郝瑩 陳園園 張瑾 馬惠姿 顧衛(wèi)紅

·神經(jīng)系統(tǒng)遺傳性疾病·

青少年型亨廷頓病10例臨床表型及基因突變分析

郝瑩 陳園園 張瑾 馬惠姿 顧衛(wèi)紅

目的總結(jié)青少年型亨廷頓病患者臨床表型及IT15基因胞嘧啶?腺嘌呤?鳥嘌呤（CAG）重復(fù)突變特點(diǎn)。方法采用聚合酶鏈反應(yīng)結(jié)合熒光標(biāo)記毛細(xì)管電泳片段分析方法，對159個(gè)亨廷頓病家系272名成員進(jìn)行IT15基因CAG重復(fù)序列檢測，并對其中10例青少年期發(fā)病患者的臨床表現(xiàn)、影像學(xué)特征以及臨床表型與基因型相關(guān)性進(jìn)行分析。結(jié)果經(jīng)基因檢測共發(fā)現(xiàn)211例攜帶異常擴(kuò)展的IT15基因CAG重復(fù)序列，其中10例為青少年型亨廷頓病患者，臨床表現(xiàn)各異，主要以不自主運(yùn)動(dòng)和認(rèn)知功能障礙為主；發(fā)病年齡平均（12.50±4.55）歲，IT15基因CAG重復(fù)序列平均（63.70±14.83）個(gè)，Pearson相關(guān)分析顯示，二者呈負(fù)相關(guān)關(guān)系（r=?0.865，P=0.001）。結(jié)論青少年型亨廷頓病與成年型亨廷頓病患者臨床表現(xiàn)不同，前者主要表現(xiàn)為認(rèn)知功能障礙；對于無明確家族史、臨床表現(xiàn)疑似亨廷頓病的患者，基因檢測是明確診斷的依據(jù)；亨廷頓病發(fā)病年齡與IT15基因CAG重復(fù)次數(shù)呈負(fù)相關(guān)，但不能完全解釋發(fā)病年齡的變異性，尤以青少年型亨廷頓病患者顯著，可能存在其他遺傳調(diào)節(jié)因素。

杭廷頓病； 青少年； 表型； 基因； 突變； 系譜

亨廷頓?。跦D，在線人類孟德爾遺傳數(shù)據(jù)庫（OMIM）編號(hào)：143100］是常染色體顯性遺傳性神經(jīng)變性病，發(fā)病年齡30～50歲，病程15～20年，臨床主要表現(xiàn)為舞蹈樣動(dòng)作、進(jìn)行性認(rèn)知功能減退和神經(jīng)精神癥狀，影像學(xué)可見尾狀核和大腦皮質(zhì)萎縮［1?4］。致病基因IT15定位于4p16.3，第1外顯子內(nèi)存在高度多態(tài)性胞嘧啶?腺嘌呤?鳥嘌呤（CAG）重復(fù)序列，該重復(fù)序列異常擴(kuò)展導(dǎo)致亨廷頓病［5］。亨廷頓病發(fā)病率為5～8/10萬［6］，通常于成年期發(fā)病，具有明顯的外顯不全和延遲外顯。青少年型亨廷頓病較為少見，臨床表型存在異質(zhì)性。本研究回顧分析10例青少年型亨廷頓病患者的臨床資料，對其臨床表型和IT15基因CAG重復(fù)突變進(jìn)行細(xì)致分析。

對象與方法

一、研究對象

研究對象均來自2005年8月-2016年5月中日友好醫(yī)院運(yùn)動(dòng)障礙與神經(jīng)遺傳病研究中心收集的159個(gè)臨床擬診為亨廷頓病家系共272名成員，均為漢族，男性143名，女性129名；年齡6～72歲，平均（36.76±13.73）歲。本研究經(jīng)中日友好醫(yī)院道德倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，所有受試者及其家屬均知情同意并簽署知情同意書。

二、研究方法

1.樣本采集 空腹采集所有受試者外周靜脈血5 ml，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.8%枸櫞酸鈉進(jìn)行抗凝，標(biāo)準(zhǔn)酚氯仿法提取基因組DNA。

