染性休克281．1822．207．14肺纖維化863．6266．596．98慢性阻塞性肺疾病461．9433．306．52再生障礙性貧血351．4722．205．71慢性支氣管哮喘582．4433．305．17肺癌933．9144．394．30肺結(jié)核1988．3366．593．03慢性支氣管炎37015．571112．092．97社區(qū)獲得性肺炎70829．802123．082．97其他基礎(chǔ)疾病36215．2433．300．83合計(jì)2376100．0091100．003．83

2.2 標(biāo)本來源分布 惡臭假單胞菌標(biāo)本主要來源于深部痰(占57.14%)，其次為中段尿(占27.47%)；中段尿標(biāo)本檢出惡臭假單胞菌占同期同類標(biāo)本檢出的假單胞菌屬細(xì)菌的6.39%，占比最高，其次為深部痰(占4.12%)。見表2。

2.3 科室分布 惡臭假單胞菌主要來源于呼吸內(nèi)科(26株，占28.57%)，其次為心血管內(nèi)科(12株，占13.19%)、腎內(nèi)科(10株，占10.99%)；以重癥監(jiān)護(hù)病房(ICU)檢出惡臭假單胞菌占同期同科室檢出的假單胞菌屬細(xì)菌百分率最高(9/130，6.92%)、其次為骨科(5/79，6.33%)、腎內(nèi)科(10/161，占6.21%)、老年病科(7/142，4.93%)、呼吸內(nèi)科(26/578，占4.50%)、泌尿外科(7/182，3.85%)、心血管內(nèi)科(12/413，占2.91%)、感染科(10/361，占2.77%)、其他科室(5/330，1.52%)。

表2惡臭假單胞菌在不同標(biāo)本中的構(gòu)成及其在假單胞菌屬細(xì)菌中所占比率

Table2Constituent ofP.putidain different specimens and its proportion inPseudomonasspp.strains

標(biāo)本假單胞菌屬株數(shù)構(gòu)成比(%)惡臭假單胞菌株數(shù)構(gòu)成比(%)惡臭假單胞菌/假單胞菌屬(%)深部痰126353．165257．144．12中段尿39116．462527．476．39血24510．3188．793．27傷口分泌物1596．6944．402．52其他標(biāo)本31813．3822．200．63合計(jì)2376100．0091100．003．83

2.4 藥敏試驗(yàn)結(jié)果 2010年1月—2015年12月臨床送檢標(biāo)本中分離出惡臭假單胞菌對(duì)常用抗菌藥物的敏感率和耐藥率，見表3。

表3惡臭假單胞菌對(duì)常用抗菌藥物的藥敏結(jié)果[株，(% )]

Table3Antimicrobial susceptibility testing result ofP.putida(No. of isolates[%])

抗菌藥物耐藥中介敏感哌拉西林23(25．27)0(0．00)68(74．73)哌拉西林/他唑巴坦22(24．18)0(0．00)69(75．82)頭孢他啶9(9．89)0(0．00)82(90．11)氨曲南48(52．75)7(7．69)36(39．56)亞胺培南9(9．89)0(0．00)82(90．11)美羅培南7(7．69)0(0．00)84(92．31)慶大霉素7(7．78)2(2．22)81(90．00)阿米卡星0(0．00)2(2．20)89(97．80)左氧氟沙星2(2．20)0(0．00)89(97．80)環(huán)丙沙星2(2．22)2(2．22)86(95．56)多粘菌素0(0．00)4(4．40)87(95．60)

3 討論

惡臭假單胞菌為無芽胞革蘭陰性需氧細(xì)長(zhǎng)桿菌，屬假單胞菌屬，一般認(rèn)為是魚類的一種病原菌及環(huán)境污染菌，對(duì)人體是一種少見的機(jī)會(huì)致病菌，未引起臨床重視。但隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，此菌耐藥性上升，當(dāng)患者出現(xiàn)菌群失調(diào)、宿主免疫力低下或創(chuàng)傷后等情況時(shí)，導(dǎo)致其感染率上升。王偉等[1]在233株非發(fā)酵菌中，惡臭假單胞菌檢出48株，達(dá)20.60%，Yang CH等[2]報(bào)道尿中檢出率也較高，常因表現(xiàn)為難治性感染時(shí)被臨床發(fā)現(xiàn)。

