張志鋒 劉桂珍 金穗華

（1江蘇省畜牧總站，江蘇南京 210000；2全國畜牧總站，北京 100026；3南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，江蘇南京 210095）

江蘇地區(qū)種豬常溫精液質(zhì)量性狀的研究與分析

張志鋒1劉桂珍2金穗華3*

（1江蘇省畜牧總站，江蘇南京 210000；2全國畜牧總站，北京 100026；3南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，江蘇南京 210095）

本研究統(tǒng)計分析了江蘇地區(qū)近三年 (2014—2016)種豬常溫精液質(zhì)量抽查檢驗數(shù)據(jù)，結(jié)果表明：年平均72小時精子活力 （%）逐年上升，后兩個年度的數(shù)值顯著高于2014年 （＜0.05）；每劑量中呈直線前進運動精子數(shù) （億個）的平均值，三個年度間比較，差異顯著 （＜0.05）；精子畸形率 （%）逐年下降，差異顯著 （＜0.05）。目前，經(jīng)過性能測定的種公豬數(shù)量占采精公豬總數(shù)的94.4%，種公豬群體質(zhì)量水平在提高?？傮w評價：種豬及常溫精液質(zhì)量水平處于上升和穩(wěn)定狀態(tài)，對于目前行業(yè)內(nèi)具有一定啟示作用。

種豬；常溫精液；質(zhì)量

隨著人工授精技術(shù)的推廣普及，種豬常溫精液產(chǎn)品的需求量迅速上升。為了行業(yè)發(fā)展需要，國家2009年發(fā)布了《種豬常溫精液》 （GB 23238-2009）[1]以規(guī)范常溫精液的生產(chǎn)和推廣。盡管標(biāo)準(zhǔn)已發(fā)布并實施，但各地執(zhí)行仍存差異。為發(fā)揮優(yōu)秀種豬資源的改良作用，進一步提高良種覆蓋率，本研究對于江蘇地區(qū)33個生豬良種補貼項目區(qū)、縣的種豬及常溫精液質(zhì)量進行了分析、評價，旨在為國內(nèi)養(yǎng)豬業(yè)的生產(chǎn)與發(fā)展提供理論依據(jù)和數(shù)據(jù)支持，同時對于常溫精液質(zhì)量控制提出探討性設(shè)想。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

生物顯微鏡、恒溫水浴箱、載玻片、血球分類計數(shù)器、小吸管、蒸餾水、姬姆薩染料、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、甲醛、甲醇、甘油，所用試劑為分析純（AR）；配制姬姆薩染液。

1.2 樣品來源

樣品為種豬常溫精液，1 063頭份樣品來自2014—2016年江蘇省內(nèi)各種豬常溫精液生產(chǎn)企業(yè)，品種有杜洛克、長白、大約克、皮特蘭、蘇淮等。

1.3 樣品的處理與檢驗

樣品的前處理和檢驗，及精子活力（%）、每劑量中呈直線前進運動精子數(shù)（個）、精子畸形率（%）的計算，依照《種豬常溫精液》（GB 23238-2009）[1]中的有關(guān)規(guī)定進行，檢驗后共獲得4 252條精液質(zhì)量性狀的測定數(shù)據(jù)。

種豬常溫精液質(zhì)量合格率的檢測、評價由具有資質(zhì)的產(chǎn)品質(zhì)量檢驗機構(gòu)執(zhí)行GB 23238-2009[1]后給出。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

測定數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，所有數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析采用SPSS軟件，對劑量、72小時精子活力、每劑量中呈直線前進運動精子數(shù)和精子畸形率進行單因素方差分析，多重比較，分析差異是否顯著。同時以GB 23238-2009[1]中有關(guān)參數(shù)規(guī)定值作為對照、分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 抽查概況

