張穎穎，李瑩瑩

（中國(guó)肉類食品綜合研究中心，北京 100068）

食品中抗病毒類藥物殘留檢測(cè)方法研究進(jìn)展

張穎穎，李瑩瑩

（中國(guó)肉類食品綜合研究中心，北京 100068）

抗病毒類藥物已被許多國(guó)家列為養(yǎng)殖業(yè)禁用藥物，長(zhǎng)期使用此類藥物會(huì)造成藥物殘留、動(dòng)物中毒、病毒變異等一系列問(wèn)題，進(jìn)而影響人類的身體健康。然而，到目前為止，我國(guó)尚未出臺(tái)測(cè)定食品中抗病毒類藥物殘留的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。本文綜述了食品中抗病毒類藥物殘留的檢測(cè)方法，主要有酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法、色譜法、光譜法、電化學(xué)傳感器、芯片法等，并分析了各方法的優(yōu)缺點(diǎn)，以期對(duì)食品中抗病毒類藥物殘留的檢測(cè)方法提供一定的理論依據(jù)。

抗病毒類藥物；食品；檢測(cè)方法

目前，盡管科技不斷更新發(fā)展，病毒感染仍是威脅人類及動(dòng)物生命健康的主要問(wèn)題。回顧歷史，多次發(fā)生的流感事件[1]不僅造成大量人畜傷亡，同時(shí)還影響世界經(jīng)濟(jì)發(fā)展，例如，1878年意大利爆發(fā)的甲型H1N1流感、1997年香港的H1N5流感、2009年墨西哥和美國(guó)爆發(fā)的“豬流感”、2013年中國(guó)內(nèi)地發(fā)生的H7N9流感以及2015年臺(tái)灣發(fā)生H5N2與H5N8流感等。為解決流感問(wèn)題，人們研發(fā)了多種抗病毒類藥物，如金剛烷胺、金剛乙胺、利巴韋林、嗎啉胍、阿昔洛韋等，其分子結(jié)構(gòu)式如圖1所示。起初這些藥物研發(fā)僅用于解決人類流感問(wèn)題，然而多次流感事件也造成大量畜禽死亡，帶來(lái)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。因此，養(yǎng)殖戶便將抗病毒類藥物摻入飼料中對(duì)禽畜進(jìn)行喂養(yǎng)。

然而，將人類藥物移植獸用，不僅沒(méi)有準(zhǔn)確的科學(xué)依據(jù)，并且長(zhǎng)期使用會(huì)造成動(dòng)物中毒、藥物殘留、病毒抑制或變異[2-3]等，進(jìn)而影響人類的身體健康。因此我國(guó)農(nóng)業(yè)部于2005年發(fā)布了560號(hào)公告，明文規(guī)定養(yǎng)殖業(yè)禁止使用金剛烷胺、利巴韋林類抗病毒藥物[4]；美國(guó)于2006年也明文規(guī)定禁止使用此類藥物[5]。但由于抗病毒類藥物價(jià)格低廉、效果顯著，因此仍被養(yǎng)殖戶大量使用，然而所造成的副作用也越來(lái)越大。據(jù)報(bào)道，H1N1病毒已經(jīng)對(duì)人類使用的達(dá)菲等抗病毒藥物產(chǎn)生了抗性，因此動(dòng)物食品中抗病毒類藥物的殘留已成為公眾廣泛關(guān)注的問(wèn)題。為保護(hù)消費(fèi)者的身體健康，抗病毒類化合物的檢測(cè)方法一直以來(lái)是食品界的研究熱點(diǎn)。然而到目前為止，我國(guó)尚未頒布測(cè)定食品中抗病毒類藥物殘留的相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，因此本文對(duì)目前的抗病毒類藥物殘留檢測(cè)方法進(jìn)行簡(jiǎn)要概述，以期為抗病毒類藥物殘留檢測(cè)提供一定的理論依據(jù)。

圖1 抗病毒類藥物的分子結(jié)構(gòu)式Fig. 1 Structures of antiviral drugs

1 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）是基于抗原抗體特異性相結(jié)合的原理進(jìn)行分析測(cè)定的，具有選擇性強(qiáng)、靈敏度高、檢出限低等特點(diǎn)，并且對(duì)該方法試劑盒化大大提高了樣品的檢測(cè)速度，是當(dāng)前快速檢測(cè)的主要方法之一。