2.聚合酶鏈反應(yīng) 根據(jù)IT15基因第1外顯子CAG重復(fù)片段兩側(cè)的序列設(shè)計(jì)引物，由北京賽百盛基因技術(shù)有限公司合成，正向引物（F引物）序列：5'?AGTAAGGCCTTCGAGTCCCTCAAGTCCTCC ?3'；反向 引 物（R引 物）序 列 ：5'?AAACTCACGGTCGGTGCAGCGGCTCCTCAG ?3'。PCR 反應(yīng)體系共 25 μl，依次加入 dNTPs 2.50 mmol、2×GC緩沖液Ⅰ12.50 μl、正向引物和反向引物分別5 pmol、模板 DNA 100 ng和r?Taq 1U，加滅菌去離子水補(bǔ)充至25 μl；反應(yīng)條件為95℃預(yù)變性5 min，95 ℃ 90 s、62.5 ℃ 60 s、72 ℃ 120 s，共循環(huán)35次，72℃延伸10 min。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物行質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.5%的瓊脂糖凝膠電泳共40 min，電壓100 V，對出現(xiàn)2條電泳條帶的樣本進(jìn)行基于毛細(xì)管電泳的片段分析。

3.基于毛細(xì)管電泳的片段分析 采用熒光標(biāo)記引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)，引物序列包括經(jīng)D4熒光標(biāo)記的上述正向引物和反向引物，其中D4熒光標(biāo)記的正向引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成。PCR反應(yīng)體系共計(jì)25 μl，依次加入dNTPs 2.50 mmol、2× GC 緩沖液Ⅰ12.50 μl、正向引物和反向引物各5 pmol、模板 DNA 100 ng和r?Taq 1U，加滅菌去離子水補(bǔ)充至25 μ l。采用美國Beckman Coulter公司生產(chǎn)的CEQ8000核酸分析儀對PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行片段分析：甲酰胺 20 μl，以 0.25 μl CEQ DNA Size Standard Kit?600片段作為標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)標(biāo)，異源雙鏈聚合酶鏈反應(yīng)（HD?PCR）擴(kuò)增產(chǎn)物1 μl混勻、上樣；預(yù)設(shè)程序進(jìn)行電泳分離，分離條件為毛細(xì)管溫度達(dá)50℃時(shí)，90℃變性120 s，2 kV電壓下注入樣本30 s、4.80 kV電壓下電泳70 min，以預(yù)設(shè)的分析參數(shù)進(jìn)行片段分析。

4.統(tǒng)計(jì)分析方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與分析。采用Kolmogorov?Smirnov檢驗(yàn)和Shapiro?Wilk檢驗(yàn)（N＜50）行正態(tài)性檢驗(yàn)；呈正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，發(fā)病年齡與IT15基因CAG重復(fù)序列的相關(guān)分析采用Pearson相關(guān)分析。以P≤0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

基因檢測顯示，159個(gè)亨廷頓病家系共272名成員中211例攜帶異常擴(kuò)展的IT15基因CAG重復(fù)序列，其中已發(fā)病且臨床資料完整患者149例，男性83例，女性66例；年齡9～69歲，平均（42.52±12.81）歲；發(fā)病年齡 6～66歲，平均為（38.25±12.34）歲；IT15基因CAG重復(fù)序列36～80個(gè)，平均（45.10±7.55）個(gè)。Pearson相關(guān)分析顯示，發(fā)病年齡與IT15基因CAG重復(fù)序列呈負(fù)相關(guān)（r=?0.750，P=0.000）。211例攜帶異常擴(kuò)展CAG重復(fù)序列的患者中10例于青少年期發(fā)病，9例為父系遺傳，其中7例有明確家族史，余1例為母系遺傳。10例青少年型亨廷頓病患者的臨床資料參見表1。

