,2* ,2.廣西中醫(yī)藥研究院，廣西 南寧 50022；2.廣西中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 50022；.廣西分析測(cè)試研究中心，廣西 南寧 50022

藥物研究

壯藥紅背娘不同部位沒食子酸含量比較

梁冰1胡仁傳1蔣珍藕1,2*黃島平3賴茂祥1,2
1.廣西中醫(yī)藥研究院，廣西 南寧 530022；2.廣西中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 530022；3.廣西分析測(cè)試研究中心，廣西 南寧 530022

目的對(duì)壯藥材紅背娘不同部位的沒食子酸含量進(jìn)行比較。方法采用HPLC法對(duì)不同產(chǎn)地的紅背娘的根、莖枝、葉各部位的沒食子酸含量進(jìn)行分析。結(jié)果各部位均含有沒食子酸成分，含量高低依次為：葉>莖枝>根。結(jié)論紅背娘不同部位中沒食子酸含量差別較大，根中的含量最低，可為紅背娘的應(yīng)用及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

壯藥；紅背娘；不同部位；沒食子酸；含量比較

壯藥材紅背娘為大戟科植物紅背山麻桿Alchorneatrewioides(Benth.)Mull.Arg.的干燥全株，具有清熱利濕、散瘀止血、殺蟲止癢的功效，主治前列腺炎、痢疾、小便不利、血尿、尿路結(jié)石或炎癥，紅崩、白帶、腰腿痛、跌打腫痛；外用治外傷出血、蕁麻疹、濕疹等[1-2]。廣西壯族民間常用其治療各型肝炎。現(xiàn)代研究表明，紅背娘主要含生物堿類、酚酸類、黃酮類等成分，沒食子酸是其中的酚酸類成分之一，具有保肝護(hù)肝作用、抗腎間質(zhì)纖維化、抗氧化、鎮(zhèn)咳、抗菌等藥理活性[3-7]。

本課題組曾對(duì)紅背娘藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了較全面的研究，包括紅背娘藥材的性狀、鑒別、檢查、浸出物和沒食子酸的含量測(cè)定等，為制定壯藥材紅背娘的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。由于紅背娘藥用全株，藥用部位包括葉、莖、枝、根等，為了探究沒食子酸在紅背娘的葉、莖、枝、根中的分布情況，筆者對(duì)紅背娘藥材的根、莖、枝、葉等不同部位的沒食子酸含量進(jìn)行了比較分析，為制定更科學(xué)合理的含量限度以及臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器 Alliancee2695高效液相色譜儀(Waters)；KQ-700DV型超聲提取儀(昆山市超聲儀器有限公司)；XS205DU十萬分之一天平(METTLER TOLEDO)。

1.2 材料 沒食子酸對(duì)照品(批號(hào)110831-201204，中國(guó)食品藥品檢定研究院)；甲醇為色譜純，水為重蒸水，其余所用試劑均為分析純。

實(shí)驗(yàn)所用紅背娘藥材樣品采自廣西不同產(chǎn)地，經(jīng)廣西中醫(yī)藥研究院中藥資源研究所賴茂祥研究員鑒定為大戟科山麻桿屬植物紅背山麻桿Alchorneatrewioides(Benth.)Mull.Arg.。各樣品收集地點(diǎn)和時(shí)間見表1。

表1 紅背娘藥材樣品來源

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件和系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相：甲醇-水-磷酸溶液(6∶94∶0.2)；檢測(cè)波長(zhǎng)：273nm；柱溫：室溫；流速：0.8mL/min。將對(duì)照品溶液和供試品溶液進(jìn)樣分析。在上述色譜條件下，供試品中沒食子酸與其它雜質(zhì)達(dá)到基線分離，分離度大于1.5，理論板數(shù)按沒食子酸峰計(jì)算應(yīng)不低于3000，溶劑對(duì)沒食子酸測(cè)定不產(chǎn)生干擾。如圖1所示。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 取沒食子酸對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含30μg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備 取供試樣品粉末(過三號(hào)篩)1.0 g，精密稱定，精密加入10%甲醇溶液50 mL，稱定重量，超聲60 min，放冷，再稱定重量，用10%甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4 線性關(guān)系考察 精密稱取沒食子酸對(duì)照品(含量為89.9%)10.88mg，置25 mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL，分別置于10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別作為對(duì)照品溶液。按上述色譜條件分別進(jìn)樣10 μL測(cè)定。以進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)(X)，峰面積值為縱坐標(biāo)(Y)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為：Y=3002198X-37874 (r=0.9999)。結(jié)果表明：進(jìn)樣量在0.039～0.469 μg范圍內(nèi)，與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.5 精密度試驗(yàn) 對(duì)同一供試品溶液，按上述色譜條件，連續(xù)測(cè)定6次，測(cè)定結(jié)果的RSD為1.09%。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 對(duì)同一供試品溶液，按上述色譜條件，于0、1、2、3、12、24h分別進(jìn)樣測(cè)定，測(cè)定結(jié)果的RSD為1.11%。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 對(duì)同一批樣品，按上述擬訂的方法平行測(cè)定6份，沒食子酸平均含量為0.4806mg/g，RSD=1.52%。

