吳 桐 張巧麗 姚樹(shù)坤

(1 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院,北京,100015； 2 北京市和平里醫(yī)院,北京,100013; 3 中日友好醫(yī)院,北京,100029)

中藥研究

清肝化瘀方質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

吳 桐1張巧麗2姚樹(shù)坤3

(1 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院,北京,100015； 2 北京市和平里醫(yī)院,北京,100013; 3 中日友好醫(yī)院,北京,100029)

目的:建立清肝化瘀顆粒的質(zhì)量控制方法。方法:采用薄層色譜法,鑒別黃芩、苦參、半枝蓮、莪術(shù)等組成藥物;采用高效液相色譜法測(cè)定方中君藥黃芩、苦參的主要成分黃芩苷及苦參堿的含量。結(jié)果:確立了顆粒中黃芩、苦參、莪術(shù)、半枝蓮的薄層色譜鑒別方法。在選定的高效液相色譜條件下,建立了本顆粒中黃芩苷、苦參堿的測(cè)定方法,其方法學(xué)均符合藥典要求。結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)建立的鑒別和含量測(cè)定方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好,適用于本顆粒質(zhì)量的控制。

清肝化瘀顆粒;薄層鑒別;黃芩苷;苦參堿;質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

清肝化瘀方由黃芩、苦參、白術(shù)、半枝蓮、白花蛇舌草、莪術(shù)、三棱、甘草等8味中藥組成,是姚樹(shù)坤教授治療原發(fā)性肝癌的臨床有效經(jīng)驗(yàn)方,臨床應(yīng)用具有二十余年歷史。該方具有清熱解毒、健脾祛濕、活血化瘀、軟堅(jiān)消癥等功效,前期臨床研究及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明該方適用于絕大多數(shù)原發(fā)性肝癌患者,具有多環(huán)節(jié)、多靶點(diǎn)的作用特點(diǎn),能提高患者免疫功能,延長(zhǎng)生存期,改善生命質(zhì)量[1-7]。為保證原方的臨床療效及方便患者服用,對(duì)原方進(jìn)行工藝優(yōu)化制成顆粒劑,并建立其質(zhì)量控制方法,本實(shí)驗(yàn)采用薄層色譜法對(duì)方中黃芩、苦參、半枝蓮、三棱進(jìn)行定性研究,采用高效液相色譜法測(cè)定方中君藥黃芩、苦參的主要有效成分,包括黃芩苷及苦參堿。為嚴(yán)格控制清肝化瘀顆粒的質(zhì)量提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 高效液相色譜儀(美國(guó)安捷倫公司);紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)(日本島津公司);AL204電子分析天平(德國(guó)梅特勒-托利多公司);YB-1A型真空恒溫干燥箱(天津鑫洲科技有限公司);電子恒溫水浴鍋(北京永光明醫(yī)療儀器廠);調(diào)溫電熱套(北京永光明醫(yī)療儀器廠)

1.2 試劑 甲醇(色譜純),乙腈(色譜純),超純水。

1.3 分析樣品 黃芩對(duì)照藥材(批號(hào):120955-201309),苦參對(duì)照藥材(批號(hào):121019-201006),半枝蓮對(duì)照藥材(批號(hào):121293-201003),三棱對(duì)照藥材(批號(hào):121521-201103),黃芩苷對(duì)照品(批號(hào):110842-201207);黃芩素對(duì)照品(批號(hào):111595-201306),漢黃芩素對(duì)照品(批號(hào):111514-200403),苦參堿對(duì)照品(批號(hào):110805-200508)均購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢定研究院。清肝化瘀顆粒(7.5 g/袋,中日友好醫(yī)院藥學(xué)部制劑室制備,批號(hào)2014003,2014004,2014005)。

