●孟明敏

ABO血型正反定型不符1例原因分析

●孟明敏

患者，女，24歲，孕1產(chǎn)1。2016年12月24日入院生產(chǎn)，于2016年12月26日產(chǎn)下一子，產(chǎn)后血紅蛋白為79g/L，伴陰道出血，24日入院時(shí)，檢驗(yàn)科采用玻片法檢驗(yàn)血型報(bào)為O,RH(+)，26日患者輸血復(fù)查血型玻片法為O,RH(+)，微柱凝膠卡式法為正反定型不符，正定型為O型，反定型為B型，RH(+)，經(jīng)多種檢測方法檢測，及疑難血型的鑒定，考慮患者為B亞型。為患者輸血安全故建議患者輸注O型洗滌紅細(xì)胞2u，輸注后患者未出現(xiàn)不良反應(yīng)，報(bào)道如下。

ABO血型；ABO亞型

1 血型血清學(xué)檢查

1.1 試劑與方法

抗A、抗B試劑（河北醫(yī)科大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程中心），抗D（上海市血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司）抗A+B（上海市血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司），抗H（上海市血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司）采用直接血凝法。血型血清學(xué)方法見文獻(xiàn)[1]。ABO、RhD血型定型檢測卡（長春博訊生物技術(shù)有限責(zé)任公司）。人源血清抗A、抗B實(shí)驗(yàn)室自制。

1.2 卡式血型鑒定

患者血型為正定型為O型，反定型為B型，RH(+)。采用ABO、RhD血型定型檢測卡（長春博訊生物技術(shù)有限責(zé)任公司）血型鑒定，用37℃生理鹽水洗滌患者RBC3次（用37-40℃生理鹽水洗滌紅細(xì)胞可去除紅細(xì)胞表面附著的導(dǎo)致紅細(xì)胞凝集的冷凝集素，可獲得可靠的正定型。），配成0.5%RBC懸液，加入正定型及Rh以及對(duì)照空中，再加分別加入兩滴患者血清于反定型孔中，離心結(jié)果為-，-，4+，-，4+，-。

1.3 玻片法血型鑒定

初篩患者血型為O，RhD(+)。采用抗A、抗B試劑（河北醫(yī)科大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程中心），抗D（上海市血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司），用37℃生理鹽水洗滌患者RBC3次（用37-40℃生理鹽水洗滌紅細(xì)胞可去除紅細(xì)胞表面附著的導(dǎo)致紅細(xì)胞凝集的冷凝集素，可獲得可靠的正定型。），配成0.5%RBC懸液，重新做ABO血型鑒定，反應(yīng)仍然和沒經(jīng)洗滌的標(biāo)本反應(yīng)結(jié)果一樣，結(jié)果為-，-，4+。

1.4 試管法特殊血型鑒定

取患者血清3ml以及生理鹽水洗滌3次的3%RBC懸液備用，血型血清學(xué)方法見文獻(xiàn)[2]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1 血型鑒定結(jié)果

1.5 吸收放散實(shí)驗(yàn)

取洗滌3次后的壓積紅細(xì)胞2ml加入標(biāo)準(zhǔn)化的人源抗B血清[3]1ml混合均勻后放置4攝氏度冰箱反應(yīng)一小時(shí)后，離心分離上清液，用4攝氏度冷鹽水洗滌紅細(xì)胞4-5次，制成壓積紅細(xì)胞2ml，加入1ml生理鹽水56攝氏度反應(yīng)15分鐘，離心取上清液備用，分別在兩個(gè)試管中加入B細(xì)胞和O細(xì)胞，然后加入上清液，離心看結(jié)果。見表1。

1.6 血型結(jié)論

處于對(duì)患者輸血安全考慮，輸血科鑒定患者血型結(jié)果為B亞型，Rh(+)。

1.7 配血試驗(yàn)

抗人球蛋白檢測法，選擇O型RH（+）洗滌紅細(xì)胞2u，與患者血樣本做交叉配血試驗(yàn)，配血主側(cè)不凝集，不溶血，配血相合，患者輸注后無不良反應(yīng)。

