陳建平，余 苗，秦小明，諶素華，鐘賽意,*

（1.廣東海洋大學(xué)食品科技學(xué)院，廣東 湛江 524088；2.廣東省天然產(chǎn)物綠色加工與產(chǎn)品安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510640； 3.江西省糧油質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，江西 南昌 330046）

環(huán)糊精功能化修飾納米銀負(fù)載姜黃素的制備及其抗腫瘤活性

陳建平1,2，余 苗3，秦小明1，諶素華1，鐘賽意1,*

（1.廣東海洋大學(xué)食品科技學(xué)院，廣東 湛江 524088；2.廣東省天然產(chǎn)物綠色加工與產(chǎn)品安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510640； 3.江西省糧油質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，江西 南昌 330046）

采用納米銀材料制備負(fù)載姜黃素（curcumin，Cur）的β-環(huán)糊精（β-cyclodextrin，β-CD）功能化納米銀——Ag@β-CD@Cur，并進(jìn)一步對(duì)其抗腫瘤活性進(jìn)行測(cè)定。運(yùn)用透射電子顯微鏡和納米粒度儀鑒定Ag@β-CD@Cur的表面形貌、粒徑大小和穩(wěn)定性。運(yùn)用倒置熒光顯微鏡和3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴鹽法檢測(cè)Ag@β-CD@Cur對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2形態(tài)和活性的影響，并進(jìn)一步采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡比例。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，所制備的Ag@β-CD@Cur是純度很高的單質(zhì)銀，且大小均一、表面光滑，粒徑約為2 nm。同時(shí)，Ag@β-CD@Cur具有較好的穩(wěn)定性，能在水中穩(wěn)定存在30 d。經(jīng)Ag@β-CD@Cur處理HepG2細(xì)胞24 h后，HepG2細(xì)胞的形態(tài)出現(xiàn)明顯的變圓、細(xì)胞核固縮等細(xì)胞凋亡特征，同時(shí)，細(xì)胞存活率從對(duì)照組的100%降低到24%，進(jìn)一步的流式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果表明，細(xì)胞凋亡比例從對(duì)照組的2.5%增加到51.0%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，納米化后的Cur具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性效果，這為Cur在納米制劑的應(yīng)用提供了一定的技術(shù)手段和理論數(shù)據(jù)參考。

姜黃素；β-環(huán)糊精；銀納米粒子；制備；抗腫瘤活性

姜黃素（curcumin，Cur）是從姜科姜黃屬植物姜黃根莖中提取的一種脂溶性酚類物質(zhì)[1]。目前，在國(guó)內(nèi)外的食品工業(yè)當(dāng)中，姜黃素是一種重要的香料、色素和抗氧化劑，廣泛應(yīng)用于咖哩、烤肉卷、芥菜醬、面食、糕點(diǎn)、糖果、罐頭、飲料、果酒、果汁及烹飪菜肴等[2-6]。研究表明，Cur的結(jié)構(gòu)中含有酚羥基，在細(xì)胞膜發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)時(shí)，其酚羥基可以發(fā)生氧化反應(yīng)，能有效終止自由基反應(yīng)[4]，因而其表現(xiàn)出諸多生理活性，比如抗氧化[7-8]、抗腫瘤[9-10]、抗炎[11-12]、防止衰老等。然而，由于Cur的水溶性差，存在于食品中的Cur被人體攝入后生物利用度較低，難以發(fā)揮應(yīng)有的抗氧化和抗腫瘤等活性作用，極大地限制了它在抗腫瘤臨床方面的應(yīng)用范圍及應(yīng)用價(jià)值。

目前，已有研究證實(shí)，可以運(yùn)用多種方法來(lái)提高Cur的生物利用度，比如，將Cur制備成納米粒子[13-14]、脂質(zhì)體[15-16]、微球[17]、磷脂復(fù)合物[18]和各種Cur的結(jié)構(gòu)衍生物等[19-20]。其中，納米技術(shù)是近年來(lái)發(fā)展的一種新型技術(shù)，納米銀（nano sliver，AgNPs）粒子作為一種新興的功能納米材料，在生物學(xué)領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用[21]。AgNPs是指粒徑在1～100 nm之間的金屬銀微粒，是金屬銀的一種特殊形態(tài)。AgNPs具有體積小、比表面積大、物理化學(xué)性質(zhì)獨(dú)特、對(duì)人體細(xì)胞毒性低等優(yōu)點(diǎn)，廣泛用作抗癌藥物的載藥體系[22-23]。然而，目前還未見(jiàn)有關(guān)采用AgNPs材料制備Cur納米粒子的研究報(bào)道。為此，本實(shí)驗(yàn)采用AgNPs作為藥物載體對(duì)Cur進(jìn)行負(fù)載制備Cur納米粒子并進(jìn)一步考察其抗腫瘤活性。為了提高AgNPs的穩(wěn)定性，本實(shí)驗(yàn)首先采用β-環(huán)糊精（β-cyclodetrin，β-CD）對(duì)AgNPs進(jìn)行功能化修飾，然后對(duì)Cur進(jìn)行負(fù)載從而制備負(fù)載Cur的環(huán)糊精功能化銀納米粒子——Ag@β-CD@Cur，并對(duì)其抗腫瘤活性進(jìn)行評(píng)價(jià)。研究結(jié)果對(duì)于指導(dǎo)Cur在臨床上的合理應(yīng)用、優(yōu)化給藥方案、改進(jìn)藥物劑型以及質(zhì)量控制等方面具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

