吳迪 王斌 石琳 李朋洋 周航 蔡晨

100039北京大學(xué)航天臨床醫(yī)學(xué)院，航天中心醫(yī)院心內(nèi)科(吳迪、王斌、周航、蔡晨)； 515041汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院心內(nèi)科(王斌)；100044 北京大學(xué)人民醫(yī)院心內(nèi)科(石琳)；77030 Houston，Texas Heart Institute(李朋洋)

·基礎(chǔ)研究·

Intermedin1-53通過(guò)抑制心肌細(xì)胞凋亡保護(hù)敗血癥大鼠心臟及心功能

吳迪 王斌 石琳 李朋洋 周航 蔡晨

100039北京大學(xué)航天臨床醫(yī)學(xué)院，航天中心醫(yī)院心內(nèi)科(吳迪、王斌、周航、蔡晨)； 515041汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院心內(nèi)科(王斌)；100044 北京大學(xué)人民醫(yī)院心內(nèi)科(石琳)；77030 Houston，Texas Heart Institute(李朋洋)

目的探討Intermedin1-53(IMD1-53)對(duì)敗血癥大鼠心臟的保護(hù)作用及可能的機(jī)制。方法雄性SD大鼠分成3組，對(duì)照組(8只)，敗血癥組(8只)，IMD組(6只)，監(jiān)測(cè)血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)，檢測(cè)血糖和乳酸濃度；取心臟組織做TUNEL染色，免疫印跡法檢測(cè)蛋白活化的cleaved caspase 3、Bax和Bcl-2的表達(dá)，測(cè)定IMD1-53對(duì)經(jīng)典的盲腸結(jié)扎穿刺法誘導(dǎo)敗血癥大鼠的心肌細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果敗血癥組血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)平均動(dòng)脈血壓(MABP)、左心室內(nèi)壓最大上升速率(+LVdp/dtmax)、左心室內(nèi)壓最大下降速率(-LVdp/dtmax)絕對(duì)值、左心室收縮壓(LVSP)顯著低于對(duì)照組(均為P<0.05)。TUNEL染色結(jié)果顯示敗血癥組細(xì)胞凋亡、Cleaved caspase 3蛋白表達(dá)量顯著高于對(duì)照組(均為P<0.05)，與敗血癥組相比，IMD組的上述指標(biāo)均有顯著改善(均為P<0.05)。結(jié)論IMD1-53可以保護(hù)敗血癥后期大鼠的心肌，顯著改善心功能，其機(jī)制可能是抑制心肌細(xì)胞凋亡。

Intermedin1-53； 凋亡； 敗血癥； 心功能不全

【Keywords】 Intermedin1-53; Apoptosis; Sepsis; Cardiac Insufficiency

Fundprogram：National Natural Science Foundation(81670434)

敗血癥是由致病菌侵入血液循環(huán)，生長(zhǎng)繁殖產(chǎn)生毒素引起全身性的感染，每年約有200萬(wàn)罹患者，死亡人數(shù)高達(dá)30萬(wàn)。敗血癥休克的患者后期心肌抑制發(fā)生率高達(dá)40%～50%[1]，表現(xiàn)為心室擴(kuò)大、心臟射血分?jǐn)?shù)和收縮力降低等，而且是導(dǎo)致患者死亡的重要因素[2]。

中介素/腎上腺髓質(zhì)素2(intermedin/adrenomedullin 2， IMD/ADM2)于2004年發(fā)現(xiàn)，由148個(gè)氨基酸殘基組成，其中具有主要生理活性的片段是prepro-IMD95-147，即IMD1-53。IMD1-53廣泛存在于心血管系統(tǒng)，有舒張血管及降低血壓、保護(hù)缺血再灌注心肌細(xì)胞、增加心力衰竭心肌收縮力等作用[3-5]，體內(nèi)發(fā)揮心血管保護(hù)及調(diào)節(jié)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的作用。在臨床研究中，Li等[6]發(fā)現(xiàn)血漿IMD1-53水平可以預(yù)測(cè)冠心病病情。由于IMD1-53是否對(duì)敗血癥誘導(dǎo)的心功能不全具有保護(hù)作用尚不清楚，因此本實(shí)驗(yàn)在敗血癥誘導(dǎo)的心功能不全大鼠模型上研究IMD1-53對(duì)心臟的可能作用，并初步探討其作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 主要材料

