柴軍紅，何婷婷，宋紅霜

(牡丹江師范學(xué)院，黑龍江 牡丹江 157012)

紅米色素抗氧化研究

柴軍紅，何婷婷，宋紅霜

(牡丹江師范學(xué)院，黑龍江 牡丹江 157012)

以紅米為原料，采用醇提法從紅米中提取色素，并對(duì)其進(jìn)行體外抗氧化活性的研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：色素對(duì)超氧自由基的最高清除率達(dá)81.13%；·OH自由基的清除率達(dá)到71.43%；對(duì)DPPH自由基的清除率達(dá)到93.40%。其紅米色素具有良好的抗氧化能力，具有好的開(kāi)發(fā)前景。

紅米；色素；抗氧化

Abstract:The red rice was raw material, The pigment was extracted from red rice by alcohol extraction. In vitro antioxidant systems, The antioxidant activity of extract on red rice pigment are discussed. The results showed that: The scavenging rate of superoxide radical was 81.13%,DPPH was 93.40%,hydroxyl radical was 71.43%.in a word, Red rice pigment has a certain antioxidant capacities and a bright future.

Keywords:Red rice; Pigment;Antioxidant

世界稻種資源中有色稻種主要分布于中國(guó)、緬甸、印度等亞洲國(guó)家，紅米稻種質(zhì)是我國(guó)珍稀的糧食作物之一，占據(jù)有色稻種首位[1]。紅米中富含花色苷類物質(zhì)，諸如：二甲花翠素、矢車菊素-3-葡萄糖苷[2-3]，天然色素具有“保健功能性、天然營(yíng)養(yǎng)、安全性高”等特點(diǎn)，可以廣泛用作食品添加劑，同時(shí)天然色素還具有治療、預(yù)防人體的多種疾病的功效[4-5]，因而紅米色素的研究具有良好的理論和應(yīng)用價(jià)值。 人體內(nèi)95%以上的自由基都是氧自由基，這些自由基削弱細(xì)胞的抵抗力、破壞核酸及染色體、干擾細(xì)胞的新陳代謝、加速機(jī)體的衰老、破壞蛋白質(zhì)和酶、導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化等[6]，可直接或間接引起慢性疾病及衰老效應(yīng)。所以適量的補(bǔ)充抗氧化食品可以清除自由基延緩衰老。目前植物中的抗氧化成分主要包括多酚類、活性多糖、還原性維生素類、皂苷類、萜類、鞣質(zhì)類等化合物都具有一定的抗氧化作用[7]。紅米中含有多酚、維生素類、多糖類等，所以是潛在抗氧化活性物質(zhì)提取原料。

1 材料與方法

1.1 主要試劑

紅米：購(gòu)買于牡丹江大潤(rùn)發(fā)超市。

Tris、DPPH(優(yōu)級(jí)純，Sigma)，鄰苯三酚、硫酸亞鐵(AR，天津博迪化工股份有限公司)，硫酸鐵銨(AR，天津科密歐化學(xué)試劑廠)，無(wú)水乙醇(AR，天津進(jìn)豐化工有限公司)，鄰二氮雜菲(AR，沈陽(yáng)科拓化工有限公司)，L-抗壞血酸(AR, 天津永大化工有限公司)，雙氧水、鹽酸(AR，哈爾濱試劑廠)等。

1.2 主要儀器

YS08粉碎機(jī)(北京燕山正德機(jī)械設(shè)備有限公司)；T6紫外可見(jiàn)分光度計(jì)(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)；BSA224S-CW電子天平(德國(guó)賽多利斯集團(tuán))；R210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士BUCHI)；FD-1冷凍真空干燥機(jī)(北京博醫(yī)康技術(shù)公司)；PB-10酸度計(jì)(德國(guó)賽多利斯集團(tuán))等。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 紅米色素提取。取500g紅米粗粉碎，過(guò)14～20篩網(wǎng)，篩上部分(紅米米皮)再次粉碎過(guò)60目篩備用,70%～85%乙醇水為溶劑，固液比1∶10，浸泡2h后，超聲波提取40min，提取2次[8]，合并濾液，濃縮回收乙醇，-70℃預(yù)凍8h，冷凍干燥備用。