2 方法與結(jié)果

2.1 薄層色譜鑒別

2.1.1 黃芩薄層鑒別[8]取3批顆粒各5 g,加乙酸乙酯—甲醇(3∶1)40 mL,超聲30 min,過(guò)濾。將濾液置水浴上揮干,殘?jiān)? mL甲醇溶解,作為供試液;另分別取處方中缺黃芩的其他藥材,同法制成陰性對(duì)照溶液;取黃芩標(biāo)準(zhǔn)藥材1 g,同法制成對(duì)照藥材溶液;取漢黃芩素、黃芩素、黃芩苷對(duì)照品,加甲醇制成對(duì)照品溶液,濃度均為1 mg/mL。分別吸取上述8種溶液,各5 μL,點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上,以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(10∶3∶1∶2)為展開(kāi)劑,展開(kāi),取出,晾干,置紫外光燈(365 nm)下檢視。結(jié)果顯示供試品色譜中,在與標(biāo)準(zhǔn)藥材、對(duì)照品色譜相對(duì)應(yīng)的位置上,紫外光燈(365 nm)下顯相同顏色的斑點(diǎn),而陰性對(duì)照無(wú)干擾。見(jiàn)圖1。

圖1 黃芩薄層色譜

注：1～3供試品;4陰性對(duì)照;5黃芩對(duì)照藥材;6漢黃芩素;7黃芩素;8黃芩苷

2.1.2 苦參薄層鑒別 取3批顆粒各3 g,放入具塞錐形瓶中,加入氨水5 mL,浸泡5 min,加氯仿30 mL超聲30 min,過(guò)濾。取濾液置水浴上揮干,殘?jiān)? mL甲醇溶解,作為供試液;另分別取處方中缺苦參的其他藥材,同法制成陰性對(duì)照溶液;取苦參標(biāo)準(zhǔn)藥材1 g,同法制成對(duì)照藥材溶液;取苦參堿對(duì)照品加甲醇制成每l mL含1 mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。分別吸取上述6種溶液各5 μL,點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以甲苯—丙酮—甲醇(8∶3∶0.5)為展開(kāi)劑,展開(kāi),取出,晾干,噴以碘化鉍鉀溶液顯色。結(jié)果顯示供試品色譜中,在與對(duì)照藥材、對(duì)照品色譜相對(duì)應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn),而陰性對(duì)照無(wú)干擾。見(jiàn)圖2。

2.1.3 半枝蓮薄層鑒別 取3批顆粒各5 g,研細(xì),加水40 mL溶解,用水飽和的正丁醇萃取3次，40 mL/次,合并正丁醇萃取液,過(guò)濾,取續(xù)濾液置50 ℃水浴上揮干,殘?jiān)蛹状? mL溶解,作為供試品溶液;另分別取處方中缺半枝蓮的其他藥材,同法制成陰性對(duì)照溶液;取1 g半枝蓮標(biāo)準(zhǔn)藥材同法制成對(duì)照藥材溶液。分別吸取上述5種溶液各5 μL,點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上,以甲苯—甲酸乙酯—甲酸(3∶3∶1)為展開(kāi)劑,展開(kāi),取出,晾干,噴以AlCl3溶液,晾干,置紫外光燈(365 nm)下檢視。結(jié)果顯示供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相對(duì)應(yīng)的位置上,顯相同熒光斑點(diǎn),而陰性對(duì)照無(wú)干擾。結(jié)果見(jiàn)圖3。

圖2 苦參薄層色譜

注：1～3供試品;4苦參對(duì)照藥材;5陰性對(duì)照;6苦參堿對(duì)照品

圖3 半枝蓮薄層色譜

注：1～3顆粒;4陰性對(duì)照;5對(duì)照藥材

2.1.4 三棱薄層鑒別 取3批顆粒各5 g,加乙醇30 mL,加熱回流1 h。濾過(guò),濾液蒸干,殘?jiān)右掖? mL使溶解,作為供試品溶液。分別取處方中缺三棱的其他藥材,同法制成陰性對(duì)照溶液,取三棱標(biāo)準(zhǔn)藥材1 g,同法制成對(duì)照藥材溶液。分別吸取上述5種溶液各10 μL,點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以石油醚(60～90 ℃)—乙酸乙酯(4∶1)為展開(kāi)劑,展開(kāi),取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,晾干,置紫外光燈(365 nm)下檢視。結(jié)果顯示供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相對(duì)應(yīng)的位置上,顯相同熒光斑點(diǎn),而陰性對(duì)照無(wú)干擾[8]。見(jiàn)圖4。

