■ 王維 （廈門科環(huán)海洋生物科技有限公司）

10月了解弧菌很重要！多事之秋謹(jǐn)防弧菌感染，一文教你如何處理防控

■ 王維 （廈門科環(huán)海洋生物科技有限公司）

6～10月是水產(chǎn)養(yǎng)殖的發(fā)病高峰期，水產(chǎn)人基本都應(yīng)該知道。同樣的，10月也是對蝦養(yǎng)殖的又一個(gè)關(guān)鍵時(shí)期。此時(shí)的晝夜溫差更大，更容易影響水生微生物的活動(dòng)繁殖和種群更替，水質(zhì)更不容易穩(wěn)定和調(diào)理，污染物更易積聚也更難處理，而且水溫已經(jīng)降到適合細(xì)菌繁殖的范圍內(nèi)，更容易感染養(yǎng)殖動(dòng)物使其發(fā)病。這些對于剛剛從白露那里劫后余生的池塘而言，又是一個(gè)多事之秋。

這個(gè)時(shí)期無論是南方的秋綿雨，長江區(qū)域突如其來的寒流，還是10月底華中、華東區(qū)域的霜后暖，亦或是冬棚養(yǎng)殖的初期階段都容易出現(xiàn)一個(gè)問題，就是弧菌感染。說起弧菌，這個(gè)概念一開始是從細(xì)菌病里分支出來的。其實(shí)直到2008年、2009年時(shí)對蝦養(yǎng)殖還基本都只是在提細(xì)菌病而已，后來慢慢才有弧菌一說，當(dāng)然那時(shí)開始就有了各種處理方案，其實(shí)大家都還是用常規(guī)細(xì)菌病的通用方法來處理的。而效果確實(shí)也差不了多少。很多時(shí)候都可以得到很好的解決，所以一直有好幾年都沒人刻意的留意弧菌會(huì)有多厲害。直到2012年之后，弧菌病越來越厲害，漸漸成為對蝦養(yǎng)殖界一個(gè)主流的發(fā)病原因之一，人們這才開始去針對性的檢測、研究以及防控。當(dāng)然，回顧以前，也有一種可能是以往發(fā)病厲害的那些病原很可能也是弧菌，只是當(dāng)時(shí)的檢測手段研究方向不對而已，這些現(xiàn)在我們就不得而知了，我們只需要知道的是，現(xiàn)在有這個(gè)條件，而且是非常簡易便捷廉價(jià)的手段能檢測常規(guī)的一些高致病性弧菌，從而給我們的處理防控提供及時(shí)的參考。

1 弧菌簡介

副溶血弧菌的綠色菌落

感染副溶血弧菌后紅肝紅腸

黑鰓

紅腿

弧菌感染導(dǎo)致的紅肝

弧菌感染紅腳紅腿

弧菌感染引發(fā)急性細(xì)菌性腸炎

黃色菌落

黃腿

弧菌，是一類尾有鞭毛弧形菌體的革蘭氏陰性細(xì)菌的統(tǒng)稱。大多數(shù)為好氧菌（這一點(diǎn)是經(jīng)過筆者公司實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)的。至于很多報(bào)道有說是厭氧菌這是常識(shí)性錯(cuò)誤，雖然一些種類是兼性厭氧的，但基本都可以在有氧條件下繁殖），部分種類有嗜鹽性。大多數(shù)弧菌代時(shí)不超過10min，所以其繁殖快（感染到發(fā)病相隔時(shí)間短）變異快（易產(chǎn)生耐藥性）。

對蝦養(yǎng)殖常見的弧菌有：副溶血弧菌、溶藻弧菌、霍亂弧菌、鰻弧菌、哈維氏弧菌等。有報(bào)道說坎貝氏弧菌、河弧菌和創(chuàng)傷弧菌也能感染對蝦，但未經(jīng)研究考證一般說得很少。

1.1 副溶血弧菌

適溫范圍5～47℃，最適30～37℃；pH值適應(yīng)范圍7.4～8.5；嗜鹽性，適鹽范圍20‰～30‰，5‰以下影響生長；嚴(yán)格好氧。在TCBS（瓊脂弧菌培養(yǎng)基）上能形成直徑2～3mm的綠色粘滑菌落（接種環(huán)輕觸似口香糖質(zhì)感）。