馮才偉等[6]通過(guò)改造金剛烷胺的分子結(jié)構(gòu)，研發(fā)金剛烷胺半抗原和人工抗原，制備了單克隆抗體，建立了ELISA法，且研制了測(cè)定動(dòng)物組織中金剛烷胺含量的ELISA試劑盒，并考察了該試劑盒的靈敏度、準(zhǔn)確性及交叉反應(yīng)率等，最終確定其檢測(cè)限為0.25 μg/kg，回收率為82.5%～91.0%。該方法操作簡(jiǎn)便、快速、靈敏度高，可以用于日常動(dòng)物源性樣品的快速檢測(cè)；蔣佳穎等[7]以兔抗豬α-干擾素免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）G多克隆抗體為包被抗體，鼠抗豬α-干擾素單克隆抗體作為二抗，創(chuàng)建雙抗體夾心（double antibody sandwich，DAS）-ELISA法，用于測(cè)定豬α-干擾素的含量。此方法不受其他基質(zhì)的干擾，準(zhǔn)確性高。

2 色譜法

2.1 氣相色譜法

氣相色譜（gas chromatography，GC）主要是利用物質(zhì)的沸點(diǎn)、極性及吸附性質(zhì)的差異來(lái)實(shí)現(xiàn)混合物的分離。由于進(jìn)樣前需對(duì)化合物進(jìn)行氣化，因此GC不適于直接分析沸點(diǎn)高及熱穩(wěn)定性差的化合物。而大多數(shù)抗病毒類藥物沸點(diǎn)高，且易溶于水，因此在樣品前處理過(guò)程中需用有機(jī)試劑來(lái)提取待測(cè)物，并進(jìn)行衍生化，才能進(jìn)入GC進(jìn)行檢測(cè)，整個(gè)操作過(guò)程相對(duì)繁瑣、易引入雜質(zhì)、重現(xiàn)性相對(duì)較差，因此在抗病毒藥物殘留檢測(cè)方面應(yīng)用較少。

Farajzadeh等[8]創(chuàng)建了測(cè)定金剛烷胺的GC法。該方法以甲醇為分散劑，1,2-二溴乙烷為提取溶劑，氯代甲酸丁酯為衍生化溶劑，通過(guò)優(yōu)化分散劑及提取溶劑的加入量、衍生化試劑的加入量、衍生化反應(yīng)時(shí)間以及液液萃取條件，經(jīng)火焰離子化檢測(cè)器（flame ionization detector，F(xiàn)ID）進(jìn)行分析檢測(cè)。此方法溶劑使用量相對(duì)少、檢出限低。樓永軍等[9]采用毛細(xì)管色譜柱，設(shè)置了合適的程序升溫過(guò)程，用質(zhì)量選擇檢測(cè)器（mass selective detector，MSD）測(cè)定金剛烷、溴代金剛烷、金剛烷胺及副產(chǎn)物金剛烷醇的電子轟擊（electron impact，EI）譜圖，用于結(jié)構(gòu)確認(rèn)；利用FID檢測(cè)器進(jìn)行定量測(cè)定，其檢出限為2 ng。

2.2 氣相色譜-質(zhì)譜法

GC-質(zhì)譜（mass spectrometer，MS）法同GC法一致，樣品需進(jìn)行衍生化，操作過(guò)程繁瑣，因此GC-MS法測(cè)定抗病毒類藥物的報(bào)道相對(duì)較少。

Herold等[10]創(chuàng)建了毛細(xì)管GC-MS法，用于測(cè)定血漿中的金剛乙胺含量，該法以金剛乙胺-D3為內(nèi)標(biāo)，通過(guò)氰基柱提取，甲醇洗脫，氮吹至干后進(jìn)行衍生化反應(yīng)，得到叔丁基二甲基甲硅烷基衍生物，經(jīng)選擇離子監(jiān)測(cè)模式進(jìn)行儀器掃描測(cè)定。

