吳梁安，張宗輝，楊杰，吳茂林，王興，吳飛飛，張亞梅，王加林，郭明

（浙江蕭山醫(yī)院，浙江 杭州 311201）

急性冠脈綜合征患者IL-12和IL-18血漿水平的臨床分析

吳梁安，張宗輝，楊杰，吳茂林，王興，吳飛飛，張亞梅，王加林，郭明*

（浙江蕭山醫(yī)院，浙江 杭州 311201）

目的探討急性冠脈綜合征患者IL-12和IL-18的血漿水平及其臨床意義。方法采用ELISA方法測(cè)定急性冠脈綜合征（ACS組）和穩(wěn)定性心絞痛（SAP組）和對(duì)照組各70例患者血漿中IL-12和IL-18的水平，并進(jìn)行比較。結(jié)果血漿IL-12水平，ACS組與SAP組均明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；血漿IL-18水平，ACS組與SAP組均明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；ACS組與SAP組組間比較，血漿IL-12和IL-18水平均有明顯差異（P＜0.05）。結(jié)論IL-12和IL-18可能參與了冠狀動(dòng)脈粥樣硬化病變的病理生理過程，炎性細(xì)胞因子水平的增高促進(jìn)了動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定性，可能是促使ACS發(fā)生的機(jī)制之一。

IL-12；IL-18；急性冠脈綜合征；細(xì)胞因子

急性冠脈綜合征（ACS）的病理生理機(jī)制實(shí)質(zhì)是血管內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)損傷因子的一系列炎癥和纖維增生反應(yīng)。斑塊內(nèi)的炎癥可以導(dǎo)致斑塊表面纖維帽變薄，最終斑塊破裂及血栓形成。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，一些細(xì)胞因子 （IL-1、IL-6）和腫瘤壞死因子（TNF-α）在血管內(nèi)的炎癥和免疫反應(yīng)中起著重要的介導(dǎo)作用，與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展有一定的關(guān)系[1]。細(xì)胞因子IL-12、IL-18是重要的炎性反應(yīng)因子，具有多種生物學(xué)功能，如誘導(dǎo)IFN-γ，促進(jìn)IL-1、TNF-α等促炎因子的產(chǎn)生。目前關(guān)于IL-12和IL-18在冠脈粥樣硬化方面的研究仍較少。本文通過檢測(cè)IL-l8、IL-12在ACS患者外周血血漿中的表達(dá)，從分子免疫水平探討細(xì)胞因子與ACS的關(guān)系，以進(jìn)一步闡述ACS的發(fā)病機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年5月～2015年9月在本院診治的急性冠脈綜合征患者（ACS組），穩(wěn)定型心絞痛患者（SAP組）和體檢人群（對(duì)照組）各70例。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）ACS組和SAP組分別符合急性冠脈綜合征或穩(wěn)定型心絞痛診斷標(biāo)準(zhǔn)[2-3]：均按照美國(guó)心臟病學(xué)會(huì)（ACC）、美國(guó)心臟病協(xié)會(huì)（AHA）在2000年制定的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷。（2）年齡20～75歲，性別不限；（3）簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：入院前2個(gè)月內(nèi)服用過抗炎和調(diào)脂藥物、他汀類藥物過敏者、孕婦和哺乳期婦女、自身免疫性疾病、肝腎功能不全、嚴(yán)重心功能不全或心肌梗死以及其他器質(zhì)性心臟病、惡性腫瘤等病史者。三組的一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），詳見表 1。

表1 三組一般資料比較

1.2 方法 試劑盒購(gòu)自美國(guó)R&D公司，實(shí)驗(yàn)步驟按照說明書操作。三組均在清晨空腹抽外周靜脈血，靜置 2～3 小時(shí)，3000r／min 離心 15 分鐘，吸取上層血漿保存于-80℃冰箱，用于IL-18、IL-12血漿濃度的檢測(cè)（ELISA法）。比較三組IL-18、IL-12血漿濃度。采用氧化酶法、沉淀法及免疫濁度法分別檢測(cè) TG、TC、LDL-C、HDL-C 的濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 血脂比較 三組 TG、TC、LDL-C、HDL-C方面差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），詳見表2。

表2 三組血脂指標(biāo)比較（±s，mmol/L）

表2 三組血脂指標(biāo)比較（±s，mmol/L）

組別 n T G T C L D L-C H D L-C A C S 組 7 0 2.0 3±1.2 7 5.2 5±2.0 1 3.3 8±1.2 3 0.9 5±0.2 6 S A P 組 7 0 1.9 8±1.0 5 5.0 7±1.8 3 3.1 7±1.1 9 0.9 7±0.1 9對(duì)照組 7 0 1.8 7±0.9 2 4.8 7±1.9 2 2.9 4±1.0 5 1.0 3±0.2 2

