● 胡雷 呂瑞雪 文春蓉 何逸鵬 梁筱靈

1000例父母血常規(guī)與新生兒攜帶地貧基因相關(guān)性研究

● 胡雷 呂瑞雪 文春蓉 何逸鵬 梁筱靈

目的：旨在探討父母紅細(xì)胞參數(shù)對判斷新生兒是否攜帶地中海貧血基因的應(yīng)用價值；預(yù)防重型地中海貧血嬰兒出生，減少出生缺陷。方法：收集來我院檢查的1000名孕婦及丈夫的紅細(xì)胞參數(shù)，參數(shù)未在正常參考范圍內(nèi)的標(biāo)本對其新生兒進(jìn)行地貧基因分析，判斷基因型。結(jié)果：從1000對夫婦中收集到1601份血樣本，女1002份、男599份；其中女性血常規(guī)紅細(xì)胞參數(shù)異常有88例，檢出陽性率為8.8%、男性血常規(guī)紅細(xì)胞參數(shù)異常有16例，檢出陽性率為2.7%、夫妻紅細(xì)胞參數(shù)同為異常的有2對；基因篩查102名新生兒，74名為地貧基因攜帶者，紅細(xì)胞參數(shù)異常與基因篩查符合率為72.5%。結(jié)論:篩查父母血常規(guī)是發(fā)現(xiàn)疑似攜帶地貧基因胎兒的重要手段，方法可靠，準(zhǔn)確性強(qiáng)，能有效的避免重型地中海貧血嬰兒出生，優(yōu)化生育。

地中海貧血；血常規(guī)；地貧基因型；新生兒

珠蛋白生成障礙性貧血原名地中海貧血又稱海洋性貧血，是一組遺傳性溶血性貧血疾病。由于遺傳的基因缺陷致使血紅蛋白中一種或一種以上珠蛋白鏈合成缺如或不足所導(dǎo)致的貧血或病理狀態(tài)。正常人自父母雙方各繼承2個α珠蛋白基因合成足夠的α珠蛋白鏈；自父母雙方各繼承1個β珠蛋白基因合成足夠的β珠蛋白鏈，由于珠蛋白基因的缺失或點突變，肽鏈合成障礙導(dǎo)致發(fā)病。地中海貧血在臨床上根據(jù)病情的輕重可分為4型：輕型、靜止型、中間型以及重型；其中輕型和靜止型的地中海貧血基因攜帶者和常人無異，一般只有在家族病史中或基因檢測才能發(fā)現(xiàn)；輕型和靜止型地中海貧血無須特殊治療，中間型和重型地中海貧血現(xiàn)今能采取輸血、去鐵治療、脾切除、造血干細(xì)胞移植、基因活化來治療。

血常規(guī)檢查是最基本的血液學(xué)檢查項目，臨床上紅細(xì)胞平均體積（MCV）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量（MCH）都是地貧篩查的重要指標(biāo)【1】。做好婚前、產(chǎn)前、新生兒三大人群，預(yù)防重型地貧嬰兒的出生成為關(guān)鍵，本課題收集到貴州省婦幼保健院檢查的1000對夫婦血常規(guī)檢測報告，紅細(xì)胞參數(shù)異常的父母對其新生兒進(jìn)行高通量基因測序檢測，判斷地貧基因型。

1 材料與方法

1.1 研究對象

來我院檢查的1000對夫婦及其新生兒。

1.2 研究方法

由護(hù)士采集父母的1ML靜脈血，以乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2）抗凝。血細(xì)胞分析：使用法國ABX血細(xì)胞分析儀，試劑為原廠配套專用試劑，試驗嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）進(jìn)行。每次實驗之前都做質(zhì)控，在質(zhì)控范圍內(nèi)才進(jìn)行標(biāo)本的檢測?；驒z測：為驗證初篩的準(zhǔn)確性及符合率，所有血常規(guī)篩查陽性父母的新生兒使用高通量測序技術(shù)進(jìn)行基因檢測，以明確基因攜帶情況，研究檢驗結(jié)果來評價通過父母血常規(guī)判斷新生兒攜帶地貧基因的準(zhǔn)確性。

1.3 紅細(xì)胞參數(shù)陽性篩查截斷值

主要以MCH、MCV、HB作為判斷標(biāo)準(zhǔn)；MCH（紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量）參考范圍27～34pg 、MCV（紅細(xì)胞平均體積）參考范圍80～94fl，HB（血紅蛋白濃度）參考范圍120～160g/L,斷值的截取參考儀器參考范圍，當(dāng)數(shù)值低于參考范圍時，判斷認(rèn)為血常規(guī)篩查陽性，進(jìn)行下一步基因測序檢測。

2 結(jié)果

表1 血常規(guī)篩查結(jié)果

女性血常規(guī)紅細(xì)胞參數(shù)異常有88例，檢出率為8.8%、男性血常規(guī)紅細(xì)胞參數(shù)異常有16例，檢出率為2.7%、夫妻血常規(guī)紅細(xì)胞參數(shù)同時陽性有2對；基因篩查102名新生兒，74名為地貧基因攜帶者，血篩與基因篩查符合率為72.5%

3 統(tǒng)計學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計，計數(shù)采用t檢驗，P＜0.05數(shù)據(jù)有意義。

4 討論

地中海貧血以地中海沿岸國家何東南亞各國多見，在我國，廣東、廣西、海南等省區(qū)發(fā)病率較高，北方則少見。目前在中國約有重型和中間型地中海貧血患者30萬人，還有3000萬名地中海貧血基因攜帶者【2】；由于地中海貧血基因是常染色體隱性遺傳，若夫妻兩人是同型地中海貧血基因攜帶者，那么每次懷孕，孩子有1/4的概率為正常，1/2的概率為地貧基因攜帶者，還有1/4的概率為重型地中海貧血患者；地中海貧血是典型的小細(xì)胞低色素性貧血，MCV降低，目前地中海貧血國際上還沒有有效的治療方法，因此做好婚前檢查以及產(chǎn)前地貧篩查，及時避免患兒的出生，尤為重要，這也是得到國際公認(rèn)的預(yù)防地中海貧血，優(yōu)生優(yōu)育系列的措施。