雄性SD大鼠(260±10)g由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部動(dòng)物部提供，動(dòng)物飼養(yǎng)管理實(shí)驗(yàn)操作符合《北京市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》等法規(guī)的要求。人工合成IMD1-53購(gòu)自美國(guó)鳳凰藥業(yè)公司。β-actin以及二抗(抗兔、抗鼠、抗羊)均購(gòu)自SantaCruz公司。Bax、Bcl-2、cleaved caspase 3抗體均購(gòu)自英國(guó)Abcam公司。硝酸纖維素膜購(gòu)自英國(guó)Hybond-C公司。TUNEL 試劑盒購(gòu)自羅氏公司。DAPI購(gòu)自北京索萊寶科技有限公司。血糖測(cè)試試劑盒、乳酸測(cè)試試劑盒購(gòu)自中國(guó)南京建成生物公司。Powerlab 多導(dǎo)生理記錄儀等。余為市售分析純產(chǎn)品。

1.2 大鼠分組與敗血癥模型構(gòu)建

用經(jīng)典的盲腸結(jié)扎穿刺法(cecal ligation and puncture，CLP)制作敗血癥模型[7]。24只雄性SD大鼠在標(biāo)準(zhǔn)條件下分成3組：對(duì)照組、敗血癥組、IMD組各8只。3組均術(shù)前禁食8～12 h，大鼠稱重，敗血癥組大鼠做CLP手術(shù)處理。IMD組大鼠手術(shù)流程同敗血癥組，在放入籠中前只是在右下腹腹腔注射IMD1-53(1 ml，10-7mol/L)，但是由于操作方面的原因，IMD組只有6只大鼠完成血流動(dòng)力學(xué)監(jiān)測(cè)。3組大鼠均恒溫培養(yǎng)20 h以進(jìn)入敗血癥晚期階段。

1.3 心臟功能和血壓測(cè)定

在敗血癥模型手術(shù)完成20 h后，用戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，先用肝素鹽水(500 U/ml)沖洗導(dǎo)管后經(jīng)左頸總動(dòng)脈插入左心室內(nèi)[8]，Powerlab多導(dǎo)生理記錄儀監(jiān)測(cè)血流動(dòng)力學(xué)相關(guān)指標(biāo)，取插管10 min后的穩(wěn)定參數(shù)值，抽取血液離心取上清測(cè)血糖、乳酸，然后開(kāi)胸取心臟。

1.4 TUNEL染色

將預(yù)先準(zhǔn)備好的大鼠心臟心室部分石蠟切片脫蠟，用二甲苯浸洗2次，每次5 min，用梯度乙醇(100%、95%、90%、80%、70%)各浸洗1次，每次3 min。脫蠟后，用Proteinase K工作液處理組織15～30 min，PBS漂洗2次。玻片干后，加50 μl TUNEL反應(yīng)混合液于標(biāo)本上，加蓋玻片或封口膜在濕盒中反應(yīng)37℃×1 h，PBS漂洗3次，滴加50 μl DAPI，PBS漂洗3次，5 min后在熒光顯微鏡下觀察凋亡細(xì)胞，拍照。

1.5 血糖、血乳酸測(cè)定

用定量移液器精確取血樣的上清液2 μl于EP管底部，用葡萄糖氧化酶法測(cè)定血糖值，按照南京建成血糖測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。血乳酸測(cè)定時(shí)，按步驟加入樣本、酶工作液、顯色劑，然后漩渦混勻，37℃孵育10 min接著加入終止劑終止反應(yīng)，最后530 nm波長(zhǎng)，1 cm光徑，比色。

1.6 Western blot檢測(cè)

將準(zhǔn)備好的心肌組織加入裂解液(含1 mol/L PMSF)，冰上研磨，在4℃ 1 200轉(zhuǎn)/min離心10 min，取上清，Bradford 法檢測(cè)蛋白濃度，按比例加入5X 上樣緩沖液煮樣，10% SDS-PAGE電泳，200 mA恒流電轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)膜，5%脫脂牛奶封閉，TBST洗膜3次，每次5 min；結(jié)合相應(yīng)一抗。放4℃冰箱過(guò)夜，TBST洗膜，結(jié)合相應(yīng)的二抗，室溫1 h，用ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒與硝酸纖維素膜孵育后，放入暗盒內(nèi)曝光，顯影后再定影。用Image J軟件分析條帶灰度值，以β-actin標(biāo)化，所有實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 IMD1-53改善敗血癥大鼠的一般特征