Cur（質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥99.9%）、碘化丙啶（propidium iodide，PI）染料 美國(guó)Sigma公司；β-CD（食品級(jí)） 山東新大精細(xì)化工有限公司產(chǎn)品；硝酸銀、VC、無(wú)水乙醇（均為分析純） 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴鹽（3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide，MTT）、改良杜氏伊格爾培養(yǎng)基（Dulbecco’s modified eagle medium，DMEM）、胎牛血清、青霉素和鏈霉素 美國(guó)Hyclone公司；人肝癌細(xì)胞HepG2 美國(guó)ATCC公司。

1.2 儀器與設(shè)備

BP301S電子天平 德國(guó)Sartorius公司；Nano-ZS納米粒度儀 英國(guó)Malvern公司；TEANAI-10透射電子顯微鏡（transmission electron microscope，TEM） 荷蘭Philips公司；Centrifuge 5804R離心機(jī) 德國(guó)Eppendorf公司；倒置顯微鏡 日本Olympus公司；Versamax酶標(biāo)儀美國(guó)Molecular Devices公司；FACS Aria流式細(xì)胞儀美國(guó)Waters公司。

1.3 方法

1.3.1 AgNPs的合成

AgNPs的合成參照文獻(xiàn)[23]。稱取AgNO3粉末16 mg溶于40 mL Milli-Q水中配成400 μg/mL AgNO3溶液。稱取16 mg VC溶于40 mL Milli-Q水中配成400 μg/mL VC儲(chǔ)備溶液。在磁力攪拌的條件下，取0.1 mL 400 μg/mL VC溶液逐滴加入到4 mL AgNO3（400 μg/mL）溶液中，攪拌2 h后，在水中透析24 h除去過(guò)量的VC和AgNO3。AgNPs溶液經(jīng)超聲2 min后，用0.2 μm的多孔濾膜進(jìn)行過(guò)濾制得AgNPs。最后，采用電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法（inductively coupled plasma-atomic emission spectrometry，ICP-AES）對(duì)AgNPs濃度進(jìn)行測(cè)定。

1.3.2 Ag@β-CD及Ag@β-CD@Cur和Ag@Cur的制備

將0.1 mL VC儲(chǔ)備溶液逐滴加入到4 mL AgNO3溶液中，經(jīng)磁力攪拌2 h后，加入3.792 mg β-CD，磁力攪拌6 h，然后經(jīng)透析后獲取純化后的AgNPs負(fù)載體系。取上述溶液，于10 000 r/min離心10 min，去離子水洗3 遍，樣品冷凍干燥得到Ag@β-CD。

將0.1 mL VC儲(chǔ)備溶液逐滴加入到4 mL AgNO3溶液中，經(jīng)磁力攪拌2 h后，加入3.792 mg β-CD和80 μL 1 mmol/L Cur，磁力攪拌6 h，然后經(jīng)透析后獲取純化后的AgNPs負(fù)載體系。取上述溶液，于10 000 r/min離心10 min，去離子水洗3 遍，樣品冷凍干燥得到Ag@β-CD@Cur。

將0.1 mL VC儲(chǔ)備溶液逐滴加入到4 mL AgNO3溶液中，經(jīng)磁力攪拌2 h后，加入80 μL 1 mmol/L Cur，磁力攪拌6 h，然后經(jīng)透析后獲取純化后的AgNPs負(fù)載體系。取上述溶液，于10 000 r/min離心10 min，去離子水洗3 遍，樣品冷凍干燥得到Ag@Cur。