一、臨床特征

例1（患者3） 男性，19歲，主因不自主運(yùn)動(dòng)伴震顫2～3年，于2008年5月12日至我院運(yùn)動(dòng)障礙與神經(jīng)遺傳病研究中心就診。患者3年前無明顯誘因出現(xiàn)不自主運(yùn)動(dòng)伴震顫，行走易跌倒，易受驚嚇。門診神經(jīng)系統(tǒng)檢查：神志清楚，語言流利，反應(yīng)尚可，面部有摔傷；眼球各向活動(dòng)充分，未見明顯眼震；四肢肌力5級(jí)、肌張力正常，雙側(cè)指鼻試驗(yàn)明顯意向性震顫，雙側(cè)跟?膝?脛試驗(yàn)尚穩(wěn)準(zhǔn)，直線行走稍差，腱反射正常，病理征陰性。影像學(xué)檢查：頭部MRI顯示，大腦皮質(zhì)輕度萎縮，尾狀核頭部明顯萎縮（圖1a）?；颊呒蚁悼勺匪?代共2例患者，均為男性，呈常染色體顯性遺傳。其父現(xiàn)年41歲，于35歲發(fā)病，神經(jīng)系統(tǒng)檢查可見不自主運(yùn)動(dòng)，雙側(cè)指鼻試驗(yàn)穩(wěn)準(zhǔn)、雙側(cè)快復(fù)輪替動(dòng)作笨拙、直線行走稍差。

表1 10例青少年型亨廷頓病患者臨床資料Table 1. The clinical features of 10 cases with juvenile?onset HD

例2（患兒4） 男性，14歲，主因間斷性不自主聳肩、動(dòng)作不協(xié)調(diào)4年，于2008年7月23日至我院運(yùn)動(dòng)障礙與神經(jīng)遺傳病研究中心就診?；純?年前無明顯誘因出現(xiàn)不自主聳肩，行走不協(xié)調(diào)，向左側(cè)傾倒，雙腿僵硬，睡眠欠佳，睡眠中踢腿、打拳等動(dòng)作較多。門診神經(jīng)系統(tǒng)檢查：神志清楚，言語欠流利，智力下降；眼球各向活動(dòng)緩慢，未見明顯眼震，可見角膜色素環(huán)；四肢肌力5級(jí)，上肢肌張力5級(jí)、下肢肌張力增高，雙側(cè)指鼻試驗(yàn)和跟?膝?脛試驗(yàn)欠穩(wěn)準(zhǔn)，腱反射活躍，病理反射未引出。影像學(xué)檢查：頭部MRI顯示，大腦皮質(zhì)中度萎縮，尾狀核頭部明顯萎縮（圖1b）?；颊呒蚁悼勺匪?代共4例患者，男性3例，女性1例，呈常染色體顯性遺傳。其父于35歲發(fā)病，表現(xiàn)為不自主運(yùn)動(dòng)、行走不穩(wěn)，于43歲因心肌梗死死亡；其姑母亦表現(xiàn)出相似癥狀。

例3（患兒6） 男性，16歲，主因運(yùn)動(dòng)功能下降伴智力減退2年，于2009年9月8日至我院運(yùn)動(dòng)障礙與神經(jīng)遺傳病研究中心就診?；純?年前無明顯誘因出現(xiàn)動(dòng)作笨拙、運(yùn)動(dòng)功能下降、智力減退等癥狀與體征，進(jìn)行性加重。神經(jīng)系統(tǒng)檢查：神志清楚，言語欠流利，反應(yīng)遲鈍；雙眼上下視不能，眼球各向活動(dòng)緩慢，未見明顯眼震；四肢肌力5級(jí)、肌張力增高，雙側(cè)指鼻試驗(yàn)笨拙但尚穩(wěn)準(zhǔn)，雙側(cè)快復(fù)輪替動(dòng)作笨拙，行走時(shí)可見肌張力障礙姿勢，頸部和肩部歪斜，腱反射亢進(jìn)，病理反射未引出。影像學(xué)檢查：頭部MRI顯示，大腦皮質(zhì)輕度萎縮，尾狀核頭部輕度萎縮（圖1c）。無明確家族史，其父現(xiàn)年38歲，其母40歲，均無相似臨床癥狀，神經(jīng)系統(tǒng)檢查未見明顯異常。