與對(duì)照組相比，敗血癥組大鼠的血乳酸含量升高至對(duì)照組的171%。與敗血癥組相比，IMD組血乳酸含量降低了24.2%(P=0.011)，與對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表1)，提示IMD1-53顯著改善了敗血癥大鼠的高乳酸血癥。敗血癥組大鼠的血糖含量降低到對(duì)照組的26.5%(P<0.05)，雖然IMD組的血糖升至敗血癥組的150%，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.062，表1)，而且仍然只有對(duì)照組的40%(P=0.001)。

表1 3組大鼠血乳酸和血糖的比較

注：與對(duì)照組比較，aP<0.05；與敗血癥組比較，bP<0.05

2.2 IMD1-53改善敗血癥大鼠的心功能

與對(duì)照組相比，敗血癥組大鼠的心功能參數(shù)MABP、+LVdp/dtmax、-LVdp/dtmax絕對(duì)值、LVSP分別下降了29.7%、31.3%、40.8%、21.6%(均為P

<0.05)。與敗血癥組相比，IMD組各項(xiàng)心功能指標(biāo)均有顯著改善，MABP上升26.6%(P=0.036)，+LVdp/dtmax上升34.3%(P=0.042)，-LVdp/dtmax絕對(duì)值上升49.1%(P=0.031)，LVSP上升26.5%(P=0.049)，且各項(xiàng)與對(duì)照組相比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P>0.05)，提示IMD1-53對(duì)敗血癥大鼠心功能不全有顯著改善作用。心率在3組的變化差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P>0.05，表2)。

2.3 IMD1-53抑制心肌細(xì)胞的凋亡

Western blot結(jié)果顯示(圖1)，相較于對(duì)照組，敗血癥組Bax蛋白水平上調(diào)223%(P=0.009)， cleaved caspase 3蛋白表達(dá)量升高375%(P=0.007)，抗凋亡蛋白Bcl-2水平下調(diào)62.1%(P=0.023)。與敗血癥組相比，IMD組Bax蛋白的表達(dá)下調(diào)45.2%(P=0.028)，Bcl-2蛋白的表達(dá)上升128%(P=0.006)，cleaved caspase 3蛋白下調(diào)30.4%(P=0.024)，且3個(gè)指標(biāo)與對(duì)照組相比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P>0.05)，提示IMD1-53抑制了敗血癥大鼠心肌細(xì)胞的凋亡。

TUNEL染色結(jié)果顯示(圖2)，與對(duì)照組相比，敗血癥組細(xì)胞凋亡率上升12倍，給予IMD1-53后心肌細(xì)胞凋亡率顯著降低且與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與Western blot結(jié)果相一致。有趣的是，凋亡的心肌細(xì)胞數(shù)量與Bcl-2/Bax的比值成反比關(guān)系，IMD組Bcl-2/Bax比值是敗血癥組的3倍(P=0.001)，而與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖1)。

DAPI染色中藍(lán)色熒光點(diǎn)是心肌細(xì)胞細(xì)胞核，細(xì)胞核定量分析對(duì)照組433±23，敗血癥組444±30，IMD組430±13，3組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。TUNEL染色中綠色熒光點(diǎn)為凋亡細(xì)胞核染色，Merged圖中箭頭所指的點(diǎn)為凋亡的心肌細(xì)胞核染色。對(duì)照組無(wú)凋亡細(xì)胞核染色，但敗血癥組的凋亡細(xì)胞核染色非常明顯，IMD組的凋亡細(xì)胞核染色非常少。

表2 3組大鼠血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)的比較

注：與對(duì)照組比較，aP<0.05；與敗血癥組比較，bP<0.05

A：電泳圖；B：Bcl-2/Bax比率；C～E：Bax、Bcl-2和cleaved caspase3表達(dá)水平灰度值量化統(tǒng)計(jì)圖。1：對(duì)照組；2：敗血癥組；3：IMD組。與對(duì)照組比較，aP<0.05；與敗血癥組比較，bP<0.05圖1 3組大鼠Bax、Bcl-2和cleaved caspase 3表達(dá)水平比較(3只)