1.3.3 Ag@β-CD@Cur物理性質(zhì)測(cè)定

1.3.3.1 TEM觀察Ag@β-CD@Cur形貌

將樣品Ag@β-CD@Cur均勻分散滴在銅網(wǎng)上，TEM測(cè)定樣品微粒的大小、形貌和均勻性。同時(shí)，采用能量色散X射線光譜儀（energy dispersive X-ray spectroscopy，EDX）掃描分析Ag@β-CD@Cur的元素組成。

1.3.3.2 納米粒度儀測(cè)定Ag@β-CD@Cur的粒徑及穩(wěn)定性

用Nano-ZS納米粒度儀測(cè)定Ag@β-CD@Cur的粒徑變化及相應(yīng)Zeta電位，與AgNPs和Ag@β-CD相比較。測(cè)試條件：入射光為氦氖激光，波長(zhǎng)λ為633 nm，入射角為90°，測(cè)量穩(wěn)定溫度為（25.0±0.1）℃。

1.3.4 Ag@β-CD@Cur抗腫瘤活性測(cè)定

1.3.4.1 細(xì)胞培養(yǎng)

HepG2細(xì)胞復(fù)蘇后培養(yǎng)在含10%胎牛血清、100 U/mL青霉素和50 U/mL鏈霉素的DMEM完全培養(yǎng)液中，于37 ℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)傳代，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞用于以下MTT實(shí)驗(yàn)。

1.3.4.2 MTT法測(cè)定細(xì)胞存活率

細(xì)胞存活率的測(cè)定根據(jù)Chen Tianfeng[24]、Chen Jianping[25]等的方法進(jìn)行操作。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，經(jīng)細(xì)胞傳代后，調(diào)整細(xì)胞密度。將HepG2細(xì)胞以2×104個(gè)/孔接種于96 孔培養(yǎng)板，置于37 ℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。向不同的96 孔板中分別加入2.5 μg/mL AgNPs工作液、Ag@β-CD工作液、Ag@Cur工作液、Ag@β-CD@Cur工作液處理HepG2細(xì)胞，以不添加工作液的細(xì)胞培養(yǎng)液作為對(duì)照組。經(jīng)不同方式處理的HepG2細(xì)胞分別培養(yǎng)24 h后，采用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)變化。然后，往96 孔細(xì)胞培養(yǎng)板中加入5 mg/mL MTT，每孔20 μL，放入37 ℃培養(yǎng)箱中孵育4 h后除去上層清液，每孔加入150 μL二甲基亞砜，在搖床上振蕩10 min，待紫色結(jié)晶物充分溶解后，用酶標(biāo)儀在570 nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔OD值。以對(duì)照組的OD值為100%，計(jì)算不同處理組中的細(xì)胞存活率。

式中：ODi表示不同處理組的OD值；OD0表示對(duì)照組的OD值。

1.3.4.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡比例

細(xì)胞凋亡率的測(cè)定根據(jù)Su Jianyu等[26]的方法進(jìn)行操作。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的HepG2細(xì)胞，經(jīng)消化離心、計(jì)數(shù)，接種到6 cm的培養(yǎng)皿中，細(xì)胞密度為6×104個(gè)/mL，培養(yǎng)箱中孵育24 h后，分別用2.5 μg/mL AgNPs工作液、Ag@β-CD工作液、Ag@Cur工作液、Ag@β-CD@Cur工作液處理HepG2細(xì)胞24 h，以不添加工作液的細(xì)胞培養(yǎng)液作為對(duì)照組。然后用0.25%胰蛋白酶消化收集細(xì)胞，用磷酸鹽緩沖液洗2 次，離心后得到的細(xì)胞用-20 ℃預(yù)冷的75%乙醇固定，吹打均勻后置于-20 ℃過(guò)夜，次日1 000×g離心5 min，倒掉上清液，加入500 μL PI染料，置于4 ℃中避光染色20 min后上機(jī)待測(cè)。流式細(xì)胞儀激發(fā)波長(zhǎng)為488 nm，發(fā)射波長(zhǎng)為630 nm，每個(gè)樣品至少分析10 000 個(gè)細(xì)胞，用軟件Multi Cycle分析細(xì)胞周期。

2 結(jié)果與分析

2.1 Ag@β-CD@Cur的鑒定

圖1 AgNPs（A）、Ag@β-CD（B）和Ag@β-CD@Cur（C）的TEM結(jié)果圖Fig. 1 TEM images of AgNPs (A), Ag@β-CD (B) and Ag@β-CD@Cur (C)

用TEM觀察所制備的Ag@β-CD@Cur，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。Ag@β-CD@Cur大小均一，粒徑約為2 nm，且表面光滑，說(shuō)明Ag@β-CD@Cur是粒徑均勻的納米球。