圖4 三棱薄層色譜

注：1～3顆粒;4陰性對(duì)照;5對(duì)照藥材

2.2 黃芩苷含量測(cè)定

2.2.1 色譜條件 Kromasil C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動(dòng)相:甲醇—水—磷酸(43∶57∶0.2);檢測(cè)波長(zhǎng):280 nm;流速:1 mL/min;進(jìn)樣量:10 μL;柱溫:28 ℃。

2.2.2 對(duì)照品溶液制備 精密稱取黃芩苷對(duì)照品(8.0 mg)置于10 mL量瓶中,用甲醇溶解,定容至10 mL,搖勻,備用(每1 mL中含黃芩苷8.0 mg)。

2.2.3 供試品溶液制備 精密稱取顆粒0.5 g,置于100 mL錐形瓶中,加入75%甲醇溶劑50 mL,密塞,稱定重量,超聲30 min,放置至室溫,予75%甲醇補(bǔ)足失去重量,搖勻,0.45 μm微孔濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。

2.2.4 專屬性試驗(yàn) 按處方量精密稱取除黃芩以外的7味藥材,以各提取工藝及成型工藝制成顆粒,精密稱取該顆粒0.5 g,置于100 mL具塞錐形瓶中,加入75%甲醇溶劑50 mL,密塞,稱定重量,超聲30 min,放置至室溫,予75%甲醇補(bǔ)足失去重量,搖勻,0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾,取續(xù)濾液,即得陰性對(duì)照溶液。分別精密吸取供試品、陰性對(duì)照及黃芩苷對(duì)照品溶液各10 μL,按以上色譜條件檢測(cè),結(jié)果顯示供試品與黃芩苷對(duì)照品色譜峰保留時(shí)間一致,陰性無(wú)干擾。見(jiàn)圖5。

2.2.5 線性關(guān)系考察 取上述對(duì)照品溶液以2、4、6、8、10、12 μL按黃芩苷測(cè)定色譜條件檢測(cè),以黃芩苷含量為橫坐標(biāo),峰面積值為縱坐標(biāo),得回歸方程y=2 322x+386.26,r=0.999 5,表明黃芩苷在1.6～9.6 μg范圍內(nèi)進(jìn)樣量與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.2.6 中間精密度試驗(yàn) 精密吸取黃芩苷對(duì)照品溶液,重復(fù)進(jìn)樣6次,峰面積RSD=0.43%,表明精密度試驗(yàn)符合要求。

圖5 清肝化瘀顆粒中黃芩高效液相色譜

注：A供試品;B陰性對(duì)照;C黃芩苷對(duì)照品

2.2.7 供試品溶液穩(wěn)定性試驗(yàn) 制備供試品溶液,于室溫中放置,測(cè)1次/h,共8 h,RSD=0.12%,表明樣品在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.8 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批顆粒(批號(hào):2014003),分別稱取顆粒0.5 g,6次,按供試品溶液制備方法制備溶液,測(cè)得黃芩苷的峰面積并計(jì)算其含量,平均值為43.71 mg/g,RSD=0.61%,該方法的重復(fù)性分析符合要求。

2.2.9 回收率試驗(yàn) 精密量取已知含量的供試品溶液1 mL,共6份,置10 mL量瓶中,分別精密加入對(duì)照品溶液1 mL,加75%甲醇稀釋并定容,依法測(cè)定。見(jiàn)表1。

