王曙光

（江蘇省豐縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 徐州 221700）

·診斷技術(shù)·

溶血標(biāo)本對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響及校正方法

王曙光

（江蘇省豐縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 徐州 221700）

目的 探討不同溶血標(biāo)本對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的影響，尋求溶血干擾一些生化項(xiàng)目校正方法。方法 對(duì)未溶血血清標(biāo)本和不同溶血程度樣本進(jìn)行K+、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、肌酸激酶（CK）、Na+、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、α-羥丁酸脫氫酶（HBDH）、乳酸脫氫酶（LDH）、總蛋白（TP）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-c）、葡萄糖（GLU）、尿素（UREA）、肌酐（Cr），測(cè)定，根據(jù)測(cè)定結(jié)果采用血清Hb濃度進(jìn)行比較分析，用回歸方程進(jìn)行校正。結(jié)果 標(biāo)本溶血后血清中的K+、AST、CK、CK-MB、HBDH、LDH、TP、的測(cè)定值明顯高于未溶血血清標(biāo)本的測(cè)定值；而標(biāo)本Na+的測(cè)定值降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；溶血前后TG、HDL-C、GLU、UREA、Cr結(jié)果差異不明顯。生化指標(biāo)K+、AST、CK、Na+CK-MB、HBDH、LDH、TP、的溶血前后測(cè)定變化值與血清血紅蛋白（Hb）濃度增加值的相關(guān)系數(shù)分別為：0.988、0.989、0.985、-0.990、0.977、0.992、0.991、0.960，對(duì)應(yīng)回歸方程計(jì)算結(jié)果分別是YK+=1.860X+0.186、YAST=0.747X-0.628、YCK=0.109X-0.01、YNa+=-0.228+0.2579、YCK-MB=0.081X-1.837、YHBDH=0.001X-0.121、YLDH=0.018+0.257、YTP=0.266X-1.822。結(jié)論 溶血可導(dǎo)致多項(xiàng)生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果明顯改變并與Hb濃度有相關(guān)性，利用Hb濃度可有效地對(duì)結(jié)果進(jìn)行校正

溶血；生化檢驗(yàn)結(jié)果；校正方法

溶血是造成臨床生化檢測(cè)出現(xiàn)偏差的干擾因素之一，經(jīng)常用到且難以避免，對(duì)臨床化學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果的影響已有不少報(bào)道[1，2，3]，但是因?yàn)槿苎潭扔兴煌?，溶血?duì)于不同項(xiàng)目的影響達(dá)到什么程度，又如何去糾正，近年來成為我們關(guān)心的重點(diǎn)，我科采用血清血紅蛋白濃度的方法對(duì)于溶血標(biāo)本數(shù)據(jù)進(jìn)行了糾正，然后利用回歸分析消除數(shù)據(jù)的偏差，取得了理想的效果，保證了結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2014年11月在我院健康體檢者30例，所有人員均于早晨空腹抽血，用真空采血管抽取靜脈血兩支，每支試管3 ml，其中一管為未溶血血清標(biāo)本管，離心制備血清；另一管用竹簽以不同力度不同時(shí)間攪動(dòng)制備成溶血程度不同的血清標(biāo)本。

1.2 儀器及試劑

希森美康XT-2000i五分類全自動(dòng)血球計(jì)數(shù)儀及配套試劑；日立7600全自動(dòng)生化分析儀及美康試劑；K+、Na+采用南京攀事達(dá)電子儀器有限公司生產(chǎn)的PSD-16B型直接離子選擇電極法電解質(zhì)分析儀，并用公司配套試劑。

