王佩，盧丹丹，王京，張唯，魏書艷，萬莉，李軒

（河北省保定市第一中心醫(yī)院，河北 保定 071000）

普羅布考對(duì)腦梗死患者氧化應(yīng)激水平、尿酸及臨床預(yù)后的影響*

王佩，盧丹丹，王京，張唯，魏書艷，萬莉，李軒

（河北省保定市第一中心醫(yī)院，河北 保定 071000）

目的 研究普羅布考對(duì)腦梗死患者氧化應(yīng)激水平、尿酸及臨床預(yù)后的影響。方法 將160例缺血性腦卒中患者隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組兩組，除基礎(chǔ)治療外，實(shí)驗(yàn)組予以阿托伐他汀鈣片聯(lián)合普羅布考治療，對(duì)照組予阿托伐他汀治療。于入院第1天和第14天分別測(cè)定缺血性卒中患者的超氧化物歧化酶（SOD）、總抗氧化能力（TAC）、丙二醛（MDA）及尿酸水平，于發(fā)病第90天應(yīng)用改良Rankin量表評(píng)價(jià)其神經(jīng)功能。分析普羅布考與氧化應(yīng)激水平、尿酸及臨床預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果 兩組卒中進(jìn)展比例比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），實(shí)驗(yàn)組低于對(duì)照組。兩組第90天時(shí)的神經(jīng)功能比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），實(shí)驗(yàn)組優(yōu)于對(duì)照組。通過比較兩組間氧化應(yīng)激水平發(fā)現(xiàn)，普羅布考可以降低腦梗死患者的氧化應(yīng)激及尿酸水平，進(jìn)一步改善患者的神經(jīng)功能。結(jié)論 普羅布考可以通過降低腦梗死患者的氧化應(yīng)激及尿酸水平，改善患者預(yù)后。

普羅布考；腦梗死；氧化應(yīng)激；尿酸

腦梗死是目前常見的卒中類型，由于其高致殘率及高致死率備受研究者們的重視。腦梗死后的神經(jīng)損傷機(jī)制十分復(fù)雜，其中缺血半暗帶的面積及細(xì)胞的存活率與患者的病情進(jìn)展及臨床預(yù)后密切相關(guān)。腦梗死發(fā)生后，缺血半暗帶內(nèi)的細(xì)胞由于氧化應(yīng)激的作用產(chǎn)生大量自由基，神經(jīng)組織內(nèi)氧化與抗氧化機(jī)制失衡，損傷神經(jīng)功能。普羅布考是一種人工合成的抗氧化制劑，大量的藥理及臨床實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其除調(diào)脂作用外，還具有強(qiáng)大的抗氧化、改善內(nèi)皮功能、抑制內(nèi)皮細(xì)胞凋亡等作用。本文通過分析普羅布考對(duì)腦梗死患者氧化應(yīng)激及尿酸水平的影響，進(jìn)一步分析普羅布考對(duì)腦梗死患者臨床預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

研究對(duì)象均來源于2014年1月-2015年12月保定市第一中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的缺血性腦卒中患者，共收集缺血性腦卒中患者160例。其中，男性81例，女性79例；年齡40～79歲，平均（67.132±6.901）歲；病程均<48 h。所有入組對(duì)象根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組和治療組，每組80例，本研究無死亡及失訪病例。

入選標(biāo)準(zhǔn)：均符合中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南的診斷標(biāo)準(zhǔn)（2014版）；年齡≤80歲，到院時(shí)間于發(fā)病48 h內(nèi)；入院前未曾接受過營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)、清除自由基治療；患者及家屬配合研究，自愿簽署書面知情同意書，并上報(bào)醫(yī)院倫理管理委員會(huì)同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：病前任何原因?qū)е碌纳畈荒茏岳恚邪V呆、記憶障礙、昏迷等無法合作者；合并有嚴(yán)重肝、腎功能損害、心功能不全或血液系統(tǒng)疾?。活^部CT及核磁確診為腦出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血及顱內(nèi)占位性病變等。