例4（患者10） 男性，28歲，主因行走不穩(wěn)伴言語模糊8年，于2015年5月27日至我院運(yùn)動(dòng)障礙與神經(jīng)遺傳病研究中心就診。患者8年前無明確誘因出現(xiàn)行走不穩(wěn)、言語模糊，反應(yīng)較慢，不自主抖動(dòng)，進(jìn)行性加重。門診神經(jīng)系統(tǒng)檢查：神志清楚，口吃，構(gòu)音障礙；面部不自主運(yùn)動(dòng)，姿勢異常，四肢小幅度不自主抖動(dòng)；眼球各向活動(dòng)欠充分，未見明顯眼震；四肢肌力5級(jí)、肌張力增高，雙側(cè)快復(fù)輪替動(dòng)作笨拙，雙側(cè)指鼻試驗(yàn)和跟?膝?脛試驗(yàn)欠穩(wěn)準(zhǔn)，腱反射對稱，病理征可疑陽性。影像學(xué)檢查：頭部MRI顯示，大腦皮質(zhì)輕度萎縮，尾狀核頭部中度萎縮（圖1d）?；颊呒蚁悼勺匪?代共4例患者，男性2例，女性2例，呈常染色體顯性遺傳。其父現(xiàn)年53歲，于40歲發(fā)病，就診時(shí)全身呈大幅度不自主運(yùn)動(dòng)；其他家系成員無法追溯。

圖1 4例青少年型亨廷頓病患者頭部MRI檢查所見 1a 例1（患者3）橫斷面T1WI顯示大腦皮質(zhì)輕度萎縮（粗箭頭所示），尾狀核頭部明顯萎縮（細(xì)箭頭所示） 1b 例2（患兒4）橫斷面T2WI顯示大腦皮質(zhì)中度萎縮（粗箭頭所示），尾狀核頭部明顯萎縮（細(xì)箭頭所示） 1c 例3（患兒6）橫斷面T2WI顯示大腦皮質(zhì)輕度萎縮（粗箭頭所示），尾狀核頭部輕度萎縮（細(xì)箭頭所示） 1d 例4（患者10）橫斷面T2WI顯示大腦皮質(zhì)輕度萎縮（粗箭頭所示），尾狀核頭部中度萎縮（細(xì)箭頭所示）Figure 1 Head MRI findings of 4 patients with juvenile?onset HD Axial T1WI of Case 3 showed mild atrophy of cerebral cortex(thick arrow indicates)and obvious atrophy of the head of caudate nucleus(thin arrow indicates,Panel 1a).Axial T2WI of Case 4 showed moderate atrophy of cerebral cortex(thick arrow indicates)and obvious atrophy of the head of caudate nucleus(thin arrow indicates,Panel 1b).Axial T2WI of Case 6 showed mild atrophy of cerebral cortex(thick arrow indicates)and the head of caudate nucleus(thin arrow indicates,Panel 1c).Axial T2WI of Case 10 showed mild atrophy of cerebral cortex(thick arrow indicates)and moderate atrophy of the head of caudate nucleus(thin arrow indicates,Panel 1d).

二、IT15基因CAG重復(fù)片段分析

共10例青少年型亨廷頓病患者，男性7例，女性3例；年齡9～28歲，平均（32.00±5.88）歲；發(fā)病年齡 6～20歲，平均（12.50±4.55）歲；IT15基因CAG重復(fù)序列43～80個(gè)，平均（63.70±14.83）個(gè)。Pearson相關(guān)分析顯示，發(fā)病年齡與IT15基因CAG重復(fù)序列呈負(fù)相關(guān)（r=?0.865，P=0.001）。

討 論

亨廷頓病是一種以運(yùn)動(dòng)障礙為突出表現(xiàn)的常染色體顯性遺傳性神經(jīng)變性病，多于中年期隱匿起病，臨床表現(xiàn)除進(jìn)行性加重的舞蹈樣動(dòng)作、認(rèn)知功能障礙和行為異常“三聯(lián)征”外，還伴有共濟(jì)失調(diào)、吞咽困難和構(gòu)音障礙［7］，主要病變部位位于紋狀體（包括尾狀核和殼核）和大腦皮質(zhì)，病殘率較高，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量，目前全世界范圍內(nèi)其發(fā)病率為5～10/10萬［8］。亨廷頓病最早于1872年由Huntington［9］系統(tǒng)描述而得名，于 1993年克隆出其致病基因IT15基因，定位于4p16.3，包含67個(gè)外顯子，其mRNA包含13 474個(gè)核苷酸，編碼1個(gè)包含3142 個(gè)氨基酸殘基的蛋白即亨廷頓蛋白（Htt）［10?11］，其第1外顯子內(nèi)存在一段高度多態(tài)性CAG重復(fù)序列，該重復(fù)序列異常擴(kuò)展可以導(dǎo)致亨廷頓病。