表1 黃芩苷回收率試驗(yàn)

2.2.10 樣品測(cè)定結(jié)果 取3批清肝化瘀顆粒,按2.2.1.3項(xiàng)下方法制備供試品溶液,按上述色譜條件測(cè)定,計(jì)算樣品黃芩中黃芩苷的含量分別為324.15、329.25、327.00 mg/袋。

2.3 苦參堿含量測(cè)定

2.3.1 色譜條件 Kromasil C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動(dòng)相:有機(jī)相甲醇-乙腈(1∶1);水相,0.1%氨水溶液;梯度洗脫程序:有機(jī)相,0～40 min(10%～60%),40～41 min(60%～10%),41～50 min(10%);流速為1.0 mL/min;柱溫為30 ℃;檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm;進(jìn)樣量為10 μL。

2.3.2 對(duì)照品溶液制備 精密稱取苦參堿對(duì)照品(0.55 mg)置于100 mL量瓶中,用甲醇溶解,定容至100 mL,搖勻,備用(每1 mL中含苦參堿0.055 mg)。

2.3.3 供試品溶液制備 精密稱取本品顆粒0.5 g,置100 mL錐形瓶中,加入甲醇溶劑50 mL,密塞,稱定重量,超聲30 min,放置至室溫,予甲醇補(bǔ)足失去重量,搖勻,微孔濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。

2.3.4 專屬性試驗(yàn) 按處方量精密稱取除苦參以外的7味藥材,以各提取工藝及成型工藝制成顆粒,精密稱取本品顆粒0.5 g,置100 mL錐形瓶中,加入甲醇溶劑50 mL,密塞,稱定重量,超聲30 min,放置至室溫,予甲醇補(bǔ)足失去重量,搖勻,微孔濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液,即得陰性對(duì)照溶液。分別精密吸取供試品、陰性對(duì)照及苦參堿對(duì)照品溶液各10 μL,按以上色譜條件檢測(cè),結(jié)果顯示供試品與苦參堿對(duì)照品色譜峰保留時(shí)間一致,陰性無(wú)干擾。見(jiàn)圖6。

圖6 清肝化瘀顆粒中苦參高效液相色譜

注：A供試品;B陰性對(duì)照;C苦參堿對(duì)照品

2.3.5 線性關(guān)系考察 取上述對(duì)照品溶液以2、4、6、8、10、12 μL按5.1項(xiàng)下色譜條件檢測(cè),記錄峰面積,以苦參堿含量為橫坐標(biāo),峰面積值為縱坐標(biāo),得回歸方程y=2 411.6x-14.887,r=0.999 5,表明苦參堿在0.11～0.66 μg范圍內(nèi)進(jìn)樣量與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.3.6 中間精密度試驗(yàn) 精密吸取苦參堿對(duì)照品溶液,重復(fù)進(jìn)樣6次,峰面積RSD=0.09%,表明精密度試驗(yàn)符合要求。

2.3.7 供試品溶液穩(wěn)定性試驗(yàn) 制備供試品溶液,于室溫中放置,測(cè)1次/h,共8 h,RSD=2.31%,表明樣品在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.3.8 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批顆粒(批號(hào):2014003),分別稱取顆粒0.5 g 6次,按供試品溶液制備方法制備溶液,測(cè)得苦參堿的峰面積并計(jì)算其含量,平均值為3.50 mg/g,RSD=2.20%,該方法的重復(fù)性分析符合要求。

2.3.9 回收率試驗(yàn) 精密量取已知含量的供試品溶液1 mL,共6份,置10 mL量瓶中,分別精密加入對(duì)照品溶液1 mL,加75%甲醇稀釋并定容,依法測(cè)定。見(jiàn)表2。

表2 苦參堿回收率試驗(yàn)