3 討論

大鼠的敗血癥模型顯示，敗血癥早期(10 h)的表現(xiàn)是血壓無(wú)變化，但血乳酸和血糖明顯升高，血漿和心肌組織中IMD1-53均明顯升高；敗血癥晚期(合并休克)的表現(xiàn)是血壓降低，血乳酸水平明顯升高，血漿IMD1-53升高，但血糖明顯降低，心肌組織中IMD1-53明顯減少[9]。后期心肌組織中IMD1-53的減少可能與心功能不全的發(fā)生有關(guān)。在本實(shí)驗(yàn)中，敗血癥大鼠血乳酸顯著增高、血糖顯著降低，血壓較對(duì)照組明顯下降，提示敗血癥組大鼠合并休克，進(jìn)入敗血癥晚期，表明本實(shí)驗(yàn)中大鼠的敗血癥模型制作成功。進(jìn)一步進(jìn)行的血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，敗血癥組大鼠的各項(xiàng)心功能指標(biāo)出現(xiàn)明顯惡化，提示出現(xiàn)嚴(yán)重心功能不全。IMD1-53組通過(guò)腹腔注射外源性IMD1-53(1 ml，10-7mol/L)后，大鼠的心功能各項(xiàng)參數(shù)較敗血癥組明顯改善，提示心功能顯著改善，且心功能指標(biāo)與無(wú)敗血癥的對(duì)照組接近。給予IMD1-53(腹腔注射)，提示對(duì)于敗血癥引起的器官損害，IMD1-53具有改善心功能的作用。由于腹腔注射IMD1-53在敗血癥模型制作開(kāi)始時(shí)(此時(shí)還沒(méi)有發(fā)生敗血癥)，因此IMD1-53的這種作用很可能具備預(yù)防和治療的雙重作用。

在敗血癥大鼠心功能改善的同時(shí)，反映休克指標(biāo)的乳酸水平明顯下降，MABP由休克狀態(tài)基本恢復(fù)到正常水平(對(duì)照組水平)，表明IMD1-53能夠逆轉(zhuǎn)休克造成的血流動(dòng)力學(xué)障礙和代謝紊亂，改善內(nèi)環(huán)境，與心臟功能的改變一致。值得注意的是，對(duì)于敗血癥后期血糖降低的改善不明顯。在敗血癥后期，一方面，敗血癥本身可以引起血糖降低；另一方面，血糖降低又可加重?cái)⊙Y所造成的器官損害，尤其是心功能的惡化。IMD1-53明顯改善心功能，而血糖變化不明顯，提示IMD1-53可能無(wú)明顯糖調(diào)節(jié)代謝的作用。從另一方面證明，IMD1-53具有更直接的心功能保護(hù)作用、抗感染性休克的作用，而非通過(guò)改善血糖的途徑起作用。

最近的研究發(fā)現(xiàn)，在糖尿病的大鼠模型和同型半胱氨酸誘導(dǎo)的心肌纖維化模型中，IMD1-53有很好的抑制炎癥和抗細(xì)胞凋亡的作用[10-11]。敗血癥發(fā)生時(shí)，大量的炎性介質(zhì)對(duì)機(jī)體造成嚴(yán)重的損傷，細(xì)胞凋亡是敗血癥心功能障礙的一個(gè)主要原因[12]。Bcl-2與Bax是一對(duì)正負(fù)調(diào)控的凋亡蛋白，Bcl-2是抗凋亡蛋白，Bax是促凋亡蛋白，研究顯示Bcl-2/Bax比值明顯下降則表示了細(xì)胞的大量凋亡[12]。本研究中，敗血癥組的Cleaved caspase 3 和Bax蛋白的表達(dá)顯著升高，Bcl-2/Bax比值降低，而Cleaved caspase 3 和Bax蛋白的表達(dá)又可被IMD1-53抑制。進(jìn)一步用TUNEL染色分析驗(yàn)證， IMD1-53顯著抑制了心肌細(xì)胞的凋亡，其結(jié)果也與之前的Western blot結(jié)果一致。LI等[11]發(fā)現(xiàn)IMD1-53可以通過(guò)抑制心肌細(xì)胞凋亡來(lái)減少心肌缺血再灌注損傷，與本研究的結(jié)果一致。因此，推測(cè)IMD1-53改善敗血癥大鼠心功能不全的作用可能與抑制心肌細(xì)胞凋亡有關(guān)。