2.3 液相色譜法

液相色譜（liquid chromatography，LC）是通過(guò)液體流動(dòng)相將待測(cè)物質(zhì)引入整個(gè)系統(tǒng)，因此分析過(guò)程不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制。目前，測(cè)定抗病毒類藥物的LC法中主要采用2 種檢測(cè)器，即紫外檢測(cè)器（ultraviolet detector，UVD）[11]與熒光檢測(cè)器（fluorescence detector，F(xiàn)LD）[12-13]，然而大部分抗病毒類藥物無(wú)較強(qiáng)的紫外吸收和熒光吸收，因此在樣品前處理過(guò)程中也會(huì)進(jìn)行衍生化操作。

Jing Shaojun等[14]創(chuàng)建了測(cè)定金剛烷胺的高效液相色譜-熒光檢測(cè)法，通過(guò)考察不同的衍生化試劑（2-萘氧基乙酰氯、丹磺酰氯、氫醌-2-磺酰氯）與衍生化溫度（25～60 ℃），最終選擇了0.3 mg/mL的丹磺酰氯為衍生化試劑，在40 ℃條件下進(jìn)行衍生化反應(yīng)，以33 mmol/L磷酸二氫鉀（pH 3.0）/甲醇（12∶88，V/V）為流動(dòng)相，通過(guò)C18色譜柱進(jìn)行分離，在激發(fā)波長(zhǎng)345 nm及發(fā)射波長(zhǎng)480 nm處進(jìn)行檢測(cè)。該方法的回收率為94.3%～100.7%，檢出限為0.1 ng/mL。

Cui Shuangjin等[15]利用LC，在紫外波長(zhǎng)256 nm處，以甲醇/水（85∶15，V/V）為流動(dòng)相，通過(guò)C18色譜柱對(duì)金剛烷胺、金剛乙胺及美金剛進(jìn)行分析測(cè)定。該方法以9,10-蒽醌-2-磺酰氯（ASC級(jí)）作為衍生化試劑，并通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證所生成的衍生物能夠長(zhǎng)期穩(wěn)定存在；此外，過(guò)量的衍生化試劑會(huì)與流動(dòng)相中的甲醇進(jìn)行反應(yīng)，生成甲基氫醌-2-磺酰酯，其保留時(shí)間與待分析化合物的衍生物的保留時(shí)間不同，因此不會(huì)影響金剛烷胺、金剛乙胺及美金剛的分析鑒定，最終其檢出限為20 ng/mL。

2.4 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法

目前，80%以上的抗病毒藥物殘留檢測(cè)方法均是液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（liquid chromatography tandem mass spectrometry，LC-MS/MS）法，其具有分離效果好、靈敏度高、檢出限低、回收率高、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)。LC-MS/MS可用于測(cè)定各種基質(zhì)樣品，如雞蛋[16-19]、雞肉[20-27]、雞肝[23,28]、豬肉[29]、豬肝[30]、牛乳[31]等，通過(guò)多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)掃描模式可減少基質(zhì)干擾、提高準(zhǔn)確性、避免假陽(yáng)性和假陰性現(xiàn)象。

現(xiàn)行的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T 4253—2015《出口動(dòng)物組織中抗病毒類藥物殘留量的測(cè)定 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》[32]便是通過(guò)LC-MS/MS法測(cè)定雞肉、雞肉制品、豬肉、肝臟、魚(yú)、蝦、蛋、皮蛋等動(dòng)物組織中金剛烷胺、金剛乙胺、美金剛、阿昔洛韋、咪喹莫特、嗎啉胍、奧司他韋7 種抗病毒類藥物的殘留量。經(jīng)三氯乙酸和乙腈提取，通過(guò)混合型陽(yáng)離子交換（mixed cation exchange，MCX）固相萃取柱凈化，采用BHE Amide色譜柱，通過(guò)MS進(jìn)行檢測(cè)，檢出限為1.0 μg/kg。

