戎 青 陳 靖 盧 焰 徐志榮 吳敏秋

(1江蘇省靖江市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，江蘇靖江 214500；2江蘇省靖江市畜牧獸醫(yī)技術(shù)服務(wù)中心，江蘇靖江 214500；3江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇泰州 225300）

江蘇省靖江市蘇姜豬藍(lán)耳病血清學(xué)抗體檢測(cè)結(jié)果與分析

戎 青1陳 靖2盧 焰2徐志榮2吳敏秋3*

(1江蘇省靖江市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，江蘇靖江 214500；2江蘇省靖江市畜牧獸醫(yī)技術(shù)服務(wù)中心，江蘇靖江 214500；3江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇泰州 225300）

蘇姜豬是以姜曲海豬、楓涇豬和杜洛克豬為親本，通過(guò)雜交、橫交固定，經(jīng)過(guò)6個(gè)世代繼代選育培育而成。為了了解蘇姜豬對(duì)豬藍(lán)耳病疫苗的免疫效果和相關(guān)防制情況，進(jìn)一步做好豬藍(lán)耳病的防控工作，2016年筆者隨機(jī)采集768頭江蘇省靖江轄區(qū)內(nèi)12個(gè)蘇姜豬養(yǎng)殖場(chǎng) （戶）已按正常免疫程序接種過(guò)豬藍(lán)耳病疫苗的蘇姜豬血樣，采用間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法對(duì)豬藍(lán)耳病免疫抗體水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)。結(jié)果表明：轄區(qū)內(nèi)蘇姜豬血清中藍(lán)耳病病毒抗體陽(yáng)性率達(dá)到83.72%，說(shuō)明在該市的蘇姜豬免疫效果較好，能有效防控豬藍(lán)耳病的發(fā)生。

蘇姜豬；豬藍(lán)耳?。豢贵w；檢測(cè)

蘇姜豬是以姜曲海豬、楓涇豬和杜洛克豬為育種素材，通過(guò)雜交、橫交固定，歷時(shí)17年6個(gè)世代選育而成的新品種。蘇姜豬全身被毛黑色，具有母性好、產(chǎn)仔數(shù)多、耐粗飼、肉質(zhì)優(yōu)良、生產(chǎn)性能穩(wěn)定等特點(diǎn)，可用作優(yōu)質(zhì)黑豬肉生產(chǎn)及商品瘦肉型豬雜交生產(chǎn)，市場(chǎng)發(fā)展前景廣闊，社會(huì)與經(jīng)濟(jì)效益明顯。豬藍(lán)耳病又名豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS），是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的豬的一種高度接觸性傳染病，是威脅養(yǎng)豬業(yè)的最重要疫病之一[1]。其臨床癥狀主要表現(xiàn)為精神沉郁、食欲減退、體重下降、體溫升高、呼吸困難；母畜主要表現(xiàn)為子宮內(nèi)膜炎和子宮肌炎[2]，妊娠母豬在懷孕后期發(fā)生流產(chǎn)，產(chǎn)死胎和木乃伊胎或者產(chǎn)弱仔；幼齡仔豬感染后常因發(fā)生呼吸系統(tǒng)疾病而引起大量死亡，造成巨大經(jīng)濟(jì)損失[3]。

由于江蘇省靖江當(dāng)?shù)厥忻駥?duì)蘇姜豬豬肉認(rèn)可度高，該市內(nèi)建有蘇姜豬擴(kuò)繁場(chǎng)，全市飼養(yǎng)數(shù)量較多。為了了解蘇姜豬豬藍(lán)耳病的疫苗注射效果和相關(guān)防制情況，進(jìn)一步做好防控措施，2016年對(duì)靖江市轄區(qū)內(nèi)的12個(gè)蘇姜豬養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）隨機(jī)選取768頭已按程序接種過(guò)豬藍(lán)耳病疫苗的蘇姜豬血樣，采用間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法，對(duì)豬藍(lán)耳病免疫抗體水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)。以便更好地對(duì)該病進(jìn)行評(píng)估及預(yù)警、預(yù)報(bào)分析，為蘇姜豬豬藍(lán)耳病的綜合防控工作提供參考依據(jù)。

1 材料及方法

1.1 樣品

采用從前腔靜脈無(wú)菌操作、隨機(jī)采集12個(gè)蘇姜豬養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）已按程序免疫過(guò)的不同日齡蘇姜豬的全血768份，每份5～10 mL，將采集的血液編號(hào)。按常規(guī)方法制備血清，即血樣待血清析出后，2 000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘，要求血清清亮，無(wú)溶血、無(wú)污染。

1.2 器材

96孔微量板，微型震蕩器，離心機(jī)，恒溫培養(yǎng)箱，酶標(biāo)儀。

1.3 試劑

LSI豬繁殖和呼吸綜合征抗體檢測(cè)試劑盒（法國(guó)LSI公司生產(chǎn)，批號(hào)：5-TTVETPRA-059），樣品稀釋劑、陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照液。

1.4 方法及步驟

1.4.1 方法

采用間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法，應(yīng)用LSI豬繁殖和呼吸綜合征抗體檢測(cè)試劑盒，對(duì)768份豬血清樣品進(jìn)行豬藍(lán)耳病抗體水平檢測(cè)。

1.4.2 步驟

依據(jù)LSI豬繁殖和呼吸綜合征抗體檢測(cè)試劑盒的說(shuō)明書(shū)操作、讀數(shù)，并按試劑盒要求的計(jì)算公式計(jì)算，用IRPC值表示結(jié)果。

1.5 結(jié)果判定

樣品IRPC值≥20.0為陽(yáng)性；樣品IRPC值＜20.0為陰性。

2 結(jié)果

利用LSI豬繁殖和呼吸綜合征抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)，結(jié)果見(jiàn)表1。