如表1所示，2014—2016年，抽查地點全部為江蘇省的生豬良種補貼項目區(qū)、縣，抽查企業(yè)均是具有一定規(guī)模的種公豬站，從抽查的區(qū)域、企業(yè)規(guī)模和抽取的樣品數(shù)來看，本研究與分析具有一定的代表性和可靠性。

表1 種豬常溫精液抽查的區(qū)、縣、企業(yè)和樣品數(shù)量

2.2 常溫精液質(zhì)量檢驗合格率年度間的比較

常溫精液合格率年度間呈明顯上升，見圖1。2014年度大部分不合格樣品均因劑量值不符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定造成部分企業(yè)仍在采用40 mL/頭份的包裝劑量。

圖1 各年度精液質(zhì)量檢驗合格率的比較

2.3 常溫精液的質(zhì)量概況

連續(xù)三個年度精液質(zhì)量性狀的四項參數(shù)測定結(jié)果見表2。經(jīng)統(tǒng)計分析，劑量完全是人為所控制的，后兩個年度均已≥80 mL，顯著高于2014年度（＜0.05），說明精液的分裝劑量已得到改變和提高。

72小時精子活力（%）在GB 23238-2009[1]中定義為“有效期”，要求精子活力在有效期內(nèi)仍然能夠保持≥60.0%。2014年的均值為55.6%，顯然低于標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定值，而后兩個年度有效期（72小時）的精子活力分別為66.1%、66.2%，顯著高于2014年度（＜0.05）。顯然這與常溫精液生產(chǎn)工藝的改進是分不開的，其測定均值已達到國外先進水平，符合歐共體EC（90/429）[2]技術(shù)法規(guī)的規(guī)定值。

每劑量中呈直線前進運動精子數(shù)（億個）三個年度間的比較，逐年上升，差異顯著（＜0.05）。與標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定每劑量≥25億的要求比較，分別超出22.3億、29.8億和30.9億，后兩個年度分別超出一倍多，遠遠高出標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定值。實際上，過高超出不僅是一種遺傳資源上的浪費，降低了良種公豬利用率，同時也是經(jīng)濟上的一種損失。

精子畸形率（%）是評價精液質(zhì)量性狀的一個重要內(nèi)容。近三年來，江蘇地區(qū)種豬常溫精液的畸形率呈逐年下降的趨勢，明顯低于歐共體技術(shù)法規(guī)中＜25%的限定值[2]。精子畸形率所產(chǎn)生的不良影響因素，多是可逆的，如能采取相應(yīng)的技術(shù)措施，畸形率還能降低[3]。

2.4 種公豬站與種豬質(zhì)量

從表3看出，三年來公豬站的數(shù)量在不斷減少，至2016年項目區(qū)、縣的公豬站平均為2.3個。采精公豬存欄數(shù)量不斷增加，2014—2016年幾乎增加1倍。數(shù)據(jù)說明，站數(shù)在減少，存欄采精公豬頭數(shù)在增加，公豬站的建設(shè)與飼養(yǎng)規(guī)模在不斷擴大。三年來，經(jīng)生產(chǎn)性能測定的種公豬占采精公豬數(shù)的百分比，從2014年度的31.0%上升到2016年度的94.4%，這說明種公豬群體質(zhì)量水平在不斷提高。

3 討論

3.1 種公豬站的建設(shè)

豬人工授精技術(shù)在我國豬的改良、繁殖、育種領(lǐng)域是關(guān)鍵技術(shù)，但在目前國內(nèi)的豬業(yè)生產(chǎn)中，豬的人工授精體系建設(shè)上還缺乏完善的技術(shù)規(guī)范，難以適應(yīng)生產(chǎn)發(fā)展需要，而種公豬站的建設(shè)，又是人工授精體系建設(shè)中的關(guān)鍵項目，直接影響到種豬精液生產(chǎn)與人工授精技術(shù)的推廣。針對前期國內(nèi)種公豬站基礎(chǔ)設(shè)施薄弱、建設(shè)層次結(jié)構(gòu)不分明、選育水平低、供種能力小的情況，加快實施種公豬站規(guī)范化建設(shè)非常必要。