1.2 研究方法

搜集所有入組研究者的一般資料，包括年齡、性別、血脂、血糖、尿酸、基線NIHSS評(píng)分等。入院第1天及第14天時(shí)的總抗氧化能力（TAC）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平。血脂、血糖、尿酸等的測(cè)定應(yīng)用日立7600全自動(dòng)生動(dòng)生化分析儀（株式會(huì)社日立高新技術(shù)）于抽血當(dāng)日進(jìn)行。TAC、SOD、MDA應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定（試劑均購(gòu)于南京建成生物有限公司）。血清標(biāo)本收集方法為留取空腹肘靜脈血3 ml，3 000 r/min離心，留血清1.5 ml冷凍保存于-80℃冰箱，待標(biāo)本收集完成后統(tǒng)一測(cè)定。所有數(shù)據(jù)的測(cè)量均由經(jīng)過培訓(xùn)的高年資醫(yī)師完成。

實(shí)驗(yàn)組予以普羅布考1.0 g/d 2次/d聯(lián)合阿托伐他汀鈣片20 mg每晚1次治療，對(duì)照組應(yīng)用阿托伐他汀鈣片20 mg每晚1次治療。兩組患者入院后均予以基礎(chǔ)治療：阿司匹林和氯吡格雷抗血小板聚集、依達(dá)拉奉清除自由基、中成藥血栓通改善循環(huán)和腦苷肌肽營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)等治療，同時(shí)根據(jù)患者病情，針對(duì)性地應(yīng)用穩(wěn)定血壓或控制血糖等藥物。

1.3 神經(jīng)功能評(píng)定

入院過程中每天對(duì)患者的神經(jīng)功能情況進(jìn)行NIHSS評(píng)分，認(rèn)為NIHSS評(píng)分增加2分及以上為腦梗死進(jìn)展。發(fā)病第90天時(shí)進(jìn)行臨床預(yù)后的評(píng)價(jià)，應(yīng)用改良 Rankin 量表（modified Rankin Scale，mRS）進(jìn)行判定，結(jié)果共分為轉(zhuǎn)歸不良組及轉(zhuǎn)歸良好組，定義mRS<2分為轉(zhuǎn)歸良好，mRS≥2分為轉(zhuǎn)歸不良。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組間均數(shù)的比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)和百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料的比較

實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組間一般資料（年齡、性別構(gòu)成、基線 NIHSS 評(píng)分、血尿酸、TAC、SOD、MDA、血糖、血脂水平等）均衡可比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.2 兩組病情進(jìn)展的比較

兩組間發(fā)病初期卒中的進(jìn)展情況比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。實(shí)驗(yàn)組患者病情進(jìn)展率低于對(duì)照組。見表1。

2.3 兩組氧化應(yīng)激、尿酸水平的比較

比較實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組第14天時(shí)尿酸、TAC、SOD、MDA 水平及尿酸、TAC、SOD、MDA 變化的關(guān)系，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），第14天時(shí)實(shí)驗(yàn)組尿酸及MDA水平低于對(duì)照組，TAC及SOD水平高于對(duì)照組。比較兩組間尿酸、SOD、TAC及MDA的變化情況，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），尿酸及MDA水平降低，TAC及SOD升高。見表2、3。

表1 兩組間病情進(jìn)展的比較 [n=80，例（%）]

表2 第14天時(shí)兩組氧化應(yīng)激、尿酸水平的比較 （n=80，±s）

表2 第14天時(shí)兩組氧化應(yīng)激、尿酸水平的比較 （n=80，±s）

組別尿酸/（μmol/L）TAC/（u/ml）SOD/（u/ml）MDA/（μmol/L）實(shí)驗(yàn)組 212.487±59.103 4.572±1.091 20.980±5.012 3.729±0.130對(duì)照組 239.221±63.208 3.314±1.536 16.103±3.884 3.969±0.352 t值 -2.218 3.429 4.686 -6.016 P值 0.028 0.001 0.000 0.000

表3 兩組間氧化應(yīng)激、尿酸變化的比較 （n=80，±s）

表3 兩組間氧化應(yīng)激、尿酸變化的比較 （n=80，±s）

組別尿酸/（μmol/L）TAC/（u/ml）SOD/（u/ml）MDA/（μmol/L）實(shí)驗(yàn)組 82.672±7.431 -0.618±0.181 -2.961±0.533 0.081±0.021對(duì)照組 46.383±11.717 1.322±0.359 3.209±0.927 -0.100±0.032 t值 2.612 -3.843 -4.926 3.298 P值 0.010 0.000 0.000 0.001