1.3 方法

（1）用日立7600全自動(dòng)生化分析儀及美康試劑測(cè)定對(duì)未溶血血清標(biāo)本和不同溶血程度血清標(biāo)本測(cè)定并記錄檢驗(yàn)結(jié)果。檢測(cè)項(xiàng)目?jī)?nèi)容包括葡萄糖（GLU）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、甘油三脂（TG）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-c）、乳酸脫氫酶（LDH）、α-羥丁酸脫氫酶（HBDH）、總蛋白（TP）、尿素（UREA）、肌酐（Cr），使用PSD-16B型電解質(zhì)分析儀測(cè)定 K+、Na+。（2）使用希森美康五分類血球全自動(dòng)分析儀及配套試劑測(cè)定未溶血血清標(biāo)本及不同程度溶血血清標(biāo)本Hb濃度。（3）測(cè)定項(xiàng)目溶血結(jié)果變化值（△X）等于用生化分析儀及電解質(zhì)分析儀測(cè)量溶血前后標(biāo)本測(cè)定值之差；血清血紅蛋白濃度變化值（△Hb）等于用血球計(jì)數(shù)儀檢測(cè)溶血前后標(biāo)本測(cè)定值之差；然后根據(jù)結(jié)果采用血清Hb濃度進(jìn)行比較分析，用回歸方程進(jìn)行校正。

2 結(jié) 果

2.1 溶血前、溶血后生化檢驗(yàn)結(jié)果

30例血液標(biāo)本溶血后血清中的K+、AST、CK、CKMB、HBDH、LDH、TP的測(cè)定值與未溶血血清標(biāo)本的測(cè)定值有顯著差異；而Na+的測(cè)定值與溶血后降低（P＜0.05），差異也顯著（P＜0.05）；溶血前后TG、HDL-C、GLU、UREA、Cr結(jié)果差異不明顯，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）見表1。

表1 溶血前、溶血后生化檢驗(yàn)結(jié)果（±s）

表1 溶血前、溶血后生化檢驗(yàn)結(jié)果（±s）

項(xiàng)目 未溶血標(biāo)本 溶血標(biāo)本 P AST（U/L） 30.3±15.4 58.1±18.5 ＜0.05 CK（U/L） 102.7±46.3 158.6±60.5 ＜0.05 CK-MB（U/L） 14.9±5.01 29.6±7.1 ＜0.05 LDH（U/L） 151.3±20.8 325.1±25.6 ＜0.05 HBDH（U/L） 144.6±56.3 300.0±23.1 ＜0.05 TP（g/L） 70.5±5.6 76.0±6.9 ＜0.05 Cr（umol/L） 70.5±5.67 80.0±12.5 ＞0.05 HDL-c（mmol/L） 1.35±0.41 1.39±0.40 ＞0.05 GLU（mmol/L） 4.75±1.56 4.70±1.51 ＞0.05 UREA（mmol/L） 5.01±1.55 5.00±1.54 ＞0.05 TG（mmol/L） 1.52±0.55 1.55±0.50 ＞0.05 K+（mmol/L） 3.98±1.03 6.25±1.84 ＜0.05 Na+（mmol/L） 140.2±5.65 123.5±5.84 ＜0.05

2.2 血清Hb濃度變化值與相應(yīng)生化指標(biāo)溶血變化值

Hb與30例不同溶血標(biāo)本血清中的AST、CK、CK-MB、 LDH、HBDH、TP、K+、的測(cè)定變化值對(duì)應(yīng)正相關(guān)，與鈉離子的測(cè)定變化值負(fù)相關(guān)。見表2。

表2 血清Hb濃度變化值與相應(yīng)生化指標(biāo)溶血變化值

2.3 血清Hb濃度變化值與相應(yīng)生化指標(biāo)溶血變化值相關(guān)性

對(duì)血清Hb濃度變化值與相應(yīng)生化指標(biāo)溶血變化值相關(guān)性進(jìn)行回歸分析，生化指標(biāo)K+、AST、CK、Na+CK-MB、HBDH、LDH、TP、的溶血前后測(cè)定變化值與血清血紅蛋白（Hb）濃度增加值的相關(guān)系數(shù)分別為：0.988、0.989、0.985、-0.990、0.977、0.992、0.991、0.960，對(duì)應(yīng)回歸方程計(jì)算結(jié)果分別是YK+=1.860X+0.186、YAST=0.747X-0.628、YCK=0.109X-0.01、YNa+=-0.228+0.2579、YCK-MB=0.081X-1.837、YHBDH=0.001X-0.121、YLDH=0.018+0.257、YTP=0.266X-1.822。