染病對蝦呈現(xiàn)體表暗紅色（紅體、紅腿、紅尾、紅腸、紅肝）；肝臟腫大發(fā)黃，嚴(yán)重的出現(xiàn)萎縮（一般是慢性感染或小蝦）；慢性感染的出現(xiàn)空腸空胃，爬邊，趴坑，瀕死的蝦出現(xiàn)離群水面漫游；不到5cm的小蝦會(huì)出現(xiàn)肝臟萎縮，體色有發(fā)白（也有發(fā)紅，但不會(huì)紅得太明顯），甲殼發(fā)軟，拖便甚至白便。慢性感染的會(huì)在放苗60d甚至40d之內(nèi)出現(xiàn)白便癥狀，即使處理好轉(zhuǎn)也會(huì)很長時(shí)間吃不起料來，大大影響生長速度。感染時(shí)間稍長的也很難發(fā)現(xiàn)前期癥狀（因?yàn)槎际莻€(gè)別蝦爬邊，即使有漫游的也很快會(huì)下沉死亡，并被其它蝦分食），一旦看到死亡，往往已經(jīng)進(jìn)入發(fā)病中后期，并且常伴隨肝臟萎縮、停食等嚴(yán)重癥狀，即使用藥對癥，也要相當(dāng)長一段時(shí)間才能處理好，這個(gè)漫長的時(shí)間，非?？简?yàn)養(yǎng)殖者或技術(shù)員的耐心和經(jīng)驗(yàn)，所以大多數(shù)的養(yǎng)殖者最終都是以處理失敗或放棄治療而告終。而急性感染的池塘從出現(xiàn)發(fā)病到整塘嚴(yán)重死亡只有2～3d時(shí)間，若要處理，必須在一看到發(fā)病就開始用藥，稍一拖延或用藥不對，就會(huì)加重病情，還不如不搞直接賣蝦。另外，副溶血弧菌常會(huì)繼發(fā)或并發(fā)一些病毒?。ㄓ绕涫侨醵拘偷穆圆《静。?，從而導(dǎo)致大批量的死亡（死亡很大程度是因?yàn)楦比苎【亩玖τ绊懀?/p>

1.2 溶藻弧菌

適溫范圍17～42℃，最適25～32℃；pH值適應(yīng)范圍6～8.5；嗜鹽性，適鹽范圍5‰～50‰，淡水不生長；兼性厭氧，在有氧條件下也能生長；在TCBS上形成直徑2～3mm以上的黃色粘稠、光滑濕潤、邊緣整齊、圓形凸起的菌落，且接種環(huán)不易挑取。

溶藻弧菌最早是從藻類里分離發(fā)現(xiàn)的，可與大多數(shù)藻類共生，對于環(huán)境而言，其少量存在時(shí)算是一種有益的微生物，有穩(wěn)定藻相水質(zhì)的作用，只有過多繁殖才會(huì)出現(xiàn)致病性，所以是海水養(yǎng)殖動(dòng)物常見的條件致病菌之一。此病夏季多發(fā)，對蝦從幼體（幼體菌血?。┑酱笪r（褐斑、細(xì)菌性爛鰓黑鰓、細(xì)菌性紅體、細(xì)菌性白斑）都能感染。感染對蝦呈現(xiàn)爛鰓、紅體、空腸空胃、肝臟腫大、甲殼潰爛等癥狀。此病是蝦苗幼體階段的主要疾病之一，對對蝦幼苗的存活率影響非常大。而到了養(yǎng)殖期間尤其是養(yǎng)殖中后期此病的發(fā)病幾率也非常高，尤其是海水養(yǎng)殖區(qū)域?qū)ξr爛黑鰓、對蝦紅腿病、細(xì)菌性白斑、褐斑病等都是常見高發(fā)疾病。既然是條件致病菌，在處理這個(gè)弧菌時(shí)就不能簡單的殺菌消毒，而是必須同時(shí)調(diào)理環(huán)境，若是忽視了環(huán)境的改善，即使短時(shí)間殺滅控制住弧菌的感染和蔓延，隨后也會(huì)很快復(fù)發(fā)。另外，有經(jīng)驗(yàn)的養(yǎng)殖者應(yīng)該都知道，溶藻弧菌引發(fā)的如爛鰓、黑鰓、白斑、褐斑都是復(fù)發(fā)率非常高的富貴病。這些無論是環(huán)境改良、營養(yǎng)調(diào)理還是弧菌防控都必須方方面面做到位，否則不但病癥很難治愈，而且即使暫時(shí)搞好疾病也會(huì)很快就卷土重來。