2.3.10 樣品測(cè)定測(cè)定 取3批清肝化瘀顆粒,按2.2.2.3項(xiàng)下方法制備供試品溶液,按上述色譜條件測(cè)定,計(jì)算樣品苦參中苦參堿的含量分別為26.86、25.52、26.43 mg/袋。

3 討論

3.1 薄層鑒別條件篩選 黃芩、三棱的薄層鑒別方法主要參照《中華人民共和國(guó)藥典》(2010版)(以下簡(jiǎn)稱《藥典》)中黃芩、三棱項(xiàng)下方法,各斑點(diǎn)顯示清晰,重現(xiàn)性好,操作簡(jiǎn)易?？鄥⒈予b別采用藥典方法時(shí)苦參堿斑點(diǎn)顯示不清晰,耗時(shí)較長(zhǎng),工藝復(fù)雜,經(jīng)參考相關(guān)文獻(xiàn)[9-13],采取本文中方法,其展開(kāi)系統(tǒng)樣品的相容性、分離效果均較好,Rf值適中,薄層板對(duì)應(yīng)部位苦參堿斑點(diǎn)清晰,呈紅棕色,陰性無(wú)干擾,該鑒別條件簡(jiǎn)單易行,重現(xiàn)性好。半枝蓮[14-15]采用本文方法斑點(diǎn)清晰,可有效鑒別。白術(shù)、莪術(shù)、白花蛇舌草、甘草4味中藥經(jīng)《藥典》(2010版)及其他文獻(xiàn)方法,鑒別結(jié)果欠佳,背景通道干擾明顯,斑點(diǎn)未能清晰分離,該4味中藥薄層色譜尚在進(jìn)一步研究中。

3.2 含量測(cè)定研究 方中君藥為黃芩、苦參,兩藥均具有清熱解毒祛濕的功效,與病機(jī)相符,其主要成分分別為黃芩苷、苦參堿,本研究主要測(cè)定兩者的含量。黃芩苷含量測(cè)定時(shí),首先選用《藥典》高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定,即流動(dòng)相:甲醇—水—磷酸(47∶53∶0.2),檢測(cè)波長(zhǎng):280 nm,流速:1 mL/min,進(jìn)樣量:10 μL,由于復(fù)方中成分復(fù)雜,結(jié)果顯示黃芩苷色譜峰與其他峰有部分重疊,為減少其他峰的干擾,經(jīng)文獻(xiàn)研究[16-23],調(diào)整流動(dòng)比較例為甲醇—水—磷酸(43∶57∶0.2),其他條件不變,所得結(jié)果黃芩苷色譜峰峰型對(duì)稱,與雜質(zhì)峰分離度良好,系統(tǒng)適用性考察符合要求,陰性樣品無(wú)干擾?？鄥A含量測(cè)定時(shí)[24-30],試驗(yàn)考察了甲醇-水,乙腈-水,甲醇-0.1%氨水,乙腈-0.1%氨水等不同的流動(dòng)相體系,苦參堿分離不理想,最終選擇流動(dòng)相:有機(jī)相:甲醇-乙腈(1∶1),水相:0.1%氨水溶液,梯度洗脫程序:有機(jī)相,0～40 min(10%～60%),40～41 min(60%～10%),41～50 min(10%),流速為1.0 mL/min,柱溫為30 ℃,檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm,進(jìn)樣量為20 μL,結(jié)果顯示苦參堿峰型及分離度均較好,經(jīng)相關(guān)方法學(xué)考察各指標(biāo)均符合藥典要求,且陰性對(duì)照無(wú)干擾,可滿足清肝化瘀顆?？鄥A含量測(cè)定。

本研究對(duì)清肝化瘀顆粒中黃芩、苦參、半枝蓮、三棱4味中藥進(jìn)行了定性鑒別,所選方法簡(jiǎn)單易行,重現(xiàn)性好,陰性對(duì)照無(wú)干擾;并對(duì)方中君藥黃芩、苦參的主要有效成分進(jìn)行了含量測(cè)定,其方法學(xué)均符合《藥典》要求,所建立方法可用于清肝化瘀顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制。

[1]姚樹(shù)坤,殷飛,王娜.清肝化瘀方藥對(duì)原發(fā)性肝癌患者的療效及對(duì)細(xì)胞免疫功能的影響[J].臨床薈萃,2006,21(18):1300-1302.