2.4 兩組間臨床預(yù)后的比較

通過比較發(fā)病第90天時(shí)兩組間的mRS評(píng)分，評(píng)估其臨床療效，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。實(shí)驗(yàn)組患者預(yù)后良好率優(yōu)于對(duì)照組。見表4。

表4 臨床預(yù)后的比較 [n=80，例（%）]

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組患者進(jìn)展率較對(duì)照組降低，而且臨床預(yù)后優(yōu)于對(duì)照組，這可能與普羅布考的抗氧化應(yīng)激作用有關(guān)。通過分析兩組氧化應(yīng)激的水平發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組氧化應(yīng)激水平較低，有較高的SOD、TAC水平，以及較低的MDA及尿酸水平。

普羅布考是人工合成的抗氧化劑，是目前為止FDA唯一認(rèn)證的抗氧化藥物[1]。普羅布考作為目前臨床常用的降脂藥物，具有降低體內(nèi)膽固醇水平、穩(wěn)定斑塊、抗動(dòng)脈粥樣硬化等作用被研究者所熟知，但是其氧化作用研究尚少[2-4]。目前其抗氧化應(yīng)激作用主要被用于抑制低密度脂蛋白的氧化，其對(duì)體內(nèi)總體抗氧化能力及脂質(zhì)過氧化水平的研究尚少。本研究發(fā)現(xiàn)普羅布考聯(lián)合阿托伐他汀較單獨(dú)阿托伐他汀有較強(qiáng)的抗氧化應(yīng)激能力，可以提高體內(nèi)SOD的水平，提高機(jī)體TAC，降低體內(nèi)脂質(zhì)過氧化物質(zhì)水平，改善患者的臨床預(yù)后。

普羅布考的抗氧化作用主要來自于斷鏈抗氧化和氧離子捕捉的特性。因?yàn)槠樟_布考分子內(nèi)所含的酚羥基很容易被氧化而發(fā)生斷鏈，捕捉氧離子并與之結(jié)合后形成穩(wěn)定的酚氧基，從而有效降低血漿氧自由基濃度[5]；還可以抑制尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷酸的氧化活性，起到內(nèi)源性的抗氧化作用[6]。有研究發(fā)現(xiàn)，普羅布考能夠抑制巨噬細(xì)胞脂質(zhì)氧化，使由巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的低密度脂蛋白氧化率降低，同時(shí)還可以抑制MDA的生成[7]。普羅布考可以清除氧自由基，抑制脂質(zhì)過氧化作用，阻斷白細(xì)胞介素1的基因表達(dá)，從而抑制平滑肌細(xì)胞的增殖，有明顯的抗氧化損傷作用[8]。不僅如此，普羅布考可以上調(diào)血紅素加氧酶的表達(dá)，降低活性氧的生長(zhǎng)，保護(hù)細(xì)胞的線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)[9]。因此，普羅布考具有明顯的抗氧化應(yīng)激作用。

當(dāng)缺血性腦卒中發(fā)生后，腦組織缺血缺氧，神經(jīng)組織內(nèi)含氧量減少，電子大量堆積。當(dāng)缺血區(qū)神經(jīng)組織有氧供應(yīng)時(shí)，氧接受堆積的電子生成氧自由基，使氧自由基在短時(shí)間內(nèi)爆發(fā)性增多，進(jìn)而激發(fā)一系列的氧化級(jí)聯(lián)反應(yīng)[10]，這就是所謂的氧化應(yīng)激。缺血區(qū)域及周圍組織（包括缺血半暗帶）自由基產(chǎn)生過多，抗氧化物質(zhì)含量不足，抗氧化能力降低，則可引起氧化應(yīng)激損傷。