A：DAPI染色中藍(lán)色熒光點(diǎn)是心肌細(xì)胞細(xì)胞核，細(xì)胞核定量分析對(duì)照組433±23，敗血癥組444±30，IMD組430±13，3組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；TUNEL染色中綠色熒光點(diǎn)為凋亡細(xì)胞核染色；Merged圖中箭頭所示為凋亡的心肌細(xì)胞核染色，對(duì)照組無(wú)凋亡細(xì)胞核染色，但敗血癥組的凋亡細(xì)胞核染色非常明顯，IMD組的凋亡細(xì)胞核染色非常少；B：細(xì)胞凋亡率統(tǒng)計(jì)圖；C：細(xì)胞核定量統(tǒng)計(jì)圖。1：對(duì)照組；2：敗血癥組，3：IMD組。與對(duì)照組比較，aP<0.05；與敗血癥組比較，bP<0.05圖2 3組大鼠TUNEL染色的比較(×200，6只)

綜上所述，本研究初步證實(shí)，補(bǔ)充外源性IMD1-53可明顯改善重癥敗血癥大鼠心功能，糾正心功能不全和血流動(dòng)力學(xué)障礙，其作用機(jī)制可能與抑制心肌細(xì)胞凋亡、減輕心肌損傷有關(guān)，為治療敗血癥合并的心功能不全、逆轉(zhuǎn)休克過(guò)程提供新的思路和實(shí)驗(yàn)依據(jù)，值得進(jìn)一步探討。

利益沖突：無(wú)

[1] Rudiger A， Singer M.Mechanisms of sepsis-induced cardiacdysfunction[J].Crit Care Med， 2007， 35(6)， 1599-1608.DOI：10.1097/01.CCM.0000266683.64081.02.

[2] Vieillard-Baron A， Caille V， Charron C， et al.Actual incidence of global left ventricular hypokinesia in adult septic shock[J].Crit Care Med， 2008， 36(6)：1701-1706.DOI：10.1097/CCM.0b013e318174db05.

[3] Zhang W， Wang LJ， Xiao F， et al.Intermedin：a novel regulator for vascular remodeling and tumor vessel normalization by regulating vascular endothelial-cadherin and extracellular signal-regulated kinase[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol， 2012， 32(11)：2721-2732.DOI：10.1161/ATVBAHA.112.300185.

[4] Du QX， Yue W， Wang YY.Effect and mechanism of intermedin in acute rat cardiac ischemic injury [J].Fa Yi Xue Za Zhi， 2011， 27(3)：164-168.

[5] Du X， Cao Y， Xue P， et al.Protective effect of intermedin on myocardial cell in a rat model of severe acute pancreatitis[J].Cell Mol Biol Lett， 2011， 16(3)：462-476.DOI：10.2478/s11658-011-0020-1.

[6] Li P， Shi L， Han Y， et al.Prognostic value of plasma intermedin level in patients with non-ST-segment elevation acute coronary syndrome[J].Medicine(Baltimore)，2016，95(16)：e3422.DOI：10.1097/MD.0000000000003422.

[7] Gao M，Ha T，Zhang X，et al.The Toll-like receptor 9 ligand， CpG oligodeoxynucleotide， attenuates cardiac dysfunction in polymicrobial sepsis， involving activation of both phosphoinositide 3 kinase/Akt and extracellular-signal-related kinase signaling[J].J Infect Dis， 2013， 207(9)：1471-1479.DOI：10.1093/infdis/jit036.

[8] Zhang B，Liu Y，Zhang JS，et al.Cortistatin protects myocardium from endoplasmic reticulum stress induced apoptosis during sepsis[J].Mol Cell Endocrinol， 2015， 406：40-48.DOI：10.1016/j.mce.2015.02.016.