1.3.2 色素抗氧化研究。樣品液制備：準(zhǔn)確稱取0.10g的色素，配制成10mg/mL的提取物溶液作為母液。用母液分別配制1.0 mg/mL、0.8 mg/mL、0.6 mg/mL、0.4 mg/mL、0.2 mg/mL的溶液。

1.3.2.1 超氧自由基清除能力測(cè)定：依據(jù)文獻(xiàn)方法[9]采用鄰苯三酚自氧化測(cè)定超氧自由基清除能力，并依據(jù)以下公式計(jì)算。

清除率(%)=[(A0-A1)/A0]×100

注：A0(自氧化)：自氧化時(shí)吸光度隨時(shí)間變化；A1(樣品)：加入樣品液后吸光度隨時(shí)間變化。

1.3.2.2 羥基自由基清除能力測(cè)定：依據(jù)文獻(xiàn)[10]，方法略有改變，采用鄰二氮菲- FeSO4- H2O2體系研究羥基自由基清除能力，并依據(jù)以下公式計(jì)算。

清除率(%)=[1-(B1-B2)]/[B3-B4]×100

注：B1：只加樣品和空白溶液的吸光度；B2：加H2O2溶液和樣品溶液的空白溶液吸光度；B3：不加H2O2和樣品的空白溶液的吸光度；B4：只加H2O2溶液和空白溶液的吸光度。

1.3.2.3 DPPH自由基清除能力測(cè)定：依據(jù)文獻(xiàn)方法[11]，略有改動(dòng)，并依據(jù)以下公式計(jì)算。

清除率(%)=[1-(C1-C2)]/C0]×100

注：C0：DPPH和95%乙醇的吸光度；C1：DPPH和待測(cè)樣品的吸光度；C2：待測(cè)樣品95%乙醇的吸光度。

2 結(jié)果與討論

2.1 色素超氧自由基的清除作用

圖 1 色素對(duì)超氧自由基的清除作用

依據(jù)圖1結(jié)果，濃度在0.2～0.6mg/mL清除率變化明顯,并且隨著濃度升高變大，顯示濃度-清除率具有相關(guān)性，0.8mg/mL以上逐漸趨于穩(wěn)定，18mg/mL以上清除率可達(dá)80%以上，顯示較好清除能力。

2.2 提取物對(duì)羥基自由基的清除作用

圖2 色素對(duì)羥基自由基的清除作用

依據(jù)圖2結(jié)果，當(dāng)濃度0.2～0.6mg/mL清除率變化較為平緩，0.8mg/mL以上出現(xiàn)較大變化，最終達(dá)到70%以上，顯示較好清除率效果，具有一定抗衰老活性[12]。

2.3 提取物對(duì)超氧自由基的清除作用

圖3 色素對(duì)DPPH自由基的清除作用

當(dāng)其濃度在0.60 mg/mL時(shí)就達(dá)到80%以上，體現(xiàn)出顯著抗氧化效果，這與其含有花色苷有明顯相關(guān)性[13]。

3 結(jié)論

在樣品測(cè)定濃度范圍內(nèi)，隨著濃度的提升紅米色素對(duì)超氧自由基、羥基自由基、DPPH自由基的清除能力也逐漸增加。結(jié)果表明：超氧自由基的清除率可達(dá)81.13%；羥基自由基的清除率最高可達(dá)71.43%；DPPH自由基清除率最高也達(dá)到93.40%。其色素具有好的抗氧化活性，其具有一定開(kāi)發(fā)潛力及價(jià)值。

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StudyonAntioxidantActivityofRedRicePigment

Chai Junhong*, He Tingting, Song Hongshuang

(Mudanjiang Normal University , Mudanjiang , Heilongjiang 157012)

2017-06-20

牡丹江師范學(xué)院青年骨干項(xiàng)目(G201211)

柴軍紅(1982-)，男，碩士，講師，主要從事天然產(chǎn)物的應(yīng)用研究，E-mail:swxcjh@126.com。

R285.5

A

DOI.:10.13268/j.cnki.fbsic.2017.05.007