本研究顯示，從患者年齡看，2010年1月—2015年12月臨床標(biāo)本分離出惡臭假單胞菌的 91例患者中，年齡6～94歲，平均年齡(64.97±17.42)歲，以老年患者占同期檢出假單胞菌屬細(xì)菌百分率較高，基礎(chǔ)疾病以終未期腎病檢出惡臭假單胞菌占同期同類基礎(chǔ)疾病檢出的假單胞菌屬細(xì)菌百分率最高，其次為嚴(yán)重軟組織損傷、呼吸道慢性疾病伴有呼吸功能受損和再生障礙性貧血等免疫機(jī)能受損的患者，提示惡臭假單胞菌作為條伴致病菌，致病力弱，其感染多見于老年患者，主要是有侵入性操作伴有基礎(chǔ)疾病的免疫機(jī)能低下患者[3]，應(yīng)引起臨床注意。

從標(biāo)本來源看，主要來源于深部痰(占57.14%)，其次為中段尿(占27.47%)；中段尿標(biāo)本檢出惡臭假單胞菌占同期同類標(biāo)本檢出的假單胞菌屬細(xì)菌的6.39%，占比最高，其次為深部痰、血和傷口標(biāo)本，分別占4.12%、3.27%、2.52%。從科室分布看，主要來源于呼吸內(nèi)科(占28.57%)，其次為心血管內(nèi)科(占13.19%)、腎內(nèi)科(占10.99%)；以ICU檢出惡臭假單胞菌占同期同科室檢出的假單胞菌屬細(xì)菌百分率(6.92%)最高、其次為骨科(6.33%)、腎內(nèi)科(6.21%)；提示該菌感染以伴有嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病患者引起呼吸道感染為主[4]，其次為泌尿道、血流和傷口感染。彭石龍等[5]報(bào)道從108例醫(yī)院獲得性肺部感染中分離出77株病原菌，其中惡臭假單胞菌檢出16株，占20.78%，檢出率占第三位，僅次于銅綠假單胞菌；余鑫之等[6]對(duì)61例非銅綠假單菌敗血癥中檢出惡臭假單胞菌6例，占9.84%，表現(xiàn)為嚴(yán)重感染和多重耐藥；此外手術(shù)切口感染和骨髓炎等也有報(bào)道[7]。

本研究顯示，惡臭假單胞菌除對(duì)氨曲南耐藥率>50%，不應(yīng)作為治療首選抗菌藥物。對(duì)慶大霉素、亞胺培南、左氧氟沙星、頭孢他啶、美羅培南、環(huán)丙沙星的耐藥率分別均<10%，對(duì)阿米卡星、多粘菌素的耐藥率為0，上述藥物可作為臨床治療惡臭假單胞菌感染的可選抗菌藥物。多粘菌素雖然耐藥率低，但副作用較大，臨床上大多僅用于對(duì)碳青霉烯類抗生素耐藥的菌株。因此，應(yīng)加以分級(jí)管理，限制濫用；而慶大霉素、阿米卡星、左氧氟沙星、頭孢他啶、環(huán)丙沙星等可作為臨床治療惡臭假單胞菌優(yōu)選抗菌藥物。隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，惡臭假單胞菌的耐藥性也明顯上升，對(duì)亞胺培南和美羅培南等碳青霉烯類抗生素的耐藥率分別為9.89%和7.69%，耐藥率顯現(xiàn)上升趨勢(shì)，應(yīng)引起臨床重視，不應(yīng)作為臨床首選抗菌藥物；臨床也已有報(bào)道耐藥株感染形成難治性疾病[8]，是危險(xiǎn)信號(hào)，與其產(chǎn)生氨基糖苷類修飾酶基因(aminoglyc oside modifying enzymes，AMEs)[9]、β-內(nèi)酰胺酶[尤其是金屬酶(VIM、IMP)][10]、消毒劑/磺胺耐藥基因(chlorhexidine-sulfadiazine resistant gene，CSRE，又稱為qacEA1-sul1)[11]、整合子(integron，int)1、2、3[10，12]、外膜蛋白缺失和外排泵[14]等有關(guān)。

