張雅莉 姚蓓 趙曉華

2種血液保存液對(duì)新鮮冰凍血漿Ⅷ因子含量影響分析

張雅莉 姚蓓 趙曉華

目的 探討采用CPDA、ACD-B血液保存液的全血分離制備的新鮮冰凍血漿（FFP）中Ⅷ含量的差異并分析其相關(guān)因素。方法 隨機(jī)抽取用CPDA（A組）、ACD-B（B組）保存的標(biāo)量400 ml全血所分離制備的FFP各48份，測定FⅧ含量，比較2組FⅧ均值及合格率。結(jié)果 2組FⅧ含量的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），B組較A組FⅧ達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)數(shù)量的合格率明顯下降。結(jié)論 ACD-B組FⅧ含量達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)數(shù)量的下降與保存液容量增多所致稀釋性濃度下降、實(shí)際采血量等因素有關(guān)。

血液保養(yǎng)液 血液容量 Ⅷ因子

新鮮冰凍血漿（FFP）是采集后儲(chǔ)存于冷藏環(huán)境中的全血，最好在6 h（保養(yǎng)液為ACD）或8 h（保養(yǎng)液為CPD或CPDA-1）內(nèi)，但不超過18 h，將血漿分離出并速凍成固態(tài)的成分血[1]，其主要用途是補(bǔ)充凝血因子。FⅧ含量檢測是FFP質(zhì)量控制的重要指標(biāo)，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求≥0.7 IU/ml，但是未標(biāo)注血液保存液的種類，每100 ml血液兩種配方保養(yǎng)液的添加量分別是14 ml（CPD）和25 ml（ACD）。為了解不同配方血液保養(yǎng)液對(duì)FFP融化后Ⅷ含量的影響，現(xiàn)對(duì)本中心2013年（CPDA）和2015年（ACD-B）質(zhì)管科抽檢的96份FFP中Ⅷ含量進(jìn)行回顧性分析，報(bào)道如下。

材料與方法

1 材料 96份FFP均為本中心采集的400 ml標(biāo)量全血，均未經(jīng)過白細(xì)胞過濾，且嚴(yán)格按成分血質(zhì)量要求制備。采集順利、冷鏈監(jiān)測正常、離心參數(shù)（4 100 g，加速9，減速6，4℃，12 min），全自動(dòng)成分分離機(jī)制備200 ml血漿，速凍機(jī)（預(yù)溫–50℃）在1 h內(nèi)冰凍成固態(tài)，于–25℃以下冰柜保存。A組和B組從采集到制備成FFP經(jīng)電腦控制時(shí)間均在6～8 h之內(nèi)。

2 儀器及試劑 大容量冷凍離心機(jī)（德國 CRYOFUGE 6000i），全自動(dòng)血液成分分離機(jī)（德國SEPAMATIC-SL（Ⅲ）），速凍機(jī)（盧森堡DOMETIC），–25℃以下冰柜（海爾）。

3 標(biāo)本檢測 根據(jù)試劑盒操作說明測定FⅧ含量。以凝固法（一步法）測定標(biāo)本FⅧ活性，每批檢測同時(shí)進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控品監(jiān)控，質(zhì)控結(jié)果均在控，檢測樣品每毫升所含 FⅧ活性情況。

4 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) GB18469-2012《全血及成分血質(zhì)量要求》[1]：新鮮冷凍血漿Ⅷ因子含量≥0.7 IU/ml 。《血站技術(shù)操作規(guī)程》（2012版）6.1.6要求：“如果有75%的抽檢結(jié)果落在質(zhì)量控制指標(biāo)范圍內(nèi)，可認(rèn)為血液采集和制備過程受控”。