[2]王永中,姚樹(shù)坤,李智崗,等.清肝化瘀口服液對(duì)肝細(xì)胞癌介入治療后血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及環(huán)氧合酶2表達(dá)的影響[J].臨床薈萃,2010,25(22):1951-1954,1958.

[3]王永中,姚樹(shù)坤,高立明,等.清肝化瘀口服液對(duì)原發(fā)性肝癌介入治療后免疫功能影響的臨床研究[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2008,28(8):770-772.

[4]殷飛,姚樹(shù)坤,吳新滿,等.清肝化瘀方對(duì)大鼠肝癌血管形成的影響[J].中藥藥理與臨床,2005,21(1):29-32.

[5]賀云妹,殷飛,姚樹(shù)坤.清肝化瘀方藥含藥血清對(duì)肝癌SMMC-7721細(xì)胞基因組學(xué)影響[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2011,34(12):843-846.

[6]楊志云,姚樹(shù)坤,殷飛,等.清肝化瘀方對(duì)大鼠肝癌前病變模型Notch信號(hào)系統(tǒng)的影響[J].中醫(yī)雜志,2006,47(12):933-935.

[7]楊志云,姚樹(shù)坤,殷飛,等.清肝化瘀方藥對(duì)大鼠肝癌前病變中卵圓細(xì)胞表型的影響[J].癌變·畸變·突變,2006,18(6):450-454.

[8]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典.一部[S].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010.

[9]杜華碧,王葉茗.三白草洗劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2014,10(3):33-36.

[10]李萬(wàn)紅.寧心膠囊薄層色譜鑒別[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志,2010,17(8):40-41.

[11]談靜,方芳,曾倩,等.婦康洗劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中藥與臨床,2014,5(2):48-52.

[12]陳錫欣,黃榮,劉怡,等.兩種含苦參中成藥中主要黃酮類成分定性鑒別方法研究[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2015,11(20):34-37.

[13]何紹映,覃志高.對(duì)苦參片薄層鑒別若干問(wèn)題探討[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2016,12(15):47-48.

[14]劉雅敏,王晨平,蘇鵬,等.蓮白消癌丸定性定量研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2010,16(3):48-50.

[15]張淑瑜,徐建江,于燕莉,等.復(fù)方漢防己顆粒中野黃芩苷的定性鑒別和含量測(cè)定[J].藥學(xué)實(shí)踐雜志,2016,34(3):245-248.

[16]楊志軍,楊秀娟,耿廣琴,等.HPLC同時(shí)測(cè)定甘肅不同產(chǎn)地黃芩及不同炮制品中黃芩苷、黃芩素及漢黃芩素的含量[J].中醫(yī)研究,2015,28(9):72-75.

[17]張小波.芙蓉散質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合外科雜志,2015,21(5):485-488.

[18]孫芳,景霞,朱明媚.HPLC法測(cè)定抗601合劑中黃芩苷的含量[J].中國(guó)藥師,2015,18(12):2180-2182.

[19]馮春景,侯佳寧,劉皈陽(yáng),等.HPLC法同時(shí)測(cè)定肝血管瘤活血膠囊中梔子苷和黃芩苷的含量[J].中國(guó)藥師,2016,19(4):772-774.

[20]孫艷濤.HPLC雙波長(zhǎng)法同時(shí)測(cè)定消石利膽膠囊中芍藥苷、橙皮苷、黃芩苷和大黃酚的含量[J].中國(guó)藥師,2016,19(4):801-803.