地中海貧血分為靜止性、輕型、中間型和重型地中海貧血，重型患兒出生數(shù)日即出現(xiàn)貧血、肝脾腫大進(jìn)行性加重，黃疸，并有發(fā)育不良，其特殊表現(xiàn)最典型的是臀狀頭，長骨可骨折。骨骼改變是骨髓造血功能亢進(jìn)、骨髓勝變寬、皮質(zhì)變薄所致。少數(shù)患者在肋骨及脊椎之間發(fā)生胸腔腫塊，亦可見膽石癥、下肢潰瘍。常見并發(fā)癥有急性心包炎、繼發(fā)性脾功能亢進(jìn)、繼發(fā)性血色病，根據(jù)臨床表型很容易判斷；中間型患者表現(xiàn)為輕度至中度貧血，患者大多可存活至成年；而靜止性和輕型地中海貧血基因攜帶者和健康人在臨床變現(xiàn)上無差異，一般需要分子生物學(xué)和遺傳學(xué)才能檢測出來。目前分子生物學(xué)技術(shù)尚不能廣泛應(yīng)用于各級醫(yī)院，尤其是基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)，而血常規(guī)檢查是每個醫(yī)院的重要檢驗手段，必不可少，能從血常規(guī)檢查中首先篩查出一部分疑似地中?；驍y帶者的病人，能有效的減輕患者的負(fù)擔(dān)，因此能簡便、廉價、有效的幫助我們進(jìn)行地中海貧血篩查工作的血常規(guī)檢測方法值得我們向全國推廣，不僅能減輕病人的負(fù)擔(dān)，也能使醫(yī)院的工作更加效率，能更好的為病人服務(wù)，具有積極的現(xiàn)實意義。

本研究的1000對夫妻，總計1601個標(biāo)本中，血常規(guī)紅細(xì)胞參數(shù)異常共有104例，其中女性88例、男性16例，其中有夫妻同時紅細(xì)胞參數(shù)異常的有2對，進(jìn)行地貧基因檢測新生兒共102名，攜帶地貧基因的有74名，符合率為72.5%，由于實驗對象因為某些原因只采集到父母雙親其中一方的血常規(guī)檢測數(shù)據(jù)，所以該符合率只是根據(jù)統(tǒng)計數(shù)據(jù)計算得出，基因檢測所做的是地貧基因的測序，不排除剩余的27.5%中有缺鐵性貧血的患兒，也不排除血常規(guī)篩查存在假陰性的可能，但不可否認(rèn)血常規(guī)篩查在地貧基因篩查過程中能幫助我們快速縮小疑似地貧基因攜帶者的范圍，具有一定的準(zhǔn)確性，節(jié)省時間和資源，給病人帶來便利，因此做好預(yù)防，在婚檢、產(chǎn)檢中把好關(guān)口，就能有效的降低地貧重型患兒的出生率，給家庭和社會避免不必要的負(fù)擔(dān)。未來我們需要加大地中海貧血基因?qū)嶒炄藛T的設(shè)備的投入，重點培養(yǎng)實驗人員的技能能力，倡導(dǎo)醫(yī)生、護(hù)士學(xué)習(xí)相關(guān)知識，為社會的優(yōu)生優(yōu)育事業(yè)奠定基石，同時提供高質(zhì)量的醫(yī)療技術(shù)服務(wù)，滿足人們的須求，耐心為不了解的人群解釋問題、解決問題；盡可能的讓地貧基因攜帶者都能正確、清楚地了解相關(guān)知識，這樣才能使我們地貧基因診斷和地貧產(chǎn)前診斷工作能規(guī)范、有效開展；同時廣泛開展地貧防控宣傳教育工作、開展婚前、孕前、孕期地中地中海貧血篩查、醫(yī)生根據(jù)檢測結(jié)果提出醫(yī)學(xué)建議 ，嚴(yán)防重型地中海貧血胎兒出生，爭取讓更多的人更為充分地、更為全面地了解相關(guān)知識,加大宣傳力度,不斷拓寬地中海貧血產(chǎn)前篩查范圍,促使大家能夠自發(fā)地參與到地中海貧血預(yù)防的活動中,這樣會大大降低新生患兒的出生率。

（作者單位：貴陽市婦幼保健院檢驗科）

[1] 蔡稔, 梁昕, 潘莉珍等. 血液學(xué)指標(biāo)在育齡人群地貧篩查中的診斷價值[J]. 中國優(yōu)生與遺傳雜志, 2003, 11(1):129-132.

[2] 羅玉芳, 文紅萍. MCV、MCH篩查妊娠合并輕型地中海貧血的價值[J]. 右江醫(yī)學(xué), 2006, 34(6):607-608.

[3] 鄒漢良, 梁漢彰, 趙毅等. 紅細(xì)胞計數(shù)與平均紅細(xì)胞體積比值在地中海貧血篩查診斷的價值[J]. 中華實用診斷與治療雜志, 2009,23(5):465-466.

[4]孔義華, 戴志敏, 劉杰麟等. 黔東南州育齡夫婦地中海貧血篩查[J]. 貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報, 2016, 41(7):855-857.

，梁筱靈，貴陽市婦幼保健院血液內(nèi)科。

項目名稱：高通量測序方法對新生兒臍血地中海貧血基因的篩查研究