李桂云　黃忠寶　卞伯偉　胡麗

【摘要】 目的：探討血必凈聯(lián)合鹽酸氨溴索對(duì)百草枯中毒的大鼠急性肺損傷氧化應(yīng)激的調(diào)節(jié)作用。方法：選擇50只健康成年SD大鼠為研究對(duì)象，將其隨機(jī)分為五組，空白對(duì)照組（A組）、單純百草枯中毒組（B組）、血必凈治療組（C組）、鹽酸氨溴索治療組（D組）、聯(lián)合治療組（E組），每組10只，A組腹腔注射生理鹽水25 mg/kg，其余四組采用腹腔注射20%百草枯溶液25 mg/kg誘導(dǎo)大鼠急性百草枯中毒模型，并給予C組、D組、E組大鼠相應(yīng)治療；檢測(cè)比較各組大鼠肺組織中丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性變化。結(jié)果：W/D比值、SOD活性及MDA、GSH水平組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。兩兩比較后發(fā)現(xiàn)C組、D組、E組W/D比值較B組明顯下降，與A組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），E組W/D比C組、D組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；C組、D組、E組SOD活性較A組明顯低，顯著高于B組（P<0.05），E組SOD活性比D組高（P<0.05），與C組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；C組、D組、E組MDA水平均比B組低，GSH水平均高于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），與A組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），C組、D組、E組間兩兩比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：血必凈與鹽酸氨溴索均能降低百草枯中毒導(dǎo)致急性肺損傷大鼠體內(nèi)的氧化應(yīng)激反應(yīng)，聯(lián)合使用具有明確的療效，可能存在協(xié)同作用，能為臨床治療提供一定參考。

【關(guān)鍵詞】 血必凈； 鹽酸氨溴索； 百草枯； 急性肺損傷； 氧化應(yīng)激

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.20.079 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805（2017）20-0155-02

百草枯是一種有機(jī)雜環(huán)類接觸性除草劑，具有極強(qiáng)的毒性，可通過多種途徑侵入機(jī)體引起中毒，對(duì)人體組織造成損傷，導(dǎo)致肺纖維化、肝壞死、心腎衰竭等，死亡率極高[1-2]，是除了有機(jī)磷中毒外最常見的農(nóng)藥中毒類型。目前關(guān)于百草枯中毒機(jī)制不明確，可能包括自由基損傷、炎癥介質(zhì)作用等方面。血必凈是主要成分為紅花黃色素A的中成藥，具有清除氧自由基、降低內(nèi)毒素、調(diào)節(jié)免疫的作用[3]；近期研究發(fā)現(xiàn)，鹽酸氨溴索對(duì)百草枯中毒大鼠肺損傷具有保護(hù)作用，而兩種藥物聯(lián)合應(yīng)用對(duì)百草枯中毒大鼠急性肺損傷是否有協(xié)同保護(hù)作用的研究在國(guó)內(nèi)尚屬空白[4-5]。為此，本次研究通過建立大鼠百草枯中毒肺損傷模型，比較相關(guān)指標(biāo)變化，初步探討了血必凈聯(lián)合氨溴索對(duì)百草枯中毒所致大鼠急性肺損傷的作用，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：50只健康成年的SPF級(jí)雄性SD大鼠。

藥品：百草枯溶液（20%），生產(chǎn)公司：山東三元工貿(mào)有限公司；血必凈，生產(chǎn)公司：天津紅日藥業(yè)股份有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字Z20040033；AH，生產(chǎn)公司：浙江康恩貝制藥股份有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H20123225。

儀器與試劑：臺(tái)式高速離心機(jī)；超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）測(cè)定試劑盒；紫外可見分光光度計(jì)等。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

將選取的50只大鼠隨機(jī)分為五組：空白對(duì)照組（A組）、單純百草枯中毒組（B組）、血必凈治療組（C組）、鹽酸氨溴索治療組（D組），聯(lián)合治療組（E組），每組10只。A組大鼠腹腔注射生理鹽水25 mg/kg，其余四組采用一次性腹腔注射20%百草枯溶液25 mg/kg，誘導(dǎo)大鼠急性百草枯中毒模型。造模后，B組大鼠僅腹腔注射生理鹽水10 ml/kg；C組大鼠腹腔注射血必凈注射液10 ml/kg；D組大鼠腹腔注射鹽酸氨溴索注射液10 ml/kg；

E組大鼠腹腔注射鹽酸氨溴索注射液10 ml/kg和血必凈注射液10 ml/kg。五組大鼠于相同環(huán)境下，以相同飼料喂養(yǎng)，連續(xù)給藥培養(yǎng)7 d后行各項(xiàng)檢查。

