莫興虎 廖 飛* 楊銘瓊 李庭章 趙孝木 楊先富 黃功明

（1.貴州省黔東南州動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州凱里 556000；2.貴州省臺(tái)江縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州臺(tái)江 556300）

一例雞H5亞型禽流感感染的診斷報(bào)告

莫興虎1廖 飛1*楊銘瓊2李庭章2趙孝木1楊先富1黃功明2

（1.貴州省黔東南州動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州凱里 556000；2.貴州省臺(tái)江縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州臺(tái)江 556300）

2017年3月，某雞養(yǎng)殖場有35%左右的雞出現(xiàn)采食量下降，發(fā)病雞拉白痢，有神經(jīng)癥狀，死亡雞呈劈叉狀、死亡率達(dá)70%左右。通過臨床病理變化、涂片鏡檢和實(shí)驗(yàn)室實(shí)時(shí)熒光定量RTPCR檢測，結(jié)合臨床癥狀及流行病學(xué)判定為H5型禽流感感染。

雞；H5亞型禽流感；熒光定量RT-PCR

禽流行性感冒（簡稱禽流感，Avian influenza，AI）被國際獸疫局定為A類傳染病，同時(shí)被列入國際生物武器公約動(dòng)物類傳染病名單，是由A型流感病毒引起的禽類的烈性傳染病，可表現(xiàn)為亞臨診到輕度的呼吸系統(tǒng)疾病、產(chǎn)蛋下降到急性致死性疾病等多種形式。禽流感病毒不僅會(huì)給養(yǎng)禽業(yè)、畜牧業(yè)帶來了災(zāi)難性的破壞，而且對公共健康也構(gòu)成了嚴(yán)重威脅，現(xiàn)將某雞場一例雞H5亞型禽流感的診斷情況報(bào)道如下，供參考。

1 流行病學(xué)調(diào)查

該養(yǎng)殖場存欄禽6000只，在每年春秋兩季進(jìn)行禽流感、新城疫等重大動(dòng)物疫病進(jìn)行免疫接種。2016年12月到2017年春節(jié)前銷售部分，到2017年3月21日該場存欄剩余2800多只，包括28只鴨，13只鵝，2017年3月19日家禽開始發(fā)病，死亡2至3只，到3月底到4月初，發(fā)病死數(shù)量劇增，至2017年4月5日已死亡1000只雞，鴨5只，鵝無死亡。用抗生素治療未見效果，并且有蔓延趨勢。

2 臨床癥狀

病雞精神萎靡，消瘦，嚴(yán)重脫水，羽毛蓬松，體溫升高，頭頸腫大，眼結(jié)膜發(fā)炎，甚至失明；頭頸歪斜，站立不穩(wěn)，排白色糞便或水便，甚至出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，死亡呈劈叉狀。

3 臨床病理變化

現(xiàn)場對4只病雞解剖，剖解雞肝呈土黃色和深褐色，每只病雞腦膜出血嚴(yán)重，小腸和盲腸嚴(yán)重充血，腺胃乳頭出血嚴(yán)重，氣管充血。（見圖2）。

圖1 病理變化

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

4.1 細(xì)菌學(xué)檢測

無菌采集的病料進(jìn)涂片染色觀察。采用革蘭氏染色方法染色，結(jié)果未觀察到細(xì)菌。將無菌采取的心、肝、脾、肺、血液及淋巴結(jié)等病料在肉湯培養(yǎng)基接種。于37℃恒溫箱內(nèi)有氧培養(yǎng)20h左右，結(jié)果均未觀察到細(xì)菌生長。

4.2 病毒檢測

采集4只病死雞的肺臟，處理后采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法進(jìn)行H5亞型禽流感檢測，檢測試劑盒購于北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司。檢測結(jié)果見圖2。檢測結(jié)果為：從圖2可以看出陽性對照組和樣品組都出現(xiàn)特異擴(kuò)增曲線，陰性對照組沒有出現(xiàn)特異擴(kuò)增曲線，并且全部樣品的Ct值都小于等于30，則表明所有樣品H5亞型禽流感呈陽性。

圖2 特異擴(kuò)增曲線

5 小結(jié)與體會(huì)

根據(jù)病因調(diào)查、臨床癥狀、剖檢病理變化及實(shí)驗(yàn)室診斷，確診病雞為H5亞型禽流感感染。該場在每年春秋兩季進(jìn)行禽流感、新城疫等重大動(dòng)物疫病進(jìn)行免疫接種，但也發(fā)生大批量的死亡現(xiàn)象，可能的原因有疫苗的保存使用不當(dāng)、多種病一起免疫相互影響及飼養(yǎng)管理不到位等。因此做好疫苗的運(yùn)輸、保存、使用和制訂適宜的免疫程序是防控傳染病最有效的方法，并且要定期對免疫抗體進(jìn)行監(jiān)測，以確保免疫防控效果。目前，禽流感的防控工作已引起國家的高度重視，出臺(tái)了相關(guān)防治計(jì)劃，如《國家中長期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012-2020年）》《國家高致病性禽流感防治計(jì)劃（2016-2020年）》，加強(qiáng)對禽流感的凈化是當(dāng)前的首要任務(wù)，為更加深入研究禽流感提供了很好的機(jī)遇。H5亞型禽流感仍是當(dāng)前危害禽類的主要疫病之一，應(yīng)嚴(yán)格認(rèn)真地做好H5亞型禽流感疫苗的免疫，絕不能掉以輕心，特別是在禽流感的高發(fā)季節(jié)更要加強(qiáng)H5禽流感疫苗的免疫接種和抗體監(jiān)測。

[1] 于康震，崔尚金，付朝陽.禽流感與養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展和人類健康[J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2000，22（4）：312-315.

[2] 曹軍平，趙國，顧敏，等.實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法檢測禽流感病毒[J].中國獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2010，（30）：47-50.

[3] 廖飛，趙孝木，楊先富，等.一例鵝H5亞型禽流感感染的診斷報(bào)告[J].中國獸醫(yī)雜志，2016，（6）：114.