楊旭等[33]通過(guò)比較鹽酸/乙腈、乙酸/乙腈、甲酸/乙腈和三氯乙酸/乙腈4 種提取溶劑及C18、強(qiáng)陽(yáng)離子交換（strong cation exchange，SCX）、HR-XC陽(yáng)離子交換和MCX 4 種固相萃取柱凈化方式，以待測(cè)物的回收率為依據(jù)，最終選擇乙腈/0.2 mol/L鹽酸溶液為提取溶劑，MCX固相萃取柱為凈化方式，測(cè)定雞肉中阿昔洛韋、奧司他韋、扎那米韋、拉米夫定、阿比朵爾、金剛烷胺、金剛乙胺、咪喹莫特8 種抗病毒類藥物的殘留量，回收率為76.4%～95.7%，檢出限小于1.0 μg/kg；常平平等[21]采用超聲波輔助溶劑萃取法，以甲醇/1%三氯乙酸為提取劑萃取雞肉中的金剛烷胺的殘留量，經(jīng)MCX固相萃取柱凈化濃縮，進(jìn)行LC-MS測(cè)定，回收率為89.7%～101.4%，檢出限為0.07 μg/kg；陳燕等[22]也通過(guò)MCX固相萃取柱凈化方式測(cè)定雞肉中的金剛烷胺的殘留量；云環(huán)等[20]通過(guò)1%三氯乙酸溶液/乙腈溶液(1∶1，V/V）提取，用SCX固相萃取柱凈化，測(cè)定雞肉中金剛烷胺和利巴韋林的殘留量，定量限為4.0 μg/kg；Chan等[34]亦采用了SCX固相萃取柱凈進(jìn)行凈化，用于測(cè)定家禽組織中的7 種抗病毒類藥物的殘留量；孫海新等[16]建立了以甲醇/1%甲酸溶液（1∶1，V/V）為提取溶劑，經(jīng)聚合物陽(yáng)離子交換（polymer cation exchange，PCX）固相萃取柱凈化，測(cè)定雞蛋中金剛烷胺、金剛乙胺、利巴韋林和嗎啉胍多殘留量。固相萃取方法能夠凈化基質(zhì)、富集待測(cè)物、降低檢出限、提高靈敏度，并且實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好、回收率高，是目前分析檢測(cè)中最常用的凈化方法。

齊凱等[23]依次用水、乙腈提取樣品中的利巴韋林，離心后，在上清液中加入石墨化碳黑（graphitized carbon black，GCB）和C18進(jìn)行分散固相萃取凈化，溶液氮吹濃縮后，通過(guò)LC-MS法測(cè)定雞肉和雞肝中的利巴韋林殘留量，方法回收率為83.5%～120.6%，雞肉中利巴韋林的檢出限為1.20 μg/kg，雞肝中的檢出限為1.54 μg/kg，該方法操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確快速，可用于日常分析檢測(cè)中。

Mu Pengqian等[35]通過(guò)優(yōu)化QuEChERS（quick、easy、cheap、effective、rugged、safe）方法中的提取溶劑、吸附劑等樣品處理?xiàng)l件，采用內(nèi)標(biāo)法，創(chuàng)建了分析雞肉中的金剛烷胺、金剛乙胺、奧司他韋及其代謝物奧司他韋羧酸鹽、美金剛、阿比朵爾、嗎啉胍、阿昔洛韋、更昔洛韋、泛昔洛韋、噴昔洛韋、咪喹莫特、利巴韋林及其代謝物H-1,2,4-三氮-3-甲酰胺（TCONH2）14 種抗病毒類藥物殘留量的LC-MS/MS方法，其回收率為56.2%～113.4%，各化合物檢出限范圍為0.02～1.0.0 μg/kg。該方法操作相對(duì)簡(jiǎn)便，并且可以同時(shí)測(cè)定多種化合物，但其回收率偏低；Yan Hua等[25]創(chuàng)建了利用QuEChERS凈化方法測(cè)定雞肉中的金剛烷胺和金剛乙胺殘留量的LC-MS法。以1%乙酸/乙腈為提取溶劑，經(jīng)MgSO4和NaCl鹽析，通過(guò)C18吸附凈化，最終濃縮上機(jī)檢測(cè)，其金剛烷胺和金剛乙胺的檢出限分別為1.02 μg/kg和0.67 μg/kg；李彥等[30]用1%乙酸/乙腈溶液超聲提取，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉、C18及N-丙基乙二胺（primary secondary amine，PSA）填料的凈化，測(cè)定雞肉中的金剛烷胺殘留量，檢出限為0.6 μg/kg，該法操作簡(jiǎn)便快捷，且準(zhǔn)確度高。QuEChERS方法是由分散固相萃取法演變而來(lái)，其原理是樣品經(jīng)有機(jī)溶劑提取，經(jīng)鹽析分層后，再進(jìn)行分散固相萃取，從而達(dá)到凈化的目的，其操作簡(jiǎn)便快速、價(jià)格低廉、有機(jī)溶劑消耗少，因此在食品分析檢測(cè)方面的應(yīng)用也越來(lái)越廣。