1.3 檢測(cè)方法

取大鼠右肺上葉，置于子天平上稱重，記為濕重，再移至70 ℃電熱恒溫干燥箱中干燥至恒重，后再次置于子天平上稱重，記為干重，肺組織濕重/干重比（W/D）值=濕重/干重。

取大鼠左肺，組織研磨成勻漿后，置于離心機(jī)內(nèi)，以3000 r/min轉(zhuǎn)速離心10 min后，取上清液，測(cè)定SOD、MDA和GSH水平，嚴(yán)格按照試劑盒規(guī)定比色測(cè)定吸光度，計(jì)算MDA、GSH濃度及SOD活性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本次研究均由SPSS 17.0軟件包處理分析數(shù)據(jù)資料，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用方差分析和SNK-q檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

五組大鼠W/D比值、SOD活性及MDA、GSH水平組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。兩兩比較后發(fā)現(xiàn)C組、D組、E組W/D比值較B組明顯低，與A組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），E組W/D比C組、D組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；C組、D組、E組SOD活性較A組明顯低，顯著高于B組（P<0.05），E組SOD活性比D組高（P<0.05），與C組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；C組、D組、E組MDA水平均比B組低，GSH水平均高于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），與A組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），C組、D組、E組間兩兩比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）

3 討論

百草枯中毒累及多個(gè)臟器，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致多器官功能不全，其中肺是主要靶器官，早期表現(xiàn)為急性肺損傷，其中毒機(jī)制目前尚未完全明確，可能與自由基氧化損傷、炎癥反應(yīng)及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡有關(guān)[6-7]。由于百草枯中毒發(fā)病機(jī)制不清，導(dǎo)致其臨床治療難度較大，尚無(wú)特效治療方案，洗胃、催吐等基礎(chǔ)治療及血液凈化是目前提高救治成功率的有效措施[8]，但臨床效果并不理想，患者死亡率依然居高不下。endprint

急性肺損傷的出現(xiàn)使患者呼吸系統(tǒng)出現(xiàn)障礙，同時(shí)可能促進(jìn)其他器官的損傷，導(dǎo)致患者最終死于臟器功能衰竭或呼吸衰竭。因此，及時(shí)有效地改善百草枯中毒患者早期急性肺損傷癥狀對(duì)提高患者生存率及搶救成功后的生存質(zhì)量均具有重要意義。本次研究以百草枯誘導(dǎo)引發(fā)急性肺損傷的大鼠模型為研究對(duì)象，對(duì)血必凈與鹽酸氨溴索的作用展開觀察。

本次研究結(jié)果顯示，分別給予百草枯中毒大鼠血必凈與鹽酸氨溴索單藥或聯(lián)合治療，統(tǒng)計(jì)分析后發(fā)現(xiàn)五組大鼠W/D比值、SOD活性及MDA、GSH水平組間差異幼統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。兩兩比較后可得出C組、D組、E組W/D比值較B組明顯低，與A組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），E組W/D比C組、D組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），這說明血必凈與鹽酸氨溴索單藥或聯(lián)合治療對(duì)于改善W/D均有良好效果，能促進(jìn)肺間質(zhì)及肺泡血管通透性改變，但是聯(lián)合用藥比單獨(dú)用藥療效更為理想；C組、D組、E組SOD活性較A組明顯低，顯著高于B組（P<0.05），E組SOD活性比D組高（P<0.05），與C組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），這體現(xiàn)了血必凈與鹽酸氨溴索單藥或聯(lián)合治療均能提高SOD活性，間接幫助機(jī)體清除多余自由基，降低氧化應(yīng)激損害；結(jié)果表明，單獨(dú)應(yīng)用鹽酸氨溴索效果比單獨(dú)應(yīng)用血必凈理想，但是兩藥聯(lián)合作用療效最佳；C組、D組、E組MDA水平均比B組低，GSH水平均高于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），與A組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），C組、D組、E組間兩兩比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），這說明血必凈與鹽酸氨溴索單藥或聯(lián)合治療對(duì)于改善患者體內(nèi)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)有一定效果，但三種治療方法的改善效果差異不顯著。

綜上所述，血必凈與鹽酸氨溴索均能降低百草枯中毒導(dǎo)致急性肺損傷大鼠體內(nèi)的氧化應(yīng)激反應(yīng)，聯(lián)合使用具有明確的療效，可能存在協(xié)同作用，能為臨床治療提供一定參考；但目前缺乏對(duì)人體作用的臨床研究，投入使用仍待進(jìn)行深入、大樣本量的研究。

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（收稿日期：2017-03-16）endprint