[21]陳旭,田明.柴胡桂姜顆粒中黃芩苷含量測(cè)定方法研究[J].中國(guó)執(zhí)業(yè)藥師,2016,13(11):27-30.

[22]郗洋,張熙潔,劉曉紅,等.HPLC同時(shí)測(cè)定清胃黃連丸5種有效成分的含量[J].中藥材,2016,39(6):1347-1349.

[23]張松濤.HPLC法測(cè)定石黃清火丸中黃芩苷的含量[J].中醫(yī)臨床研究,2016,8(1):32-33.

[24]張智軍,崔華,馬久太.HPLC法測(cè)定膚疾洗劑中苦參堿的含量[J].世界中醫(yī)藥,2012,7(5):457-459.

[25]趙鳳春,李浩,陳兩綿,等.苦參提取物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國(guó)中藥雜志,2015,40(2):245-250.

[26]周俊,彭翠香,范茜茜,等.益母婦寧膠囊中苦參堿、氧化苦參堿的含量測(cè)定[J].湖北中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2015,17(3):32-35.

[27]牛天增,喬玉峰,李明花,等.苦參及其制劑中生物堿成分測(cè)定方法研究進(jìn)展[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2015,11(19):56-59.

[28]張為,譚璐,張廣求,等.高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定參菊洗劑中苦參堿和蛇床子素的含量[J].西北藥學(xué)雜志,2016,31(1):40-42.

[29]黃正德,林如文,劉小平.高效液相色譜法測(cè)定苦參堿醇質(zhì)體溫敏凝膠中苦參堿含量[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2016,35(5):521-523.

[30]薛建文,林華,黃興振.高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定口疳吹藥中苦參堿和氧化苦參堿的含量[J].中國(guó)藥物經(jīng)濟(jì)學(xué),2016,11(4):20-22.

StudyonQualityStandardofQingganHuayuGranule

Wu Tong1, Zhang Qiaoli2, Yao Shukun3

(1BeijingDitanHospitalAffiliatedtoCapitalMedicalUniversity,Beijing100015,China; 2BeijingHepingliHospital,Beijing100013,China; 3China-JapanFriendshipHospital,Beijing100029,China)

Objective:To establish a quality-control method for Qinggan Huayu Granule.MethodsTLC (Thin Layer Chromatography) was adopted to identify Radix Scutellariae, Radix Sophorae Flavescentis, Scutellaria barbata, zedoary etc. The main content of baicalin and matrine in the principal drug Radix Scutellariae, Radix Sophorae Flavescentis are determined by HPLC (high performance liquid chromatography) method.ResultsIdentification method of the TLC about Radix Scutellariae, Radix Sophorae Flavescentis, Scutellaria barbata, zedoary etc in granules was established. Under the selected conditions of HPLC, an identification method for baicalin and matrine in granules was established and the methodology complies with the requirements of Chinese Pharmacopeia.ConclusionThe identification and quantitative determination method is simple, accurate and reproducible, which can be applied to the quality control of Qinggan Huayu Granule.

Qinggan Huayu Granule; TLC; Baicalin; Matrine；Quality standard

國(guó)家重大新藥創(chuàng)制專項(xiàng)課題(2012ZX09103201-021)——清肝化瘀膠囊治療原發(fā)性肝癌的候選藥物研究

吳桐(1982.02—),男,博士,主治醫(yī)師,研究方向:中西醫(yī)結(jié)合防治肝病研究,E-mail:wut1982@126.com

姚樹(shù)坤(1957.11—),男,博士,教授,博士研究生導(dǎo)師,中日友好醫(yī)院副院長(zhǎng),研究方向:中西醫(yī)結(jié)合防治消化病研究,E-mail:yaoshukun6@aliyun.com

R284.1

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2017.10.046

(2016-07-12收稿 責(zé)任編輯：王明)