1.3 霍亂弧菌

適溫范圍20～45℃，最適37℃左右；pH值適應(yīng)范圍6.0～9.0；廣鹽性，適鹽范圍0‰～45‰；兼性厭氧（有氧條件一樣可以感染）；在TCBS上形成直徑2～3mm以上的黃色菌落；霍亂弧菌的一些種類可以發(fā)光。

霍亂弧菌（水產(chǎn)尤其是對蝦上主要是非01型霍亂弧菌）是非常普遍的一種弧菌，處理起來也見效甚微，筆者看來這有點(diǎn)類似大腸桿菌，一定數(shù)量之內(nèi)與對蝦屬于共生關(guān)系，只有在一定條件下，繁殖過多時(shí)才會(huì)引發(fā)病變。發(fā)病對蝦水面漫游、眼球腫脹（嚴(yán)重的直接潰爛至眼柄）。瀕死對蝦肌肉白濁。此病單獨(dú)致死的往往是很大規(guī)格的對蝦，本身死亡率并不大，往往是繼發(fā)或并發(fā)其他病菌致死。近幾年有發(fā)現(xiàn)一些小蝦若是感染過多霍亂弧菌會(huì)誘發(fā)嚴(yán)重的慢性腸炎，時(shí)間一長會(huì)引發(fā)拖便、水腸、細(xì)腸、甚至2個(gè)月內(nèi)就會(huì)出現(xiàn)白便甚至肝臟萎縮，是這幾年苗期偷死、白便、慢大的主要病因之一。

1.4 鰻弧菌

適溫范圍4～37℃，最適24～35℃；pH值適應(yīng)范圍5～11；嗜鹽性，適鹽范圍5‰～50‰，淡水不生長；兼性厭氧（在有氧條件下也能感染）；在TCBS上形成1～2mm以上的黃色菌落。

感染對蝦癥狀與副溶血弧菌非常類似：體紅、腿紅、尾紅、紅腸等。病蝦會(huì)出現(xiàn)有明顯的身體消瘦，頭胸甲心臟附近常出現(xiàn)白濁或發(fā)紅，嚴(yán)重的或長期感染的蝦還會(huì)出現(xiàn)爛鰓或黃黑鰓，腸道出現(xiàn)黃色粘液。鰻弧菌很少單獨(dú)感染對蝦，常是對蝦先感染或攜帶病毒（如IHHNV、白斑病毒、紅體病毒等），體質(zhì)下降之后環(huán)境又達(dá)到鰻弧菌繁殖的條件時(shí)才大量繁殖令對蝦致死，所以常會(huì)檢測到某種病毒和鰻弧菌同時(shí)存在，這也是鰻弧菌發(fā)病起來死亡非常嚴(yán)重的原因之一。所以想要治療，哪怕再及時(shí)也只是一句空話，因?yàn)闀r(shí)間上根本來不及，只能靠預(yù)防。

1.5 哈維氏弧菌

適溫范圍16～37℃，最適27～32℃；pH值適應(yīng)范圍6.0～9.5；嗜鹽性，適鹽范圍12‰～30‰，淡水不生長；好氧性；在TCBS上形成1～2mm以上的黃色菌落。

哈維氏弧菌一般感染苗種階段的對蝦，除非池塘環(huán)境較差、水源問題較大或體質(zhì)很差的小蝦（200條以內(nèi)）才會(huì)感染。所以一般養(yǎng)殖池塘里較少遇到，而大多數(shù)都是在苗廠或淡化暫養(yǎng)池中出現(xiàn)，是蝦苗的熒光病的菌原之一。染病小蝦游動(dòng)彈跳乏力，漫游于水體中下層，最終也是死于池底（也是早期偷死癥的病原之一）。哈維氏弧菌是典型的發(fā)光細(xì)菌之一，嚴(yán)重感染或?yàn)l死的小蝦會(huì)出現(xiàn)身體發(fā)光（一開始是口器、鰓部和生殖腺部位發(fā)光，之后慢慢進(jìn)入體內(nèi)尤其是頭胸部，最后蔓延全身）的現(xiàn)象。要注意，哈維氏弧菌很容易對抗生素產(chǎn)生耐藥性，在有抗生素污染的水源區(qū)域，一旦感染就很難控制。