圖2 Ag@β-CD@Cur的EDX元素分析Fig. 2 EDX analysis of Ag@β-CD@Cur

對(duì)Ag@β-CD@Cur表面元素進(jìn)行分析。由圖2可知，Ag是主要元素，占了21%，而C、O分別占了18%和11%，后兩者很可能來(lái)自于β-CD和Cur，此外無(wú)其他元素的信號(hào)（所檢出Cu為銅網(wǎng)所致），表明Ag@β-CD@Cur純度很高。

對(duì)Ag@β-CD@Cur的穩(wěn)定性進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn)，Ag@β-CD@Cur在水溶液中保持穩(wěn)定，在30 d內(nèi)粒徑維持在2 nm左右，提示所合成的納米載藥體系是穩(wěn)定的納米溶膠系統(tǒng)，有利于貯存和使用（圖3A）。對(duì)Ag@β-CD@Cur體系的Zeta電位分析結(jié)果（圖3B）顯示，AgNPs的Zeta電位為-15 mV，在納米粒子表面連接了β-CD后Ag@β-CD的Zeta電位變?yōu)?0 mV。在體系中負(fù)載了Cur后，Ag@β-CD@Cur的Zeta電位減至36 mV，說(shuō)明β-CD和Cur存在于AgNPs納米體系中。

圖3 Ag@β-CD@Cur穩(wěn)定性Fig. 3 Stability of Ag@β-CD@Cur

2.2 Ag@β-CD@Cur的抗腫瘤活性

圖4 Ag@β-CD@Cur對(duì)HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)的影響Fig. 4 Effect of Ag@β-CD@Cur on the growth of HepG2 cells

從圖4A的倒置熒光顯微成像可以看出，對(duì)照組細(xì)胞均呈不規(guī)則多邊形貼壁生長(zhǎng)，經(jīng)過(guò)2.5 μg/mL AgNPs、2.5 μg/mL Ag@β-CD、2.5 μg/mL Ag@Cur和2.5 μg/mL Ag@β-CD@Cur處理HepG2細(xì)胞24 h后，HepG2細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)均受到了抑制。然而，相比AgNPs、Ag@β-CD和Ag@Cur，Ag@β-CD@Cur抑制HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)更明顯，表現(xiàn)為細(xì)胞形態(tài)出現(xiàn)了明顯的變化，細(xì)胞出現(xiàn)更多的變圓、細(xì)胞核固縮等細(xì)胞凋亡的生物學(xué)特征。為了驗(yàn)證這一實(shí)驗(yàn)結(jié)果，進(jìn)一步采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞的存活率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖4B所示。當(dāng)用2.5 μg/mL AgNPs和2.5 μg/mL Ag@β-CD處理HepG2細(xì)胞24 h后，其細(xì)胞存活率分別為80%和72%。而當(dāng)2.5 μg/mL的Ag@Cur處理HepG2細(xì)胞24 h后，其細(xì)胞存活率降低到51%。然而，用2.5 μg/mL的Ag@β-CD@Cur處理HepG2細(xì)胞24 h后，其細(xì)胞存活率達(dá)到最低，為24%。這一實(shí)驗(yàn)結(jié)果與觀察到的細(xì)胞形態(tài)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果（圖4A）相一致。由此可知，相比AgNPs、Ag@β-CD和Ag@Cur，Ag@β-CD@Cur表現(xiàn)出更強(qiáng)的抗腫瘤活性。

2.3 細(xì)胞凋亡比例

圖5 Ag@β-CD@Cur對(duì)HepG2細(xì)胞中細(xì)胞凋亡比例的影響Fig. 5 Effect of Ag@β-CD@Cur on the population of Sub-G1 cells in HepG2 cells

為了驗(yàn)證MTT的結(jié)果，進(jìn)一步采用細(xì)胞流式術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡比例，結(jié)果如圖5所示。當(dāng)用2.5 μg/mL AgNPs和Ag@β-CD處理HepG2細(xì)胞24 h后，SubG1細(xì)胞凋亡比例分別從對(duì)照組的2.5%提高到12.6%和27.1%。而當(dāng)2.5 μg/mL Ag@Cur處理HepG2細(xì)胞24 h后，SubG1細(xì)胞凋亡比例增加到34.7%。然而，相比Ag@Cur，用2.5 μg/mL的Ag@β-CD@Cur處理HepG2細(xì)胞24 h后，SubG1細(xì)胞凋亡比例為51.0%，這表明Ag@β-CD@Cur抑制腫瘤細(xì)胞增殖主要是通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡而實(shí)現(xiàn)的。