大量的自由基及活性氧可以攻擊細(xì)胞中的線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核酸等關(guān)鍵結(jié)構(gòu)，加速細(xì)胞死亡。例如，缺血性腦卒中發(fā)生后，線粒體處于缺氧狀態(tài)，活性氧促使線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔開放，導(dǎo)致線粒體功能障礙，加速細(xì)胞凋亡及壞死[11-12]。氧化應(yīng)激還抑制缺血區(qū)Ⅲ級(jí)側(cè)支循環(huán)的形成，抑制新生血管的形成，導(dǎo)致?lián)p傷加重[13]。缺血性腦卒中發(fā)生后，腦組織缺氧導(dǎo)致能量不足，谷氨酸大量釋放到細(xì)胞外，在N-甲基-D-天冬氨酸受體的作用下，Ca2+大量進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，使神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生Ca2+超載[14]。Ca2+大量進(jìn)入細(xì)胞后又會(huì)導(dǎo)致NOX（NADPH氧化酶）表達(dá)上調(diào)，它可以在缺血性腦卒中發(fā)生后產(chǎn)生大量自由基，進(jìn)一步加重氧化應(yīng)激損傷，破壞血腦屏障，促進(jìn)神經(jīng)元凋亡,NOX基因敲除小鼠在腦缺血再灌注后的神經(jīng)功能缺損和死亡率減輕和降低[15-17]。因此可以首先降低缺血半暗帶區(qū)腦組織的氧化應(yīng)激程度，從而進(jìn)一步減少神經(jīng)組織的損傷，及時(shí)保護(hù)神經(jīng)功能。MANZANERO等[18]也提出降低缺血腦組織的氧化應(yīng)激的水平，可以保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)及其功能，這可能為缺血性腦卒中的治療提供新的途徑。正因?yàn)榇?，普羅布考的抗氧化應(yīng)激作用可以更好地應(yīng)用于缺血性腦卒中的治療。

在氧化應(yīng)激的整個(gè)反應(yīng)過程中，主要病理反應(yīng)是自由基生成增多,其機(jī)制包括黃嘌呤氧化酶形成增多，黃嘌呤氧化酶催化次黃嘌呤轉(zhuǎn)換為黃嘌呤，又將黃嘌呤催化為尿酸，當(dāng)神經(jīng)組織發(fā)生氧化應(yīng)激時(shí)，該過程不僅產(chǎn)生大量的自由基，還可以產(chǎn)生大量的尿酸。普羅布考的抗氧化應(yīng)激作用可以通過保護(hù)線粒體，減少氧化應(yīng)激作用中尿酸的生成，也就是本研究中實(shí)驗(yàn)組尿酸水平低于對(duì)照組。

由于氧化應(yīng)激對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)等的破壞，嚴(yán)重影響缺血性卒中患者神經(jīng)功能的恢復(fù)，而普羅布考可以降低組織的氧化應(yīng)激水平，進(jìn)一步改善患者的神經(jīng)功能，改善患者的預(yù)后，減輕社會(huì)和家庭的負(fù)擔(dān)。

[1]YOKOYAMA T,MIYAUCHI K,KURATA T.et al．Effect of probucol on neointimal thickening in a stent porcine restenosis model[J].Jpn Heart J,2004,45(2):305-313.

[2]IQBAL M,OKAZAKI Y,OKADA S.Probucol modulates iron nitrilotriacetate(Fe-NTA)-dependent renal carcinogenesis and hyperproliferative response:diminution of oxidative stress[J].Mol Cell Biochem,2007,304(1/2):61-69.

[3]YOSHIKAWA T,MITANI K,KOTOSAI K,et a1.Antiatherogenic effects of cilostazol and probucol alone，and in combination in low density lipoprotein receptor-deficient mice fed with a high fat diet[J].Horm Metab Res,2008,40(7):473-478.

[4]TANOUS D,HIME N,STOCKER R.Anti-atherosclerotic and anti-diabetic properties of probucol and related compounds[J].Redox Rep,2008,13(2):48-59.

[5]AARNISALO A A,AALRO-SERALA K,HOLRHOFER H,et al.Puromycin-induced lipid per Oxidation in the cochlea of ApoE knockout mice[J].Acta Otolaryngol Suppl,2000,543:102-104.

[6]SINGLA D K,KAUR K,SHARMA A K,et al.Probucol promotes endogenous antioxidant reserve and confers protection against reperfusion injury[J].Can J Physiol Pharmacol.2007,85(3/4):439-443.

[7]UMEJI K,UMEMOTO S,ITOH S,et a1.Comparative effects of pitavastatin and probucol on oxidative stress,Cu/Zn superoxide dismutase,PPAR-gamma,and aortic stiffness in hypercholesterolemia[J].Am J Physiol Heart Circ Physiol,2006,291(5):2522-2532.