2 弧菌的檢測

養(yǎng)殖一線一般通過TCBS（瓊脂弧菌培養(yǎng)基，即硫代硫酸鹽檸檬酸鹽膽鹽蔗糖瓊脂培養(yǎng)基）來做弧菌培養(yǎng)檢測。其配方成份為：酵母粉5g/L、蛋白胨10g/L、硫代硫酸鈉10g/L、枸櫞酸鈉10g/L、牛膽粉5g/L、牛膽酸鈉3g/L、蔗糖20g/L、氯化鈉10g/L、檸檬酸鐵1g/L、麝香草酚蘭0.04g/L、瓊脂15g/L。培養(yǎng)基pH值為8.6±0.1，保存溫度為25℃。做弧菌培養(yǎng)前稱取8.9g，煮沸溶解于100mL蒸餾水中, 冷至60℃左右時(shí)，傾入無菌培養(yǎng)皿，自然冷卻即可得到一個(gè)弧菌培養(yǎng)皿。檢測時(shí)用接種環(huán)沾取樣品在TCBS上劃線，之后放入恒溫箱，設(shè)定32～35℃，培養(yǎng)12～36h即可得到檢測結(jié)果。

TCBS上常見有3種顏色，分別為：綠色——副溶血弧菌、河流弧菌；黃色——溶藻弧菌、霍亂弧菌、哈維弧菌、鰻弧菌；黑色——腸桿菌科（如沙門氏菌。因其能代謝產(chǎn)生的硫化物能和培養(yǎng)基里的鐵離子反應(yīng)生成黑色物質(zhì)）。

而TCBS上出現(xiàn)的菌落數(shù)量也可以定量的說明，樣品大概的弧菌的數(shù)量。

3 弧菌的處理

處理弧菌一直是這幾年來對蝦養(yǎng)殖界廣泛研究討論的話題，方法不是沒有，而是非常多，以前處理細(xì)菌感染的絕大多數(shù)方法其實(shí)都是有一定作用的。只是現(xiàn)在的養(yǎng)殖中存在幾點(diǎn)問題，如下文所示。

大多數(shù)傳統(tǒng)殺菌手法都是好壞通殺，這會(huì)導(dǎo)致本來就惡化的環(huán)境（絕大多數(shù)的弧菌都是在環(huán)境很差時(shí)才爆發(fā)的）進(jìn)一步變差，往往是弧菌還沒完全殺滅，魚蝦就已經(jīng)頂不住環(huán)境壓力。

很多時(shí)候即使暫時(shí)可把多數(shù)弧菌給殺滅，依然會(huì)因?yàn)閻毫拥沫h(huán)境導(dǎo)致有益菌群很難正常繁殖起來，占據(jù)優(yōu)勢，而缺乏有益菌群的水體環(huán)境，時(shí)間一長又會(huì)被弧菌慢慢繁殖起來占據(jù)優(yōu)勢。所以弧菌的復(fù)發(fā)率是相當(dāng)高。

由于很多弧菌代時(shí)很短，繁殖速度極快，很容易對藥物產(chǎn)生耐藥性，所以往往之前用得有效的藥物，第2次或第3次使用時(shí)就效果減半甚至完全沒有藥效。因此處理弧菌得經(jīng)常各種藥物交替使用。