2.8 加樣回收試驗(yàn) 精密稱取重復(fù)性試驗(yàn)項(xiàng)下的樣品約0.5g，平行取6份，精密稱定，分別精密加入一定量的沒食子酸對(duì)照品，按2.3項(xiàng)下方法制備供試品溶液，進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果平均加樣回收率為96.85%，RSD=1.15%。詳見表2。

2.9 樣品測(cè)定 取各供試樣品1.0g，各2份，精密稱定，按2.3項(xiàng)下制備供試品溶液，按2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定沒食子酸含量。結(jié)果見表3及圖2。

表2 沒食子酸對(duì)照品加樣回收率

表3 樣品測(cè)定結(jié)果 (n=2)

3 討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明: 紅背娘的根、莖枝、葉均含有沒食子酸，但各部位沒食子酸分布不同、含量差異較大。紅背娘藥用全株，如果同一批樣品，葉、莖枝、根的取樣比例不同，沒食子酸含量測(cè)定結(jié)果可能差異較大。因此，在對(duì)紅背娘進(jìn)行沒食子酸含量的檢測(cè)時(shí)應(yīng)盡可能保證其各部位都取有一定的量，避免因取樣時(shí)各部位比例不同而使檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)誤差。紅背娘不同部位中沒食子酸含量高低依次為：葉>莖枝>根。根中的含量最低，而根在整個(gè)植株(高1～2m的灌木)中所占的分量很少，因此，可以考慮使用地上部分入藥，保留根部不采集，有利于植株的再生長(zhǎng)、保護(hù)紅背娘藥材資源和壯藥材的可持續(xù)利用與發(fā)展。

[1]國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì)．中華本草(第四冊(cè))[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999：755-756.

[2]江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典[M].(第1版·上冊(cè)).上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1977：1005.

[3]胡玉麟．從紅背葉得到的新的美登素類腫瘤抑制劑：紅背葉素、脫氫紅背葉素和脫甲基紅背葉素[J]．國(guó)外醫(yī)學(xué)藥學(xué)分冊(cè)，1982(5)：16．

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ContentComparisononGallicAcidinDifferentPartsofZhuangMedicineHongbeiniang

LIANG Bing1HU Renchuan1JIANG Zhenou1,2﹡HUANG Daoping3LAI Maoxiang1,2

1.Guangxi Institute of Chinese Medicine and Pharmaceutical Science, Nanning 530022, China;2.Guangxi Key Laboratory of Tradtitonal Chinese Medicaine Quality Stardands, Nanning 530022, China;3.Guangxi Center for Analysis and Test Research, Nanning 530022, China

ObjectiveTo compare the contents of gallic acid in different parts of zhuang medicine Hongbeiniang.MethodsThe contents of gallic acid in roots, stem and branches，leaves of Hongbeiniang were carried out by HPLC.ResultsThe roots and stem and branches and leaves of Hongbeiniang have the gallic acid, The content of the order was the leave>the stem and branch>the root.ConclusionThe contents of gallic acid in different parts of Zhuang Medicine Hongbeiniang had big difference, the lowest content in root. This experimental result provide experimental basis for the application and the establishmend of quality standard of Hongbeiniang

Zhuang Medicine；Hongbeiniang；Different Parts；Gallic Acid；Content Comparison

R284.1

A

1007-8517(2017)17-0006-03

2017-06-28 編輯：陶希睿)

廣西中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室自主研究課題(桂中重自201413)；廣西醫(yī)療衛(wèi)生適宜技術(shù)研究與開發(fā)項(xiàng)目(S2015 55)；廣西科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(桂科重1598005-10)。

梁冰，女，本科，助理研究員，研究方向?yàn)橹胁菟庂|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究、中藥與天然藥物的基礎(chǔ)研究及中藥藥理的研究。E-mail：462712902@qq.com

蔣珍藕，女，碩士研究生，主任中藥師，研究方向?yàn)橹胁菟庨_發(fā)研究及質(zhì)量評(píng)價(jià)。E-mail：zhenoujiang@163.com