亨廷頓病發(fā)病年齡為24～46歲，平均（35.8±11.8）歲；病程 7～ 16年，平均（11.6± 5.6）年［12］，約25%患者于50歲甚至70歲后發(fā)病，臨床癥狀輕微。成年型亨廷頓病臨床表現(xiàn)多以運(yùn)動(dòng)障礙、智力減退和精神行為異常為主；青少年型亨廷頓病臨床少見，發(fā)病率0.50 ～ 1.00/10萬，占成年型的1/10［13］，多為父系遺傳，20歲前發(fā)病，臨床表現(xiàn)與成年型不同，主要表現(xiàn)為運(yùn)動(dòng)障礙、肌強(qiáng)直、腱反射亢進(jìn)、眼動(dòng)異常、嚴(yán)重認(rèn)知功能障礙，特別是10歲前發(fā)病患者，臨床常出現(xiàn)帕金森樣表現(xiàn)，如肌張力障礙、震顫、運(yùn)動(dòng)遲緩等。本研究經(jīng)基因檢測確定159個(gè)亨廷頓病家系共211例患者攜帶異常擴(kuò)展的CAG重復(fù)序列，其中149例已發(fā)病，絕大多數(shù)于成年期發(fā)病，僅10例于青少年期發(fā)病，8例表現(xiàn)為小腦體征、7例出現(xiàn)不自主運(yùn)動(dòng)、6例出現(xiàn)認(rèn)知功能障礙、3例出現(xiàn)精神行為異常、1例出現(xiàn)震顫、1例無明確家族史患者出現(xiàn)肌張力障礙。10例患者中4例發(fā)病年齡≤10歲，分別為10、6、7和9歲；IT15基因CAG重復(fù)序列分別為80、73、79和79次，其中，10歲發(fā)病的患兒4臨床表現(xiàn)為不自主運(yùn)動(dòng)、行走不穩(wěn)、智力下降、睡眠中出現(xiàn)打拳、踢腿等動(dòng)作；6歲發(fā)病的患兒5表現(xiàn)為行走姿勢異常、足內(nèi)翻、雙上肢和面部不自主抖動(dòng)、智力下降、反應(yīng)較慢、情緒異常；7歲發(fā)病的患兒8表現(xiàn)為行走易跌倒、不自主運(yùn)動(dòng)、學(xué)習(xí)成績較差、性格孤僻；9歲發(fā)病的患兒9表現(xiàn)為雙側(cè)快復(fù)輪替動(dòng)作笨拙、不自主運(yùn)動(dòng)，上述4例患兒均無舞蹈樣動(dòng)作。國外曾報(bào)道多例青少年型亨廷頓病患者，例如，Yoon等［14］報(bào)告3例10歲前發(fā)病的患兒，CAG重復(fù)序列分別為120、100和93次，早期表現(xiàn)為精神行為異常、煩躁、多動(dòng)、共濟(jì)失調(diào)、易跌倒，后期均出現(xiàn)嚴(yán)重構(gòu)音障礙。Ribai等［15］研究顯示，29例法國青少年型亨廷頓病患者中19例（65.52%）最常見癥狀是嚴(yán)重認(rèn)知功能障礙和精神行為異常，包括酒精和藥物依賴及精神障礙，平均發(fā)生于發(fā)病后6年；3例出現(xiàn)肌陣攣伴頭部震顫，3例為舞蹈樣動(dòng)作，1例為進(jìn)行性小腦共濟(jì)失調(diào)；10歲前發(fā)病的患者均為父系遺傳。Patra和 Shirolkar［16］報(bào)告 1 例 IT15 基因 CAG重復(fù)序列為83次的青少年型亨廷頓病患者，8歲發(fā)病，臨床表現(xiàn)為嚴(yán)重癲發(fā)作、共濟(jì)失調(diào)、運(yùn)動(dòng)遲緩、易跌倒，無明確家族史，病情進(jìn)展較快，9歲時(shí)出現(xiàn)嚴(yán)重抽搐發(fā)作，病程中無舞蹈樣動(dòng)作；頭部MRI顯示雙側(cè)尾狀核對稱性T2WI高信號(hào)，輕度萎縮。我們研究團(tuán)隊(duì)曾報(bào)告1例少年型亨廷頓病患兒，其父未發(fā)病，但是攜帶CAG中間重復(fù)等位基因［17］。青少年型亨廷頓病與成年型亨廷頓病患者臨床表型的差異提示受累神經(jīng)核團(tuán)不完全相同，可能與神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程有關(guān)。