綜合上述幾點(diǎn)，我們一般處理弧菌都最好用化學(xué)類、中藥、和生物制劑搭配使用，比如三黃散（或大黃）配聚維酮碘；過硫配過碳酸鈉；蛭弧菌配乳酸菌。這3個(gè)搭配方案算是現(xiàn)在市場上用起來比較好用的。若是嚴(yán)重感染的甚至可以先連續(xù)用2～3次大黃+碘，配合晚上干撒過硫+過碳（顆粒粉劑都可，最好是各一半），這樣搭配處理2～3d后再用蛭弧菌配乳酸菌或芽孢或光合菌殺菌的同時(shí)補(bǔ)充水體有益菌相。若是懷疑體內(nèi)感染弧菌的（紅腸、紅肝明顯），可以拌喂中藥+聚維酮碘1～2d，之后拌喂蛭弧菌+芽孢或乳酸菌2～3d。注意內(nèi)服無論哪個(gè)搭配方案都不能太長時(shí)間，超過3d就可能會(huì)影響腸胃正常消化吸收功能。

4 注意

弧菌有強(qiáng)毒株和弱毒株之分，多數(shù)弧菌在一定數(shù)量以內(nèi)其實(shí)是不會(huì)對宿主有太大危害的。但若是環(huán)境變了，哪怕是弱毒株也可能慢慢復(fù)壯或是突變?yōu)閺?qiáng)毒株。而這才是弧菌真正的危險(xiǎn)之處。所以哪怕是完全正常的養(yǎng)殖情況下，若是檢測發(fā)現(xiàn)弧菌超標(biāo)也得適當(dāng)?shù)挠盟幙刂埔幌?，以免任其繁殖蔓延突然什么時(shí)候變異成為強(qiáng)毒株就為時(shí)晚矣。同時(shí)即使用藥后明顯減少弧菌數(shù)量或發(fā)病癥狀得到緩解，也不能忽視環(huán)境的調(diào)理。處理弧菌問題，其實(shí)最根本的還是對環(huán)境的恢復(fù)正常。

很多弧菌都是好氧的，即使兼性厭氧的弧菌絕大多數(shù)也能在有氧條件下感染對蝦。這也就是為何我們經(jīng)?？吹酵撬盟n的池塘更易爆發(fā)弧菌病的原因。

多數(shù)弧菌的代謝產(chǎn)物在水溫超過38℃時(shí)毒性會(huì)大大降低。但在一定水溫范圍內(nèi)（20～37℃），弧菌的毒性是隨著水溫升高而升高的，而且高溫能提高弧菌的易感性，大大縮短發(fā)病時(shí)間。

環(huán)境的污染會(huì)促進(jìn)弧菌的變異和抗藥性的產(chǎn)生（如霍亂弧菌、哈維氏弧菌）。同時(shí)水體的富營養(yǎng)化程度越大越能促使細(xì)菌、病毒并發(fā)感染的幾率升高。

弧菌能在池底淤泥、泥沙、池壁上附著潛伏很長時(shí)間，甚至一些能頂過清塘消毒這些相對惡劣的環(huán)境。所以有發(fā)過弧菌的池塘或養(yǎng)殖區(qū)域，清塘消毒必須嚴(yán)格操作，用藥得加大劑量，同時(shí)用藥處理的時(shí)間也得留夠。

弧菌檢測培養(yǎng)時(shí)間不能超過48h，否則顏色會(huì)變化，甚至是相反，如霍亂弧菌時(shí)間長了就會(huì)漸漸變成藍(lán)綠色，而副溶血弧菌的綠色也會(huì)慢慢變淺到看不清是綠色。

很多弧菌是廣鹽性的，并非人們以前認(rèn)為的必須要有一定鹽度才繁殖。而事實(shí)證明，近幾年很多淡水區(qū)域已經(jīng)越來越頻繁的開始爆發(fā)嚴(yán)重的弧菌疾?。ㄈ缃衲甑柠}城、贛榆、湖南）。作為養(yǎng)殖者這一點(diǎn)不得不防。

相對甲殼類而言弧菌也并非一無是處，弧菌在幾丁質(zhì)物質(zhì)循環(huán)里扮演非常重要且?guī)缀跏遣豢商娲慕巧?。幾乎所有的弧菌都能產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶，能幫助自然界處理成千上萬的甲殼、皮毛等廢物。對于機(jī)體而言也正是因?yàn)榛【倪@些代謝產(chǎn)物能促進(jìn)一些營養(yǎng)物質(zhì)的分解和消化。所以和大腸桿菌一樣，弧菌也不能完全殺滅干凈。