尹暉等[17]利用一種更為簡(jiǎn)便的凈化方式——乙腈飽和的正己烷進(jìn)行液液萃取來(lái)測(cè)定雞肉和雞蛋中金剛烷胺與金剛乙胺殘留量，該方法的回收率為70%～120%；湯曉艷等[18]通過(guò)甲醇/1%三氯乙酸溶液提取后，采用正己烷萃取的方式凈化除脂，測(cè)定雞蛋中的金剛烷胺殘留量，該方法的檢出限為2 μg/kg，回收率為88%～99.8%。液液萃取方法操作簡(jiǎn)便、回收率高，但由于食品基質(zhì)復(fù)雜，該方法不能夠應(yīng)用于所有的基質(zhì)樣品，且凈化效果遠(yuǎn)不如固相萃取及QuEChERS方法，在儀器檢測(cè)過(guò)程中會(huì)有較為明顯的基質(zhì)干擾作用，因此，液液萃取方法在食品檢測(cè)方向的應(yīng)用較少。

此外，部分抗病毒類藥物在生物體內(nèi)會(huì)進(jìn)行代謝作用，例如，利巴韋林會(huì)代謝為磷酸化利巴韋林。祝偉霞等[24]利用酸性磷酸酶將磷酸化利巴韋林代謝物完全轉(zhuǎn)化為利巴韋林原藥，通過(guò)1%乙酸/乙腈的提取及C18和PSA填料的分散固相萃取，經(jīng)氨基色譜柱分離，進(jìn)入MS檢測(cè)。該方法能夠準(zhǔn)確地測(cè)定雞肉中利巴韋林的代謝產(chǎn)物殘留量，檢出限為1.0 μg/kg。

艾連峰等[36]建立了在線凈化LC-MS/MS法測(cè)定肌肉、雞蛋與牛乳中金剛烷胺殘留量，樣品通過(guò)簡(jiǎn)單的溶劑提取及離心過(guò)程，便直接取部分上清溶液，先經(jīng)過(guò)在線PCX色譜柱的凈化作用，用以富集待測(cè)化合物，洗脫雜質(zhì)；再通過(guò)六通閥進(jìn)行柱切換，用合適的流動(dòng)相將富集在PCX色譜柱上的金剛烷胺洗脫至C18分離色譜柱中進(jìn)行分離，通過(guò)MS進(jìn)行檢測(cè)。該方法的回收率為83.3%～93.6%，牛乳的定量限為0.25 μg/kg；動(dòng)物組織和雞蛋的定量限為0.5 μg/kg。此方法通過(guò)在線凈化裝置便可對(duì)樣品直接進(jìn)行測(cè)定，操作簡(jiǎn)便、省時(shí)省力。

2.5 毛細(xì)管電泳法

毛細(xì)管電泳是一類以毛細(xì)管為分離通道、以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力的新型液相分離技術(shù)，具有分析速度快、分辨率高、穩(wěn)定性好、消耗溶劑少等優(yōu)點(diǎn)，可以作為L(zhǎng)C的替代或互補(bǔ)技術(shù)。但由于其重現(xiàn)性差，使得分析結(jié)果的可靠性降低，從而制約了其在食品檢測(cè)方面的廣泛應(yīng)用。

Reichová等[37]創(chuàng)建了用于測(cè)定金剛烷胺、金剛乙胺、美金剛殘留量的毛細(xì)管電泳方法，首先分別單獨(dú)測(cè)定這3 個(gè)化合物，以含有5 mmol/L甲基芐胺的乙醇/水（1∶4，V/V）為電解液，在紫外波長(zhǎng)210 nm處，檢出限為0.35 mg/L；此外通過(guò)在流動(dòng)相中加入α-或β-環(huán)糊精與待測(cè)物形成絡(luò)合物，從而進(jìn)行基線分離。Laborde-Kummer等[38]用毛細(xì)管電泳法測(cè)定了市售膠囊中奧司他韋的含量，該方法分析時(shí)長(zhǎng)為1.5 min，具有選擇性高、準(zhǔn)確度高、分析時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)，檢出限與定量限分別為0.97 μg/mL與3.24 μg/mL。