[9] 廖勇敢，蔣明森，劉青云，等.敗血癥休克大鼠血漿和心血管組織中Adrenomedullin與Intermedin的變化[J].中國(guó)老年保健醫(yī)學(xué)， 2007， 5(3)：13-16.DOI：10.3969/j.issn.1672-4860-B.2007.03.005.

Liao YG， Jiang MS， Liu QY， et al.The changes of plasma and cardiovascular adrenomedullin and intermedin in rats with peritonitis septicaemia shock[J].Chin J Geriatric Care， 2007， 5(3)：13-16.DOI：10.3969/j.issn.1672-4860-B.2007.03.005.

[10] Zhang JS， Hou YL， Lu WW， et al.Intermedin1-53protects against myocardial fibrosis by inhibiting endoplasmic reticulum stress and inflammation induced by homocysteine in apolipoprotein E-deficient mice[J].J Atheroscler Thromb， 2016， 23：1294-1306.DOI：10.5551/jat.34082.

[11] Li H， Bian Y， Zhang N， et al.Intermedin protects against myocardial ischemia-reperfusion injury in diabetic rats[J].Cardiovasc Diabetol， 2013， 12：91.DOI：10.5551/jat.34082.

[12] 任宏強(qiáng)， 趙利，王忠，等.復(fù)方丹參滴丸對(duì)急性心肌梗死大鼠心肌細(xì)胞凋亡和凋亡相關(guān)蛋白的影響[J].中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志，2013，21(12)：1007- 3949.

Ren HQ， Zhao L， Wang Z， et al.Effect of Compound Danshen Dripping pill on apoptosis of cardiac muscle cells and apoptosis-related gene expression in rats with acute myocardial infarction[J]， Chi J Arteriosclerosis， 2013，21(12)：1007- 3949.

Cardioprotectiveeffectsofintermedin1-53viainhibitingcardiomyocyteapoptosisinsepsisratmodels

WuDi，WangBin，ShiLin，LiPengyang，ZhouHang，CaiChen

DepartmentofCardiology，PekingUniversityAerospaceSchoolofClinicalMedicine，PekingUniversityHealthScienceCenter，Beijing100039，China(WuD，WangB，ZhouH，CaiC)；DepartmentofCardiology，theFirstAffiliatedHospitalofShantouUniversityMedicalCollege，Shantou515041，China(WangB)；DepartmentofCardiology，PekingUniversityPeople′sHospital，Beijing100044，China(ShiL)；TexasHeartInstitute，Houston77030，USA(LiPY)

WangBin，Email：wangbin_pku@126.com

ObjectiveTo investigate the cardioprotective effects of interleukin1-53(IMD1-53)and its underlying mechanism in sepsis rats.MethodsThe SD rats were randomly assigned into 3 groups：control group(n=8)，sepsis group(n=8)，and IMD group(n=6)；the effect of IMD1-53on the apoptosis of cardiomyocytes induced by classical cecal ligation was studied. The hemodynamic parameters were recorded through left common carotid catheterization，and plasma glucose and lactic acid levels were measured 20 hours after the surgery. Heart tissue was collected and subjected to TUNEL staining，and Western blotting was processed to assess the expression levels of cleaved caspase 3，Bax and Bcl2.ResultsThe hemodynamic indexes in sepsis group such as mean arterial blood pressure(MABP)，left ventricular peak rate of contraction(+LVdp/dtmax)，absolute value of left ventricular peak rate of relaxation(-LVdp/dtmax)，left ventricular systolic pressure(LVSP)were significantly lower than those in the control group(allP<0.05). TUNEL staining results showed that the apoptosis level of the cells and the expression of cleaved caspase 3 protein in sepsis group were significantly higher than those of control group(allP<0.05). Compared with sepsis group，the above indexes of IMD group were significantly improved(allP<0.05). In addition，TUNEL staining revealed lower degree of apoptosis after IMD1-53injection.ConclusionsIMD1-53may protect myocardium and cardiac function of rats with late sepsis through inhibiting cardiomyocytes apoptosis.

王斌，電子信箱：wangbin_pku@126.com

10.3969/j.issn.1007-5410.2017.05.009

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81670434)

2017-04-28)

(本文編輯：周白瑜)