綜上所述，一般認(rèn)為惡臭假單胞菌致病力弱，未引起重視，但隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，此菌耐藥性和感染率有上升趨勢(shì)。當(dāng)患者出現(xiàn)菌群失調(diào)、宿主免疫力低下或創(chuàng)傷后等免疫功能下降情況時(shí)，極易引起呼吸道、泌尿道、切口、傷口、骨髓、血流等部位惡臭假單胞菌感染，甚至形成難治感染性疾病、敗血癥和食品污染食物中毒等[15]，且多認(rèn)為與醫(yī)院感染有關(guān)。因此，廣大醫(yī)務(wù)人員應(yīng)引起高度重視，嚴(yán)防漏診及誤診，同時(shí)注意手衛(wèi)生，防止該菌通過醫(yī)護(hù)人員手傳播給患者，加強(qiáng)環(huán)境消毒和隔離，避免交叉感染。

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Epidemiologicalcharacteristicsandantimicrobialresistanceof91strainsofPseudomonasputida

XIEZhao-yun1,XIONGYun1,SUNJing1,YANGZhong-ling1,HUYang1,YANGHuai2

(1ThirdAffiliatedHospitalofGuizhouMedicalUniversity,Douyun558000,China; 2GuizhouProvincialPeople’sHospital,Guiyang550002,China)

ObjectiveTo analyze the epidemiological characteristics and antimicrobial resistance of clinically isolatedPseudomonasputida(P.putida), and provide basis for rational prevention and treatment ofP.putidainfection.MethodsP.putidaisolated between January 2010 and December 2015, as well as clinical data of patients infected withP.putidawere collected, antimicrobial susceptibility of isolates was determined by Kirby-Bauer disk diffusion susceptibility testing of Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) of America, susceptibility testing results of isolated strains were analyzed by WHONET 5.5 software.ResultsA total of 91 strains ofP.putidawere isolated from clinical specimens, most were from elderly patients aged >60 years(70.33%); the major underlying disease was community-acquired pneumonia (23.08%)，followed by chronic pulmonary heart disease(15.38%); the main specimen was sputum(57.14%), followed by urine(27.47%);P.putidamainly distributed in department of respiratory medicine (28.57%), followed by department of cardiovascular medicine (13.19%).P.putidahad high resistance rate to aztreonam (52.75%), while resistance rates to gentamicin, imipenem, levofloxacin, ceftazidime, meropenem, and ciprofloxacin were 7.78%, 9.89%, 2.20%, 9.89%, 7.69%, and 2.22% respectively, resistance rates to amikacin and polymyxin were both 0.ConclusionP.putidainfection mainly occurs in elderly patients with underlying diseases, mainly respiratory tract infection, resistance rates to most antimicrobial agents were <10%.

Pseudomonasputida; epidemiology; antimicrobial agent; drug resistance; microbial

[Chin J Infect Control，2017，16(12)：1185-1188]

2017-03-20

貴州省黔南州社會(huì)發(fā)展科技項(xiàng)目(黔南科合社字[2013]20號(hào))

謝朝云(1968-)，男(水族)，貴州省三都縣人，主任醫(yī)師，主要從事醫(yī)院感染防控、骨科感染性疾病防治及細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)研究。

楊懷 E-mail:syygkhy@126.com

10.3969/j.issn.1671-9638.2017.12.018

R378.99+1

A

1671-9638(2017)12-1185-04

文細(xì)毛、陳玉華)