3 討 論

溶血是紅細(xì)胞破裂，血紅蛋白從紅細(xì)胞中溢出的現(xiàn)象，由于一些物質(zhì)在紅細(xì)胞內(nèi)外含量有差異，一旦紅細(xì)胞破裂，其細(xì)胞內(nèi)的成分進(jìn)入血清或血漿，造成血液中的分析物濃度改變。本文所說的主要是指臨床生化檢驗(yàn)溶血標(biāo)本中所需要解決的問題，方法是檢測(cè)血清或血漿中的血紅蛋白是否超過300 mg。

AST、LDH、HBDH、K+在紅細(xì)胞內(nèi)的濃度比血漿高22～160倍，當(dāng)血液標(biāo)本發(fā)生溶血后AST、LDH、HBDH、K+就會(huì)轉(zhuǎn)移到血清中引起結(jié)果偏高，影響臨床診斷。雖然紅細(xì)胞中不含CK，但含有大量AK，AK能催化ADP直接轉(zhuǎn)化成ATP，使得CK活性假性增高[9]。臨床上CK-MB的含量隨著CK增多而升高，在溶血后受到AK的影響也升高。溶血后產(chǎn)生的血紅蛋白與雙縮尿試劑反應(yīng)，產(chǎn)生的復(fù)合物與TP與雙縮脲試劑相結(jié)合可使540 nm的吸光度增加，導(dǎo)致總蛋白假性偏高。紅細(xì)胞內(nèi)液Na+濃度為16.0 mmol/L而紅細(xì)胞外液為140.0 mmol/L，當(dāng)細(xì)胞內(nèi)液隨著紅細(xì)胞破壞進(jìn)入血清中，致血清體積增加，對(duì)血清鈉離子有稀釋作用而降低。也有部分生化項(xiàng)目受標(biāo)本溶血影響不大，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示溶血前后TG、HDL、GLU、UREA、Cr結(jié)果差異不明顯。對(duì)血清Hb濃度變化值與溶血后生化指標(biāo)K+、AST、CK、Na+CK-MB、HBDH、LDH、TP、的溶血前后測(cè)定變化值與血清血紅蛋白（Hb）濃度增加值的相關(guān)系數(shù)分別為：0.988、0.989、0.985、-0.990、0.977、0.992、0.991、0.960，對(duì)應(yīng)回歸方程計(jì)算結(jié)果分別是YK+=1.860X+0.186、YAST=0.747X-0.628、YCK=0.109X-0.01、 YNa+=-0.228+0.2579、YCK-MB=0.081X-1.837、 YHBDH=0.001X-0.121、YLDH=0.018+0.257、YTP=0.266X-1.822.

發(fā)現(xiàn)標(biāo)本溶血后應(yīng)立即采取響應(yīng)補(bǔ)救措施，首選重新采集標(biāo)本，對(duì)于臨床上不能或不容易重采標(biāo)本者應(yīng)對(duì)輕中度溶血標(biāo)本結(jié)果進(jìn)行校正，校正效果較好，對(duì)于嚴(yán)重溶血標(biāo)本，利用血清△Hb值校正容易受影響的生化項(xiàng)目也有一定的臨床作用。

[1] 楊振東,姚文思.標(biāo)本溶血對(duì)臨床常規(guī)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響及對(duì)策[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥,2011,6(26):4-5.

[2] 郭金秀.探析溶血對(duì)生化檢驗(yàn)準(zhǔn)確性的影響及糾正方法[J].中國(guó)繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育,2015,7(4):159-160.

[3] 陰斌霞,王香玲,趙麗華,等.溶血對(duì)生化檢驗(yàn)準(zhǔn)確性的影響及糾正[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,22(6),25-29.

本文編輯：吳玲麗

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ISSN.2095-8242.2017.31.6053.02