從表1可見(jiàn)，在所檢測(cè)的蘇姜豬中，豬藍(lán)耳病抗體陽(yáng)性率為83.27%，各養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）有一定差異，抗體陽(yáng)性率最高的達(dá)88.46%，最低的也有78.57%，與該轄區(qū)2016年其他品種豬的豬藍(lán)耳病抗體總平均陽(yáng)性率（83.24%）的檢測(cè)結(jié)果沒(méi)有顯著差異。

3 討論

⑴本次檢測(cè)的12個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）的累計(jì)樣品抗體陽(yáng)性合格率較高，且呈現(xiàn)規(guī)模大的養(yǎng)殖場(chǎng)樣品抗體陽(yáng)性合格率高于規(guī)模小的養(yǎng)殖場(chǎng)（戶），說(shuō)明規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)都能重視豬藍(lán)耳病的防控工作，操作也更規(guī)范。但是，由于檢測(cè)方法限制，無(wú)法確定抗體是疫苗源抗體還是野毒源性抗體，故也不排除有野毒源性抗體存在的可能性。這種可能性在其他品種豬也同樣存在。

表1 靖江市2016年蘇姜豬高致病豬藍(lán)耳病免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

表1 靖江市2016年蘇姜豬高致病豬藍(lán)耳病免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

⑵動(dòng)物體的免疫機(jī)能是受遺傳控制的，不同的豬種由于遺傳基因的差別而對(duì)免疫的應(yīng)答能力也有不同，且在遺傳的過(guò)程中還會(huì)出現(xiàn)變異，導(dǎo)致可能出現(xiàn)有免疫缺陷的個(gè)體[4]。有的個(gè)體免疫應(yīng)答水平高，而有的個(gè)體免疫應(yīng)答水平低，應(yīng)答能力低的就可能導(dǎo)致免疫失敗。動(dòng)物的免疫應(yīng)答還受到營(yíng)養(yǎng)狀況和疾病的影響，長(zhǎng)期處于營(yíng)養(yǎng)不良狀態(tài)的豬，無(wú)法產(chǎn)生足夠的抵抗力，很容易導(dǎo)致豬藍(lán)耳病的發(fā)生[5]。此外，母源抗體雖然能在一定程度上保護(hù)仔豬免受侵害。但是有的仔豬母源抗體水平過(guò)高，反而會(huì)抑制后天免疫，不能產(chǎn)生有效的免疫應(yīng)答[6]。靖江市轄區(qū)內(nèi)的蘇姜豬免疫程序與其他品種豬采用同一免疫程序，且檢測(cè)結(jié)果基本一致，說(shuō)明蘇姜豬對(duì)PRRS的免疫性能和其他品種豬沒(méi)有差異。

⑶從檢測(cè)結(jié)果可以看出，12個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）中有1個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)的抗體陽(yáng)性合格率為78.57%，雖然達(dá)到農(nóng)業(yè)部要求的70%以上，但并未達(dá)到江蘇省的地方標(biāo)準(zhǔn)，究其原因可能是疫苗保存、運(yùn)輸或作用不當(dāng)而造成免疫效果偏低。免疫接種前未對(duì)豬群進(jìn)行抗體水平檢測(cè)，沒(méi)有根據(jù)豬群抗體水平科學(xué)制定免疫程序，使疫苗受到母源抗體的干擾，影響了疫苗的免疫效果。此外，免疫結(jié)果還受到接種人員操作水平的影響，有的接種人員在操作過(guò)程中存在打飛針的情況，致使有的疫苗未能全部注入豬體內(nèi)，造成因抗原量不足而無(wú)法誘導(dǎo)豬體產(chǎn)生有效的免疫應(yīng)答。

⑷目前對(duì)豬藍(lán)耳病尚無(wú)特效藥物進(jìn)行治療，主要是以預(yù)防為主，采取綜合防制措施[7]，同時(shí)結(jié)合針對(duì)性的免疫預(yù)防，一般會(huì)取得比較好的免疫效果。疫苗免疫是防控本病的有效方法，仔豬接種疫苗的首免時(shí)間跟很多因素有關(guān)系，其中最主要的是仔豬母源抗體水平，通過(guò)抗體水平檢測(cè)了解母源抗體的消長(zhǎng)規(guī)律，能夠初步確定免疫時(shí)機(jī)[8]。

⑸由于母豬和仔豬是豬藍(lán)耳病的主要侵害對(duì)象[9]，母畜妊娠后期發(fā)生流產(chǎn)，產(chǎn)死胎、木乃伊胎或者產(chǎn)出弱仔，新生仔豬產(chǎn)后一周內(nèi)的死亡率可高達(dá)80%，甚至達(dá)到100%，而耐過(guò)豬生長(zhǎng)緩慢，有的變成僵豬[10]。因此主要要加強(qiáng)母豬和仔豬的防疫，對(duì)陽(yáng)性率較高的豬群進(jìn)行疫苗防制，從源頭上控制和消滅豬藍(lán)耳病。在臨床動(dòng)物疫病檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)，豬藍(lán)耳病和豬瘟常相伴發(fā)生，因此，做好豬藍(lán)耳病防疫的同時(shí)，還要做好豬瘟及其他疫病的防制。

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S852.65（253JJ）

A

1673-4645(2017)10-0069-02

2017-09-28

戎青（1964-），男，高級(jí)獸醫(yī)師，主要從事動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督工作，E-mail：1208837331@qq.com*

吳敏秋（1963-），男，教授，主要從事臨床獸醫(yī)教學(xué)與研究，E-mail：wumq1003@sina.com