2 討論

因紅細(xì)胞膜抗原分布不同，ABO血型系統(tǒng)有多種亞型。ABO亞型是指屬同一血型抗原，但抗原結(jié)構(gòu)和性能或抗原位點(diǎn)數(shù)有一定差異。ABO血型系統(tǒng)中以A亞型最多見，A亞型主要有A1和A2，占全部A型血的99.9%，其他A亞型（A3、AX、AM）為數(shù)少；B亞型（B3、BM、BX）比A亞型少見。在進(jìn)行ABO血型鑒定時(shí)如只做正定型，易將亞型誤定為“O”型.對(duì)ABO亞型的準(zhǔn)確鑒定需根據(jù)紅細(xì)胞與抗A、抗A1、抗B、抗AB、抗H的凝集強(qiáng)度、血漿中是否存在抗A1、分泌型人的唾液中A，B，H物質(zhì)進(jìn)行區(qū)分[4].但部分亞型之間只表現(xiàn)為極少的血型血清學(xué)差異，紅細(xì)胞吸收放散試驗(yàn)對(duì)證實(shí)是否存在弱A或弱B抗原非常重要，常是區(qū)別各亞型的主要依據(jù).類孟買血型也表現(xiàn)為紅細(xì)胞A或B抗原缺失或弱表達(dá)，與Am，Ax，Ael，Bm，Bx等亞型相似，但類孟買血型紅細(xì)胞H抗原也缺失或弱表達(dá)，ABO亞型紅細(xì)胞H抗原則較強(qiáng).白血病患者致ABO血型抗原減弱的血型血清學(xué)特征與ABO亞型也很相似，但其導(dǎo)致血型抗原減弱的機(jī)制與亞型不同，不涉及血型基因的變異，未改變紅細(xì)胞膜表面抗原表達(dá)的本質(zhì)，隨疾病的發(fā)生而減弱，隨疾病的好轉(zhuǎn)而恢復(fù).而ABO亞型是由基因突變所致，和疾病的發(fā)生無關(guān)，并可通過家系調(diào)查或經(jīng)PCRRFLP及ABO基因測序等分子生物學(xué)方法進(jìn)行確認(rèn)。

本例B亞型患者輸入O型洗滌紅細(xì)胞2U達(dá)到了預(yù)期療效，未發(fā)生不良反應(yīng)。根據(jù)以上試劑進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。分別用卡式法，玻片法，鹽水試管法對(duì)患者血液進(jìn)行血型鑒定，ABO血型不合可引起嚴(yán)重的溶血性輸血反應(yīng)。ABO亞型患者需要輸血時(shí)，輸入相同亞型供血者的血液無疑是最理想的選擇，但由于ABO亞型的頻率極低，幾乎無法找到相同亞型供血者.而給ABO亞型受血者輸入亞型對(duì)應(yīng)正常血型的血液，有引起溶血反應(yīng)或因同種免疫產(chǎn)生同種抗體的可能。

如果將B亞型的血輸給O型的受血者，受血者就會(huì)產(chǎn)生免疫反應(yīng)，從而引起嚴(yán)重的溶血性輸血反應(yīng)。對(duì)于ABO亞型受血者，則選成分輸血，所選血液成分的血型應(yīng)以避免輸入其血漿中抗體對(duì)應(yīng)的紅細(xì)胞血型抗原及其紅細(xì)胞血型抗原對(duì)應(yīng)的抗體，并以盡量避免異型紅細(xì)胞血型抗原輸入導(dǎo)致同種免疫為原則.ABO亞型受血者輸入紅細(xì)胞時(shí)應(yīng)選擇O型，輸入血漿及冷沉淀時(shí)應(yīng)選擇AB型或亞型對(duì)應(yīng)的正常血型，但輸入血小板時(shí)只能選擇亞型對(duì)應(yīng)的正常血型，因?yàn)檩斎胙“宓耐瑫r(shí)會(huì)有較多血漿的輸入，輸O型或AB型分別可能致血漿中的抗體或血小板上抗原與受血者不相容.也就是說B亞型的人如果作為受血者，只能接受O型的洗滌紅細(xì)胞和B/AB型血漿，以及B型血小板。

（作者單位：武安市第一人民醫(yī)院）

[1]李廣,中華人民共和國衛(wèi)生部.中國輸血技術(shù)操作規(guī)程[M].天津:天津科技出版社,1997,60-62.

[2]肖星浦.輸血技術(shù)手冊(cè).[J].四川科學(xué)技術(shù)出版社,1992:95-98.

[3]張宇宏,陳晨,張獻(xiàn)清,穆士杰,李芳莉[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007(1):104-104.

[4]吳國光,邵超鵬,蘇宇清,等.輸血技術(shù)學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:148-152.