近幾年來，中國種公豬站建設(shè)正在經(jīng)歷迭代升級，無論從豬舍的硬件設(shè)施還是管理軟實力都有了大幅提升[4]。江蘇地區(qū)目前種公豬站的建設(shè)也正是按照這樣的思路在升級，在布局上，通過淘汰一些條件差的種公豬站，積極建設(shè)規(guī)模相對大的標(biāo)準(zhǔn)化種公豬站，可大大提高豬的良種覆蓋率，這將有利于養(yǎng)豬業(yè)的生產(chǎn)與發(fā)展。在技術(shù)上，通過對種公豬、原精液和常溫精液產(chǎn)品的質(zhì)量控制，可有效保證種公豬的遺傳質(zhì)量，提高改良效果；同時，能有效控制種公豬的健康安全，預(yù)防動物性疾病通過精液傳播，保證使用精液母豬群體的健康。

表2 常溫精液質(zhì)量的測定數(shù)據(jù)

表3 項目區(qū)、縣的公豬站與采精公豬數(shù)量

3.2 種豬精液的液態(tài)保存 （常溫精液）

在豬人工授精工作中，精液的稀釋保存是關(guān)鍵的技術(shù)環(huán)節(jié)。即使其他一些畜種在應(yīng)用冷凍精液（包括正在進行對豬精液冷凍的試驗研究），目前種豬精液的液態(tài)保存（常溫精液）技術(shù)，仍具有重要的實用價值。如何進一步提高和改進精液稀釋保存液的使用效果，應(yīng)基于對公豬精液生理、生化機制的了解和需要，添加必要的成分，以往較多地偏重一些配方的驗證和篩選，缺乏對基礎(chǔ)理論機制的探討，這樣就難有突破性的進展。目前，這一問題已得到基本解決，一些專業(yè)機構(gòu)專門研究和生產(chǎn)不同需求的商品稀釋（粉）液，其作用與效果在本研究中得到驗證。2014年度有相當(dāng)一部分種公豬站使用的是自制配方稀釋液或是短效稀釋液，難以達到72小時規(guī)定的精子活力；2015、2016年度多數(shù)種公豬站使用了長效稀釋液，72小時精子活力均達到理想水平。

3.3 常溫精液質(zhì)量要求的分析

在人工授精條件下，精液劑量及每劑量中呈前進運動精子數(shù)直接影響母豬的受孕與產(chǎn)仔數(shù)。母豬具有特殊的繁殖生理特性和子宮解剖結(jié)構(gòu)（子宮細長、相對容積大、排卵數(shù)量多）。為保證卵子能夠正常地受精，輸入的精液不僅需要保證有一定的量（輸精劑量），同時還需要有一定數(shù)量生命力強的精子（活力高）。正常情況下，活力越高，受精率越高[5]。

對于72小時精子活力（有效期），這不僅是對精子生存時間的考驗要求，更重要的是要符合授精過程的實際。受精的過程中，精子不僅需要在生殖道內(nèi)向受精部位運動，同時還有一個“獲能”的過程。母豬是多胎高產(chǎn)動物，其排卵數(shù)量多，必然有個相對長的時間段。除此之外，還有對母豬的發(fā)情鑒定和最佳輸精時間不確定等因素，所以對精子要有較高活力的要求。通常情況下，原精液活力好并使用長效稀釋液，實現(xiàn)有效期（72小時精子活力）的要求即可保證母豬正常的受孕與產(chǎn)仔數(shù)。

關(guān)于常溫精液的畸形率，從理論上分析，異常（畸形）精子的發(fā)生，首先是在精子發(fā)生時期出現(xiàn)的，其次是精子在通過公畜生殖道或在體外處理時發(fā)生的[6]。因此，除了要控制好公豬的飼養(yǎng)管理和原精液質(zhì)量，同時在常溫精液生產(chǎn)過程中，也應(yīng)注意到外界不利因素對精子形態(tài)的損傷。