2.2 IL-12和IL-18血漿水平 血漿IL-12水平，ACS組與SAP組均明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；血漿 IL-18 水平，ACS 組與 SAP組均明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.01）；ACS組與SAP組組間比較，血漿IL-12和IL-18水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），詳見表3。

表3 三組IL-12和IL-18血漿水平比較（±s，pg/mL）

表3 三組IL-12和IL-18血漿水平比較（±s，pg/mL）

與對(duì)照組比較**P＜0.01，與SAP組比較△P＜0.05

組別 n I L-1 2 I L-1 8 A C S 組 7 0 6 5.4 6±4.0 4**△ 2 4 2.9 0±2 9.7 9**△S A P 組 7 0 4 6.4 0±4.1 3** 1 4 0.9 0±3 7.2 3**對(duì)照組 7 0 2 9.7 0±2.1 5 9 9.1 8±1 6.5 3

3 討論

ACS實(shí)質(zhì)上是一個(gè)慢性炎癥的急性惡化過程。研究發(fā)現(xiàn)，炎性細(xì)胞因子參與了冠脈斑塊的炎癥反應(yīng)，在ACS中起到了啟動(dòng)和促進(jìn)的作用[4]。本文結(jié)果顯示，細(xì)胞因子IL-18、IL-12在ACS組和SAP組外周血的血漿中存在高水平表達(dá)，并且在組織損傷更重的ACS組中升高更為顯著（P＜0.05），提示IL-12和IL-18可能參與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的炎癥反應(yīng)，并參與促進(jìn)ACS的發(fā)展。

IL-12是APC細(xì)胞（抗原提呈細(xì)胞）分泌表達(dá)的一種細(xì)胞因子，其生物學(xué)功能也多種多樣，其最主要的生物學(xué)活性是調(diào)節(jié)Th1和Th2細(xì)胞間的平衡，可促進(jìn)Th1反應(yīng)，誘導(dǎo)分泌IFN-γ和TNF-α等炎性因子的表達(dá)，增強(qiáng)細(xì)胞免疫應(yīng)答，對(duì)免疫反應(yīng)、抗感染及抗腫瘤等過程有很重要的作用。IL-18是Th1反應(yīng)的輔助因子，主要由活化的巨噬細(xì)胞和肝臟枯否細(xì)胞產(chǎn)生，具有多種生物學(xué)效應(yīng)，如增強(qiáng)NK細(xì)胞細(xì)胞毒作用，促進(jìn)T細(xì)胞增殖，以及誘導(dǎo)產(chǎn)生IFN-γ等[5]。IL-18能強(qiáng)烈誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞產(chǎn)生γ-干擾素，促進(jìn)腫瘤壞死因子和白細(xì)胞介素-1等炎性因子的表達(dá)[6]。IL-12和IL-18有許多類似的生物學(xué)活性。有研究表明在誘導(dǎo)IFN-γ和Th1反應(yīng)上，兩者具有相互協(xié)同作用，也能使相應(yīng)的受體表達(dá)增強(qiáng)，剛分離出的T細(xì)胞不能表達(dá)IL-18Rα，亦不能對(duì)IL-18的刺激產(chǎn)生應(yīng)答，但予以IL-12刺激后，則開始表達(dá)IL-18Rα，并且對(duì)IL-18產(chǎn)生應(yīng)答。有研究顯示，IL-18可使Th1細(xì)胞表達(dá)IL-12Rβ2增強(qiáng)[7]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，在IL-12和IL-18基因敲除的小鼠中，NK細(xì)胞的活性及Th1細(xì)胞的反應(yīng)均明顯下降[8]，IL-18基因敲除的小鼠可以延緩動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程[9]，同時(shí)還顯示IL-18在慢性心衰患者外周血的血漿中存在高表達(dá)現(xiàn)象。

總之，IL-18、IL-12在免疫反應(yīng)中起著重要作用，提示炎性細(xì)胞因子水平的增高促進(jìn)了動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定性，可能是促使ACS發(fā)生的機(jī)制之一；但對(duì)于IL-12和IL-18參與ACS發(fā)展進(jìn)程的確切分子機(jī)制有待于進(jìn)一步的研究以闡明。

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