[8]KIM J H,PARK S H,BAE S S,et al.Combinatorial effect of probucol and cilostazol in focal ischemic mice with hypercholesterolemia[J].J Pharmacol Exp Ther,2011,338(2):451-457.

[9]CHEN Y Q,PANDIRI I,JOE Y,et al.Synergistic effects of cilostazol and probucol on ER stress-induced hepatic steatosis via heme oxygenase-1-dependent activation of mitochondrial biogenesis[J].Oxid Med Cell Longev,2016,DOI:1155-2016-3949813.

[10]WARING W S,WEBB D J,MAXWELL S R.Systemic uric acid administration increases serum antioxidantcapacity in healthy volunteers[J].J Cardiovasc Pharmacol,2001,38(3):365-371.

[11]GOURIOU Y,DEMAUREX N,BIJLENGA P,et al.Mitochondrial calcium handling during ischemia-induced cell death in neurons.Biochimie,2011,93(12),2060-2067.

[12]ZHANG X,WU B,NIE K,et al.Effects of acupuncture on declined cerebral blood flow,impaired mitochondrial respiratory function and oxidative stress in multi-infarct dementia rats[J].Neurochem Int,2014,65:23-29.

[13]BROUGHTON B R,REUTENS D C,SOBEY C G.Apoptotic mechanisms after cerebral ischemia[J].Stroke,2009,40(5):331-339.

[14]KLEINSCHNITZ C,GRUND H,WINGLER K,et al.Post-stroke inhibition of induced NADPH oxidase type 4 prevents oxidative stress and neurodegeneration[J].PLos Biol,2010,8(9):e1000479.

[15]BRETON R R,RODRIGUEZ J C G.Excitotoxicity and oxidative stress in acute ischemic stroke//Rodriguez JCG.Acute Ischemic Stroke[J].Croatia:In Tech,2012:29-58.

[16]RADAK D,RESANOVIC I,ISENOVIC ER,et al.Link between oxidative stress and acute brain ischemic[J].Angiology,2014,65(8):667-676.

[17]SUQAWARA T,LEWEN A,GASCHE Y,et al.Overexpression of SOD1 protects vulnerable motor neurons after spinal cord injury by attenuating mitochondrialcytochrome c release[J].FASEB J,2002,16(14):1997-1999.

[18]MANZANERO S,SANTRO T,ARUMUQAM TV.Neuronal oxidative stress in acute ischemic stroke:Sources and contribution to cell injury[J].Neurochem Int,2013,62(5):712-718.

（張蕾 編輯）

Effect of Probucol on oxidative stress level,uric acid and clinical prognosis in patients with cerebral infarction*

Pei Wang,Dan-dan Lu,Jing Wang,Wei Zhang,Shu-yan Wei,Li Wan,Xuan Li
(Department of Neurology,Baoding No.1 Central Hospital,Baoding,Hebei 071000,China)

Objective To study the effect of Probucol on serum uric acid,oxidative stress level and prognosis in patients with ischemic stroke.Methods One hundred and sixty patients with ischemic stroke were randomly divided into experimental group and control group.On the basis of basic treatment,the experimental group was treated with Atorvastatin and Probucol,the control group was treated with Atorvastatin only.Superoxide dismutase(SOD),total antioxidant capacity(TAC),malondialdehyde(MDA)and uric acid(UA)levels were measured in patients with ischemic stroke on the 1st day and the 14th day respectively.The neurological function was evaluated with the modified Rankin Scale on the 90th day.The correlations ofProbucol with oxidative stress level,uric acid and clinical prognosis were analyzed.Results The rate of progressive stroke in the experimental group was significantly lower than that in the control group(P<0.05).The neurological function of the experimental group was significantly better than that in the control group on the 90th day(P<0.05).By comparing the levels of oxidative stress between the two groups,it was found that Probucol significantly decreased the levels of oxidative stress and uric acid,and improved the neurological function in the patients with cerebral infarction(P<0.05).Conclusions Probucol can improve the prognosis of the patients with cerebral infarction by reducing the levels of oxidative stress and uric acid.

Probucol;ischemic stroke;oxidative stress;uric acid

R743

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2017.25.010

1005-8982（2017）25-0049-04

2016-11-07

河北省保定市科技局技術(shù)支撐項(xiàng)目（No：zf15015）