結(jié) 果

2種血液保養(yǎng)液對(duì)FFP 中FⅧ含量及合格率的影響見表1，2種血液保養(yǎng)液對(duì)全血容量的稀釋對(duì)比見表2。

表1 2種血液保養(yǎng)液對(duì)FFP 中FⅧ含量及合格率的影響

表2 2種血液保養(yǎng)液對(duì)全血容量的稀釋對(duì)比

討 論

Ⅷ因子是不穩(wěn)定的凝血因子，體外半衰期較短，多為8～12 h。血液離體后，血漿凝血因子接觸異物表面會(huì)有不同程度的激活從而失去活性。易受到各種因素影響：如獻(xiàn)血者個(gè)體差異、采集是否順利、保養(yǎng)液與血液混勻的時(shí)間及混勻度、血量與保養(yǎng)液的比例、冷鏈溫度控制、冷凍速率、采集到制備成冰凍血漿的總時(shí)間等。目前，采集、運(yùn)輸、保存、制備時(shí)間、冷鏈等因素對(duì)FⅧ因子的影響研究較多。有研究發(fā)現(xiàn)，400 ml全血采集時(shí)間大于13 min，所采集的全血不可用于制備FFP[2]；也有研究發(fā)現(xiàn)，15℃左右和37℃保存的血液，在6～10 h制備FFP中FⅧ因子隨溫度升高和保存時(shí)間延長，其活性下降速度顯著[3]。從表1可見，2組FⅧ均值的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但ACD-B配方血漿中FⅧ合格率明顯下降。分析原因有以下幾點(diǎn)：①血液保存液容量。根據(jù)GB18469-2012《全血及成分血質(zhì)量要求》，新鮮冰凍血漿中FⅧ含量要求≥0.7 IU/ml，以400 ml全血為例，CPDA保存液容量56 ml，ACD-B保存液容量100 ml，同樣的全血使用ACD-B保存液，必然會(huì)導(dǎo)致稀釋性濃度下降，從而使FⅧ濃度降低。文獻(xiàn)報(bào)道指出[4]，采集HCT為42%的200 ml全血，若使用CPDA保養(yǎng)液，其原始因子濃度相比ACD-B保養(yǎng)液高出15%。若CPDA保養(yǎng)液全血制備的FFP中FⅧ含量是0.7 IU/ml，那么等容量ACD-B方的FFP中FⅧ含量是0.595 IU/ml，即為不合格。②實(shí)際采血量。 根據(jù)GB18469-2012《全血及成分血質(zhì)量要求》，標(biāo)示量±10%均為容量合格的全血。以400 ml標(biāo)示量為例，容量在360～440 ml均為合格全血。為了解我血液中心每份400 ml全血的實(shí)際采血量，隨機(jī)抽取2種配方血液保養(yǎng)液的全血各81袋，標(biāo)示量均為400 ml，稱重后求平均值，再根據(jù)公式[2]：血液容量=（毛重（g）–血袋重（g）–保養(yǎng)液重（g））/全血比重1.045 （g/ml），計(jì)算出實(shí)際平均采血量，ACD-B約為377 ml，CPDA約為393 ml。根據(jù)合格率≥75%的要求，計(jì)算出25%的平均實(shí)際采血量ACD-B約為364 ml，CPDA約為366 ml。以采集HCT為42%的400 ml全血為例，若以CPDA保養(yǎng)液全血制備的FFP中FⅧ含量是0.7 IU/ml，那么等容量ACD-B方的FFP中FⅧ含量是0.595 IU/ml，再換算到表2（ACD-B方）實(shí)際采血量364 ml，血量與總?cè)萘康陌俜直认陆盗?.3%，F(xiàn)Ⅷ含量從0.7降到0.540 IU/ml。因此，不合格機(jī)率就增大了。③制備成FFP的時(shí)間。GB 18469-2012《全血及成分血質(zhì)量要求》新鮮冰凍血漿的術(shù)語定義中，從采血到冰凍成固態(tài)的時(shí)間ACD配方最好6 h，最長不超過18 h。電腦設(shè)置時(shí)間都是8 h，理論上講時(shí)間對(duì)ACD配方FFP中FⅧ的含量可能有影響，但我們追溯了8袋不合格血漿，其從采血到制成FFP的時(shí)間均在6 h以內(nèi)，故本次試驗(yàn)的制備時(shí)間未影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

新鮮冰凍血漿是臨床輸血中非常重要的成分血，以采集HCT為42%的400 ml全血（CPDA方）為例，標(biāo)準(zhǔn)血漿量約為232 ml，但是制備中去白過程的損耗、病毒滅活過程的損耗，部分最終產(chǎn)品的容量會(huì)低于200 ml的標(biāo)量，再考慮到白細(xì)胞濾器的易通過性，一些血站選擇了ACD-B的全血袋。GB 18469-2012《全血及成分血質(zhì)量要求》采用歐盟指南要求，歐盟標(biāo)準(zhǔn)[5]規(guī)定450 ml全血，保養(yǎng)液為63 ml，其血液保養(yǎng)液比例為10∶1.4，而國內(nèi)ACD-B方400 ml全血，保養(yǎng)液為100 ml，血液保養(yǎng)液比例為10∶2.5，其對(duì)血漿中FⅧ含量降低的影響是不爭的事實(shí)。建議再次修訂標(biāo)準(zhǔn)時(shí)考慮保養(yǎng)液配方對(duì)FⅧ含量的影響，質(zhì)管科增加成分用全血的質(zhì)控項(xiàng)目，并制定內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)一步提高臨床療效。

1 全血及成分血質(zhì)量要求[S].GB18469-2012.

2 衛(wèi)醫(yī)政發(fā).血站技術(shù)操作規(guī)程[S]. 2012.

3 王曉峰，張美萍，劉自安，等.不同溫度、時(shí)間制備新鮮冰凍血漿中各種凝血因子含量研究[J]. 臨床輸血與檢驗(yàn)，2015，17（2）：128-129.

4 龔裕春，莫琴，邱穎婕，等. 不同儲(chǔ)存溫度對(duì)于全血中Ⅷ因子含量的影響[J]. 中國輸血雜志，2015，28（6）：710.

5 EDQM.Guide to the Preparation，Use and quality assurance of blood components[M]. 16th ed.Strasbourg：Council of Europe Publishing，2011.120.

Effect of Two Kinds of Blood Preservative Solution on the Content of Factor Ⅷ Recovery in Fresh Frozen Plasma

ZHANG Ya-li , YAO Bei , ZHAO Xiao-hua. Shanxi Blood Center, Xi'an 710061

Objective To investigate the fresh frozen plasma （FFP）VIII derived from the whole blood with CPDA or ACD-B blood preservative solution，content difference and analyze the relative factors. Methods 48 cases of FVIII derived from the whole blood with CPDA （A group） or ACD-B （B group） blood preservative solution were randomized for the determination respectively，compared the two groups of the mean value and qualified rate of FVIII. Results There was no significant difference between the 2 groups of FVIII content （P＞0.05），compared with the A group，the qualified rate of FVIII quality standards in B group decreased significantly. Conclusion The decline of qualified rate of FVIII quality standards in B group related to the related factors such as the decrease of the concentration of dilution caused by the increase of the liquid storage capacity，the actual blood collection and so on.

Blood preservative solution Blood volume FⅧ

R446.1

A

1671-2587（2017）05-0442-03

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.05.009

710061 西安，陜西省血液中心

張雅莉（1966–），女，陜西西安人，主任護(hù)師，學(xué)士，主要從事輸血管理工作，（Tel）13892869269，（E-mail）1270430698@qq.com。

2017-01-30）

（本文編輯：王虹）