3 光譜法

3.1 分光光度法

分光光度法是通過(guò)測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)的吸光度或發(fā)光強(qiáng)度，對(duì)其進(jìn)行定性和定量分析的方法，具有應(yīng)用廣泛、選擇性好、靈敏度高、分析成本低等優(yōu)點(diǎn)。

Rizk等[39]于2003年提出用紫外分光光度計(jì)定量測(cè)定含有伯胺基團(tuán)的藥物——鹽酸金剛烷胺、苯環(huán)丙胺硫酸鹽和氨甲環(huán)酸，該過(guò)程主要是基于在乙腈溶液中，π電子接受體——四氰乙烯與n電子供體——待測(cè)化合物（鹽酸金剛烷胺、苯環(huán)丙胺硫酸鹽和氨甲環(huán)酸）形成的電荷轉(zhuǎn)移復(fù)合物在330 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，該方法的回收率分別為（99.68±0.92）%、（100.3±0.75）%、（99.8±0.76）%；Raut等[40]通過(guò)紫外分光光度計(jì)于280.5 nm波長(zhǎng)處準(zhǔn)確測(cè)定奧司他韋的含量，奧司他韋質(zhì)量濃度在4～24 μg/mL范圍內(nèi)符合比爾定律，該法操作簡(jiǎn)便、靈敏度高，檢測(cè)限為0.342 μg/mL；Mustafa等[41]利用阿昔洛韋在pH 9.0的硼酸鈉緩沖溶液中與2價(jià)銅離子形成的絡(luò)合物于290 nm波長(zhǎng)處有最大吸光度，在非水介質(zhì)吡啶/甲醇（1∶99，V/V）中與鈷（Ⅱ）反應(yīng)得到的絡(luò)合物在287 nm波長(zhǎng)處有較強(qiáng)吸收，從而測(cè)定阿昔洛韋的含量，其回收率分別為99.32%和98.77%；此外金剛烷胺在pH 3.0的條件下可與3 價(jià)鐵形成絡(luò)合物，在295 nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度可用于準(zhǔn)確定量。

3.2 近紅外光譜技術(shù)

近紅外光譜（near infrared spectroscopy，NIR）是一種非破壞性的樣品定量分析技術(shù)，具有快速、操作簡(jiǎn)單、樣品少、不消耗化學(xué)試劑、不污染環(huán)境等優(yōu)點(diǎn)，近來(lái)越來(lái)越受到人們的關(guān)注。

Dou Ying等[42]利用NIR鑒別金剛烷胺，并創(chuàng)建人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型進(jìn)行定量，通過(guò)不斷優(yōu)化參數(shù)設(shè)定，最終該方法可以準(zhǔn)確測(cè)定金剛烷胺的含量；Titova等[43]也建立了NIR法用于測(cè)定金剛烷胺的含量。

然而創(chuàng)建近紅外方法過(guò)程中需采用大量有代表性的樣品進(jìn)行建模，并且該模型需要根據(jù)測(cè)定的樣品不斷地進(jìn)行維護(hù)改進(jìn)，無(wú)形中增加了工作量；此外，若參比方法精度不夠，則NIR測(cè)定的結(jié)果也會(huì)產(chǎn)生偏差。因此目前NIR方法在食品安全檢測(cè)方面還未得到廣泛應(yīng)用。

4 電化學(xué)傳感器檢測(cè)法

電化學(xué)傳感器是由能夠與被測(cè)組分某種化學(xué)性質(zhì)相關(guān)電信號(hào)的敏感元件所構(gòu)成的，其操作簡(jiǎn)便、反應(yīng)迅速、測(cè)定準(zhǔn)確，可用于日常監(jiān)督檢測(cè)中。