臨床上有些疾病表型與亨廷頓病極為相似，應(yīng)注意鑒別診斷。（1）類亨廷頓病1型（HDL1型）：呈常染色體顯性遺傳，發(fā)病年齡21～34歲，致病基因?yàn)镻RNP基因；臨床以精神癥狀為主，此外還表現(xiàn)為共濟(jì)失調(diào)、構(gòu)音障礙、協(xié)調(diào)能力差、認(rèn)知功能障礙、癡呆、舞蹈樣動(dòng)作、面部不自主運(yùn)動(dòng)和肌強(qiáng)直等［18］。（2）類亨廷頓病2型（HDL2型）：呈常染色體顯性遺傳，發(fā)病年齡35～40歲，致病基因?yàn)镴PH3基因，其變位剪切體處存在一段多態(tài)性CAG重復(fù)序列，正常重復(fù)次數(shù)為6～28次，≥41次為異常重復(fù)次數(shù)；臨床主要表現(xiàn)為肌張力障礙、舞蹈樣動(dòng)作、肌強(qiáng)直、構(gòu)音障礙、運(yùn)動(dòng)遲緩、癡呆、動(dòng)作性震顫和精神癥狀等；頭部影像學(xué)顯示紋狀體萎縮［19］。（3）類亨廷頓病3型（HDL3型）：呈常染色體隱性遺傳，發(fā)病年齡為3～5歲，致病基因定位于4p15.3；臨床表現(xiàn)為共濟(jì)失調(diào)、痙攣、舞蹈樣動(dòng)作、肌張力障礙、癲發(fā)作、錐體外系癥狀和精神癥狀等；頭部影像學(xué)顯示尾狀核和額葉皮質(zhì)萎縮［20］。（4）類亨廷頓病4型（HDL4型）：又稱脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)17型（SCA17型），呈常染色體顯性遺傳，發(fā)病年齡19～48歲，致病基因?yàn)門BP基因，其第3外顯子區(qū)存在一段多態(tài)性CAG重復(fù)序列，正常重復(fù)次數(shù)為25～42次，異常重復(fù)次數(shù)為45～66次；臨床表現(xiàn)為共濟(jì)失調(diào)、構(gòu)音障礙、意向性震顫、精神癥狀、癡呆、肌陣攣、肌張力障礙和舞蹈樣動(dòng)作等［21］。

多項(xiàng)研究顯示，CAG重復(fù)序列＜27次為正常等位基因，不引起疾??；27～35次為可引起突變的等位基因，不引起疾病，但在減數(shù)分裂過程中易發(fā)生擴(kuò)展突變，使后代致?。?6～40次易發(fā)生外顯不全，其根本原因是代間傳遞不穩(wěn)定，使后代重復(fù)發(fā)生明顯擴(kuò)展，攜帶者可能發(fā)病也可能不發(fā)病；＞40次為完全外顯的異常等位基因，引起疾?。?2?26］。對于無明確家族史的散發(fā)病例，應(yīng)通過基因檢測明確診斷，同時(shí)還應(yīng)對其父母進(jìn)行基因檢測，以免漏診。

發(fā)病年齡與擴(kuò)展的CAG重復(fù)序列呈負(fù)相關(guān)，但僅能解釋50%～70%的發(fā)病年齡變異性。有文獻(xiàn)報(bào)道，青少年型亨廷頓病患者CAG重復(fù)序列＞50次，成年期發(fā)病患者CAG重復(fù)序列約為40次［27］。本研究家系中211例攜帶異常擴(kuò)展的IT15基因CAG重復(fù)序列的患者中149例已發(fā)病，CAG重復(fù)序列約為40次的患者多于成年期發(fā)病，如攜帶43次CAG重復(fù)序列的患者發(fā)病年齡多≥40歲。本研究10例青少年型亨廷頓病患者中4例CAG重復(fù)序列≤50次，分別為47、49、43和50次，相對應(yīng)的發(fā)病年齡分別為17、15、16和20歲，尤其是重復(fù)43次的患者16歲即發(fā)病，提示青少年型亨廷頓病患者存在其他調(diào)節(jié)因素影響發(fā)病年齡，有學(xué)者認(rèn)為可能與DNA穩(wěn)定性相關(guān)遺傳調(diào)節(jié)因素有關(guān)［28］。