3 結(jié) 論

原發(fā)性肝癌，俗稱“肝癌”，是世界上第5大常見(jiàn)的惡性腫瘤，且其死亡率高居所有癌癥中第3位[27]。目前，治療肝癌的常用化療藥物有表柔比星、絲裂霉素、5-氟尿嘧啶、順鉑等。近年來(lái)，大量研究表明，Cur對(duì)肝癌細(xì)胞具有較強(qiáng)的抑制效果[28]。然而，相比化療藥物，Cur對(duì)正常細(xì)胞卻表現(xiàn)出較低的毒副作用[29-30]。這為Cur作為一種理想的抗癌藥物提供了可能，然而由于其水溶性低，限制了其在臨床方面的應(yīng)用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)銀納米技術(shù)提高了Cur的水溶性，發(fā)現(xiàn)Ag@Cur能夠很好地溶解在水中，并且，在水中能夠穩(wěn)定存在30 d，這為Cur的臨床應(yīng)用提供了可能。同時(shí)，Ag@β-CD@Cur處理HepG2細(xì)胞后，能極顯著抑制HepG2細(xì)胞的生長(zhǎng)（P＜0.01），且抑制率達(dá)到了76%（由于細(xì)胞存活率僅為24%），且SubG1細(xì)胞凋亡比例達(dá)到了51%，表明Ag@β-CD@Cur具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性效果。然而，關(guān)于Ag@β-CD@Cur抑制HepG2細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)其細(xì)胞凋亡的機(jī)制還有待于進(jìn)一步的研究。

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Preparation and Anticancer Activity of Cyclodextrin-Functionalized Curcumin-Loaded Silver Nanoparticles

CHEN Jianping1,2, YU Miao3, QIN Xiaoming1, CHEN Suhua1, ZHONG Saiyi1,*
(1. College of Food and Technology, Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China; 2. Guangdong Province Key Laboratory for Green Processing of Natural Products and Product Safety, Guangzhou 510640, China; 3. Grain and Edible Oil Products Quality’s Supervision and Inspection Center in Jiangxi Province, Nanchang 330046, China)

In this study, cyclodextrin-functionalized curcumin-loaded silver nanoparticles (Ag@β-CD@Cur) were prepared with silver nanomaterials and its anticancer activity was also studied. The surface morphology, particle size and stability of Ag@β-CD@Cur were detected by transmission electronic microscopy and Zetasizer Nano. Moreover, the effect of Ag@β-CD@Cur on morphological and viability changes of HepG2 cells were detected by phase-contrast microscopy and(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide assay. Moreover, the population of apoptotic cells was detected by flow cytometric analysis. The experimental results showed that Ag@β-CD@Cur was obtained as highly pure,uniformly sized silver nanoparticles with a smooth surface. The average size of Ag@β-CD@Cur was 2 nm. Moreover,Ag@β-CD@Cur had good stability in water for 30 days. After treatment of HepG2 cells with Ag@β-CD@Cur for 24 h,apoptosis characteristics appeared such as cell swelling and cell nuclei pyknosis. At the same time, the cell viability reduced to 24% of the control group. Further flow cytometric analysis showed that the population of apoptotic cells increased from 2.5% (control) to 51.0%. The results demonstrated that after nanoparticlization, curcumin has stronger anticancer activity,which will provide a technical means and theoretical data for curcumin nano-formulation.

curcumin; β-cyclodextrin; silver nanoparticles; preparation; anticancer activity

10.7506/spkx1002-6630-201721006

TS201.2

A

1002-6630（2017）21-0038-05

2016-09-28

國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目（21602034）；廣東省自然科學(xué)基金博士啟動(dòng)項(xiàng)目（2016A30310332）；廣東省公益研究與能力建設(shè)項(xiàng)目（2015A020209166）；廣東省天然產(chǎn)物綠色加工與產(chǎn)品安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放基金項(xiàng)目（201617）

陳建平（1986—），男，講師，博士，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物活性物質(zhì)及其生物利用。E-mail：cjp516555989@126.com

*通信作者：鐘賽意（1979—），男，副教授，博士，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物活性物質(zhì)及其生物利用。E-mail：zsylxc@126.com

陳建平, 余苗, 秦小明, 等. 環(huán)糊精功能化修飾納米銀負(fù)載姜黃素的制備及其抗腫瘤活性[J]. 食品科學(xué), 2017, 38(21):38-42.

10.7506/spkx1002-6630-201721006. http://www.spkx.net.cn

CHEN Jianping, YU Miao, QIN Xiaoming, et al. Preparation and anticancer activity of cyclodextrin-functionalized curcumin-loaded silver nanoparticles[J]. Food Science, 2017, 38(21): 38-42. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201721006. http://www.spkx.net.cn