Salem等[44]基于修飾碳糊和石墨涂層的離子選擇性電極制備電化學(xué)傳感器，用于測(cè)定藥物及人尿樣中的金剛烷胺和嗎啉胍的質(zhì)量濃度，分別考察了膜的成分、均勻性及增稠劑類型等的影響，其新電極所測(cè)定的檢出限為0.19～2.08 μg/mL，該電極制備簡(jiǎn)單、使用方便，并且成本低，可以用于實(shí)際樣品中金剛烷胺和嗎啉胍的含量測(cè)定；此外Jalali等[45]用β-環(huán)糊精修飾的碳電極測(cè)定藥物中金剛烷胺的含量，在優(yōu)化的pH 4.0的醋酸鹽緩沖溶液中，該電極的檢出限為6.3×10-10mol/L，回收率為94%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.68%，且電極的使用壽命長(zhǎng)達(dá)3 個(gè)月，該法反應(yīng)靈敏、操作簡(jiǎn)便。

5 芯片法

芯片法操作快速簡(jiǎn)便，可進(jìn)行高通量測(cè)定，是未來(lái)快速、高通量檢測(cè)方法的研究熱點(diǎn)之一。蔡自由等[46]在2011年首次提出通過(guò)微流控芯片來(lái)測(cè)定片劑中的金剛烷胺含量。該方法以聚甲基丙烯酸甲酯十字型芯片上的微通道為分離通道，在高壓直流電場(chǎng)的驅(qū)動(dòng)下，通過(guò)非接觸電導(dǎo)檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，所測(cè)得的檢出限為0.6 mg/L，加標(biāo)回收率為97%～98%。該方法消除了電極污染，降低了背景噪音，提高了檢測(cè)靈敏度、穩(wěn)定性和重復(fù)性。

6 結(jié) 語(yǔ)

自“速成雞”事件以來(lái)，抗病毒類藥物的濫用再次引起了廣泛關(guān)注，進(jìn)而針對(duì)食品中抗病毒類藥物殘留檢測(cè)方法的研究再次成為熱點(diǎn)，其中應(yīng)用最廣的便是LC-MS/MS法，該方法操作簡(jiǎn)便、靈敏度高、準(zhǔn)確性好，是當(dāng)前食品檢測(cè)行業(yè)的主流方法，然而該方法在檢測(cè)過(guò)程中需要大型精密儀器且檢測(cè)費(fèi)用昂貴，不適合執(zhí)法部門(mén)的市場(chǎng)監(jiān)督及企業(yè)的內(nèi)部自檢，因此需要?jiǎng)?chuàng)建更簡(jiǎn)便快速、高通量的檢測(cè)方法，例如ELISA試劑盒、高通量芯片、傳感器等，這些或許會(huì)成為將來(lái)分析檢測(cè)發(fā)展的主要方向之一。

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Progress in Analytical Methods for Antiviral Drug Residues in Foods

ZHANG Yingying, LI Yingying
(China Meet Research Center, Beijing 100068, China)

Antiviral drugs have been banned from being used in food-producing animals in many countries of the world.Long-term use of such drugs will cause a series of problems such as drug residues, animal poisoning and virus variation and, which will have a detrimental impact on human health. However, so far, the country has not yet promulgated a national standard for the determination of antiviral drug residues in foods. In this review, the major detection methods for antiviral drugs, including enzyme immunoassay, chromatography, spectroscopy, electrochemical sensor, and chip method are summarized and analyzed. We hope that this review will provide theoretical supports to promote the detection of antiviral drugs in foods.

antiviral drugs; food; detection

10.7506/spkx1002-6630-201721049

TS207.3

A

1002-6630（2017）21-0313-06

張穎穎，李瑩瑩. 食品中抗病毒類藥物殘留檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J]. 食品科學(xué), 2017, 38(21): 313-318.

10.7506/spkx1002-6630-201721049. http://www.spkx.net.cn

ZHANG Yingying, LI Yingying. Progress in analytical methods for antiviral drug residues in foods[J]. Food Science, 2017,38(21): 313-318. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201721049. http://www.spkx.net.cn

2016-12-18

張穎穎（1990—），女，工程師，碩士，研究方向?yàn)槭称钒踩珯z測(cè)。E-mail：yingying_sys@163.com