3.4 常溫精液生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)化程序的建立

實踐證明，常溫精液生產(chǎn)是所在企業(yè)的核心業(yè)務(wù)，該生產(chǎn)流程應(yīng)建立在標(biāo)準(zhǔn)化作業(yè)程序（Standard Operating Procedure）[7]的基礎(chǔ)上，以加強種公豬站、精液配送中心（站、點）對精液質(zhì)量的控制[8]。因此，目前應(yīng)盡快制定統(tǒng)一、規(guī)范的方式方法，詳細提出流程的各個環(huán)節(jié)、工作內(nèi)容、技術(shù)內(nèi)容和注意要點，同時盡可能地將相關(guān)操作步驟細化、量化和優(yōu)化，提出最適合的標(biāo)準(zhǔn)化作業(yè)程序。這對于常溫精液的質(zhì)量控制和提高將起到積極作用。

4 結(jié)論

大量的統(tǒng)計和檢測數(shù)據(jù)表明，目前，江蘇地區(qū)種公豬及常溫精液的質(zhì)量水平處于上升和穩(wěn)定的狀態(tài)，種公豬站的建設(shè)和發(fā)展，處于一種良性循環(huán)的態(tài)勢，所有這些與國家的補貼支持、政府管理部門的宏觀指導(dǎo)是分不開的。

[1]GB 23238-2009,種豬常溫精液[S].

[2]EC(90/429),Boar AI-Stud Guidelines[S].

[3]金穗華,王振云,李慧,等.影響公牛精子形態(tài)異常的原因分析[J].畜牧獸醫(yī)雜志,2015(5):19-21.

[4]黃若涵,張守全,潘玉春,等.種公豬站的迭代升級 [J].豬業(yè)科學(xué),2015,32(11):34-37.

[5]秦和春,金穗華.牛精液的質(zhì)量與母牛受精率關(guān)系 [J].畜牧與獸醫(yī),2007,39(4):29-30.

[6]Hafez ESE.農(nóng)畜繁殖學(xué)[M].許懷讓,范必勤,譯.上海:上海人民出版社,1977:313-314.

[7]金穗華,羅國祥,李喜和.牛冷凍精液生產(chǎn)與質(zhì)量檢驗標(biāo)準(zhǔn)化作業(yè)手冊[M].南京:江蘇鳳凰科學(xué)技術(shù)出版社,2015:1-2.

[8]駱菲,王貴江,羅文學(xué),等.種豬常溫精液質(zhì)量控制 [J].中國豬業(yè),2013(9):32-34.

The Research and Analysis on the Quality Properties of Boar Fresh Semen in Jiangsu Province

ZHANG Zhifeng1,LIU Guizhen2,JIN Suihua3
（1Animal Husbandry Station of Jiangsu Province,Nanjing 210000;2National Animal Husbandry Station of China,Beijing 100026;3Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095）

In this study,the test data of boar fresh semen quality in Jiangsu province in the past three years(2014-2016)was analyzed.The results showed that the annual average 72-hour activity(%)increased year by year,and the latter two years were higher significantly than 2014(＜0.05).The difference of average progressive motility of sperm was significant(＜0.05).The abnormal sperm percentage decreased year by year,and the difference was significant(＜0.05).At present,the performance of 95%sample boars was been determined.The quality of boar fresh semen improved.In a word,the quality of boar and fresh semen improved.

boar;fresh semen;quality

S814

A

1673-4645(2017)10-0028-04

2017-08-27

張志鋒（1964-），男，漢族，推廣研究員

*通訊作者：金穗華，男，漢族，高級畜牧師，主要從事家畜繁殖與牛凍精生產(chǎn)技術(shù)等方面的研究工作，E-mail：suihua48@126.com