亨廷頓病是一種常染色體顯性遺傳性神經(jīng)變性病，逐漸出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)障礙、認(rèn)知功能障礙和情感障礙。由于越來越多的家系后代逐漸具備一定的醫(yī)學(xué)常識(shí)，看到上一代病情后，難免產(chǎn)生恐懼心理。目前該病尚無有效治療方法，基于對家系患者的明確診斷開展產(chǎn)前診斷和植入前診斷，中斷致病突變的傳遞，對家系后代十分重要。此外，康復(fù)訓(xùn)練和心理指導(dǎo)對神經(jīng)變性病患者及其家屬也是至關(guān)重要的，亨廷頓病患者應(yīng)盡早開展運(yùn)動(dòng)功能和認(rèn)知功能康復(fù)，對于情感和精神障礙，應(yīng)盡早予心理指導(dǎo)；家屬也應(yīng)充分了解該病特點(diǎn)和病程規(guī)律，采取相應(yīng)的照料，亦需要心理支持。國外最新文獻(xiàn)報(bào)道，神經(jīng)變性病動(dòng)物模型顯示，海藻糖具有抑制異常蛋白質(zhì)聚集、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞的作用，可能對于多聚谷氨酰胺類疾病具有一定延緩疾病發(fā)展的作用［29］。與此同時(shí)，深入研究亨廷頓病相關(guān)遺傳調(diào)節(jié)因素，對發(fā)病機(jī)制和干預(yù)治療的探索具有重要意義。

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Clinical and genetic analysis of juvenile?onset Huntington's disease:10 cases report

HAO Ying1,CHEN Yuan?yuan1,ZHANG Jin1,MA Hui?zi2,GU Wei?hong11Movement Disorder&Neurogenetics Research Center,China?Japan Friendship Hospital,Beijing 100029,China
2Department of Neurology,Beijing Tiantan Hospital,Capital Medical University,Beijing 100050,China
Corresponding authors:MA Hui?zi(Email:mahuizi1127@126.com);
GU Wei?hong(Email:jane55.gu@vip.sina.com)

ObjectiveTo investigate the clinical features and dynamic mutation of 10 cases with juvenile?onset Huntington's disease(HD).MethodsThe cytosine?adenine?guanine(CAG)repeats of IT15 gene were detected by polymerase chain reaction(PCR)and capillary electrophoresis in 272 individuals of 159 pedigrees with preliminary diagnosis of HD.The correlation between clinical features and expanded CAG repeats in the IT15 gene of 10 cases with juvenile?onset HD were studied carefully.Results Among 211 individuals carried expanded CAG repeats,10 cases onset before 20 years of age.The predominant clinical manifestations were involuntary movement and cognitive impairment.The average age of onset was(12.50±4.55)years,and the average CAG repeat number of IT15 gene was 63.70±14.83.Pearson correlation analysis showed that the age of onset was significantly and negatively correlated with the CAG repeat number(r= ?0.865,P=0.001).Conclusions1)The juvenile?onset case of HD presented with different clinical features compared with adult?onset cases.The most common presentation is cognitive decline.2)Analysis of CAG repeats of IT15 gene is necessary for the diagnosis of juvenile?onset case of HD with no family history.3)The variability in age of onset is not completely explained by the effects of expanded CAG repeats of IT15 gene,which is more prominently for the juvenile?onset cases,therefore,it is suggested that other factors may modulate the age of onset.

Huntington disease; Adolescent; Phenotype; Genes; Mutation; Pedigree

This study was supported by Grant Awarded 2010-2012 from Ministry of Health Foundation of China.

10.3969/j.issn.1672?6731.2017.08.008

衛(wèi)生部部署（管）醫(yī)院2010-2012年度臨床學(xué)科重點(diǎn)項(xiàng)目

100029北京，中日友好醫(yī)院運(yùn)動(dòng)障礙與神經(jīng)遺傳病研究中心（郝瑩，陳園園，張瑾，顧衛(wèi)紅）；100050首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科（馬惠姿）

馬惠姿（Email：mahuizi1127@126.com）；顧衛(wèi)紅（Email：jane55.gu@vip.sina.com）

2017?06?14）